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Universidade Paulista, 3º Semestre, Fluídos Corporais 1 MODALIDADE EAD | BIOMEDICINA Avaliação química e microscópica O exame de urina inclui testes químicos para PH, proteínas, glicose, cetonas, sangue oculto, bilirrubina, urobilinogênio, nitrito, esterase leucocitária, e um método de tira reagente para gravidade específica. O exame de urina realizado por laboratórios depende do tipo da tira realizada. A análise química da urina por meio das tiras reagentes é concluída em 2 minutos. Tira reagentes: tira estreita de plástico com pequenos campos afixados. -Não devem ser expostas a umidade, luz solar direta, calor ou substâncias voláteis e devem ser armazenadas em sua embalagem original. - A embalagem não deve ser mantida em refrigerador ou exposta a temperaturas superiores a 30ºC. A urina deve ser testada à temperatura ambiente. Se a amostra por refrigerada, deve-se esperar até atingir a temperatura ambiente, antes de ser analisada. Procedimento: 01. Mergulhar completamente as áreas de teste da fita em urina fresca, bem-homogeneizada e não centrifugada, e retirá-las imediatamente. 02. Remover o excesso de urina da fita encostando a extremidade da fita no frasco da urina. Seguir as orientações do fabricante quanto à manutenção da fita reagente em posição horizontal ou vertical. 03. No momento adequado, comparar as áreas de teste com a escala de cores correspondente da embalagem. A fita deve ser lida sob iluminação adequada, para uma comparação precisa das cores. 04. Os resultados devem ser registrados conforme indicado pelo protocolo do laboratório. pH urinário O rim tem como uma de suas funções o auxílio na manutenção do balanço ácido-base do organismo. Para manter um pH (concentração de íons hidrogênio) constante no sangue (7,40), o rim deve variar o pH da urina para compensar a dieta e os produtos do metabolismo. A regulação ocorre principalmente na porção distal do néfron, com a secreção de íons de hidrogênio e amônia no filtrado e a reabsorção de bicarbonato (também reabsorvido no túbulo proximal). Se íons de hidrogênio (H+) suficientes forem secretados no túbulo, todo o bicarbonato presente será reabsorvido, porém, diante de menor secreção de H+ ou havendo presença de excesso de bicarbonato, parte do bicarbonato será excretada na urina. A secreção contínua de H+ após a reabsorção total do bicarbonato diminuirá o pH do filtrado (urina ácida). Isso se dá porque há um excesso de ácido no organismo (acidose), ou seja, maior quantidade de H+. Quando há um excesso de base no organismo (alcalose), menor será a excreção de H+ e a urina será alcalina. O pH da urina é determinado pela concentração de H+ livre. Proteínas - Sua presença na urina pode ser um indicador de doença renal. - Condições fisiológicas como exercícios físicos e febre, que podem levar à excreção aumentada de proteínas na urina na ausência de doenças renais. Proteína de Tamm-Horsfall: proteínas normalmente excretadas incluem essa mucoproteína que não está contida no plasma, sendo excretada pelos túbulos renais. (forma a matriz da maioria dos cilindros urinários). Testes de Varredura: - Os testes para proteinúria são baseados na capacidade de serem precipitados por ácidos ou calor. - Representam sensibilidades distintas. As tiras reagentes são mais sensíveis à albumina que as outras proteínas, ao passo que os testes com ácido e calor são sensíveis a todas as proteínas. - Urinas muito diluídas podem originar reações falso-negativa, uma vez que a concentração de proteínas varia de acordo com o fluxo urinário.. - A presença de grande quantidade de proteínas promove alterações na tensão superficial da urina. A agitação da urina provocará a formação de uma espuma branca em sua superfície (indicador de proteinúria). - O método tira reagente é muito sensível à albumina, a principal proteína excretada como resultado de lesão ou doença glomerular. Resultados falso-positivos. Podem ocorrer em urinas alcalinas altamente tamponadas decorrente de medicamentos alcalinos ou urina antigas. O pH alcalino pode sobrepujar o tampão ácido do reagente e o campo pode sofrer alteração de cor na ausência de proteína. Se a tira reagente for mantida na urina por períodos muito longos, o Universidade Paulista, 3º Semestre, Fluídos Corporais 2 MODALIDADE EAD | BIOMEDICINA tampão será eliminado do reagente, haverá o aumento do pH e a tira ficará azul ou verde esmo na ausência de proteínas. Resultados falso-negativos Podem ocorrer em urinas muito diluídas ou quando proteínas diferentes da albumina estão presentes em concentrações ligeiramente elevadas. Glicose e outras substâncias redutoras o A quantidade de glicose na urina depende da concentração de glicose no sangue, da taxa de filtração glomerular e do grau de reabsorção tubular. o Não haverá presença de glicose na urina até