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GRUPO SER EDUCACIONAL CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA BIOQUIMICA APLICADA CURSO DE GRADUAÇÃO EM FARMÁCIA ATIVIDADE CONTEXTUALIZADA CATY JANNE REBOUÇAS DE OLIVEIRA 01449656 MOSSORÓ-RN 2022 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO ..................................................................................................................... 4 2 OBJETIVOS .......................................................................................................................... 6 3 METODOLOGIA .................................................................................................................. 7 4 DESENVOLVIMENTO ........................................................................................................ 8 4.1 GLUTATIONA ..................................................................................................................8 4.2 MÉTODOS DE QUANTIFICAÇÃO DA GSH................................................................8 4.3 ESTRUTURA DA GLUTATIONA E PRINCIPAIS MECANISMO DE AÇÃO.........................................................................................................................................9 4.4 ATUAÇÃO DA GSH E NÍVEIS APÓS A REALIZAÇÃO DE EXERCÍCIOS FÍSICOS...................................................................................................................................11 5 CONSIDERAÇÕES FINAIS .............................................................................................. 13 6 REFERÊNCIAS .................................................................................................................. 14 4 1 INTRODUÇÃO Hoje em dia, a importância do exercício físico está bem aceita pelo público, pelas organizações profissionais e pela comunidade médica e assim, cada vez mais, as pessoas ao redor do mundo incluíram, em seu dia-a-dia, a prática regular de atividades físicas. A atividade física é importante indispensável para a manutenção e promoção da saúde. A comunidade científica tem evidenciado a importância de um estilo de vida fisicamente ativo. Contudo, o exercício físico representa aumento na utilização de substratos pelos músculos em atividade, devido ao aumento na demanda de energia e, consequentemente, na utilização do oxigênio para produzi-la através de vias oxidativas (Silva, 2014). A formação no interior do organismo de espécies oxidantes, tanto as causas como os mecanismos moleculares envolvidos nesse processo são poucos conhecidos. O que se verifica e que as hipóteses sobre a influencia do processo oxidativo no envelhecimento celular fazem parte de um contexto que envolve, entre outros aspectos, as teorias gerais do envelhecimento (Rebellato, 2008). Na literatura vemos que o exercício físico estressante, ou seja, quando o esforço supera a capacidade funcional da pessoa, aumenta muito o consumo e a utilização muscular de oxigênio, incrementando a produção de ROS (espécies reativas de oxigênio), o grau de estresse oxidativo e o dano oxidativo as macromoleculas. Isto se deve pelo maior consumo de oxigenio, pela menor eficácia da respiracao mitocondrial e diminuição das defesas antioxidantes (Mazzeo, et al 1998). Uma forma de verificar a ocorrência de condições de estresse oxidativo é pela medição dos níveis de concentrações plasmáticas de glutationa reduzida (GSH) e oxidada (GSSG), calculada pela relação molar GSH/GSSG, e identificado o dano oxidativo em lipídios e proteínas GSH e de GSSG. A glutationa é uma molécula constituída pelos aminoácidos ácido glutâmico, cisteína e glicina, que é produzida nas células do organismo, sendo, importante ingerir alimentos que favoreçam essa produção, como ovos, legumes, peixe ou frango. Métodos analíticos para quantificar GSH, em matrizes biológicas são de extrema importância e a literatura apresenta uma vasta coletânea destes métodos (Camera e Picardo, 2002). Ao selecionarmos um método analítico, ele deve ser específico para diferenciar a GSH de outros tióis presentes nas células e em produtos de biotransformação, além de separar GSH e GSSG de moléculas interferentes. Os métodos de análise dividem-se em cromatográficos e não cromatográficos, mas qualquer que seja ele, o pré-tratamento da amostra é fundamental, incluindo coleta e preparação da amostra, remoção de proteínas e a derivatização, dependendo da técnica selecionada. 