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COCOS GRAM + Staphylococcus ◦ Cocos ◦ Gram positivo ◦ Arranjo em estafilococos ◦ Catalase positiva ◦ 0,5 – 1,5 um ◦ Presença variável de cápsula ◦ Anaeróbio facultativo ◦ capazes de crescer em elevado teor de NaCl ◦ toleram temperaturas de 18-40oC - Resistência ◦ Dessecação por semanas ◦ 60o.C por 30 minutos ◦ pH entre 4,0 e 9,5 ◦ Concentração salina de 7,5% ◦ Produtoras de -lactamase ◦ MRSA – Staphylococcus aures meticilina resistente - Epidemiologia ◦ São ubíquos. ◦ Todas as pessoas possuem estafilococos Coagulase Negativa na pele. ◦ Normal colonização por S. aureus nas dobras úmidas da pele. ◦ S. aureus e estafilococos coagulase-negativos também são encontrados na orofaringe e nos tratos gastrointestinal e urogenital. ◦ A colonização persistente ou por períodos curtos de tempo com S.aureus em crianças mais velhas e em adultos é mais comum na nasofaringe anterior do que na orofaringe. ◦ 15% dos adultos saudáveis normais são portadores persistentes de S. aureus na nasofaringe. - Diagnóstico Laboratorial 1. Baseados em ácido nucléico ◦ Diretamente da amostra clínica ◦ Principalmente para detecção de MSSA e MRSA 2. Cultura - Condições de cultivo e identificação ◦ Meios ricos convencionais (ágar sangue) ◦ 12 horas ◦ 37oC ◦ Colônias opacas, lisas, brancas ou amarelo ouro. ◦ Anaeróbios facultativos - Hemólise - Microscopia ◦ Gota de Água Oxigenada - Staphylococcos x Micrococcus ◦ TESTE DA BACITRACINA ◦ Staphylococcus resistente ◦ Micrococcus sensível Staphylococcus aureus ◦ Coagulase: + ◦ DNAse: + ◦ Ágar Manitol: Positivo (amarelo) - Controle com antimicrobianos ◦ Resistentes a penicilina – 90% ( -lactamase) ◦ 80% Coag – e 50% Coag + (Meticilina/Oxacilina e Nafcilina) ◦ Clindamicina ◦ Vancomicina Streptococcus / Entercoccus ◦ Cocos Gram Positivos ◦ Arranjo em cadeia ◦ Negativo na prova catalase ◦ 1 um de diâmetro ◦ Algumas espécies com cápsulas polissacarídicas ◦ Exigentes nutricionalmente - Sensibilidade e Resistência ◦ Pus dessecado: várias semanas ◦ 60oC: destroem em 30 minutos - Streptococcus ◦ Inibido por: 6,5% de NaCl; 40% de bile ◦ Inibido por :>45o.C e <10oC - Enterococcus ◦ Suportam azida sódica a 0,02% ◦ Suporta por: 6,5% de NaCl; 40% de bile ◦ Suporta :>45o.C e <10o ◦ Sensíveis a penicilina, cefalosporina, estreptomicina, cloranfenicol e sulfa- trimetoprim. ◦ Resistentes aos aminoglicosídios, fluoroquinolonas e tetraciclina - Epidemiologia ◦ S. pyogenes : ◦ Podem colonizar a orofaringe de crianças sadias e de adultos jovens, na ausência de doença clínica. ◦ O isolamento de um paciente com faringite é considerado significativo. ◦ A colonização assintomática com S. pyogenes é transitória ◦ Doença é causada por cepas recém-adquiridas, que podem estabelecer uma infecção de faringe ou de pele antes que anticorpos específicos sejam produzidos ou que micro- organismos competidores sejam capazes de se proliferar - Identificação -Tipo de Hemólise: ◦ hemólise total (beta) ◦ parcial (alfa, de cor esverdeada) ◦ nenhuma (gama). ◦ Beta hemolíticos é feita através de aglutinação com soros específicos contra os antígenos de Lancefield (A, B, C, D, F e G) • Identificação Sorológica • Identificação Fenotípica 1. S. pyogenes (grupo A) ◦ Colocar o disco de bacitracina 0,004 UI ◦ Incubar por uma noite a 35oC sem CO2 ◦ Zona de inibição como resultado de sensibilidade 2. Grupo C: Streptococcus não ABD Teste Sxt ◦ Adicionar na mesma placa de ágar sangue o disco de SXT (sulfametoxazol- trimetoprim). ◦ Incubar por uma noite a 35°C sem CO2 . ◦ Sensibilidade : estreptococo não pertence ao grupo A, B ou D de Lancefield. Streptococcus agalactiae 3. Teste de CAMP ◦ Staphylococcus aureus produtor de beta lisina (ATCC 25923) ◦ Inocular em estrias formando um ângulo reto. ◦ As estrias não devem se tocar ◦ Incubar a placa a 35-37°C durante um período de 18-24 horas. - Positivo: Streptococcus agalactiae (grupo B) ◦ Alargamento da zona de lise, que adquire a forma de ponta de flecha característica, na área de intersecção entre as duas estrias. ◦ Se o teste de CAMP não resultar em uma flecha, mas numa figura semelhante a uma cabeça de fósforo, refazer o teste de catalase e em caso positivo verificar as provas para identificação de Listeria sp. - S. pyogenes x Enterococcus 4. Teste do PYR ◦ Atividade do PYR também chamado pyrrolidonyl- aminopeptidase ◦ enzima produzida pelo Streptococcus pyogenes e também pelo Enterococcus sp. - Enterococcus x S. bovis (grupo D) 5. Teste da bile esculina e do NACL 6,5% ◦ Teste da bile esculina positiva➔cor marrom escuro ◦ Caldo de NaCl a 6,5 % deve mostrar turvação para ser considerado positivo. ◦ Positivo: grupo D de Lancefield apresentam a bile esculina positiva ◦ Enterococcus sp. ◦ Streptococcus do grupo D não enterococo (Streptococcus bovis). ◦ Positivo tolerância ao NaCl a 6,5% ◦ Enterococcus. - S. Pneumonie 6. Teste da optoquina