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Reaplicação do DNA (Embriologia) Fitas do DNA vão em direção contrária se uma está indo pra baixo a outra vai para cima. É uma fita dupla hélice Bases Nitrogenadas: · (A-T LIGAÇÃO DUPLA DE PONTE DE HIDROGÊNIO) · (C-G LIGAÇÃO TRILA DE PONTES DE HIDROGÊNIO) DNA · RNA (A-U) (G-C) Questão de prova: ACGTCAGTC DNA TGCAGTCAG RNA complete. ACGUCAGUC · ligação fosfodiester - 5 linha 3 linha FORQUILHA (caminha no sentido 5linha 3linha) DA REPLICAÇÃO = COMPLEXO DE ENZIMAS DA MAQUINARIA DA REPLICAÇÃO HELICASE: TEM O PAPEL DE QUEBRAR PONTES DE HIDROGÊNIO E AS FITAS SÃO SEPARADAS. Outra coisa e manter a fita separada, como elas tem polaridades opostas elas podem se enrolar novamente, temos que evitar a helicoidisacao da fita deixando a fita exposta quem faz isso? · TOPOISOMERASE NOME DA ENZIMA QUE IMPEDE A HELICOIDIZACAO: TOPOISOMERASE QUAL FITA SERÁ COPIADA NO MESMI SENTIDO DA FORQUILHA? A DE CIMA OU A DE BAIXO? A DE BAIXO! O QUE VALE É A FITA QUE VAI SER COPIADA Quem começa a síntese? Quem começa a síntese é um primer! Primer é uma sequência de 6 a 12 nucleotídeos RNA, não é ele que faz a síntese, ele só inicia a síntese. Quem realmente efetua a síntese? O DNA POLIMERASE (temos 3) Polimerase 1: faz a síntese de pequenos fragmentos de DNA. Polimerase 3: faz a síntese de longos fragmentos. Polimerase 2: participa do sistema de reparo do DNA. Filamento continuo: copiado no sentido da forquilha e é necessário apenas 1 primer e depois ele é copiado automaticamente por isso chamado de contínuo. O filamento de cima é denominado: Filamento Descontinuo, copiado no sentido contrário a forquilha e são necessários vários primers. Descontínuos porque tem que receber vários primers. Entre um primer e outro você tem fragmentos chamados Fragmentos de Okazaki. O primer é formado por nucleotídeos RNA, porém não pode deixar RNA no meio do DNA, depois do início da síntese o primer tem que ser retirado porque depois do sinal do início da síntese o primer não tem mais função. O RNA tem maior chance de erros do que no DNA. O que causa uma alta taxa de mutação nos primers. A polimerase 1 sintetiza pequenos fragmentos né? Que no caso são os Primers para serem retirados e colocam DNA no lugar. Quem é o sinalizador final? Ele é copiado até onde? É COPIADA até chegar no TTAGGG (telômero) Telomerase retira o último primer e adiciona o TTAGGG na fita de cima É possível copiar o DNA in vitro? Sim! É possível. PCR serve para dizer se o paciente tem alguma coisa ou não. As respostas do PCR é Sim ou Não! RtPCR: transcriptase reversa, vírus da COVID é RNA. Termociclador: máquina que faz ciclos com diversas temperaturas, cada etapa vai fazer uma etapa da replicação de DNA celular. Temperatura de Melting: 70 a 90 graus. Temos a separação da fita de DNA se não tiver a helicase. Depois da separação é necessário um primer, para realizar a síntese do DNA. Desnaturação – 90 graus Anelamento dos primers: 60 graus DNA POLIMERASE NÃO É TERMOESTAVEL TAq DNA POLIMERASE: o que é preciso para taq polimerase sintetiza os fragmentos? Preciso dos nucleotídeos para que o DNA seja...? Tudo está no livro griffins
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