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Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 1 Situação: 1. Introdução: O leucograma é a parte do exame de sangue que avalia os leucócitos, também chamados de glóbulos brancos, que são as células de defesa do organismo. O exame inclui a contagem total dos leucócitos e a contagem diferencial, ou seja, a contagem de cada tipo de leucócito separadamente. Este exame, além de ser útil para o diagnóstico e na determinação do prognóstico de várias doenças como infecções bacterianas, virais, inflamatórias, tóxicas e entre outras, também pode ser utilizado para monitorar a resposta do corpo a tratamentos, e acompanhar o funcionamento da medula óssea. (FLEURY, 2021). A contagem total de leucócitos mede o número de leucócitos em um volume de sangue sem diferenciá-las, e alterações nessa contagem podem acabar sugerindo a presença de alguma doença. Já a contagem diferencial de leucócitos, fornece o valor relativo, que aparece em porcentagem, e o valor total, que aparece em uL ou mm³, de cada tipo de glóbulo branco encontrado em 100 células. Durante essa etapa, além da soma das células, também é realizada a sua análise morfológica, pois algumas alterações podem ser significativas para fechar um diagnóstico (USP, 2008). O leucograma compõem o hemograma fazendo a avaliação qualitativa e quantitativa das células brancas, sendo essencial para triagem, diagnóstico e controle de diversas patologias, e por isso, acaba fazendo parte dos exames de rotina das pessoas (JUNQUEIRA, 2018). 2. Princípio do teste: A contagem total de leucócitos é feita utilizando o sangue do paciente e o Líquido de Turk, que é composto por ácido acético, que destrói as células anucleadas, e o azul de metileno ou violeta genciana, que cora os leucócitos, permitindo assim a contagem das células nucleadas, ou seja, dos glóbulos brancos. Porém, os eritroblastos não são destruídos, Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 2 Situação: por isso, quando são encontrados na contagem diferencial, é necessário fazer o ajuste (CÂMARA, 2010). A contagem diferencial é realizada através da análise do distendido sanguíneo corado por alguma coloração neutra. Esse tipo de coloração apresenta corantes ácidos e básicos, permitindo que as células possam ser coradas de acordo com a sua afinidade, sendo os componentes com pH ácido, corados em tons de vermelho, e os de pH básico, corados em tons de azul. Assim, é possível perceber e classificar as células sanguíneas e suas características a partir da coloração e características apresentadas (GOMES, 2O17). 3. Aplicação clínica: Auxiliar no diagnóstico de leucemias, alergias, infecções parasitárias, doenças hematológicas, neoplásicas, entre outras patologias. Além disso, é usada para monitorar tratamentos e uso de medicações de pacientes doentes, e avaliar o prognóstico desses pacientes (JUNQUEIRA, 2018). 4. Amostra: 4.1. Amostra: Amostra de sangue periférico obtido pela coleta venosa ou picada no dedo, ou, no caso de recém-nascidos, no calcanhar (FLEURY, 2021). 4.2.Interferentes: A contagem depende da idade do paciente, sendo que os recém-nascidos apresentam contagens mais altas, e idosos podem apresentar valores levemente diminuídos. Pacientes fumantes ou que estão no final de uma gravidez podem apresentar aumento na contagem total. Alguns medicamentos também podem aumentar ou diminuir a contagem total, e a contagem pode variar ao longo do dia (LABTESTES, 2020). 5. Equipamento de proteção individual: Jaleco, calça comprida e sem rasgos, sapato fechado e luvas. Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 3 Situação: 6. Padrões, controles, reagentes e outros insumos: Líquido de Turk, Corante neutro (panótico ou Wright) e água destilada 7. Equipamentos: Lâminas, Câmara de Neubauer, lamínulas, microscópio, pipeta e ponteiras 8. Procedimento detalhado: 8.1 Contagem total de leucócitos: 8.1.1 Adicionar 400 uL do Líquido de Turk e 20uL de sangue e homogeneizar 8.1.2 Colocar a mistura na Câmara de Neubauer e aguardar aproximadamente 5 minutos 8.1.3 Realizar a contagem das células no 4 quadrantes laterais 8.2 Contagem diferencial de leucócitos: 8.2.1 Realizar o distendido sanguíneo e corar a lâmina utilizando um coloração neutra, como Panótico ou Wright 8.2.2 Analisar a lâmina corada na objetiva de 100x 8.2.3 Contar 100 leucócitos, diferenciando cada tipo encontrado 8.2.4 Registrar alterações encontradas na lâmina (olhar no mínimo 10 campos) 9. Cálculos: 9.1. Contagem total de leucócitos: Somar os leucócitos dos 4 quadrantes analisados e multiplicar por 50. ATENÇÃO: a diferença entre os quadrantes deve ser < 12. 9.2 Contagem diferencial: Realizar uma regra de três utilizando o valor dos leucócitos totais e os leucócitos específicos encontrados na lâmina. Fazer a conta para todos os tipos de leucócitos encontrados. Contagem diferencial: Leucócitos totais - 100% X - N° encontrado na contagem diferencial 9.3 Ajustes Caso algum eritroblasto seja encontrado durante a contagem diferencial, é necessário ajustar o valor total utilizando a fórmula abaixo, para posteriormente realizar a regra de três de cada leucócitos. Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 4 Situação: Contagem corrigida de leucócitos = Leucócitos Totais x 100 N° eritrócitos + 100 10. Valores de Referência: 10.1. Valores normais: Leucócitos totais: Adultos: 100% e 3.600 - 11.000 uL Crianças menores de 8 anos: 100% e 4.000 - 14.000 uL Bastonetes: Adultos: 0 - 5% e 0 - 700 uL Crianças menores de 8 anos: 0 - 6% e 0 - 450 Segmentados: Adultos: 40 - 70% e 1.800 - 7.000 uL Crianças menores de 8 anos: 30 - 64% e 1.200 - 9.600 uL Eosinófilos: Adultos: 0 - 7% e 0 450 uL Crianças menores de 8 anos: 0 - 5% e 0 - 550 uL Basófilos: Adultos: 0 - 3% e 0 - 200 uL Crianças menores de 8 anos: 0 - 25% e 0 - 300 uL Linfócitos: Adultos: 20 - 50% e 1.000 - 4.800 uL Crianças menores de 8 anos: 38 - 70% e 1.500 - 10.500 uL Monócitos: Adultos: 3 - 14% e 0 - 800 uL Crianças menores de 8 anos: 3 - 14% e 40 - 1.700 uL 10.2. Interpretação: Desvio à esquerda: aparecimento de precursores granulocíticos, que normalmente se localizam na medula óssea, no sangue periférico. Esse processo ocorre em resposta a processos infecciosos bacterianos ou na leucemia mielóide crônica (UFPA, 2019). Leucopenia: leucócitos abaixo do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa, quando a porcentagem está alterada, e/ou absoluta, quando a contagem total está alterada (UFPA, 2019). Leucocitose: leucócitos acima do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em infecções, inflamações e leucemias (UFPA, 2019). Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 5 Situação: Neutropenia: neutrófilos abaixo do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em problemas na medula óssea, infecção ou uso de alguns medicamentos (UFPA, 2019). Neutrofilia: neutrófilos acima do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em infecções bacterianas, leucemias e processos inflamatórios (UFPA, 2019). Eosinofilia: eosinófilos acima do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em parasitoses, processos imunológicos e leucemias (UFPA, 2019). Basofilia: basófilos acima do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em processos imunoalérgicos e leucemias (UFPA, 2019). Monocitose: monócitos acima do valor de referência para a idadee sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em infecções como mononucleose, septicemia e tuberculose (UFPA, 2019). Linfopenia: linfócitos abaixo do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em pacientes que utilizam algum medicamento ou fazem quimioterapia (UFPA, 2019). Linfocitose: linfócitos acima do valor de referência para a idade e sexo. Pode ser relativa e/ou absoluta. Frequente em infecções virais agudas, leucemias, amigdalites, processos ganglionares e infecções crônicas como tuberculose e sífilis (UFPA, 2019). 11. Linearidade e Limites de detecção: A coleta do sangue precisa ser feita em tubo de EDTA e o sangue deve ser homogeneizado antes de ser utilizado. Além disso, a coloração da lâmina precisa ser adequada, utilizando corantes dentro do prazo de validade e preparados corretamente, pois Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 6 Situação: erros na coloração podem dificultar a identificação da célula durante a contagem diferencial (UFPA, 2019). A presença de eritroblastos pode interferir na contagem total de leucócitos, pois o líquido de Turk destrói apenas as células anucleadas, fazendo com que, na presença de eritroblastos, eles sejam contados como leucócitos. É necessário fazer o ajuste da contagem após a identificação dessas células na contagem diferencial (CÂMARA, 2010). 12. Referências bibliográficas: CÂMARA, B. Contagem de leucócitos totais. Goiânia, 2010. Disponível em: https://www.biomedicinapadrao.com.br/2011/09/contagem-global-de-leucocitos.html. Acesso em: 15 out. 2021. CÂMARA, B. Prática: contagem diferencial de leucócitos. Goiânia, 2012. Disponível em: https://www.biomedicinapadrao.com.br/2012/07/pratica-contagem-diferencial-de.html. Acesso em: 15 out. 2021. FLEURY. Leucograma, Sangue total. São Paulo, 2021. Disponível em: https://www.fleury.com.br/medico/exames/leucograma-sangue-total. Acesso em: 15 out. 2021. GOMES, F. Instant Prov: conjunto de corantes para a coloração diferencial rápida em hematologia. Paraná, 2017. Disponível em: file:///C:/Users/bruna/Downloads/instant-prov-conjunto-de-corantes-para-coloraao-diferencial-rapida- em-hematologia.pdf. Acesso em: 12 out. 2021. JUNQUEIRA, I. C. Contagem de leucócitos em câmara de neubauer. Goiânia, 2018. Disponível em: https://www.studocu.com/pt-br/document/universidade-federal-de-goias/analises-clinicas/relatorio- 5-contagem-de-leucocitos-atualizado/4774143. Acesso em: 15 out. 2021. LABSFREIRE (Freire Laboratórioo). Leucograma: o que é e para que serve? Minas Gerais, 2018. Disponível em: https://labfreire.com/leucograma-o-que-e-e-para-que-serve/. Acesso em: 15 out. 2021. LABTESTS. Contagem de leucócitos. Rio de Janeiro, 2020. Disponível em: https://labtestsonline.org.br/tests/contagem-de-leucócitos. Acesso em: 15 out. 2021. UFPA (Universidade Federal do Pará). Hemograma. Pará, 2019. Disponível em: http://faculdademedicina.ufpa.br/doc/Hemograma.pdf. Acesso em: 15 out. 2021. Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação Estágio Supervisionado em Análises Clínicas II POP – LEUCOGRAMA Código: 01 HEMATOLOGIA Folha: 7 Situação: USP (Universidade de São Paulo). Hematologia Clínica: Leucograma. São Paulo, 2008. Disponível em: https://edisciplinas.usp.br/pluginfile.php/1915535/mod_resource/content/1/Leucograma.pdf. Acesso em: 15 out. 2021 Elaboração Bruna Birbeire Machado Aprovação e Liberação
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