microscopia

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Microscopia 
Esfregaço: Células livres presentes nos fluidos corpóreos
(sangue, linfa, sêmem, líquor, hemolinfa);
Espalhamento: Consiste em promover uma raspagem das
camadas superficiais das mucosas Ex.: mucosas vaginais ou
bucais; 
Montagem total (à fresco ou não): Ex.: Órgão inteiro de
insetos, folha de uma planta;
Corte histológico: cortes extremamente finos (micrômetros)
Técnicas de coleta
Reações de acidofilia e basofilia
ACIDÓFILAS-Afinidade por corantes ácidos (proteinas básicas
citoplasmáticas) 
BASÓFILAS-Afinidade por corantes básicos (DNA, RNA,
glicoproteinas ácidas, Pectatos e polissacarideos ácidos) 
Métodos de fixação
FÍSICOS:Calor - Fixação de bactérias leveduras
QUÍMICOS-Substâncias quimicas que preservam a estrutura e
composição química dos tecidos.
Álcoois (metanol, etanol)
Fixadores com mercúrio (Zenker) Fixadores com ácido
pícrico (Bouin) Glutaraldeído
Formaldeído
Tetróxido de ósmio
Fixação de tecidos 
Consistência "endurecer os tecidos e as células"
Impedir a autolise
Impedir a atividade e a proliferação de bactérias
Resistência às etapas seguintes da técnica citológica
Aumentar a afinidade das estruturas celulares pelos
corantes citológicos
Fatores que afetam a fixação 
ph;
Osmolaridade;
Velocidade de penetração dos fixadores (2-3 mm espessura);
Volume de fixador; Concentração do fixador; 
Temperatura;
Desidratação
Consiste na remoção da água livre do tecido
fixado, por ação do álcool.
A maior parte dos meios de inclusão são
insolúveis em água, o que obriga a proceder a
uma desidratação das amostras a incluir. 
Série de álcoois de concentração crescente: 70°,
95° e 100°
Diafanização
Passagem dos fragmentos de tecido fixados e
desidratados por uma substância diafanizadora
miscível com a substância de inclusão. Ex: Xilol,
Toluol, Benzol
 A peça fica com aspecto mais claro e
translúcida
Inclusão 
O tecido é colocado em suportes metálicos cheios de
parafina líquida, que depois de solidificar permite
cortar o tecido em secções finas.
os tecidos tém de ser alinhados e orientados de
acordo com as suas características e objetivos do
trabalho.
Corte transversal
 Corte longitudinal
 Corte obliquo
Corte
Os blocos incluídos são cortados em micrótomos
A espessura do corte deve estar compreendida
entre 3 a 10 um
Após o corte
Colocam-se as secções a flutuar em banho-maria
Colocam-se os cortes numa lâmina
Estufa
Tipos de microscopia 
Óptica e eletrônica 
Microscopia
Microscopia Óptica
Amplia um objeto a ser estudado.
Funciona com um conjunto de lentes que atuam nessa
ampliação.
Pode usar iluminação natural ou artificial.
Possui um sistema mecânico que suporta e permite
controlar o sistema óptico que atua na ampliação das
imagens.
Oculares: Ampliam a imagem fornecida pelo sistema de
objetivas.
Braço: Suporta a platina e ao revólver.
Canhão (Tubo): Serve de suporto ao sistema ocular.
Objetivas: Ampliam a imagem do objeto que está sendo
observado
Revólver: serve de suporte às objetivas e permite a mudança
delas.
Platina:Serve de suporte para a colocação do material que vai
ser observado. Observe que a mesma apresenta uma abertura
central para a passagem da luz.
Fonte de Luz: Pode ser natural quando se usa um espelho
refletor ou artificial.
 Condensador: Distribui a luz que atravessa o diafragma.
Diafragma: regula a intensidade de luz captada da fonte
luminosa. Observe que o mesmo apresenta um pino que ao ser
manipulado abre ou fecha o mecanismo central.
Base ou pé: Suporte de todos os elementos do microscópio.
.
Parafusos Macrométrico e Micrométrico: Permitem
movimentos de maior ou menor amplitude, afastando
ou aproximando a preparação estudada.
Cuidados com o microscópio 
Transportá-lo com ambas as mãos, apoiando a base
numa delas e segurando o braço com a outra.
Ao colocá-lo sobre a mesa, mantê-lo a alguma
distância do bordo.
Evitar molhá-lo ao usar preparações temporárias.
As lentes São peças muito caras. Para as limpar, deve
usar a flanela que normalmente acompanha o
aparelho. Após a utilização, encaixar a objetiva de
menor ampliação alinhada com a ocular.
Eucariotas
Possuem carioteca.
Podem ser animais ou vegetais. Podem ser uni ou
pluricelulares.
Ricos em organelas.
Procariotas 
NÃO Possuem carioteca. Todos são UNICELULARES.
NÃO possuem organelas.
EX. BACTÉRIAS.