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GABARITO da 1 a . Avaliação a Distância – 2017/1 Disciplina: BIOLOGIA CELULAR I Data limite para postagem da AD1 on line pelos alunos: 03 /03/2017 NÃO SERÃO ACEITAS PROVAS ENTREGUES EM PAPEL NEM ENVIADAS POR EMAIL. AS CÓPIAS DIRETAS DE PÁGINAS DA INTERNET OU DE LIVROS NÃO SERÃO ACEITAS! REDIJA SUA PRÓPRIA RESPOSTA. 1) (3 pontos) - A maioria das células não é visível ao microscópio óptico de campo claro. Esta afirmação está correta? R: SIM (0,5 ponto) Justifique sua resposta com 3 argumentos que sustentem sua resposta. R: 1- A maioria das células é transparente (não tem pigmentos) exceções para hemácias ou células vegetais que apresentam cloroplastos. (0,5 ponto); 2- Para que as células sejam visíveis ao MO de campo claro é necessário usar corantes (1 ponto); 3- Para que as células sejam visíveis de pode fazer uso de anéis de contraste de fase OU de contraste interferencial diferencial OUu ainda do fechamento do diafragma de campo, aumentando assim o contraste e permitindo a visualização. (1 ponto) 2) (4 pontos) - Muito do conhecimento que temos sobre a biologia celular foi construído a partir de experimentos que utilizaram a técnica de cultivo de células em placas de Petri (cultura in vitro). Para que estas células se adaptem, repliquem e se mantenham em cultura, elas necessitam de nutrientes essenciais presentes no meio de cultivo e no soro fetal bovino (um suplemento). Muitos destes nutrientes são moléculas biológicas formadas por monômeros. A- Cite 4 destas moléculas e todos os seus respectivos monômeros constituintes. 1. Molécula: Proteínas - Monômeros: Aminoácidos; 0,5 ponto 2. Molécula: Açúcares - Monômeros: Monossacarídeos; 0,5 ponto 3. Molécula: lipídeos – Monômeros: Ácidos graxos; 0,5 ponto 4. Molécula: Ácidos nucleicos - Monômeros: Nucleotídeos. 0,5 ponto Outras moléculas podem ser consideradas. Cuidado com respostas sobre vitaminas, há de se verificar de qual vitamina se está considerando e quais seriam os monômeros. B- Cite 2 moléculas encontradas APENAS no soro fetal bovino e que fazem deste soro um componente obrigatório do meio de cultivo. R; Fatores de crescimento OU hormônios, proteínas transportadoras de ferro como transferrina, Lipoproteínas, etc. 2 pontos (1 ponto para cada exemplo correto) 3) (3 pontos) – Descreva 3 principais etapas para se obter apenas as mitocôndrias de hepatócitos em cultura, deixando claro quais métodos bioquímicos foram escolhidos. R: 1ª Etapa: Preparação da amostra - Nesta etapa necessitaríamos obter amostras isoladas dos hepatócitos. Primeiramente utilizaríamos quelantes (de cálcio) E OU enzimas como tripsina que ajudam no desprendimento das células do fígado umas das outras e com a matriz extracelular. Posteriormente utilizaríamos a centrifugação para separar as células dos restos celulares por diferença de densidade. 1,0 ponto 2ª Etapa: Rompimento das células - Nesta etapa utilizaremos a técnica de maceração OU choque osmótico OU choque térmico, etc... para romper as células e assim deixar disponíveis as diversas organelas presentes na mesma. 1 ponto 3ª Etapa: Separação da organela - Nesta última etapa utilizaríamos a centrifugação diferencial e, posteriormente, a centrifugação diferencial para separar as mitocôndrias de núcleo e demais organelas e estruturas. 1 ponto