Microbiologia Clínica - Diagnóstico Infecção Por Não Fermentadores

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Resumos Biomedicina – Silvana Neves 
 
Microbiologia Clínica 
Diagnóstico / Infecção Por Não Fermentadores 
 
Introdução: 
Não vão fermentar a glicose, eles são não fermentadores. 
Pode ter a oxidase positiva e negativa. 
Possuem como habitat natural o meio ambiente. 
Então assim, antigamente o não fermentador não tinha muita importância, pois 
estava no meio ambiente e não estava causando mal a ninguém. Só que, começaram 
a surgir algumas infecções em hospitais no paciente que estava mais debilitado, por 
exemplo, até em uso de outro antibiótico, que destruía a microbiota que estava 
defendendo aquele individuo e por algum motivo imunológico ou desequilíbrio da 
microbiota, desenvolvia uma infecção por não fermentador. 
Uma característica desse não fermentador, eles normalmente têm uma sensibilidade 
reduzida a grande maioria dos medicamentos (antibióticos). Duas ou três drogas 
por exemplo. 
A “melhorzinha” é as bactérias Pseudomonas. 
Pode ter origem endógena ou exógena (acomete mais 
a exógena). 
 Endógena por que? tem algumas pessoas por 
algum motivo podem ser colonizadas por não 
fermentadores. 
Exemplo: Fibrose Cística - devido ao 
respirador/nebulizador, que contêm água, podendo ser 
colonizada. 
Quando encontra o não fermentador na secreção oral 
é interessante que analise esse paciente, pois ele pode 
desenvolver algum tipo de infecção 
Não temos na microbiota o não fermentador. 
 Como o ser humano adquiri esses não 
fermentadores? 
 
 A pessoa está usando o antibiótico para eliminar as bactérias que estão na 
microbiota, mas tendo o contato com o não fermentador em algum lugar 
específico e acaba desenvolvendo uma infecção. 
 Procedimentos cirúrgicos prolongados, um acesso para a bactéria infectar. 
 Respiração eletrônica: respiradores hospitalares. 
 
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Normalmente não se encontra um paciente ambulatorial com infecção por 
Pseudomonas, vai encontrar em ambiente hospitalizado, com um caso grave de 
imunossupressão. 
Características: 
Bacilos gram negativos - a maioria, mas tem um que é diplococos gram negativo 
Acinetobacter sp. 
São aeróbios, usam a via oxidativa, portanto não fermentam carboidratos. 
São quimiotrópicos (organismos cuja fonte de energia é compostos químicos), pois 
necessitam de carboidratos. 
Oxidase positiva ou negativa. 
Se não tem o método automatizado para identificar um não fermentador, pela 
pigmentação, o gram, a oxidase. 
Quando faz o antibiograma ele tem o padrão específico de resistência, tem uns que 
são sensíveis as tais drogas e outros resistentes. 
Enterobactérias: o bacilo era mais grosseiro, mais gordinho. Característica “coco 
bacilar” 
Não fermentador: tem uma aparência mais delicada. 
 A klebsiella, que as vezes tem a produção de urease e pode acabar se 
confundindo com não fermentador. 
Em relação ao teste oxidase, a questão do falso-positivo, não pode manusear 
qualquer tipo de alça, pois se usar uma com vestígios de ferro, pode ter um falso-
positivo e a colona em determinado meio ex: Ágar mcconkey, ele contém substâncias 
que pode reagir com a oxidase e dar um falso-positivo – erro clínico. 
Se tem que fazer a oxidase e não tem outro meio, tem que pegar superficialmente a 
colônia, se for mais no meio pode ocorrer um falso-positivo. 
O que pode ser positivo ou negativo na oxidase? 
Tem algumas bactérias que produzem essa enzima oxidase intracelular e outras não, 
como os não fermentadores, mas por ex: Stenotrophomonas é considerado oxidase 
negativo, mas olhando no manual da anvisa, ela oxida lentamente (sendo positivo) 
e nos livros como Koneman, oxidase negativa. 
 O meio EMB é a mesma coisa de Mcconkey? 
Vai crescer enterobactéria, só que Eosina Azul de 
Metileno consegue vai distinguir a E. coli dos outros, é 
tipo o Mcconkey só que vai ter a identificação E. coli, 
ficando verde brilhante. 
Oxidase Positiva: cor púrpura forte que aparece rapidamente em menos de 15/30 
segundos. 
 
