Como outros antibióticos beta-lactâmicos, a oxacilina atua inibindo a síntese da parede celular bacteriana. Impede a formação de ligações cruzadas entre as cadeias poliméricas do peptidoglicano linear, que são um componente importante da parede celular das bactérias gram-positivas.
As penicilinas podem ser caracterizadas como antibióticos do grupo dos beta-lactâmicos profusamente utilizados no tratamento de infecções causadas por bactérias sensíveis; a maioria das penicilinas são derivadas do ácido 6-aminopenicilânico, diferenciando-se umas das outras conforme a substituição na cadeia lateral do seu grupo amino.
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