ED 1 - Gabarito - Microbiologia Clínica

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Universidade Estácio de Sá – UNESA 
Campus Petrópolis 
Microbiologia Clínica 
Turma: 3001 
 
Professor: Pablo Tavares Coimbra 
 
Estudo Dirigido 1 - Gabarito 
 
 
1. Cite a importância da utilização da coloração de GRAM. 
 
A coloração de Gram, ou simplesmente Gram, é uma técnica rápida e simples 
que tem como objetivo diferenciar as bactérias de acordo com as características 
de sua parede celular após exposição a diferentes corantes e soluções. Afinal, 
esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no 
microscópio óptico, uma vez que sem a coloração é impossível observá-las ou 
identificar sua estrutura. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas 
das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e 
caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus 
ou de fluidos orgânicos. Essa informação permite ao clínico monitorar a infecção 
até que dados de cultura estejam disponíveis. 
 
 
2. Explique qual é a ação do lugol e da solução descorante neste tipo de 
coloração? 
 
O lugol é um fixador tanto bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas que 
absorvem de maneira idêntica o corante primário (violeta de genciana) e o 
fixador, adquirindo uma coloração violeta devido à formação de um complexo 
cristal violeta-iodo, insolúvel, em seus citoplasmas. 
A solução descorante é um solvente orgânico, o etanol ou acetona. O solvente 
dissolve a porção lipídica das membranas externas das bactérias Gram-
negativas e o complexo violeta-iodo é removido, descorando as células. Por 
outro lado, o solvente desidrata as espessas paredes celulares das bactérias 
Gram-positivas e provoca a contração dos poros do peptidoglicano, tornando-as 
impermeáveis ao complexo; o corante primário é retido e as células permanecem 
coradas. A etapa da descoloração é crítica, pois a exposição prolongada ao 
solvente provoca a remoção do cristal violeta dos dois tipos de bactérias, 
podendo produzir resultados falsos. 
 
 
3. Cite as estruturas que compõem a célula bacteriana. 
 
Parede de Celular (Camada externa e Camada de Peptidioglicano), Membrana 
Plasmática, Ribossomos, Nucleóide, Plasmídeo. Algumas bactérias podem 
conter estruturas como cápsula e flagelo. 
 
4. Descreva a diferença entre bactérias gram positivas e gram negativas. 
 
As diferenças entre as bactérias gram-positivas e gram-negativas , estão no 
comportamento frente a técnica de coloração de Gram, a composição e 
propriedades químicas e físicas das paredes celulares. Os organismos Gram-
positivos possuem uma parede celular grossa envolvendo a membrana 
citoplasmática que é composta por peptideoglicanos e ácidos teicoico. Os 
organismos Gram-negativos possuem uma parede celular mais fina que é 
envolvida por outra membrana externa, portanto os gram-negativos possuem 2 
membranas, a externa difere da interna e contém moléculas de 
lipopolissacarideos.Respeite a autoria e a continuidade da informação de 
qualidade, referenciando a fonte pelo hiperlink completo. 
 
5. Morfologicamente como são diferenciados os estafilococos dos estreptococos? 
 
 
A identificação dos estafilococos baseia-se na morfologia apresentada no Gram 
obtido, preferencialmente, em meios líquidos, onde apresenta forma de cocos 
isolados, aos pares ou agrupados em forma de cachos de uva, com 0,5 a 1,0 µm 
de diâmetro. Streptococcus corresponde a um gênero de bactérias 
caracterizadas por terem formato arredondado e serem encontradas arranjadas 
em cadeia, além de possuírem coloração violeta ou azul escura quando 
visualizadas através do microscópio, sendo, por isso, chamadas de bactérias 
gram-positivas. 
 
6. Cite pelo menos 3 meios de cultura utilizados na microbiologia clínica e suas 
principais características. 
Meio enriquecido: ágar-sangue (ágar nutriente mais 5% de eritrócitos de 
carneiro) e o ágar-chocolate (ágar nutriente adicionado de hemoglobina em pó) 
são exemplos de meios sólidos enriquecidos utilizados rotineiramente nos 
laboratórios de bacteriologia clínica. 
Meio seletivo: contém inibidores adicionados que tornam inviável o crescimento 
de certos microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo que está 
sendo pesquisado. Por exemplo, o ágar macconkey inibe o crescimento de 
bactérias gram-positivas, selecionando assim, as bactérias gram-negativas. 
Meio diferencial: permite a distinção dos microrganismos que crescem no 
referido meio. Por exemplo, o ágar macconkey é frequentemente utilizado para 
diferenciar vários bacilos gram-negativos isolados de amostras de fezes. O ágar 
manitol salgado é utilizado para caracterizar o staphylococcus aureus. O s. 
Aureus não apenas cresce neste meio, mas também converte a cor do meio 
originalmente rosa em amarelo, em razão da sua capacidade de fermentar o 
manitol. 
Observação: os vários tipos de meios (enriquecido, seletivo, diferencial) não são 
mutuamente exclusivos. Por exemplo, como acabamos de ver, o ágar 
macconkey é tanto seletivo como diferencial. 
 
