AULA_1

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18/02/2022
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AULA 1
CONSIDERAÇÕES 
INICIAIS AO ESTUDO 
DA MORFOLOGIA
DISCIPLINA: HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA
Prof Sandra Ol iveira
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Por que a microscopia?
Imagine que 125 células estão alinhadas conforme o desenho 
abaixo, e que juntas possuem 1mm de comprimento... 
Como estudar cada uma delas? Precisamos de um instrumento 
de melhor alcance.
Ainda assim...
Veríamos essas células somente 
na sua dimensão externa, sem 
compreensão de suas minúsculas 
estruturas, como a membrana 
plasmática ou organelas internas 
como lisossomos, ou proteínas 
como a HEMOGLOBINA
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Então... Vamos nos adiantar e agora 
iniciar aprendendo...
Hemácias são células do sangue – também denominado TECIDO SANGUÍNEO
Hemácias são anucleadas – e por isso não possuem material genético DNA.
Hemácias não possuem mitocôndrias – sua energia recebem de respiração 
anaeróbia
Hemácias possuem uma enormidade de HEMOGLOBINA, proteína que transporta 
o gás oxigênio pelo sangue e o distribui nas inúmeras células do corpo. 
RELEMBRE: O2 + glicose Energia (ATP) + CO2 + H20
Com energia, as células podem realizar suas funções a que foram destinadas.
Importância médica das hemácias:
• Vamos descobrir o que são os termos abaixo? 
• Depois, diga como seria para uma pessoa, viver com cada um 
desses dois quadros clínicos
Anemia
Policitemia
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Como analisar o tecido sanguíneo?
Podemos fazer um esfregaço sanguíneo...
https://www.youtube.com/watch?v=wqvrP2gb5XI
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1.CONFECÇÃO DO ESFREGAÇO GOTA DELGADA
1.1. ESFREGAÇO
Coleta-se um a gota de sangue no canto da extremidade de uma lâmina, apóia-se à extremidade 
que contém a gota, aproximadamente, no primeiro décimo da superfície de uma segunda lâmina, com 
uma inclinação de cerca de 45º (variar a inclinação com a densidade e a quantidade de sangue, 
angulo maior esfregaço mais espesso) aguardar que o sangue, por capilaridade espalhe-se. Distenda o 
sangue sobre a Segunda lâmina empurrado com movimento uniforme, mantendo as lâminas em 
contato de modo que forme uma área franjada na parte final do esfregaço. Secar imediatamente 
agitando-se a lâmina ao ar. Identifique escrevendo no próprio esfregaço, com lápis comum ou na 
lâmina com lápis de diamante.
1.2. FIXAÇÃO
Cubra o esfregaço ou introduza a lâmina em recipiente com álcool etílico absoluto P.A. ou álcool
metílico absoluto P.A., por 3 a 5 minutos. Secar ao ar em repouso ou agitado.
1.3.COLORAÇÃO
Usando solução de GIEMSA, diluir na proporção de 2 gotas da solução de GIEMSA para cada
ml de solução tampão (ou água destilada), Cubra o esfregaço ou introduza a lâmina em recipiente
com a solução de GIEMSA diluída, deixar cora por 30 minutos. Lavar a lâmina em água corrente para
retirar o excesso de corante. Secar ao ar em repouso ou agitando.
Maiores detalhes no item COLORAÇÃO DE GIEMSA (ROMANOVSK)
1.4. EXAME
Usar a objetiva de 100x, com óleo de imersão. No esfregaço de camada delgada, examinar
em ‘ZIG-ZAG’ passando pela franja.
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http://www.iv.ufrrj.br/DPA/tecnicas/tecnica_esfregacosangue.htm#colora%C3%A7%C3%A3o
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Resultados esperados
https://editora.pucrs.br/edipucrs/
acessolivre/livros/atlas-de-
histologia/sangue.html
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Nessa imagem você
enxerga...
Linfócito
Neutrófilo
Plaquetas
Hemácias
Vamos ao nosso Exercício 1
Pesquise a função simplif icada de cada célula do sangue citada 
nessa aula.
Seu resumo deve ser contido de apenas 20 linhas...
Seja criativo, faça você mesmo, seja conciso. 
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Resumindo...
Você enxergou várias células desse tecido em imagens que foram 
dimensionadas em uma lente de 100x, mesmo assim, conseguiu 
visualizar apenas algumas características das células. 
Isso foi devido ao uso do MICROSCÓPIO ÓPTICO...
Sobre esse assunto veremos agora...