5 Segundo Neto (2010) a glutationa está distribuída em tecidos animais e vegetais, e em microorganismos. A GSH após processos evolutivos tornou-se capaz de realizar diversas funções, como: interfere na catálise, metabolismo, transporte, participa de reações de síntese de proteínas e ácidos nucléicos, metabolização de peróxidos e inativação de radicais livres. Alteração da GSH reduzida para GSSG oxidada altera o balanço redox favorecendo a permanência de espécies reativas de oxigênio. A GSH é uma molécula que intervêm em diversos processos, com antioxidante e destoxificante, no transporte de aminoácidos, manutenção de certas enzimas, até mesmo proteção de organismo contra radiação solares e também tem participação na regulação da morte celular programada. (DRINGEN, 1999). (Ana neto, dissertação). A nível intracelular de glutationa pode ser predititivo para a longevidade da célula, devido a proteção contra o estresse oxidadtivo e destoxificação e sua disponibilidade na forma reduzida contribui para a manutenção da saúde. (Park , 2010). Este peptídeo é importante para a proteção das células do estresse oxidativo, e tem ainda um papel muito importante na biotransformação e eliminação de substâncias químicas do organismo. Face a isso, realizou-se uma pesquisa bibliográfica, numa variedade de trabalhos publicados em revistas renomadas, de forma exaustiva sobre glutationa, sua síntese e degradação, funções, métodos de quantificação no plasma sanguíneo e o poder antioxidante, qual sua atuação frente aos exercícios físicos. . 6 2 OBJETIVOS Esta atividade tem como objetivo, através de pesquisa bibliográfica e leituras e síntese do conteúdo pertinente ao assunto, contextualizar sobre a glutationa, sua síntese e degradação, funções, métodos de quantificação da glutationa em extrato de células endoteliais e eritrócitos (glóbulos vermelhos ou hemácias) e o poder antioxidante, e ainda, sua atuação e quantificação frente aos exercícios físicos. 7 3 METODOLOGIA A metodologia empregada se faz através de buscas e leituras de artigos, dissertação e teses disponíveis na literatura, com assuntos pertinentes a glutationa. Os artigos e dissertações foram obtidos de sites como o science direct, Google acadêmico, Scielo, bdtd (banco de dados de teses e dissertações) dentre outros. Com artigos em mãos é realizada a leitura seguida da escolha do conteúdo texto condizente com o tópico glutationa, explorando conteúdo relacionado à sua síntese e degradação, funções, métodos de quantificação no plasma sanguíneo e o poder antioxidante, bem como sua função e teor após exercícios físicos, e por fim sua interpretação e formulação escrita contextualizada. 4 DESENVOLVIMENTO 4.1 Glutationa A importância da glutationa (GSH) 1888, por Rey-Pailhade, como Philothion, como algo que continha átomos de enxofre (Penninck, 1999). Este composto foi purificado por cristalização na época por vários pesquisadores, em que se verificou a presença molécula constituída pelos nas células do organismo, sendo, por isso muito importante ingerir alimentos que favoreçam essa produção, como ovos, legumes, peixe ou frango, por exemplo. antioxidante, importante para a proteção das células do estresse oxid papel muito importante na biotransformação e eliminaçãode substâncias químicas do organismo (Tew, 2007). Figura 1: estrutura molecular da glutationa Glutationa de fórmula molecular cristais incolores ou pó cristalino branco ou quase no cloreto de metila