Aula 02 -Métodos e técnicas para exame parasitológico de fezes

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Exame parasitológico de fezes
➢ Fase analítica:
Exame microscópico Exame macroscópico
Exame MACROSCÓPICO
Consistência das fezes (formadas, pastosas, cíbalos
(consistência pétrea), diarreicas ou líquidas)
Aspecto fecal (normal, mucosa, sanguinolenta ou 
mucos-sanguinolenta)
Exame da superfície da amostra ( proglotes de Taenia, 
Ascaris ou Enterobius adulto.
➢ Consistência das fezes:
Exame MACROSCÓPICO
Exame parasitológico de fezes Microscopia
• Pesquisa de ovos e larvas de helmintos; 
trofozoítos e cistos de protozoários
• Uso de processos de enriquecimento e 
coloração
• Métodos gerais (sedimentação espontânea e 
centrifugação)
• “Nenhum dos métodos é capaz de 
diagnosticar todas as formas parasitárias 
simultaneamente”
Exame microscópico
Exame parasitológico 
de fezes Microscopia
Exame direto 
• Amostra recentemente colhida, fezes líquidas, amostra 
de aspirado duodenal – exame até 30 min após coleta
• Pesquisa de trofozoítos, cistos de protozoários, ovos
e larvas de helmintos 
• Observação direta ao microscópio do material fecal:
- diluído com solução NaCl 0,85% - motilidade de 
trofozoítos e refração citoplasma dos cistos
- com lugol – melhor definição da estrutura nuclear 
dos cistos
• Presença de detritos fecais, revela poucos detalhes 
estruturais
Cisto E. hystolitica/ E. dispar
Trofozoíto E. hystolitica/E. dispar
Exame direto 
Cisto E. hystolitica/ E. dispar
Trofozoíto E. hystolitica/E. dispar
- 2 a 3 gotas de solução NaCl 0,85% na lâmina. 
- Com um palito, tocar diferentes locais da amostra de fezes e 
transferir um pequena porção para a lâmina com a solução de 
NaCl.
- Homogeneizar a porção de fezes com a solução salina com o 
palito. 
- Adicionar uma gota de lugol (melhor definição da estrutura 
nuclear dos cistos)
- Observar a lâmina ao microscópio.
Procedimento:
Métodos com concentração por sedimentação
• Pesquisa de cistos de protozoários, ovos e larvas de 
helmintos
• Amostra recentemente colhida ou em conservantes
• Concentração por sedimentação espontânea - a 
amostra de fezes é misturada com água, filtrada e 
colocada em repouso por 2 horas. O exame 
microscópico do sedimento obtido por ação da 
gravidade, corado com lugol, permite a observação 
de cistos, ovos e larvas
• Utilizado na rotina do EPF
Método de Hoffman, Pons e Janer (HPJ) ou Lutz
Método de Hoffman, Pons e Janer
http://slideplayer.com.br/slide/49554/
Método de Hoffman, Pons e Janer
https://www.youtube.com/watch?v=htXB2QrKe7o
Métodos com concentração por centrifugação
• Pesquisa de cistos de protozoários, ovos e larvas de helmintos
• Amostra recentemente colhida (Blagg e cols.) ou com conservante 
(MIFc)
• Concentração por centrifugação - a mistura de fezes e solução 
conservante é filtrada, misturada com éter sulfúrico e submetida 
a centrifugação. O exame microscópico do sedimento obtido, 
corado com lugol, permite a observação de cistos, ovos e larvas
• Utilizado na rotina do EPF
Método de Blagg e cols. ou MIFc
MIF: Mercúrio, Iodo e Formol (Atualmente é usado apenas o formol)
Método de Blagg e cols. ou MIFc
Éter
Sólidos
Aquosa
Sedimento Biológico
Método de Blagg e cols. ou MIFc
http://slideplayer.com.br/slide/83362/
Método de Faust e cols.
