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Citologia e histologia – prova 1 TÉCNICAS HISTOLÓGICAS E HISTOQUÍMICAS 1-Qual é o resultado da reação histoquímica do PAS em uma lâmina previamente tratada com amilase salivar? A reação terá resultado PAS-, pois a amilase degrada o glicogênio e consequentemente o radical 1,2-glicol que seria reagido com ácido e posteriormente corado com reagente de schiff. 2-Qual é a relação entre glicogênio e retículo endoplasmático liso (REL) no citoplasma dos hepatócitos? o REL é responsável, dentre outras funções, por armazenar substâncias em suas ‘bolsas’, e assim o faz nos hepatócitos, visto que essas células, presentes no fígado, são importantes para a reserva de energia (em forma de glicogênio) do corpo humano. Em suma, o fígado possui uma ampla reserva glicogênio, logo suas células são repletas de REL, organela responsável por esse armazenamento. 3-Porque a reação de Feulgen não cora RNA? A reação de Feulgen é específica para corar moléculas de DNA e não é eficiente para o RNA, pois este encontra-se mais suscetível à desnaturação na etapa de hidrólise para liberação de aldeídos. MEMBRANA PLASMÁTICA: ESTRUTURA 1-O que é unidade de membrana? a unidade de membrana é definida como uma estrutura trilaminar vista pelo microscópio eletrônico de transmissão, no qual são delimitadas três partes: duas faixas mais escuras representando a parte polar e uma mais clara entre elas, indicando a parte apolar dos lipídeos. 2-Justifique a organização em bicamada lipídica das membranas celulares As membranas se organizam dessa forma, pois tanto o citoplasma como o meio intracelular são compostos majoritariamente por H2O (polar), e os lipídeos, sendo anfifílicos, precisam dispor-se em uma bicamada onde sua parte hidrofóbica (apolar) fica voltada uma para a outra, enquanto a parte hidrofílica fica direcionada para os meios intra e extra celular. 3-Compare os tipos de proteínas em relação a sua interação com a bicamada lipídica e facilidade de extração bioquímica Na membrana plasmática existem dois tipos de proteínas: as integrais/intrínsecas e as periféricas/extrínsecas. O primeiro tipo está fortemente associado aos lipídeos, e elas ultrapassam totalmente a membrana, de forma que há uma parte dela internamente e externamente da célula. Já as proteínas periféricas podem estar ligadas diretamente á membrana, somente à cabeça polar dos lipídeos, ou até mesmo em outra proteína intrínseca, contando que todas elas ocupam somente o meio externo OU interno da célula, não ultrapassando toda a membrana como feito pelas proteínas integrais. 4-Qual é a composição química e a importância funcional do glicocálice das células animais? A composição química do glicocálice é de forma geral definida como a associação de carboidratos (açúcares) com partes proteicas ou lipídicas que estão na parte externa da membrana celular. Essa estrutura é importante para o reconhecimento entre as células, impedindo seu crescimento excessivo (tumores), contém propriedades imunitárias, proporciona viscosidade/deslizamento e também a adesão entre células. 5-Qual é a importância da carga negativa da superfície celular? a importância de cargas na superfície celular é específica de cada célula. No caso do neurônio isso está associado com abertura e fechamento de canais proteicos, já nas hemácias está relacionado com sua proteção, visto que isso as mantém longe uma das outras e do tecido endotelial (camada interna de epitélio que reveste todos os vasos sanguíneos). 6-Quais são as vantagens da criofratura para o estudo das membranas? A criofratura permite observar a estrutura da membrana plasmática entre lipídeos, e, por ser feita com uma quebra, como o nome já diz, ela indica que as interações entre as porções hidrofóbicas dos lipídeos são mais fracas, pois são elas que se quebram no processo. MEMBRANA PLASMÁTICA: ESPECIALIZAÇÕES E JUNÇÕES INTERCELULARES 1-Diferenciar morfológica e funcionalmente os diferentes tipos de junções celulares O complexo juncional de uma célula é constituído por: zônulas de oclusão e de adesão, desmossomo e junção comunicante (GAP) – todos constituídos por proteínas transmembrana. A junção de oclusão localiza-se na parte apical (cima) da célula, é formada por proteínas (ocludinas) e tem como função a vedação do espaço intercelular, impedindo o fluxo de substâncias entre as células. Logo em baixo dessa junção, encontra-se a oclusão de aderência, também formada por proteínas (caderinas) e responsáveis por dar resistência lateral às células adjacentes epiteliais. Já os desmossomos são placas arredondadas puntiformes, formados por filamentos de queratina e com a função de adesividade (mais forte do que a junção de adesão) entre as células, estando majoritariamente em células as quais há muita tração. E por último, as junções GAP são filamentos de proteínas (conexinas) reunidos, que atravessam as membranas e estabelecem uma comunicação entre as células (pequenas moléculas como nucleotídeos e íons). Nota: nucleotídeo= monômero do RNA e DNA, formado por pentoses + grupo fosfato + base nitrogenada 2-Diferenciar quanto à estrutura e composição química os componentes do citoesqueleto: microtúbulos, microfilamentos e filamentos intermediários Os microtúbulos são heterodímeros formados por alfa e beta tubulina que se juntam formando protofilamentos, os quais se associam em número de 13 para formar um microtúbulo com diâmetro de 25 nanômetros. Enquanto os microfilamentos são compostos pela proteína actina, com 5 a 8 nanômetros de diâmetro e possuem maior flexibilidade do que os microtúbulos. Já os filamentos intermediários são constituídos por protofilamentos de proteínas em alfa hélice (incluindo a queratina) com diâmetro de 10 nanômetros. 3-O que são proteínas motoras (PM)? Quais são as PM dos microtúbulos? E dos microfilamentos? Proteínas motoras são moléculas associadas a essas estruturas (microtúbulos e microfilamentos) e que sofrem mudanças conformacionais, gerando assim, o movimento das moléculas. Nos microtúbulos, essas proteínas são a dineína e cinesina, já nos microfilamentos (filamentos de actina) a PM é a miosina. 4-Qual é a importância do citoesqueleto e das junções aderentes nos epitélios como na pele? Que componente do citoesqueleto e tipo de junção estão relacionados ao estresse mecânico? o citoesqueleto tem grande importância nas células para regular a sua forma e tamanho, além de ser capaz de suportar estresses sem que haja lise celular, assim como as junções também estabelecem sua importância nesse processo, visto que possuem a tarefa de suportar tração na célula. Os filamentos intermediários e os desmossomos são os principais componentes dos respectivos grupos citados para realizar tal função. NÚCLEO INTERFÁSICO E EM DIVISÃO 1-Porque as células absortivas intestinais apresentam glicocálice mais desenvolvido? As células intestinais são responsáveis por absorver e reconhecer as substâncias presentes no organismo (é o contato do corpo com o meio externo), visto que o glicocálice é uma estrutura responsável por esse reconhecimento, é de suma importância que os enterócitos possuam ela bem desenvolvida. Além disso, muitas enzimas digestivas estão associadas ao glicocálice, enaltecendo mais uma vez a relevância de sua presença nas células absortivas intestinais. 2-Qual é o efeito da colchicina sobre as células em mitose? E da citocalasina B? Justifique A colchicina é utilizada para impedir a proliferação de células inflamatórias, seu mecanismo de ação baseia-se no impedimento da divisão celular. Esse fármaco associa-se aos dímeros alfa e beta tubulina, prejudicando a formação de microtúbulos e assim, inviabilizando a separação das cromátides na metáfase. Já a citocalasina B, age impedindo a polimerização dos filamentos de actina, e dessa forma impede que ocorra a citocinese na última fase da mitose. 3-Relacione tipo de cromatina, aspecto do núcleo e atividade metabólica da célula A cromatina pode apresentar-se de duas maneiras no núcleo: mais condensada ou menos condensada. A primeira forma édenominada de heterocromatina, pelo microscópio eletrônico vemos uma região eletrodensa e isso caracteriza uma célula em baixo estado metabólico. Enquanto o segundo citado é chamado de eucromatina, a qual indica alta atividade metabólica, visto que o DNA está ativo, descondensado e de fácil transcrição. Essa região é vista eletrolúcida no ME. 4-Como é constituído: nucleossoma, esqueleto do cromossoma metafásico, centrossoma, envoltório nuclear, complexo