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IDENTIFICAÇÃO DAS CÉLULAS SANGUÍNEAS CURSO: BIOMEDICINA DISCIPLINA: IMUNOLOGIA CLÍNICA ADYLLA RAQUEL SIQUEIRA CARVALHO - 202203286803 ALCIDES VICTOR OLIVEIRA SÁ - 202203853503 ÉRICA MARTINS DE ASSUNÇÃO 202203918702 KALLYANDRA SANTIAGO DIAS FREITAS - 202103104525 MAGNO SERGIO OSORIO ALVES DA SILVA - 201651238952 MARA LUZIA DA SILVA RAMOS – 202051269911 PROFESSOR: WALTER PINHEIRO MENDES JUNIOR TERESINA, 2022 1. INTRODUÇÂO O esfregaço sanguíneo consiste em uma técnica padrão bastante utilizada nos laboratórios de análises clínicas, é um teste que tem por finalidade a observação dos compostos sanguíneos para contagem e identificação de anormalidades nas células, consiste em uma camada fina e regular de sangue disposta sobre uma lâmina, onde deve conter margens livres e possuir cabeça, corpo e cauda, para que consiga depor uma boa distribuição das células, em seguida passa por fixação, coloração e análise através do microscópio. Por meio dessa técnica é possível fornecer informações importantes sobre o paciente, no esfregaço pode-se avaliar hemácias, plaquetas e leucócitos. Permite identificar e fazer a contagem do número de células sanguíneas, que por sua vez, podem indicar uma série de deficiências, alterações e anormalidades. A realização de um bom esfregaço é muito importante para o hemograma, deve ser realizado com cuidado e é necessário empregar as técnicas corretas, para que possa garantir uma visualização adequada das células ao microscópio, obtendo-se resultados confiáveis. Esse teste pode auxiliar o médico no diagnóstico de doenças relacionadas ao sangue, como por exemplo as anemias, linfomas, trombocitose, entre outras. 2. OBJETIVOS • Realizar a técnica do esfregaço sanguíneo; • Identificar os diferentes tipos de células que compõem o sangue, seus formatos e cores, além de caracterizá-los como hemácias, linfócitos, monócitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos e plaquetas; • Preparar lâminas de esfregaço, seguido de coloração para identificar as estruturas do sangue. 3. METODOLOGIA EXPERIMENTAL 3.1 Reagente e Materiais ● Lâminas ● Lanceta ● Corante básico: Azul de Metileno ● Corante ácido: Eosina ● Álcool 70% ● Gaze ● Microscópio ● Caneta ou lápis para identificação da lâmina ● Óleo de Imersão ● Descarpack 3.2 Procedimento Experimental Após o professor dar um pequeno exemplo na sala de aula, as lâminas foram limpas utilizando a gaze embebida com álcool 70%,de forma que não restasse nenhum resíduo,em seguida os alunos,no lado fosco da lâmina,escreveram suas iniciais com lápis e caneta,identificando a lâmina. Um aluno foi escolhido e seu dedo foi higienizado com gaze e álcool 70% por outro aluno,que utilizando a lanceta fez um pequeno furo no dedo do aluno,a gota de sangue foi colocada na extremidade da lâmina. O aluno,então,pegou a lâmina extensora e encostou fazendo um ângulo de 45°,realizando o movimento de forma que a gota de sangue se espalhasse de forma retilínea na lâmina,em seguida, com um único movimento rápido,o sangue foi espalhado ao longo de toda lâmina. Depois da secagem ,as lâminas foram levadas para serem mergulhadas nos reagentes. Primeiro foi mergulhada 5 vezes no álcool 70%,retirado o excesso,em seguida mergulhada 5 vezes no corante ácido Eosina,retirado o excesso,e,por fim,5 vezes no corante básico Azul de metileno,foi retirado o excesso,lavado com água e as lâminas foram levadas de volta a bancada para secagem. Em seguida as lâminas foram levadas para serem observadas no microscópio em diferentes aumentos, 4,10,40 e 100x,neste último foi adicionado o óleo de imersão para melhor visualização. 3.3 Tratamento dos Resíduos Após o término da prática, as agulhas foram descartadas no descarpack, as lâminas foram mergulhadas em uma solução de hipoclorito de sódio. 