• Pesquisa de cistos e oocistos de protozoários, ovos leves de helmintos
• Amostra recentemente colhida ou em conservante
• Concentração por centrífugo-flutuação no sulfato de zinco - a mistura 
de água e fezes é filtrada e lavada através de centrifugação e 
ressuspensão com água. O sedimento é ressuspendido em solução de 
sulfato de zinco (densidade 1.18) e centrifugado. 
Exame microscópico da película flutuante permite a observação dos 
cistos.
• Vantagens: maior sensibilidade para a detecção de cistos
• Desvantagens: procedimento mais complexo, requer reagentes específicos
Métodos com concentração por centrifugação
http://slideplayer.com.br/slide/49554/
Método de Faust e cols.
https://www.youtube.com/watch?v=X0Qjp4URRlU
Técnica de Willis (1921)
Princípio: O método é baseado sobre uma dupla propriedade que possuem certos ovos de 
helmintos: a de flutuar na superfície de uma solução saturada de cloreto de sódio de densidade 
1,20 e a de aderir no vidro. 
Finalidade: Ideal para a pesquisa de ovos leves, como os de ancilostomídeos, semi-leves de 
helmintos e cistos, eventualmente larvas poderão ser encontradas.
Métodos com concentração por centrifugação
Fezes
+
H2O
Filtrar em 
tubo de
ensaio
Lavar 3x
Solução 
saturada
de NaCl
Lâmina + Lugol
+ lâmínulaMicroscópio
100 e 400X
Técnica de Willis
Parasitos 
(ovos leves)
Detritos
Solução saturada
de NaCl
Técnica de Willis
https://www.youtube.com/watch?v=dTKaE76ypOA
https://www.youtube.com/watch?v=dTKaE76ypOA
Método Kato-Katz
• Pesquisa quantitativa de ovos de helmintos (especialmente 
S. mansoni)
• Amostra de fezes de consistência normal, sem 
conservantes
• Quantidade determinada de fezes (40 – 60 mg), corada 
com verde malaquita, é observada ao microscópio, 
permitindo a determinação do número de ovos por grama 
de fezes
• Vantagens: método quantitativo; maior sensibilidade para 
a detecção de ovos de S. mansoni
• Desvantagens: tempo do procedimento (1 – 2 horas), 
requer materiais especiais
Método Kato-Katz
https://www.youtube.com/watch?v=apuE0YQxVnk
http://pt-br.aia1317.wikia.com/wiki/Arquivo:Kato-katz.png
http://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticProcedures/stool/morphcomp.html
Ovos de nematelmintos e cestodas em fezes humanas
Ancilóstomo
http://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticProcedures/stool/morphcomp.html
Comparação entre o tamanho de ovos de helmintos
Método de Baermann e Moraes ou Rugai
• Fezes sem conservantes, de preferência não 
armazenadas em geladeira
• Amostra colocada em contato com água a 45 °C 
para onde as larvas migram. O exame 
microscópio do sedimento permite a observação 
de larvas
• S. stercoralis
• Ancilostomídeos
• Maior sensibilidade para a detecção de larvas, 
simplicidade de execução
Métodos baseados em hidrotropismo das larvas
Método de Baermann e Moraes e Método de 
Rugai
(44) Método de Rugai - YouTubeMétodo de Baermann Moraes - YouTube
https://www.youtube.com/watch?v=-EM5hS3GtCA
https://www.youtube.com/watch?v=NO_tPjZR6DI
Método de Baermann e Moraes
Método de Rugai
Larvas de nematelmintos
Cavidade
Primórdio 
genital
Ancilostomídeo Strongyloides
Ancilostomídeo
Strongyloides
Esôfago
Em fezes com mais tempo de coleta, ou de constipação intestinal, as larvas podem ser de Strongyloides stercoralis ou
de Ancilostomídeos que eclodiram dos ovos eliminados nas fezes
Strongyloides Ancilostomídeos
Filarióide
Maior, cauda 
bifurcada, 
esôgado
cilíndrico e reto
Filarióide
Vestíbulo 
bucal longo, 
cauda 
pontiaguda, 
bainha, 
esôfago 1/3 
comprimento
Rabditóide
Vestíbulo 
bucal longo, 
genital 
pequeno
Método da fita gomada (fita adesiva, Graham)
• Pesquisa de ovos de Enterobius vermicularis e Taenia sp que, 
se presentes na região perianal, aderem à fita gomada e podem 
ser observados ao microscópio
• Realizado pela manhã, ao acordar, antes de higienização da 
região perianal
• Rápido e de fácil execução
Enterobius vermiculares
Taenia sp (positividade 85%)
Método da fita gomada
Outros métodos - tamização
Todo o conteúdo de uma evacuação é passado em 
uma tela de metal fina sob água corrente 
(peneirado). As proglotes de Taenia ficam retidas e 
são examinadas após clarificação com ácido acétido. 
