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AGREGADOS PLAQUETÁRIOS E VENOPUNÇÃO LEGISLAÇÃO Em 2015 CFO regulamentou o uso de agregados plaquetários autólogos para uso exclusivamente autólogo, não transfusional (apenas podendo ser usado no próprio indivíduo) na pratica odontológica Permitido ter centrifuga em consultório, necessita de certificado de habilitação (especialização, curso) AÇÃO DOS AGREGADOS PLAQUETÁRIOS • Estimula o remodelamento dos componentes da matriz extracelular • Atua no leito dos tecidos lesados como um arcabouço promovendo a hemostasia – forma a rede de fibrinas • Promovendo migração e adesão celular – melhora da matriz • Induz a síntese de colágeno pelos fibroblastos dérmicos • Aumenta a elasticidade COMPOSIÇÃO DO SANGUE HEMÁCIAS • Transporte de oxigênio (hemoglobina) • 4/4,5 milhões por ml de sangue • Vida media de 100/120 dias • Produzido na medula óssea PLASMA • 91% água • Base de aminoácido, proteínas, hidrato de carbono, ácidos graxos, pigmentos, vitaminas, eletrólitos, elementos naturais e hormônios – muito rico • Permite livre intercambio dos seus componentes com liquido intersticial e intracelular – nutrição LEUCÓCITOS GRANULÓCITOS Númerosas granulações no citoplasma • Neutrófilos • Eosinófilos • Basófilos AGRANULÓCITOS Citoplasma homogêneo • Linfócito: T; B; Natural Killer • Monócito G R A N U L Ó C I T O S NEUTRÓFILO • Células brancas mais comuns: 60 a 70% do total • Produzido na medula óssea, vida útil em média de 6 a 10h circulantes antes de entrar no tecido • Grande mobilidade, fagocita tecidos danificados e bactérias • Destrói-se após pico de atividade • Atua em processos inflamatórios – primeira célula a chegar EOSINÓFILOS • São raros. Compondo de 1-6% do total de células da serie branca • Produzido na medula óssea, migrando depois de poucas horas para o tecido conectivo respiratório e gastrointestinal • Fagocitam complexos antígeno-anticorpo, parasitas e produzem histamina • Atuam em processos alérgicos – eosinófilo alto • Numeros muito altos: inflamação parasitária BASÓFILOS • A célula mais rara da serie branca com 1% total • Atuam em resposta imunológica e parasitária, liberam prostaglandinas, serotonina e histamina nos tecidos lesionados, turbinando processo inflamatório • Atuam em processos alérgicos MONÓCITOS • Prevalência de 2-10% das células da série branca • PLASMA: água, ions, proteínas, nutrientes, resíduos, gases CÉLULAS BRANCAS + PLAQUETAS: defesa SÉRIE VERMELHA • Percursores dos macrófagos com atividade fagocitária • Vida útil de 1 a 3 dias antes de migrar aos tecidos e se transformam em MACRÓFAGOS (eventualmente osteoclastos) • Eliminam células mortas e bactérias • Atuam em processos inflamatórios A G R A N U L Ó C I T O S LINFÓCITOS • Segunda célula mais comum da série branca: 20- 50% • Atuam em viroses, células cancerosas, órgãos transplantados • Existem 3 tipos: LINFÓCITOS T: imunidade especifica induzindo apoptose de células invadidas por vírus, bactérias, danificadas ou cancerígenas LINFÓCITO B: sistema imune adaptativo com função de produzir anticorpos contra antígenos NATURAL KILLER: linfócitos citotóxicos do sistema imunológico inato. Combate infecções virais e células tumorais PLAQUETAS • Fragmentos citoplasmáticos produzidos na célula óssea pelos megacarióticos • 150 a 400mil por ml de sangue • Atuam na hemostasia tecidual aderindo ao colágeno intersticial, formando bugs de fibrina • Liberam fatores de crescimento quando se rompem – o que queremos com PRF e PRP HEMOSTASIA PRIMÁRIA Estanca o sangramento por meio da ação das plaquetas para formação do tampão plaquetário SECUNDÁRIA Evita o