 
7. Descreva três métodos físicos importantes para o controle microbiano no 
laboratório de Microbiologia Clínica. 
 
Temperatura: O calor é o método mais eficiente para matar micro-organismos. 
Pode ser calor: seco ou úmido. 
 
Radiações: Possuem atividade letal sobre os microrganismos. Podem ser: 
Ionizantes – comprimento de onda menor que 1 nm (raios gama, raio X e feixes 
de elétrons de alta energia) Não Ionizantes (UV) – de 1 a 350 nm (luz ultravioleta 
(UV). 
 
Filtração: A passagem de soluções ou gases através de filtros de poros 
suficientemente pequenos é usada para reter bactérias e fungos (não vírus). É 
utilizada na esterilização de materiais sensíveis ao calor, como meios de cultura, 
enzimas, vacinas e soluções antibióticos. É comum a utilização na entrada de ar 
para os biorreatores. 
 
Pressão osmótica: Alta Concentração de Solutos que leva a desidratação da 
célula bacteriana. 
 
 
8. Pesquise e descreva como ocorre a ação do álcool 70% e do hipoclorito de 
sódio sobre bactérias gram positivas e gram negativas. 
 
 
A atividade antimicrobiana dos álcoois está condicionada à sua concentração em 
peso ou em volume em relação à água, que deve ser de 70% (P/P) ou 77% (V/V), 
respectivamente. Nessa concentração, o álcool não desidrata a parede celular 
do micro-organismo, podendo penetrar no seu interior, onde irá desnaturar 
proteínas. Em primeiro lugar, o álcool destrói a membrana celular externa 
por desidratação, afinal o álcool é higroscópico e hidrofílico. Em segundo lugar, 
as moléculas de álcool penetram no citoplasma e, como resultado, precipitam as 
proteínas devido à desnaturação. Em terceiro lugar, causa coagulação de 
enzimas responsáveis por atividades celulares essenciais. 
 
O hipoclorito de sódio, cuja ação sanificante é controlada pelo ácido hipocloroso, 
liberado quando o hipoclorito de sódio é colocado em água. Este ácido é 
extremamente reativo e, por sua vez, ataca os aminoácidos que constituem as 
proteínas alterando sua estrutura tridimensional. A estrutura de uma proteína é 
muito importante para a sua função. Quando proteínas importantes perdem sua 
forma, as células do organismo podem não sobreviver por muito tempo. 
9- Staphylococcus aureus é o principal patógeno envolvidos nas infecções de 
pele. Por quê? 
 
 
O Staphyloccus aureus é um potencial patógeno que está na microbiota normal 
da pele de 15% das pessoas. Dessa forma, lesões cutâneas, como queimaduras, 
incisões cirúrgicas, eczema e cortes são porta de entrada para esses cocos. 
Além disso, algumas cepas produzem enzimas e toxinas com atividade 
proteolítica, que dissolvem as conexões entre as células e causam separação 
destas, permitindo a entrada e disseminação da bactéria no tecido. As principais 
infecções cutâneas incluem foliculite simples, impetigo bolhoso, furúnculos e 
carbúnculos. 
 
10 – Porque é importante a pesquisa S. epidermidis em isolados de 
hemoculturas? 
 
O S. epidermidis produz o glicocálice (substância limosa extracelular)que 
promove a aderência da bactéria a dispositivos plásticos e forma um biofilme que 
impede a passagem de antibióticos. O S. epidermidis isolado em hemocultura 
deve ser valorizado quando encontrado em materiais como cateteres, válvulas 
cardíacas, próteses articulares ou outros dispositivos plásticos inseridos no 
corpo, pois podem causar sérias infecções e até evoluir para um caso de sepse. 
 
11 - As cepas de Staphylococcus caspsuladas são ditas mais virulentas. Por 
quê? 
A cápsula é um exopolissacarídeo que pode impedir a fagocitose do 
Staphylococcus pelos leucócitos polimorfonucleados. Isso acontece porque a 
cápsula reveste os receptores que estimulam a atividade fagocitária. Além disso, 
a cápsula pode facilitar a aderência dos microrganismos às células do 
hospedeiro. 
12- O Staphylococcus saprophyticus tem maior prevalência em que tipo de 
infecção? Qual a população? Por quê? 
 
O Staphylococcus saprophyticus é um patógeno oportunista que tem maior 
prevalência em infecções do trato urinário por causa do seu tropismo positivo 
pelo tecido uroepitelial (capacidade de aderir às células do epitélio do trato 
urinário). 
Atinge principalmente mulheres jovens, sexualmente ativas. Esta população é 
mais susceptível porque o S. saprophyticus é encontrado no reto e, mais 
freqüentemente, no trato genital das mulheres com menos de 40 anos (não 
sendo encontrados em mulheres mais velhas, nem em homens de 13 a 40 anos). 
Isto sugere que o intróito vaginal seria o provável reservatório dessa bactéria. 
Além disso, as alterações hormonais do hospedeiro favorecem a reprodução de 
bactérias na vagina, acarretando maior suscetibilidade à contaminação 
por Staphylococcus saprophyticus.