é facilmente solúvel na 4.2 Métodos de quantificação da Há métodos não cromatográficos para quantificar o GSH, espectrofluorimetria e amperometria, que permitem a análise de GSH e derivados. disponível no comercio kit de ensaio colorimétrico que é bastante utilizado para medir o conteúdo de GSH reduzido em soro animal, plasma, tecido, sangue total, células de cultura e outras amostras. Glutationa reage complexo amarelo que pode ser detectado por ensaio colorimétrico a 405 nm e calcular o conteúdo reduzido de GSH indiretamente DESENVOLVIMENTO A importância da glutationa (GSH) (Figura 01) tem sido descrita pela primeira vez em Pailhade, como Philothion, como algo que continha átomos de enxofre Este composto foi purificado por cristalização na época por vários pesquisadores, em que se verificou a presença relevante de enxofre, sendo designado de glutationa molécula constituída pelos aminoácidos ácidos glutâmico, cisteína e glicina, que é p nas células do organismo, sendo, por isso muito importante ingerir alimentos que favoreçam essa produção, como ovos, legumes, peixe ou frango, por exemplo. E antioxidante, importante para a proteção das células do estresse oxidativo, e tem ainda um papel muito importante na biotransformação e eliminação de substâncias químicas do : estrutura molecular da glutationa Glutationa de fórmula molecular C10H17N3O6S (Figura 1) se apresenta com a cristalino branco ou quase branco, pouco solúvel acilmente solúvel na água. Métodos de quantificação da GSH Há métodos não cromatográficos para quantificar o GSH, amperometria, que permitem a análise de GSH e derivados. disponível no comercio kit de ensaio colorimétrico que é bastante utilizado para medir o conteúdo de GSH reduzido em soro animal, plasma, tecido, sangue total, células de cultura e Glutationa reage com o ácido dinitrobenzóico (DNTB) para formar um complexo amarelo que pode ser detectado por ensaio colorimétrico a 405 nm e calcular o conteúdo reduzido de GSH indiretamente. 8 tem sido descrita pela primeira vez em Pailhade, como Philothion, como algo que continha átomos de enxofre Este composto foi purificado por cristalização na época por vários pesquisadores, em xofre, sendo designado de glutationa. É uma , cisteína e glicina, que é produzida nas células do organismo, sendo, por isso muito importante ingerir alimentos que favoreçam Exerce uma forte ação ativo, e tem ainda um papel muito importante na biotransformação e eliminação de substâncias químicas do se apresenta com aspecto de solúvel no etanol a 96 % e Há métodos não cromatográficos para quantificar o GSH, a espectrofotometria, amperometria, que permitem a análise de GSH e derivados. Há disponível no comercio kit de ensaio colorimétrico que é bastante utilizado para medir o conteúdo de GSH reduzido em soro animal, plasma, tecido, sangue total, células de cultura e com o ácido dinitrobenzóico (DNTB) para formar um complexo amarelo que pode ser detectado por ensaio colorimétrico a 405 nm e calcular o Outros métodos mais robustos precisão são utilizados para determinação da GSH em algumas mais importantes como: - Cromatografia em camada fina complexo entre GSH e (5-pentafluorbenzoilamina) excesso do reagente por CCF, e quantificado por fluorimetria. O método é bastante seletivo e foi utilizado para detecção de GSH em extrato de células endoteliais de artéria pulmonar (Arttmangkul, 1999). - Cromatografia líquida (CLAE) e fase reversa e espectrometria de massas por eletrospray (EM interface bastante importante para detecção de GSH e GSSG, sensibilidade e especificidade concentrações de glutationa reduzida (GSH) e Líquida de Alta Precisão (HPLC) para análise de GSH e GSSG foram injetadas no aparelho HPLC, (25cm x 46mm, 5µm). Resultados mostraram linearidade tanto para a GSH quanto GSSG entre concentrações 1,562; 3,125; 6,25; 12,50 e 25µ e 2,5µg/mL (r = 0,9), respectivamente. Este método tecnologias hifenadas, vem sendo bastante utilizado