Microscopia 
Óptica
Importante identif icar:
Lentes oculares
Lentes objetivas
Mesa de platina
Botões de ajuste da mesa de 
platina
Foco de luz
Condensador e Diafragma 
Quarta manhã
Quinta manhã
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Lentes de aumento
Oculares 10x
Objetivas
4x
10x
40x
100x
4x
40x
10x
Fixação - finalidade a interrupção do metabolismo celular, 
estabilizando as estruturas e os componentes bioquímicos intra e 
extracelulares para preservar e conservar os elementos teciduais.
Conservadores: agentes físicos (frio e calor) ou químicos (formalina a 10%, o álcool etílico...).
Tempo de fixação (depende do tamanho da peça, mas varia de 12 a 48 horas em temperatura 
ambiente)
Clivagem tem por objetivo reduzir o tamanho do material biológico a ser 
analisado com a finalidade de facilitar a penetração do fixador em menor tempo, 
evitando assim, o processo de autólise
O ideal é que, na clivagem, os fragmentos tenham 
cerca de 3 mm de espessura, entretanto, 
dependendo do tipo de órgão, esse fragmento pode 
chegar a mais do que 5 mm
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Processamento histológico consiste na difusão de reagentes químicos para o interior dos tecidos e 
na remoção do líquido tecidual. Este procedimento torna os fragmentos dos tecidos rígidos facilitando 
a obtenção de cortes finos para a observação ao microscópio. 
Etapas
desidratação
inclusão
diafanização
impregnação
PARAFINA
O objetivo da desidratação é retirar a água presente 
no tecido, visto que a parafina é insolúvel em água. 
O álcool etílico é o produto mais utilizado para esse 
fim. 
O processo de desidratação é realizado de forma 
progressiva quanto à graduação alcoólica. 
● Álcool 70% 
● Álcool 80% 
● Álcool 90% 
● Absoluto I (Álcool 100%) 
● Absoluto II (Álcool 100%) 
(1h para cada banho de álcool).
desidratação
A finalidade da diafanização ou clarificação é 
remover completamente o álcool do interior dos 
tecidos, visto que a parafina não se mistura 
homogeneamente com o álcool. 
diafanização
O xilol é o agente utilizado nesta etapa do 
processo histológico de rotina. Ao substituir 
o álcool esse diafanizador vai deixando o 
tecido mais claro (quase transparente)
● Xilol I 
● Xilol II 
(1h para cada banho de xilol).
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A impregnação consiste na infiltração da parafina 
líquida no material biológico para que o tecido 
adquira rigidez suficiente e seja possível a realização 
de cortes finos
impregnação
Esta etapa deve ser realizada em estufa regulada a 
60º C. 
● Parafina I 
● Parafina II 
(1h para cada banho de parafina em estufa regulada 
a 60º C).
O PROCEDIMENTO 
PODERÁ SER 
MANUAL OU POR 
HISTOTÉCNICO
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Inclusão - envolver o exterior do 
material biológico com a parafina
líquida para formar blocos que 
serão submetidos posteriormente
à microtomia. 
Nesta etapa o material é colocado
com a superfície (clivada) a ser 
cortada para baixo em um molde
para inclusão, que será
preenchido com a parafina líquida, 
e em seguida coberto com o 
cassete. 
Microtomia - consiste em executar
cortes bem finos com espessura de 
3 a 6 micrômetros para a 
passagem de luz e observação do 
tecido ao microscópio. 
Os cortes obtidos devem ser levados com o 
auxílio de uma pinça ao banho-maria à 
temperatura aproximada de 40 a 50ºC para 
que as fitas de parafina se distendam sobre a 
água, evitando a formação de dobras no 
tecido.
Em seguida, os cortes são pescados com 
lâminas previamente limpas que serão 
encaminhadas à estufa à 60º C por um período 
mínimo de 2 horas
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Para coloração… o 
procedimento se inverte
Desparafinização: tem por objetivo remover a 
parafina do tecido após a microtomia, utilizando 
dois banhos de xilol.
● Xilol I (10 min) 
● Xilol II (10 min)
Hidratação: tem por finalidade hidratar o tecido com 
concentrações decrescentes de álcool. 
● Álcool absoluto I (1 min) 
● Álcool absoluto II (1 min) 
● Álcool 90% (1 min) 
● Álcool 80% (1 min) 
● Álcool 70% (1 min) 
● Água destilada (1 min
ASSIM...
Etapas da coloração Hematoxilina e Eosina 
● 1ª Etapa: desparafinar e hidratar. 
