Nos tubos dos controles (C25, C30, C35, C40 e C50 °C), adicionou-se 500 µL de água destilada e 500 µL de sacarose, enquanto que nos tubos de reação de hidrólise (A25, A30, A35, A40 e A50 °C) colocou-se 500 µL de sacarose 0,02 mol/L, mantendo-se por 5 min nos respectivos banhos-marias para equilíbrio das temperaturas. Em seguida, nos tubos de reação da hidrólise (A), acrescentou-se 500 µL de HCl 2 mol/L, agitou-se e o cronômetro foi disparado. Mantiveram-se as reações por mais 5 min nas temperaturas de 25, 30, 35 e 40 °C; e na 50 °C, manteve-se por 2 min para que se mantivesse na velocidade inicial da reação.