a prática de exercícios físicos Schott e colaboladores em eritrocitos humanos por cromatografia líquida (HPLC), por ser uma técnica rápida, altamente seletiva, sensível e reprodutiva. Amostras analisadas foram de pacientes que receberam suplementação vitamínica do complexo B. Os resultados mostraram níveis aumentados de GSH quando comparados aos níveis do controle Figura 02: cromatograma obtido em HPLC, nota GSH que indica aumento na concentração da GSH. mais robustos que mostram rapidez na análise, bem como alta utilizados para determinação da GSH em amostras biológicas, podmeos citar algumas mais importantes como: romatografia em camada fina (CCF) – este método consiste na pentafluorbenzoilamina)-fluoresceína e então, pode ser separado do excesso do reagente por CCF, e quantificado por fluorimetria. O método é bastante seletivo e foi utilizado para detecção de GSH em extrato de células endoteliais de artéria pulmonar Cromatografia líquida (CLAE) e espectrometria de massas – fase reversa e espectrometria de massas por eletrospray (EM-ESI) tem se mostrado uma interface bastante importante para detecção de GSH e GSSG, sensibilidade e especificidade. Corrêa 2002 padronizou a técnica de quantificação das concentrações de glutationa reduzida (GSH) e glutationa oxidada (GSSH) por Cromatografia (HPLC) para análise de estresse oxidativo (EO). foram injetadas no aparelho HPLC, utilizando coluna de fase m). Resultados mostraram linearidade tanto para a GSH quanto GSSG entre concentrações 1,562; 3,125; 6,25; 12,50 e 25µg/mL e GSSG 0,3125; e 2,5µg/mL (r = 0,9), respectivamente. Este método, apesar de mais caro que tecnologias hifenadas, vem sendo bastante utilizado para quantificação de GSH físicos. colaboladores 2005 realizaram a quantificação da glutationa reduzida (GSH) em eritrocitos humanos por cromatografia líquida (HPLC), por ser uma técnica rápida, altamente seletiva, sensível e reprodutiva. Amostras analisadas foram de pacientes que suplementação vitamínica do complexo B. Os resultados mostraram níveis aumentados de GSH quando comparados aos níveis do controle (Figura : cromatograma obtido em HPLC, nota-se aumento da GSH que indica aumento na concentração da GSH. 9 que mostram rapidez na análise, bem como alta biológicas, podmeos citar este método consiste na formação do fluoresceína e então, pode ser separado do excesso do reagente por CCF, e quantificado por fluorimetria. O método é bastante seletivo e foi utilizado para detecção de GSH em extrato de células endoteliais de artéria pulmonar utilizando colunas de ESI) tem se mostrado uma interface bastante importante para detecção de GSH e GSSG, considerando a sua adronizou a técnica de quantificação das glutationa oxidada (GSSH) por Cromatografia tivo (EO). Amostras padrão de coluna de fase sólida LC 18-T m). Resultados mostraram linearidade tanto para a GSH quanto para a g/mL e GSSG 0,3125; 0,625; 1,25 , apesar de mais caro que apresenta para quantificação de GSH e GSSH após a quantificação da glutationa reduzida (GSH) em eritrocitos humanos por cromatografia líquida (HPLC), por ser uma técnica rápida, altamente seletiva, sensível e reprodutiva. Amostras analisadas foram de pacientes que suplementação vitamínica do complexo B. Os resultados mostraram níveis (Figura 02). se aumento da intensidade do pico 4.3 Estrutura da glutationa A glutationa atua na biotransformação e eliminação de xenobióticos químicas estranhas no organismo) tripeptídeo é encontrado intracelularmente em altas concentrações, essencialmente em todos os organismos aeróbicos. Nota nitrogênio resultante da desidratação de aminoácidos) glutamil e do grupo α-carboxilatolivre prevenindo a hidrólise da GSH pelas peptidases celulares que degradam outros peptídeos pequeno O fígado possui um papel fundamental na celular, considerando que 90% da glutationa reduzida é GSH possui um papel fundamental na defesa celular contra radicais livres, pois além de ser o tiol