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Oxidase Positiva Lenta: reação fraca que aparece entre 15/30 segundos a 1 
minuto. Pode ocorrer com Complexo Burkholderia cepacia e Stenotrophomonas 
maltophilia. Pigmentação diferente. 
Oxidase Negativa: coloração inalterada do inóculo. 
Obs:. Stenotrophomonas maltophilia é considerado negativa em concursos, devido 
ao tempo de crescimento, demora MUITO para crescer. 
Como faz para identificar um bacilo gram negativo não fermentador. 
Ágar TSI – Triplo Açúcar Ferro 
Primeira prova que faz é o TSI – três tipos de açucares: 0,1%glicose, 1,0% lactose, 
1,0% sacarose. 
Também tem o ferro que vai reagir com H2S. 
A bactéria vai produzir o H2S e vai 
formar o sulfato ferroso, deixando a 
coloração preta. Com isso, não vão 
fermentar a glicose, pois produzem 
gás mais em baixo. 
Quando ele é não fermentador, não 
vai fermentar a glicose. 
Tem TSI, mas necessita saber a 
espécie, o não fermentador utiliza a 
via oxidativa, oxidando alguns tipos 
de carboidratos. 
Glicose – Maltose – Lactose 
(estando em cima, representando o 
oxigênio). 
Os não fermentadores usam a via não oxidativa, se eles usam essa via eles 
necessitam do oxigênio para degradar o carboidrato e produzir energia. 
Meio Base para Oxidação e Fermentação – OF 
Se a glicose estiver em cima, vai ocorrer a prova do O.F. (O- oxidação, F- 
fermentação). 
Glicose é um meio semissólido. Fazendo três furos no meio. 
Glicose – dois tubos um com óleo mineral (vai servir de bloqueio para oxigênio) e 
outro vai estar em contato com oxigênio (sem o óleo mineral). 
Maltose – sem o óleo mineral. 
 
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Lactose – sem o óleo mineral. 
Obs:. O que tem óleo mineral, vai ficar inalterado e o que tem vai haver crescimento. 
Descarboxilação da Lisina (CO2) 
Observar se vai utilizar aminoácidos, se o meio estiver todo púrpuro, significa que 
utilizou (ficando positivo). 
Quando for negativo, é obrigatório o tubo ter 2/3 do tubo amarelado. 
 Por que isso? 
Temos ali a lisina, que é um aminoácido, tendo fonte de nitrogênio  descarboxilase 
+ carboxila  terminal = liberação de amina (base)  aumentando o pH (alcalino), 
ficando mais roxinho (púrpura). Caso esse processo não ocorrer, o tubo ficara 
amarelo. 
Nesse caso pode haver a presença do óleo mineral ou não, mas como ela vai 
descarboxilar, sendo um líquido, tem que mexer e acaba entrando bolhas de 
oxigênio. 
Prova da Gelatinase 
Também pode ser considerado o fator de virulência da 
bactéria. Se ela vai formar gelatina ou não. 
Triagem do Não Fermentador - Comuns 
 Pseudomonas aeruginosa 
 Burkholderia cepacia maltophilia 
 Stenotrophomonas maltophilia 
 Acinetobacter baumannii complex 
Importante: Verificar a motilidade, se tem crescimento no Mcconkey, relação ao 
meio OF e as provas. 
Pseudomonas Aeruginosa 
 Faz parte do Grupo Fluorescente; 
 Habitat: água, solo, vegetais, animais e 
ambiente hospitalar; 
 Beta-hemólise; 
 Pigmento verde-azulado em Ágar Mueller-
Hinton; 
 Ágar Sangue as colônias ficam verde 
metálico; 
 Brilho metálico; 
 
