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Técnicas de Processamento: Coleta, Fixação e Coloração As técnicas de processamento são constituídas por oito etapas, onde o farmacêutico entra na etapa de processamento técnico, essas etapas devem ser seguidas rigidamente garantindo um diagnóstico fidedigno. As etapas são: Coleta, fixação. Identificação, Encaminhamento, Processamento técnico, Avaliação microscópica, Conclusão diagnóstica e Emissão do laudo Etapa pré-analítica • Citologia Cérvico-Vaginal Tanto a região endocérvice como a ectocérvice devem ser coletadas logo que as duas regiões podem apresentar carcinomas. • Material de Coleta • Procedimento Inicialmente deve-se anotar as iniciais do paciente e identificar as porções da coleta, a parede lateral deve ser colatada com a espátula de Ayre na ectocérvice com um giro de 360° e a endocérvice deve ser coletada com a escova cytobrush também fazendo um giro de 360°, após a coleta as células devem ser fixadas imediatamente na lâmina, a lâmina será acondicionada Além da coleta da amostra também é realizada uma observação da porção do útero utilizando lugol. Ainda faz parte da etapa pré-analítica de um exame citológico, e necessita passar por um rigoroso controle de qualidade para garantir que a amostra estará adequada para gerar um diagnóstico. Amostra não fixada, lâmina quebrada, ausência ou erro na identificação resultam em descarte imediato da amostra • Coloração de Papanicolaou A coloração de papanicolaou tem como objetivo identificar os detalhes estruturais do núcleo, ressaltando que no câncer o núcleo será o primeiro a sofrer modificações, determinar transparência celular e diferenciar os elementos basófilos, cianófilos e eosinófilos que compõem as células. São empregados três corantes distintos que permitem diferenciar as células basófilas, que aqui serão as células basais e parabasais que se coram em azul, cinófilas, células intermediárias coradas em verde, e eosinofilias. Esse processo consiste em fases de desidratação, hidratação e diafanização para que assim possa se analisar os núcleos e o compostos citoplasmáticos. Corantes • Hematoxilina Corantes básicos de solução aquosa capaz de corar estruturas ácidas que resulta em uma coloração azul- escura possui parede celular de lactobacilos e outras bactérias • Orange G Corante ácido de solução alcoólatra que colore estruturas ácidas, interage com o citoplasma e os depósitos de glicogênio das células escamosas maduras, coram hifas fúngicas. • Eosina Amarelada É uma mistura de corantes de solução alcoólica que pode colorir estruturas ácidas e básicas por isso é utilizada para finalizar, core o citoplasma de Trichomonas vaginalis. Etapas da Coloração A técnica de coloração ainda é manual, mas pode ser feita em várias laminas de uma única vez, para isso deve-se garantir a usabilidade do corante para impedir contaminação da amostra. • Hidratação e Hematoxilina Inicialmente deve-se banhar a lâmina em água corrente, já que a hematoxilina é um corante de solução aquosa a hidratação aumenta a afinidade da placa ao corante. • Desidratação e Orange G A desidratação ocorre para aumentar a afinidade da amostra com o corante Orange G, removendo o excesso de hematoxilina e água que é de solução alcoólatra. • Coloração com EA Não precisa de uma preparação prévia, já que consiste em uma mistura de corantes, mas pode ser seguida de desidratação para remover o excesso do corante. • Diafanização A placa é mergulhada em xilol para ser clareada e ser possível ver as estruturas celulares. • Montagem da lâmina Para finalizar as lâminas são banhadas em bálsamo de Canadá ou verniz automotivo. Etapa analítica Consiste na analise microscópica para que assim sejam interpretados os possíveis quadros clínicos, discussão, revisão de caso e diagnóstico. A varredura deve-se atentar a analisar todas as partes do esfregaço, por isso ela deve ser sistematizada Etapa pós-analítica Processos realizados após a analise da lâmina, ou seja, a digitação do laudo, conferencia e o encaminhamento. As amostras devem permanecer armazenadas por no mínimo 5 anos para nortear exames futuros ou para possíveis reavaliações e no máximo 15 anos que é tempo de durabilidade.
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