● 2ª Etapa: lavar as lâminas com água destiladapor 1 minuto, para assim receber o primeiro 
corante, a hematoxilina. As lâminas ficam imersas no corante por 3 minutos (depende do 
tempo de preparo e uso do corante). 
● 3ª Etapa: lavar as lâminas com água corrente por 10 minutos e corar com eosina por 7 
minutos (depende do tempo de preparo e uso do corante). 
● 4ª Etapa: desidratar e clarificar. 
Em seguida, realizar a montagem das lâminas. 
Resultados: os núcleos coram-se de azul a roxo pela hematoxilina, enquanto que o citoplasma e 
os espaços extracelulares são corados pela eosina, em róseo ou avermelhado.
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PROCEDIMENTO
1.Ligar. 
2. Descer a mesa ao máximo. 
3. Colocar na objetiva de menor número. 
4. Aumentar a intensidade se luz. 
5. Colocar a lâmina para a análise. 
6. Alcançar o foco entanto observa a lâmina pelas oculares ao mesmo 
tempo em que, vagarosamente sobindo a mesa movimentando o 
macrômetro. 
7.Movimentar o micrométrico para alcançar o foco.
8. CUIDADO... Se apertar a lente contra a lâmina ... VAI QUEBRAR
Microscópio eletrônico • De transmissão: Este tipo 
permite examinar detalhes, ampliando o objeto em 
até um milhão de vezes Para a observação neste 
tipo de microscópio é necessário que o material seja 
cortado em camadas bem finas. • Além da grande 
resolução, os microscópios que utilizam essa 
tecnologia podem medir características como dureza 
e elasticidade do material.
Microscópio eletrônico • De varredura: Capazes de 
produzir imagens em alta resolução, estes 
microscópios ampliam em até 100 mil vezes objeto 
e permitem obter imagens tridimensionais, sendo 
bastante utilizados para a observação da estrutura 
superficial da amostra.
Micrômetro: 1 μm = 0,001 mm.
nanômetro: 1 ηm = 0,001 μm = 0,000001 mm = 0,000000001 m.
angstrom: 1 Å = 0,1 ηm = 0,0001 μm = 0,0000001 mm = 0,0000000001 m.
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Assistir: 
https://www.youtube.com/watch?v=B8HhdnIhAVg
&list=RDCMUCXj2oSzwg6G0iBjK 
g33joMQ&start_radio=1&t=9
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Hematoxilina e eosina (HE):
• Hematoxilina – azul ou violeta. É um corante 
basófilo.
• Eosina – cor-de-rosa. É um corante acidófilo.
Núcleos – roxos (hematoxilina) 
Citoplasma – cor-de-rosa (eosina)
40x
4x
Vamos procurar lâminas hitológicas:
Útero
Placenta
Ovário
Tuba uterina
Próstata
Testículos
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ÚTERO
4x 10x
ENDOMÉTRIO
MIOMÉTRIO
PERIMÉTRIO
ovário
Folículo primário
Folículo secundário
Corona radiata
Corpo lúteo
Teca 
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Testículos
Epidídimo
https://mol.icb.usp.br/index.php/21-10-aparelho-
reprodutor-masculino/
Duto epididimário
Tecido conectivo
Fibras musculares
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Assistir o vídeo disponibilizado em:
https://www.youtube.com/watch?v=mY9OF98gJEI
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É importante que compreenda a seguir:
Gametogênese
Fecundação
Formação do Zigoto
Embrião
Feto
No Plano de aula, disponibilizado em 
Sala de aula virtual
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Siga as dicas:
Faça Download de todos os planos de aula
Assista aos vídeos indicados
Na sala de aula virtual, existem AULAS – CONTEÚDO INTERATIVO, que devem 
ser cuidadosamente assistidos, lidos e internalizados.
Sempre fique de olho nas novidades dentro da sua AULA VIRTUAL
Se tem dúvida: pergunte ao professor.
Participe, leia, estude... Aproveite o máximo de todas suas disciplinas.
Conte comigo! SANDRA OLIVEIRA
ATIVIDADE 1 – PONTUAÇÃO (2,O)
Reproduza em desenho o ovário e útero – como visualiza-se uma 
lâmina histológica (não é desenho anatômico). Tente ser o mais 
fidedigno possível. Cores a vontade
Reproduza a Gametogênese feminina e masculina.
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Para a próxima aula:
Procure entende o que é ovócito.
Onde o ovócito está localizado.
Local onde o ovócito é liberado.
Etapas de formação do espermatozoide.
Após maduro, onde o sptz está localizado.
Caminhos que o sptz irá seguir até a fecundação.
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