de poros, fuso mitótico Nucleossoma= combinação de histonas com o DNA no início de seu enovelamento. Esqueleto do cromossoma metafásico= cromossomo no grau máximo de condensação, formado por duas cromátides irmãs de dupla hélice de DNA. Centrossoma= constituído por dois cilindros de microtúbulos, organizados em 9 trincas formando um cilindro. Envoltório nuclear= constituído por duas unidades de membrana, uma interna em contato com proteínas, e uma externa que se projeta para construçao do retículo endoplasmático. Complexo de poros= constituído por diversas proteínas (+ de 150). Fuso mitótico= constituído de tubulinas, pois são microtúbulos. 5-Qual é o papel das histonas na cromatina interfásica? As proteínas histonas são encarregadas pela condensação do DNA na intérfase. São elas as responsáveis por formar o cromossomo condensado para, posteriormente, alocar-se na placa metafásica e originar duas células filhas. SÍNTESE E SECREÇÃO 1-Faça um desenho esquemático ultra-estrutural da célula ácino pancreática indicando as organelas envolvidas no processo de secreção essa é uma célula com intenso processo de secreção de proteínas, portanto possui retículo endoplasmático e complexo de Golgi bem desenvolvidos, sendo as principais organelas responsáveis por produzir e secretar substâncias. 2-Diferencie quanto a ultra-estrutura, célula produtora de proteínas de acúmulo citoplasmático de célula secretora de proteínas a célula produtora de proteínas que ficarão acumuladas no citoplasma possui quantidade reduzida de retículo endoplasmático e complexo de Golgi, visto que são necessárias essas organelas somente para uma função basal. Também é possível haver diferenciação entre manter proteínas em grânulos e mantê-las livres no citoplasma, sendo essa última mais rica em polirribossomos livres. Já a célula secretora de proteínas tem alto grau de desenvolvimento de RE e GC, pois estes são imprescindíveis para a constante produção e eliminação das moléculas. 3-Quais são as principais características de uma célula secretora de hormônios esteróides? células secretoras de hormônios esteróides são ricas em retículo endoplasmático agranular (liso), pois eles são responsáveis pela produção de todos os lipídeos, e os esteróides são produzidos por meio da conversão de colesterol (um tipo de lipídeo) em enzimas presentes nessa organela. 4-Quais são as funções do REL nas células hepáticas? Tendo em vista a função do fígado de armazenar glicose, sabe-se que suas células (hepatócitos) são ricas em REL, estes que por sua vez possuem a enzima glicose-6-fosfatase em sua membrana, capaz de degradar a glicose e armazená-la sob forma de glicogênio. 5-Quais são principais regiões do complexo de Golgi? Cite suas funções O complexo de Golgi possui três regiões funcionais: cis/convexa/formação (inferior), medial e trans/côncava/maturação (superior). A primeira citada é responsável por receber os lipídeos e proteínas vindos do RE e modificá-los para posteriormente serem liberados pela face trans, a qual os encaminha, por meio de vesículas transportadoras, para o seu destino final. 6-Considerando o que se observou nas lâminas histológicas 5 e 73, procure determinar um tipo de substância produzida pelas células caliciformes observando as lâminas 5 e 73, de intestino e tranquéia respectivamente, é possível localizar as células secretoras caliciformes no tecido epitelial de revestimento, podendo determinar que a substância excretada por elas é o muco. TECIDO EPITELIAL DE REVESTIMENTO 1-Quanto à interação com a lâmina basal, o que diferencia os epitélios simples, estratificado e pseudo-estratificado? A interação com a lâmina basal determina a classificação do epitélio analisado. Quando ele é simples, todas as suas células estão em contato direto com a lâmina; quando ele é estratificado suas células estão dispostas em várias camadas, inviabilizando que todas toquem a membrana basal. Já o espitélio pseudoestratificado transmite a impressão de que são várias camadas como no estratificado, porém, se analisado de melhor forma, pode-se enxergar o contato direto de todas as células com a lâmina, entretanto, nem todas chegam até a superfície do epitélio. 