mais abundante GPx e GST (AWASTHI et al., 2004). A GST pertence a uma família multifuncional de enzimas que catalisam a conjugação da molécula de glutationa a várias outras moléculas, e possuem um papel fundamental em mecanismos de detoxificação intracelular de compostos endo e xenobióticos (C Muitas das reações da GSH envolvem o grupo sulfidrila (SH), altamente polarizável, tornando-o um bom nucleófilo para reações com compostos químicos eletrofílicos. Esta habilidade de doar elétrons a out combinação de sua abundância nos organismos aeróbicos e das propriedades químicas do grupo sulfidrila suporta a proposta de que a GSH surgiu na evolução bioquímica como uma proteção contra espécies reativas de oxigênio e compostos eletrofílicos gerados por processos oxidativos, tanto no organismo quanto no ambiente em que este vive. Figura 03: estrutura Segundo Huber e colaboradores expressa pela redução de espécies oxidantes, e conseqüente oxidação da GSH à glutationa dissulfeto (GSSG) seja mantida, a GSH precisa ser regenerada através do ciclo catalítico. da glutationa e principais mecanismo de ação atua na biotransformação e eliminação de xenobióticos químicas estranhas no organismo) e na defesa das células contra o estresse oxidativo. Este é encontrado intracelularmente em altas concentrações, essencialmente em todos os organismos aeróbicos. Nota-se a ligação γ-peptídica (Figura 03) (ligação entre carbono e esidratação de aminoácidos) pouco usual, a presença da porção carboxilato livre prevenindo a hidrólise da GSH pelas peptidases gradam outros peptídeos pequeno (Huber, 2008). O fígado possui um papel fundamental na manutenção do estado REDOX celular, considerando que 90% da glutationa reduzida é produzida nesse órgão GSH possui um papel fundamental na defesa celular contra radicais livres, pois além de ser o tiol mais abundante, atua também em conjunto com as enzi GPx e GST (AWASTHI et al., 2004). A GST pertence a uma família multifuncional de enzimas que catalisam a conjugação da molécula de glutationa a várias outras moléculas, e possuem um papel fundamental em mecanismos de detoxificação stos endo e xenobióticos (Chelvanayagam et al., 2001) Muitas das reações da GSH envolvem o grupo sulfidrila (SH), altamente polarizável, o um bom nucleófilo para reações com compostos químicos eletrofílicos. Esta habilidade de doar elétrons a outros compostos também faz da glutationa um bom redutor. A combinação de sua abundância nos organismos aeróbicos e das propriedades químicas do grupo sulfidrila suporta a proposta de que a GSH surgiu na evolução bioquímica como uma eativas de oxigênio e compostos eletrofílicos gerados por processos oxidativos, tanto no organismo quanto no ambiente em que este vive. : estrutura química da GSH mostrando a ligação γ-peptídica Segundo Huber e colaboradores 2008, para que a atividade protetora da glutationa expressa pela redução de espécies oxidantes, e conseqüente oxidação da GSH à glutationa dissulfeto (GSSG) seja mantida, a GSH precisa ser regenerada através do ciclo catalítico. 10 atua na biotransformação e eliminação de xenobióticos (substâncias e na defesa das células contra o estresse oxidativo. Este é encontrado intracelularmente em altas concentrações, essencialmente em todos (ligação entre carbono e pouco usual, a presença da porção γ- carboxilato livre prevenindo a hidrólise da GSH pelas peptidases manutenção do estado REDOX produzida nesse órgão. A GSH possui um papel fundamental na defesa celular contra radicais livres, pois além , atua também em conjunto com as enzimas GPx e GST (AWASTHI et al., 2004). A GST pertence a uma família multifuncional de enzimas que catalisam a conjugação da molécula de glutationa a várias outras moléculas, e possuem um papel fundamental em mecanismos de detoxificação et al., 2001). Muitas das reações da GSH envolvem o grupo sulfidrila (SH), altamente polarizável, o um bom nucleófilo para reações com compostos químicos