que o nível sanguíneo exceda 160 a 180 mg/dl que corresponde ao limiar renal normal para glicose. Teste de varredura Os procedimentos que empregam a enzima glicose oxidase são específicos para glicose, ao passo que os testes de redução de cobre detectam substâncias redutoras. Resultados falso-positivos Se a amostra de urina estiver contaminada por agentes de limpeza oxidantes fortes, peróxidos ou hipoclorito, podem ocorrer uma reação falso-positiva. Uma glicose falsamente elevada pode resultar da presença de altas quantidades de urobilinogênio. Resultados falso-negativas A sensibilidade à glicose pode ser afetada por temperatura, gravidade específica e pH. A reatividade com a glicose pode variar com a temperatura devido ao efeito desta em reações enzimáticas. Uma gravidade específica elevada pode reduzir a sensibilidade à glicose. A combinação de gravidade específica alta e pH alcalino pode resultar em falso-negativos a baixas concentrações de glicose. Elevadas concentrações urinárias de ascorbato (ácido ascórbico ou vitamina C) podem inibir a reação enzimática, resultando em uma leitura reduzida ou falso-negativa. Cetonas o São formadas durante o catabolismo de ácidos graxos. Um dos produtos intermediários da degradação de ácidos graxos consiste em acetil-CoA. O acetil-CoA participa do ciclo de Krebs quando a degradação de gorduras e carboidratos encontra-se corretamente balanceada. o A primeira etapa do ciclo de Krebs consiste na reação entre acetil-CoA e oxalacetato, originando citrato. o Não havendo disponibilidade de carboidrato, ou caso sua utilização não esteja apropriada, todo o oxalacetato será utilizado na formação de glicose e, desta forma, não haverá disponibilidade para a condensação de acetil-CoA. O CoA não entrará no ciclo de Krebs; portanto será desviado para a formação de corpos cetônicos. o Os corpos cetônicos correspondem a ácido acetoacético, ácido B-hidroxibutírico e acetona. o O músculo cardíaco e o córtex renal preferem a utilização de acetoacetato em vez de glicose. Poém, a glicose é o principal combustível do cérebro seja capaz de adaptar-se ao uso de acetoacetato na ausência de glicose. o A acetona difunde-se para o ar quando a amostra é deixada em temperatura ambiente. Portanto, a urina deve ser testada imediatamente ou refrigerada em recipiente fechado até ser analisada. Resultados falso-positivos o Podem ocorrer quando a amostra de urina é altamente pigmentada ou quando contém grandes quantidades de metabólitos da levodopa. o Algumas amostras que apresentam gravidade específica alta e pH baixo podem originar resultados falso-positivos. o Compostos que contêm grupos sulfidrila podem gerar reações falso-positivas ou de coloração atípica. Resultados falso-negativos Considerando a especificidade as tiras reagentes não apresentarão resultado positivo para cetona com controles que contêm acetona. Sangue Oculto o Detectam a hemoglobina livre oriunda de hemácias lisadas. o Métodos químicos empregados no exame de urina de rotina paraa detecção de sangue (hematúria) também detectam a hemoglobina (hemoglobinúria) e a mioglobina (mioglobinúria) Hematúria o Refere-se à presença de sangue ou hemácias intactas na urina. o Uma urina altamente alcalina ou com gravidade muito baixa pode provocar a lise de hemácias, liberando assim sua hemoglobina na urina. Universidade Paulista, 3º Semestre, Fluídos Corporais 3 MODALIDADE EAD | BIOMEDICINA Hemoglobinúria o Presença de hemoglobina livre na urina como resultado de hemólise intravascular. o A hemólise ocorre na urina enquanto no trato urinário ou após a micção em virtude de uma baixa gravidade específica ou pH altamente alcalino pode ser considerada hemoglobinúria. o Hemoglobinúria sem hematúria ocorre como resultado de hemoglobinemia e, portanto, primariamente não está relacionada aos rins, embora secundariamente possa resultar em dano renal. Mioglobinúria o É a proteína heme de músculos estriados, atua como suprimento reserva de oxigênio e também facilita a movimentação do oxigênio o interior do músculo. o Uma lesão no músculo cardíaco ou no esquelético resulta na liberação de mioglobina na circulação. Teste de varredura o Eletroforese o A hemoglobinúria e a mioglobinúria podem ser rapidamente diferenciadas com base em: plasma vermelho e urina vermelha equivalem a hemoglobinúria; plasma límpido e urina vermelha equivalem a mioglobina. Tiras de testes reagentes o Baseado na atividade do tipo peroxidase da hemoglobina e da mioglobina, que catalisa a oxidação de um cromógeno por um peróxido orgânico. Resultados falso-positivos o A maioria das tiras reagentes apresenta resultados falso- positivos na presença de determinados contaminantes oxidantes, como hipocloritos, que podem ser utilizados na limpeza de recipientes para coleta de urina. o Quando a urina encontra-se altamente contaminada por bactéria, pode