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 Fluorescente na luz ultravioleta; 
 Odor de frutas (doce), devido a aminocetofenona; 
 Prevalece em pacientes com feridas de queimaduras, fibrose cística, leucemia 
aguda, transplante de órgão e usuários de drogas intravenosas; 
 Não esporulado, composto por um flagelo; 
 Importante na formação de biofilmes; 
 Possui lipopolissacarídeo (LPS) com propriedade de indução de citocinas; 
 Hidrólise de Gelatina (Prova Gelatinase) positiva 11-89%; 
 Oxidase positiva; 
 Motilidade positiva; 
 Glicose positiva; 
 Maltose positiva 11-89%; 
 Lactose negativa; 
 Manitol positiva 11-89%; 
 Arginina positiva; 
 Lisina negativa; 
 Ureia positiva 11-89%. 
Importante: O diferencial dessa bactéria, é que a oxidase é positiva, móvel (pode 
expressar antígenos flagelados), crescer a 42C° e descarboxilar arginina. 
Todo não fermentador, não fermenta, mais vai oxidar e no caso da fermentação vai 
ficar inerte.Pseudomona gosta muito de água, principalmente em torneira de hospital, por isso 
os Hospitais usam um sabonete específico. 
Informação: tem bactérias agora resistentes a álcool 70%. 
Tem mais de 100 espécies. 
Sendo que tem algumas que mais causam infecção. 
A maioria encontramos no ambiente, no solo e principalmente na água. 
Na água do shampoo que toda mulher coloca pra render mais (água morna/quente). 
Eles podem colonizar, infectar pacientes que já tenho uma porta de entrada (pós-
operatório, com queimaduras, imunossuprimidos). Também pacientes com micoses, 
caso o paciente não seque a região direito. 
Tem a lesão, entra oxigênio, podendo haver uma colonização da unha (exemplo). 
Pseudo (falso) monas (única unidade) 
aeruginosa verdete (corrosão de cobre) 
Espécies mais comuns: 
 Pseudomonas aeruginosa (a que mais acontece) 
 Pseudomonas fluorescens 
 Pseudomonas putida 
 
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Relevante pela patogenicidade em humanos. 
Incidência em ambientes hospitalares de 30%. 
 Resistência natural aos antibióticos e desinfetantes. 
Prolifera em locais úmidos e quentes. 
Riscos: Dispositivos para umidificação, respiradores artificiais, pessoa que realizou 
traqueostomia e lavar a lente na água corrente na ausência do soro (soluções 
oftálmicas). 
Fibrose Cística  esses pacientes podem ser infectados por uma Pseudomonas que 
tem o material capsular polissacarídeo extracelular 
Geralmente a bactéria burla o antibiótico, quando ela fica mucoide, ela fica muco 
sensível normalmente. A capsula serve para que o antibiótico consiga se internalizar 
ou eliminar de maneira mais fácil a bactéria. 
Diagnóstico Laboratorial 
Isolamento mais comum. 
Ágar Sangue 
 
 
 
Mcconkey 
 
Pigmento Pioverdina e Piocianina 
 
O interessante que ela tem a produção de pigmento esverdeado 
na sua grande maioria, pois tem vários tons de verde, mas tem uma 
que fica marrom. 
Pigmento Piomelanina 
A colônia é mais plana, no ágar sangue consegue ver um brilho metálico e tem a 
borda irregular. 
 
 
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Importante ! 
 