ressangramento por meio de ação dos fatores da cascata de coagulação para a formação da rede de fibrina FATORES DE CRESCIMENTO PROTEÍNAS Controle externo do ciclo celular • Estimula a proliferação celular • Manter a sobrevivência celular • Estimular a migração celular • Diferenciação celular • Apoptose EXTREMAMENTE REGENERATIVOS PROMOVEM: • Angiogênese – novos vasos • Mitogênese – novas células • Quimiotaxia – estimulam a chegada de células no local Catalizadores para as fases iniciais da REPARAÇÃO TECIDUAL – REGENERATIVOS TGF Fator de crescimento transformador alfa e beta – promove a formação de matriz extracelular, síntese de colágeno e elastina, proliferação e diferenciação celular FGF Fator de crescimento fibroblástico – promove a proliferação de fibroblastoas, célula endotelial, e estimula angiogênese importante nas lesões musculares EGF Fator de crescimento epitelial – mitógeno, promove a repitelização e síntese de colágeno. Importante na cicatrização de feridas e tratamento de pele ➔ A maioria forma matriz extracelular, prolifera células, promove angiogênese AGREGADOS PLAQUETÁRIOS • PRP: plasma rico em plaquetas • PRF: fibrina rica em plaquetas L-PRF- fibrina rica em plaquetas e leucócitos A-PRF- fibrina rica em plaquetas avançado (monócitos) i-PRF- fibrina rica em plaquetas injetável • PLASMAGEL: arcabouço de fibrinas SEPARAÇÃO DOS COMPONENTES PLASMA PROTEÍNAS PLASMÁTICAS (fibrina) PROTEÍNAS PLASMÁTICAS COM PLAQUETAS SÉRIE BRANCA PLASMA HEMÁCIAS C EN TR IF U G A Ç Ã O CONCEITOS BÁSICOS O sangue colhido, após passar pela centrifugação ficará separado por componentes das células. Pequenas ou altas rotações irá influenciar na quantidade do conteúdo PEQUENA ROTAÇÃO • Menor compactação dos componentes • Liquido mais homogêneo • Preservação maior das células • LIBERAÇÃO LENTA DE FATORES DE CRESCIMENTO ALTA ROTAÇÃO Grande compactação • Componentes mais concentrados • Maior fragmentação plaquetária • FATORES DE CRESCIEMENTO NO LIQUIDO SOBRENADANTE (amarelo + laranja) • Liberação imediata maior, depois cai PRP – PLASMA RICO EM PLAQUETAS Após a centrifugação, retira todo sobrenadante separado e homogeiniza em um outro tubo – passível de contaminação (sai de um ambiente estéril para colocar em outro local) PRF – L-PRF: FIBRINA RICA EM PLAQUETAS E LEUCÓCITOS Após sair da centrifugação, retira a porção aglutinada de junto com série branca PRF – I -PRF: FIBRINA RICA EM PLAQUETA INJETÁVEL Após centrifugar, separa a porção de plaquetas ricas em fibrinas e aplica em menos de 30 segundos PRP X PRF • PRP tem intervenção de anticoagulante – duas etapas de centrifugação • PRF: superioridade biológica: organização estrutural mais densa de rede de fibrina • PRF liberação lenta de fatores de crescimento • Presença de leucócitos • Maior aproveitamento do sobrenadante • PRF: implanto CENTRIFUGAS As características das centrifugas influenciam de forma importante na arquitetura e no conteúdo celular RPM – ROTAÇÃO POR MINUTO (velocidade de rotação) FORÇA G – força centrifuga relativa, força gravitacional (força exercida durante a centrifugação) RAIO – tamanho do tubo em mm ESCOLHA DO TUBO VACUTAINER • Sistema de vácuo com coleta simplificada • Baixo risco de contaminação • Processamento rápido • Identificação por cores de acordo com o medicamento interno ROXO - K2 EDTA • Captura de cálcio na amostra • 1,5 a 2mg/ml na superfície do cubo • Desintegram plaqueta mais rapidamente – evita rápida coagulação • Ativação de monócitos (percursores inflamatórios) • Inversão 180 graus 5-6 vezes (misturar) AZUL – CITRATO DE SÓDIO • Captura cálcio formando citrato de cálcio (insolúvel) • 1/10 do volume de