Mitocôndrias isoladas, sem membrana externa e mantidas em um meio com substratos para que a respiração se processe, vão ocasionar a diminuição gradativa do pH do meio. Se após algum tempo adicionarmos o composto A ao meio, observaremos que o fenômeno da diminuição do pH não mais ocorre. Qual a razão para a diminuição do pH antes da adição de A? Qual a provável ação de A?
Durante a etapa final da respiração celular, conhecida como fosforilação oxidativa ou cadeia respiratória, ocorre a maior parte da produção de ATP. Para isso, as moléculas de NADH e FADH2 produzidas nas etapas anteriores são oxidadas, e ocorre o efluxo de moléculas de hidrogênio. Essa etapa acontece na membrana interna da mitocôndria; sendo assim, as moléculas de H+ acumulam-se entre as membranas interna e externa (espaço intermembrana).
No caso do experimento em questão, as mitocrôndrias não possuem a membrana externa. Sendo assim, as moléculas de H+ que seriam transportadas para o espaço intermembrana passam a ser jogadas para o meio onde o experimento está ocorrendo, aumentando a acidez da solução (diminuição do pH).
Seguindo essa lógica, se a adição de A evita a alteração do pH, pode-se assumir que essa molécula é capaz de interromper a fosforilação oxidativa, o que causa o bloqueio do efluxo de H+.
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