eletrofílicos. Esta ros compostos também faz da glutationa um bom redutor. A combinação de sua abundância nos organismos aeróbicos e das propriedades químicas do grupo sulfidrila suporta a proposta de que a GSH surgiu na evolução bioquímica como uma eativas de oxigênio e compostos eletrofílicos gerados por processos peptídica ara que a atividade protetora da glutationa expressa pela redução de espécies oxidantes, e conseqüente oxidação da GSH à glutationa dissulfeto (GSSG) seja mantida, a GSH precisa ser regenerada através do ciclo catalítico. Nota-se a atividade das enzimas peroxidase (GSH-Px) e a glutationa redutase (GR). As duas primeiras enzimas, GO e GSHPx, catalisam a oxidação de GSH à GSSG e a última, GR, é responsável pela regeneração de GSH, a partir de GSSG, na prese Figura 04: ciclo catalítico da glutationa A regulação do estresse oxidativo baseia oxigenadas reativas, envolvendo GSH e enzimas relacionadas, além do sistema tioredoxina, envolvendo tioredoxina, tioredoxina redutase e perox provocar o estresse oxidativo, por interferência nas vias responsáveis pela manutenção dos níveis de GSH, ou tioredoxina se vislumbra como uma estratégia para o desenvolvimento de fármaco (Kanzok, 2003). 4.4 Atuação da GSH e níveis após a realização de exercícios físicos A atividade física também está associada com a prevenção de doenças metabólicas e pode aumentar a resiliência e melhorar a atividade dos sistemas enzimáticos, como por exemplo, a melhoria da funcionalidade de células hepáticas que a atividade física é um importante mecanismo na prevenção doenças crônicas metabólicas (B melhora no estilo de vida e diminuição dos índices de comorbidades sedentarismo e obesidade, como diabetes, hipertensão, doenças metabólica (Capodaglio, 2018) Em situações de estresse oxidativo no organismo são for biomarcadores celulares que são indicadores mensuráveis para refletir os danos e/ou celulares sofridos, como por exemplo, a oxidação de proteínas e peroxidação lipídica. Nosso organismo é dotado de sistemas se a atividade das enzimas (Figura 04): a glutationa oxidase (GO), a glutationa Px) e a glutationa redutase (GR). As duas primeiras enzimas, GO e GSHPx, catalisam a oxidação de GSH à GSSG e a última, GR, é responsável pela regeneração de GSH, a partir de GSSG, na presença de NADPH. : ciclo catalítico da glutationa A regulação do estresse oxidativo baseia-se na atividade de sistemas contra espécies oxigenadas reativas, envolvendo GSH e enzimas relacionadas, além do sistema tioredoxina, tioredoxina redutase e peroxidases dependentes da primeira. provocar o estresse oxidativo, por interferência nas vias responsáveis pela manutenção dos níveis de GSH, ou tioredoxina se vislumbra como uma estratégia para o desenvolvimento de da GSH e níveis após a realização de exercícios físicos A atividade física também está associada com a prevenção de doenças metabólicas e pode aumentar a resiliência e melhorar a atividade dos sistemas exemplo, a melhoria da funcionalidade de células hepáticas que a atividade física é um importante mecanismo na prevenção contra obesidade e outras doenças crônicas metabólicas (Bradley et al, 2008). A prática de atividade física promover melhora no estilo de vida e diminuição dos índices de comorbidades sedentarismo e obesidade, como diabetes, hipertensão, doenças cardiovasculares e síndro metabólica (Capodaglio, 2018) Em situações de estresse oxidativo no organismo são for biomarcadores celulares que são indicadores mensuráveis para refletir os danos e/ou celulares sofridos, como por exemplo, a oxidação de proteínas e osso organismoé dotado de sistemas de defesas 11 : a glutationa oxidase (GO), a glutationa Px) e a glutationa redutase (GR). As duas primeiras enzimas, GO e GSHPx, catalisam a oxidação de GSH à GSSG e a última, GR, é responsável pela regeneração de se na atividade de sistemas contra espécies oxigenadas reativas, envolvendo GSH e enzimas relacionadas, além