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REPLICAÇÃO DO DNA A replicação do DNA necessita de várias atividades enzimáticas que devem agir de forma integrada e sequencial atuando de maneira coordenada nos estágios de início, alongamento e término. O conjunto de proteínas que atuam na replicação é denominado “Replissomo” Enzimas que auxiliam na replicação: - Enzima Helicase quebra as ligações de hidrogênio e permite a duplicação - Enzima DNA polimerase faz as lições das bases nitrogenadas (polimerização) - Topoisomerase faz o relaxamento da supertorção do DNA (bolha e forquilha de replicação) - Proteína SSB estabiliza a fita simples O DNA é uma molécula formada por duas fitas ligadas uma à outra na forma de dupla hélice. Cada fita é composta por uma sequência de quatro bases nitrogenadas: - Adenina - A - Guanina - G - Citosina - C - Timina - T ★ Características da replicação - Replicação semiconservativa e semidescontínua - DNA – Polimerases - Proteínas auxiliares (helicases, proteínas SSB, primases, ligase e topoisomerases) - Origem de replicação - Bolha de replicação - Forquilha de replicação - Adição de nucleotídeos é sempre no sentido 5’-P para 3’-OH (5’ 3’) - Fita líder ou contínua - Fita atrasada ou descontínua – fragmentos de Okazaki As duas fitas são complementares, significa que sempre que aparece T em uma fita, na oposta estará um A e quando aparecer G, estará o C Cada fita iniciará com 5’P ou 3’OH e as duas fitas ocorrem em direções opostas O primeiro passo na replicação do DNA é a separação das duas fitas. A abertura é realizada por uma enzima chamada helicase, que resulta na formação da forquilha de replicação. Cada fita separada é um molde para a síntese de uma nova fita de DNA Uma enzima chamada primase inicia o processo. Esta enzima sintetiza um pequeno pedaço do RNA, chamado primer. Isso marca o ponto inicial para a síntese de uma nova fita de DNA. A enzima DNA polimerase se liga ao primer e sintetiza uma nova fita de DNA, esta enzima somente adiciona bases em uma direção, da ponta 5’P para 3’OH Uma das novas rotas de DNA é contínua e sintetiza continuamente, adicionando as bases uma por uma. A outra fita é tardia, não se sintetiza de maneira contínua, porque esta na direção contrária. Deste modo, o DNA polimerase consegue somente sintetizar vários pedaços, denominados de fragmentos de Okazaki e esse processo de repete. O novo DNA é sintetizado e a enzima exonuclease remove todos os primers de RNA de ambas as fitas. O DNA polimerase preenche as lacunas deixadas com DNA e finalmente a enzima DNA ligase conecta os fragmentos de Okazaki em ambas as fitas, formando uma dupla hélice contínua. A replicação do DNA é descrita como semiconservativa, porque cada molécula de DNA é formada por uma fita antiga conservada e uma nova.
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