 
 
Pigmentos 
 Pioverdina Fluorescência 
 Piocianina 
 Piorrubina 
 Piomelanina 
Brilho metálico visto no ágar sangue (carneiro 5%). 
Comum em pacientes com fibrose cística (cepa – mucoide). 
Se a cepa for mucoide, por mais que seja sensível, tem dificuldade de o antibiótico 
agir. 
Identificação 
Oxidação e fermentação (meio com baixa concentração de peptona). 
Oxidar a glicose. 
Crescimento a 42C°. 
Algumas provas que são positiva (+): Gelatinase, diidroarginina-hidrolise (ADH) e 
lisina descarboxilase. 
Acinetobacter 
 Forma de cocos ou cocobacilos; 
 Diplococos minúsculos; 
 Gram negativo; 
 Crescem em Ágar Mcconkey, com 
coloração rosada 
 No Ágar Eosina-Azul de metileno, 
possuem coloração azul intenso; 
 No Ágar Sangue tem a coloração 
branco-acinzetado; 
 Não produzem citocromo oxidase; 
 Rápida utilização da glicose, com produção ácida; 
 São imóveis; 
 
 
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 Resistentes à penicilina; 
 Beta-hemólise; 
 Odor de podridão; 
 Oxidase negativa; 
 Catalase positivo; 
 Motilidade negativo; 
 Crescimento em temperatura 33-35°C; 
 Colônias lisas, às vezes mucoides; 
 Multiresistente; 
Se apresentam em pares. 
Segundo não fermentador mais frequente encontrados em ambientes hospitalares, 
presente também na natureza. 
Tem a capacidade absurda de sobreviver em superfícies, sendo úmidas ou secas, 
facilitando sua propagação em hospitais. 
Curiosidade: Guerra do Vietnã e Guerra do Iraque (2003-2005) 
 Soldados com osteomielite (Inflamação do osso) e infecções por partes 
moles, devido ao contato com o solo. 
Altas taxas de resistências a antimicrobianos. 
Diagnóstico Laboratorial 
Ágar Mcconkey 
 
 
 
Ágar Sangue 
 
 
 
 
Dica: Se souber que tem uma alta taxa de resistência, oxidase negativa, a 
morfologia, o meio que cresce como fica e paciente bem debilitado = Acinetobacter. 
Diferença: Gram negativo no ágar sangue ele fica acinzentado no Acinetobacter, 
mas se for Pseudomonas ele vai ficar esverdeado e com brilho metálico. 
 
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Stenotrophomonas maltophilia 
 Gram negativo; 
 Móvel; 
 Não fermentador; 
 Oxidase negativa; 
 Bom crescimento em Ágar Sangue e Ágar Mcconkey; 
 Colônias lisas e cremosas; 
 Colônias com bordas irregulares, levemente amarelada; 
 Não produzem citocromo oxidase; 
 Maltose positivo; 
 Manitol negativo; 
 Podem ser negativas para a glicose; 
 Lisina descarboxilase positiva; 
 Cepas com pigmento amarelo; 
 Resistencia intrínseca a maioria dos antibióticos; 
 Teste de sensibilidade: Bactrim; 
 Frequentemente associado a infecções do trato respiratório humano; 
Habitat 
Fontes de água, solo, rios. 
Em hospitais  torneiras, respiradores, máquinas de diálise, soluções desinfetantes 
contaminadas etc. 
Flagelos e adesina fimbriada permitem a fixação inerte, como no cateter ou 
respiradores, formando biofilme. 
Diagnóstico Laboratorial 
Lembra cor de catarro no Ágar Sangue 
 
 
 
 
Ágar Mcconkey 
 
 
 
 
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Burkholderia cepacia maltophilia 
 Bacilos gram negativos; 
 São retos e ligeiramente curvos; 
 Catalase positiva; 
 Oxidase positiva, mas muito lenta ou fraca; 
 Degrada a glicose oxidativamente; 
 Crescem em Ágar Mcconkey (quase 
transparente); 
 Oxidam a maioria dos açúcares (manitol, lactose, glicose, sacarose); 
 Descarboxilação da arginina negativa; 
 Lisina a maioria positiva; 
 São microrganismos oportunistas, mais comum em pacientes imunodeprimidos 
e fibrose cística; 
 Contamina frequentemente equipamentos, medicamentos, desinfetantes; 
 Biofilme; 
 Uma das mais resistentes encontradas em Hospitais; 
 Resistencia intrínseca a polimixina (antibiótico)  na dúvida faz o esse teste. 
Ágar Sangue