do sistema tioredoxina, idases dependentes da primeira. Assim, provocar o estresse oxidativo, por interferência nas vias responsáveis pela manutenção dos níveis de GSH, ou tioredoxina se vislumbra como uma estratégia para o desenvolvimento de A atividade física também está associada com a prevenção de doenças metabólicas e pode aumentar a resiliência e melhorar a atividade dos sistemas exemplo, a melhoria da funcionalidade de células hepáticas. Já se sabe contra obesidade e outras tica de atividade física promover melhora no estilo de vida e diminuição dos índices de comorbidades associadas ao cardiovasculares e síndrome Em situações de estresse oxidativo no organismo são formados biomarcadores celulares que são indicadores mensuráveis para refletir os danos moleculares e/ou celulares sofridos, como por exemplo, a oxidação de proteínas e de defesas antioxidantes em 12 resposta aos agentes oxidantes, compostos pelos sistemas de defesa antioxidante enzimático e não enzimático, que desempenham papel fundamental na conversão de espécies reativas de oxigênio em moléculas menos ofensivas (Halliwell, 2012). Em relação ao sistema de defesa antioxidante não enzimático, destacam-se a glutationa reduzida (GSH) e a glutationa oxidada (GSSG). A GSH é o thiol mais 17 abundante encontrado no nosso organismo e é um tripeptídeo sintetizado no citosol por dois trifosfato de adenosina, por meio de uma reação enzimática (Meister et al 1986). A GSH não só participa da estabilização de espécies reativas através da doação de prótons H+ derivados de nicotinamida adenina dinucleotídeo fosfato no estado reduzido (NADPH), em reação catalisada pela glutationa redutase, como também da detoxificação de xenobióticos prejudiciais ao organismo que são produtos da lipoperoxidação, além de fornecer substratos para a GPx e havendo a conversão em GSSG (Sies, 1999). O sistema antioxidante não enzimático participa de diversas reações celulares, sendo capaz de atuar auxiliando na atividade de enzimas antioxidantes para diminuir possíveis danos provenientes de espécies reativas de oxigênio, como também na destoxificação de compostos prejudiciais as células. Bejman e Ramires 2000 analisaram os níveis de glutationa oxidada o qual verificaram um aumento significativo ao comparamos o grupo inativo, ativo e muito ativo (grupo de pessoas submetidas ao exercício físico) (Figura 05). Com relação ao estado redox (GSH/GSSG) houve um aumento comparando o grupo inativo, ativo e muito ativo (Figura 06). Figura 05: quantificação da GSH Figura 06: valores da razão GSH/GSSG . O estado REDOX celular é avaliado pela razão entre GSH/GSSG. A GSSG pode ser revertida a GSH pela reação catalisada pela glutationa redudase (GR), sendo um indicador de estresse oxidativo celular. Resultados mostram que a atividade física melhorou os níveis de 13 GSH, aumentando a proteção do fígado contra a ação de radicais livres e danos oxidativos (Bejman e Ramires, 2000). Em concordância, outros estudos apontam que o exercício de forma moderada melhorou tanto o estado REDOX celular quanto os níveis de GSH através de protocolos moderados em esteira e natação. 5 CONSIDERAÇÕES FINAIS Este trabalho permitiu conhecer a importância da glutationa no organismo, é considerado um potente antioxidante existente no organismo, tem um papel fundamental na resistência celular ao dano oxidativo, o entendimento de oxidação e redução é complexo, pois envolve várias enzimas e várias estruturas moléculas em meio biológico complexo. Há vários métodos consolidados que permite analisar os teores da GSH em amostras biológicas em rotina laboratorial de forma exeqüível e confiável, são importantes por que uma vez o individuo quando submetidos à atividade física percebe-se que há aumento ou diminuição da GSH. 14 6 REFERÊNCIAS ARTTMANGKUL, S.; Bhalgat, M. K.; Haugland, R. P.;. Anal. Biochem. 1999, 269, 410. BRADLEY, R. L. et al. 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