4. RESULTADOS E DISCUSSÂO Após alguns minutos de observação das lâminas de esfregaço sanguíneo (lâminas obtidas pelos alunos) por meio do microscópio óptico, foi possível identificar a presença de poucos elementos figurados do sangue na lâmina 1 ( Figura 4). Os resultados coletados foram analisados pela equipe e foi observado que as células mais frequentes foram os glóbulos vermelhos ( hemácias ou ainda eritrócitos). Além disso, foi perceptível a escassa presença de um dos tipos de leucócitos granulócitos, os basófilos, e a presença de plaquetas. Na lâmina 2 ( Figura 5) foi observado também a alta presença de glóbulos vermelhos, porém não havia basófilos, neste caso houve uma quantidade maior de linfócitos ( leucócitos agranulócitos). Hemácias A quantidade de hemácias presente no sangue de um indivíduo normal é na ordem de 3 a 4 milhões por decilitro de sangue; Plaquetas O número de plaqueta no sangue periférico varia de 150.000 a 400.000 plaquetas/μL de sangue; Neutrófilos São os leucócitos mais presentes no sangue, representando cerca de 60 a 65% dos leucócitos do sangue circulante normal; Eosinófilos Representam cerca de 2-4% dos leucócitos; Basófilos São os leucócitos circulantes mais raros, correspondem menos de 1% dos leucócitos; Linfócitos Eles representam de 20 a 30% dos leucócitos na circulação. Aproximadamente 80% dos linfócitos circulantes são células T, e o restante são células B; Monócitos São os maiores leucócitos circulantes, e representam de 4 a 8% dos leucócitos na circulação sanguínea. 5. CONCLUSÃO A partir desta prática experimental foi possível perceber a importância da técnica de esfregaço sanguíneo, de coloração e fixação para a observação detalhada dos componentes do sangue. Deve ser seguida dentro do padrão pré-estabelecido, preparando a lâmina com bastante precisão para que a qualidade da amostra seja satisfatória no momento da observação. Na visualização das lâminas prontas, observaram-se plaquetas (fragmentos citoplasmáticos de megacariócitos), hemácias (células em maior número no sangue) e leucócitos. Estes últimos são classificados em dois diferentes tipos, de acordo com a forma, dimensões do núcleo e funções específicas: granulócitos(neutrófilos, basófilos e eosinófilos), e agranulócitos (monócitos e linfócitos). Em relação à quantidade, os neutrófilos e linfócitos presentes no sangue foram muito mais que os monócitos e os eosinófilos. Os basófilos, são os mais raros, uma vez que sua concentração no sangue é relacionada com os processos alérgicos. Esta prática foi de extrema importância para o conhecimento da equipe, pois foi possível visualizar os diversos componentes (elementos figurados) do sangue. 6. ANEXOS Figura 1: Higienização das lâminas com álcool 70%. Fonte: Arquivo pessoal Figura 2: Coleta do sangue na lâmina. Fonte: Arquivo pessoal Figura 3: Lâminas após serem mergulhadas no álcool 70%, no corante ácido eosina e no corante básico azul de metileno. Fonte: Arquivo pessoal Figura 4: Análise da lâmina 1 no microscópio. Fonte: Arquivo pessoal 1 2 Figura 5: Análise da lâmina 2 no microscópio. Fonte: Arquivo pessoal 7. REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS • Vala, H. (2016, outubro). “Princípios Básicos de Hematologia. Esfregaço Sanguíneo”. • Recomendações da Sociedade Brasileira de Patologia Clínica/Medicina Laboratorial (SBPC/ML): coleta e preparo da amostra biológica. – Barueri, SP: Manole: Minha Editora, 2014. • Histologia Interativa – Universidade Federal de Alfenas:https://www.unifal- mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e- hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3 ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/livro_coleta_biologica2013.pdf http://www.sbpc.org.br/upload/conteudo/livro_coleta_biologica2013.pdf https://www.unifal-mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e-hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas https://www.unifal-mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e-hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas https://www.unifal-mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e-hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas https://www.unifal-mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e-hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas https://www.unifal-mg.edu.br/histologiainterativa/celulas-do-sangue-e-hematopoiese/#:~:text=O%20exame%20ao%20microsc%C3%B3pio%20%C3%B3ptico,demonstrar%20caracter%C3%ADsticas%20t%C3%ADpicas%20destas%20c%C3%A9lulas 3.1 Reagente e Materiais 3.2 Procedimento Experimental 3.3 Tratamento dos Resíduos
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