ocorrer um reação falso-positiva devido às peroxidases bacterianas. Resultados falso-negativos o Se a amostra não for bem higienizada antes do teste, pode ocorrer um resultado falso-negativo, porque as hemácias tendem a depositar-se no fundo do recipiente. o Acido ascórbico e captopril podem reduzir a sensibilidade do campo reagente. Bilirrubina e urobilinogênio o Bilirrubina: é formada pela degradação da hemoglobina no sistema reticuloendotelial. o Urobilinogênio: composto que convertem a bilirrubina no intestino com a ação de enzimas bacterianas. - Cerca de 10 a 15% do urobilinogênio é reabsorvido na corrente sanguínea, retorna ao fígado e é excretado no intestino. o Quando a concentração de bilirrubina total excede aproximadamente 2,5 mg/dL, os tecidos corporais adquirem a cor amarela da bilirrubina (icterícia). o Quando a icterícia é devida a um aumento da bilirrubina não conjugada, não haverá excreção de bilirrubina, uma vez que a bilirrubina não conjugada não pode ser filtrada pelo glomérulo. o Por outro lado, quando a icterícia deve-se a um aumento na bilirrubina conjugada hidrossolúvel, haverá presença de bilirrubina na urina. Testes de varredura o A bilirrubina é sensível a luz, portanto, deve ser protegida e examinada o mais rápido possível. Resultados falso-positivos o Se o campo da bilirrubina for observado após o período de tempo indicado, ele pode desenvolver outras cores, interferindo na leitura das reações de bilirrubina. o Metabólitos de fármacos podem levar a interpretação errada dos resultados, visto que podem alterar a cor nas fitas reagentes. Resultados falso-negativos o Grandes quantidades de ácido ascórbico reduzem a sensibilidade deste teste. o Níveis elevados de nitrito reduzirão o resultado da bilirrubina. o Se a bilirrubina tiver sido oxidada à biliverdina, que ocorre quando as amostras são expostas à temperatura ambiente e à luz. Teste de espuma o Se houver formação de espuma amarela ou amarela- esverdeada, há grande probabilidade da presença de bilirrubina. A bilirrubina altera a tensão superficial da urina, promovendo a formação de espuma após a agitação. Testes de varredura para urobilinogênio o Além de doença hepática, pacientes que fazem uso de antibióticos de amplo espectro e outras substancias que Universidade Paulista, 3º Semestre, Fluídos Corporais 4 MODALIDADE EAD | BIOMEDICINA alteram a microbiota bacteriana intestinal normal, a excreção de urobilinogênio na urina é discreta ou ausente, uma vez que não ocorre a formação de urobilinogênio no intestino. Resultados falso-positivos o A urina de pacientes que fazem uso de fenazopilidiina pode apresentar reação falso-positiva Resultados falso-negativos o A real ausência não é detectável. o Urinas que contém nitrito ou aquelas preservadas em formalina podem gerar resultados falso-negativos. o Também podem ocorrer em amostras armazenadas inadequadamente devido à oxidação de urobilinogênio a urobilina. Nitrito o Método rápido e indireto para a detecção precoce de bacteriúrias significantes e assintomáticas. o Organismos capazes de causar infecções no trato urinário, produzem enzimas que reduzem o nitrato em nitrito. Resultados falso-positivos o A urina deve ser testada logo após a micção, pois se mantida por várias horas à temperatura ambiente propicia o crescimento de organismos, originando nitrito. o Urinas vermelhas que contém fenazopiridina e outras substâncias que se tornam vermelhas em condições ácidas. Resultados falso-negativos o Um teste negativo jamais deve ser interpretado como indicador de ausência de infecção bacteriana, pois: 1. Pode haver a presença de patógenos que não formam nitrito 2. A urina pode ter permanecido tempo suficiente na bexiga para a conversão do nitrato em nitrito. 3. Há caso em que a urina não contém nitrato e, mesmo com bactérias, a tira reagente será negativa 4. Em determinadas circunstâncias, enzimas bacterianas podem ter reduzido o nitrato a nitrito, sendo o nitrito convertido em nitrogênio, gerando um resultado negativo para nitrito. o Ocorre quando há níveis anormais de urobilinogênio e acido ascórbico. Esterase Leucocitária o O número mais comumente observado é o neutrófilo. o Números elevados de neutrófilos em geral indicam infecção do trato urinário; sua presença é indicada por um teste positivo para esterase leucocitária. Resultados falso-positivos o Agentes oxidantes produzem resultados falso-positivos de esterase leucocitária. Isso ocorre quando detergentes fortes utilizados na limpeza de recipientes para coleta de urina, encontram-se presentes. o Presença de secreções vaginais o Presença de formalina Resultados falso-negativos o Alta gravidade específica e em urinas contendo glicose e proteínas. o Acido ascórbico, ácido oxálico, cafalexina, cefalotina, gentamicina e tetraciclina.
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