T. solium – ramificações 
largas, irregulares e 
dendríticas
T. saginata – ramificações estreitas
Hematoxilina Férrica
Método de coloração para protozoários intestinais, os
quais tomam a cor azulada ou cinzenta com estruturas
nucleares em preto. Os corpos cromatóides dos cistos
das amebas e inclusões, tais como bactérias ou então
hemácias no citoplasma dos trofozoítos, coram-se de
preto.
» É uma técnica complicada por apresentar várias
etapas para sua execução
Métodos Especiais de Coloração
Coloração pelo Tricrômico
Métodode coloração para protozoários intestinais,
os quais tomam a cor verde-azulada. A cromatina
nuclear, corpos cromatóides, hemácias e bactérias
coram-se de vermelho ou púrpura escuro. O material
de fundo, usualmente cora-se em verde,
contrastando com o protozoário.
Métodos Especiais de Coloração
Método de Kinyoun
Método de coloração utilizado para
o diagnóstico de parasitos protozoários
intestinais oportunistas, como
Cryptosporidium e Isospora. Cora
estruturas álcool-ácido resistentes com
fucsina contrastadas com verde-malaquita
ou azul de metileno.
Métodos Especiais de Coloração
(44) Método Kinyoun - YouTube
https://www.youtube.com/watch?v=8QHUFmC_eZg
http://www.cdc.gov/dpdx/diagnosticProcedures/stool/morphcomp.html
Colorações específicas
Parasitos Intestinais (diagnosticados por exames de fezes)
Protozoários
Giardia lamblia Cisto ou trofozoíto
Entamoeba histolytica Cisto ou trofozoíto
Entamoeba coli* Cisto ou trofozoíto
Iodamoeba butschilli* Cisto ou trofozoíto
Endolimax nana* Cisto ou trofozoíto
Chilomastix mesnili Cisto ou trofozoíto
Blastocystis hominis Oocisto
Cryptosporidium parvum Oocisto
Isospora belli Oocisto
Platelmintos
Taenia sp Ovo
Hymenolepis nana Ovo
Hymenolepis diminuta Ovo
Schistosoma mansoni Ovo
Nematelmintos
Ascaris lumbricoides Ovo (fértil ou infértil)
Enterobius vermicularis Ovo
Trichuris trichiura Ovo
Ancylostoma duodenale Ovo ou larva**
Necator americanus Ovo ou larva**
Strongyloides stercoralis Larva
* amebas comensais (não patogênicas para o homem)
** somente em fezes mantidas no laboratório por mais de 24 horas
Engroff, P.; Müller, G. C.; Mansour, E.; al., E. Parasitologia Clínica. [Digite o Local da Editora]: Grupo A, 2021. 9786556901572. 
Disponível em: https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9786556901572/. Acesso em: 2021 ago. 26.
Engroff, P.; Müller, G. C.; Mansour, E.; al., E. Parasitologia Clínica. [Digite o Local da Editora]: Grupo A, 2021. 9786556901572. 
Disponível em: https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9786556901572/. Acesso em: 2021 ago. 26.
Engroff, P.; Müller, G. C.; Mansour, E.; al., E. Parasitologia Clínica. [Digite o Local da Editora]: Grupo A, 2021. 9786556901572. 
Disponível em: https://integrada.minhabiblioteca.com.br/#/books/9786556901572/. Acesso em: 2021 ago. 26.