2-Caracterize a lâmina basal, quanto a sua composição química e funções A lâmina basal é constituída por proteínas do meio extracelular como colágeno e laminina. Ela é responsável por apoiar o tecido epitelial e separá-lo do tecido conjuntivo, além de selecionar o trânsito de moléculas entre esses tecidos, controlar a diferenciação e proliferação celular e promover a polaridade da célula. 3-Quais são as adaptações funcionais do epitélio da bexiga que permitem a distensão do órgão? O tecido epitelial da bexiga é estratificado de transição, caracterizado por sua capacidade de distender quando a bexiga está cheia e de se encurtar quando ela está vazia. Isso pode ocorrer devido à forma de suas células apicais, as quais não são achatadas, mas sim com formato de cúpula ou abóboda. 4-Qual é a importância da borda estriada no epitélio do intestino delgado? A borda estriada, ou seja, com microvilosidades, é importante no intestino delgado pois esse órgão é responsável pela captação de nutrientes que ingerimos, e essa especialização da membrana viabiliza um maior contato entre o bolo alimentar e o epitélio, proporcionando uma absorção mais efetiva. 5-Como é a renovação celular nos epitélios estratificados? As células da camada germinativa (mais próximas da membrana basal) sofrem diferenciações e vão subindo no epitélio até atingir a sua “última camada”. Após algum tempo (cerca de 5/6 semanas), essas células apicais perdem organelas e tornam-se parte da queratina. Assim acontece o processo cíclico de renovação celular em tecidos epiteliais de revestimento estratificados. TECIDO EPITELIAL GLANDULAR 1-Diferencie a morfologia ultra-estrutural de célula serosa e célula mucosa glândulas serosas (secretam proteínas) possuem células piramidais com núcleo central arredondado e lúmen pouco evidente, além de possuírem forte coloração histológica. Enquanto glândulas mucosas (secretam carboidratos) possuem núcleo achatado e basal, com lúmen mais evidente e coloração histológica fraca. 2-O que é secreção parácrina? Esse é um tipo de secreção que foi originado pela liberação de sinais vindos de células adjacentes à aquela que liberou o produto. Esse processo ocorre com a sinalização parácrina, na qual uma célula envia ligantes para outra em uma distância relativamente pequena, fazendo com que a receptora reconheça o sinal e realize a liberação. Um exemplo desse processo é dado no desenvolvimento da medula óssea, viabilizando a diferenciação de funções neuronais. 3-Compare a morfologia das células da supra-renal ao microscópio de luz e eletrônico No MO as células da supra-renal apresentam-se divididas em duas partes: medular e cortical, na qual a glândula endócrina é vista em sua forma cordonal. Já no ME a célula supra-renal é analisada com a riqueza de RL, visto que há muita liberação de hormônios nesse órgão, e essa organela é a responsável pela sintetização de lipídeos (precursores dos hormônios). 4-O que são glândulas de secreção apócrina, merócrina e holócrina? Essas são as diferentes formas de liberar a secreção de uma glândula. A apócrina realiza esse processo liberando o produto junto com porções do citoplasma apical de suas células. A merócrina não perde nenhuma parte de sua estrutura, liberando somente a secreção. E a holócrina faz a excreção perdendo totalmente suas células junto com a secreção, ocasionando na sua própriadestruição, também conhecido como apoptose. A última citada possui células reserva para repor aquelas que foram perdidas no processo de liberação. 5-Porque as glândulas sebáceas e sudoríparas não são classificadas quanto ao aspecto histológico dos adenômeros? Essas glândulas não podem ser classificadas quanto aos seus adenômeros pois, apesar de serem exócrinas e possuírem essa estrutura, a forma de liberação dessas glândulas é holócrina, ou seja, toda a célula é destruída e juntamente liberada com o produto secretório, inviabilizando uma definição de sua porção excretora, que está sempre em renovação. 6-O que diferencia uma glândula exócrina simples de uma composta? Essa classificação é dada conforme a quantidade de ductos da glândula. Uma glândula com apenas um ducto é caracterizada como simples, já a composta possui 2 ou mais ductos que se ramificam e originam outros de calibres cada vez menores.
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