sangue a 3,2% • Liquido, alerta o volume do plasma • Inversão 180 graus 5-6 vezes BRANCO – SEM ADITIVOS • Sem alteração das propriedades sanguíneas • Tempo de coagulação regular – normal do individuo • Não precisa ser invertido VERMELHO – ATIVADOR • Revestido comsilicone • Sem alteração das propriedades sanguíneas • Acelera o tempo de coagulação – contém aceleradores na parede para que coagule e forme membrana mais rápido • Não precisa ser invertido IPRF – FIBRINA RICA EM PLAQUETAS INJETÁVEIS STICKY – BONE CENTRIFUGAÇÃO 850G POR 2 MIN – SEPARA O SOBRENADANTE Mistura o sobrenadante com osso particulado SUBSTITUTO ÓSSEO PARTICULADO + I-PRF (rede de fibrina) – forma uma “massa” chamado Sticky bone IMPLANTES – ao realizar implante, podem ficar folgas entre implante e o osso (GAPS) que poderão ser preenchidos com sticky bone ao redor para melhorar osseointegração Também podem ser utilizados para preservação de alvéolo VANTAGEM DO I-PRF: coágulo com rede de fibrina rica em plaquetas permite a liberação de fatores de crescimento. Possibilitando: neocolagenese, neovascularização e cicatrização superior L-PRF – FIBRINA RICA EM PLAQUETAS E LEUCÓCITOS • CENTRIFUGAÇÃO 710G POR 12 MINUTOS • FORMA UM TROMBO • SEPARA O TROMBO (porção aglutinada COM CAMADA LEUCOCITÁRIA – não cortar parte de células brancas, cortar na porção de hemácias) • Liberação imediata, porém não tanto quanto PRP Ao abrir o tubo a membrana para utilizar já é formada (trombo) A-PRF – FIBRINA RICA EM PLAQUETAS AVANÇADA • CENTRIFUGAÇÃO 210G POR 12 MINUTOS (mesmo tempo de L-PRF porém giro mais lento) • Também separa o trombo com camada leucocitária • Liberação mais lenta de fatores de crescimento e boa cicatrização • Quantidade maior de células, qualidade melhor de membrana L-PRF X A-PRF L-PRF: distribuição celular principalmente acumulada na parte proximal a camada leucocitária. Células mais concentradas; menos quantidade de células e liberação imediata rápida que decai com o tempo A-PRF: distribuição celular mais uniforme e número aumentado de células e plaquetas e maior entrega de fatores de crescimento - apesar de vantagens de A-PRF as duas são muito boas e conferem resultados semelhantes PRF X A-PRF PFR (708g): estrutura densa, menos leucócitos A-PRF (208g): estrutura mais porosa, mais leucócitos PRÁTICA • Sangue do paciente colhido • Coloca tubo na centrifuga direto (colher e colocar) • Plasma separado • Retirar membrana (trombo) cuidadosamente e cortar na porção de sangue, se necessário. As vezes já está solto • Colocar a membrana na caixa perfurada que vem na centrífuga para retirar excesso de sangue • 2 OPÇÕES: usar a membrana mais espessa para preencher espaços de cistos, grandes lesões OU amassar com vidro na caixinha e afinar a membrana para utilizar de revestimento (membrana) • PLUG: posiciona membrana em oficio que vem na caixa que confere a membrana o formato exato para preencher alvéolos Defeitos ósseos envolvendo mais paredes deve-se associar uso de enxertos com PRF VENOPUNÇÃO • Posicionar o garrote • Retirar o sangue • Abrir o escalpe com sistema a vácuo • Preenche o tubo • Retira garrote • Escalpe • Curativo, álcool com algodão CONTRA-INDICAÇÕES • Disfunções plaquetárias (hemograma) • Trombocitopenia critica (<50.000/ul) • Instabilidade hemodinâmica • Doenças crônicas principalemente não controladas (diabetes, discrasias sanguíneas, infecções crônicas) • Uso de anticoagulantes ou anti-inflamatórios (48h) – ver com o médico parecer e possibilidade de suspensão • Febre recente, câncer (hematopoiético ou ósseo) • Nível de hemoglobina <10g/dl
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