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Questão 1 Correto Atingiu 0,80 de 0,80 Avanços recentes no campo da biologia molecular estão ampliando as possibilidades de uso de biossensores no diagnóstico e na prevenção de doenças. Desenvolvidos com base em elementos de reconhecimento biológico, como antígenos e anticorpos, esses dispositivos podem se tornar aparelhos portáteis e baratos, semelhantes aos utilizados na medição das taxas de glicose no sangue. Amplamente usados em outros países, os biossensores atraem cada vez mais a atenção de grupos de pesquisa brasileiros, que nos últimos anos passaram a investir em dispositivos voltados especificamente para a detecção de doenças infecciosas negligenciadas, associadas à pobreza e à falta de saneamento básico. Sobre este tema, analise as afirmativas abaixo: I. A vantagem desses dispositivos é que eles são capazes de identificar proteínas nas amostras ao invés de sequências de DNA que não apresentam significado diagnóstico. II. Os biossensores baseiam-se em sistemas eletroquímicos que alteram padrões de sinais elétricos ao detectarem proteínas específicas na amostra. III. Neste caso, quando a sequência de DNA alvo se liga a sequência do dispositivo há uma alteração no sinal elétrico, indicado no biossensor É correto o que se afirma em: Escolha uma opção: I apenas. II apenas. I e II apenas. II e III apenas. III apenas. Sua resposta está correta. Estão erradas: I. Há biossenssores tanto para identificação de proteínas quanto par a sequências de DNA (nucleotídeos). A resposta correta é: II e III apenas. Questão 2 Correto Os resultados de uma PCR podem ser analisados a partir da técnica de eletroforese. Está técnica permite separar fragmentos de proteínas e ácidos nucléicos por tamanho e carga elétrica. Com base na figura abaixo, que representa uma corrida de eletroforese de DNA, marque a alternativa CORRETA: Escolha uma opção: Os fragmentos maiores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos menores, devido ao seu alto peso molecular do polo negativo para o positivo. Os fragmentos menores de DNA migram mais rápido do que os fragmentos maiores, pois se aderem mais facilmente aos íons do tampão utilizado na eletroforese. A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (–) para o polo positivo (+), e os fragmentos maiores são mais lentos, formando as bandas mais altas do gel. A utilização do Marcador Molecular é indicada para auxiliar na estimativa da concentração dos fragmentos de DNA que aparecerem no gel. A coloração é feita com um corante que se liga ao gel e permite visualizar as bandas de DNA sem necessidade de nenhum equipamento. Sua resposta está correta. A resposta correta é: A migração das amostras ocorre no sentido do polo negativo (–) para o polo positivo (+), e os fragmentos maiores s ão mais lentos, formando as bandas mais altas do gel. Questão 3 Correto O diagnóstico por microarranjos utilizada para diagnósticos de câncer funciona ao se comparar um chip com cDNA marcado por fluorescência de células normais e células de câncer. Desta forma, genes expressos em células normais são geralmente marcados em verde, genes expressos em células cancerígenas são marcados em vermelho, quando os genes são expressos em ambas as células fluorescência é amarelada e nenhuma fluorescência quando o gene não é expresso em nenhuma célula. Para o diagnóstico, o cDNA das células do paciente é marcado com outra fluorescência de forma que é possível comparar quais genes são expressos no paciente com o chip que contem o cDNA de células normais e cancerígenas. Ao analisar a amostra do paciente podemos concluir que: Escolha uma opção: O paciente pode possuir câncer uma vez que o padrão da expressão gênica da célula cancerígena é diferente do padrão de expressão das células referências. O resultado é inconclusivo porque a sonda utilizada para marcação do cDNA possui cores diferentes, impossibilitando a comparação. O paciente não possui câncer uma vez que os genes expressos são de cores diferentes. O paciente possui câncer uma vez que todos os genes expressos na amostra são diferentes dos genes expressos na célula cancerígena no controle. O paciente não possui câncer uma vez que os genes expressos no paciente são os mesmos expressos na célula cancerígena. Sua resposta está correta. A amostra do paciente apresenta expressão gênica diferente das cé lula referência, indicando que o paciente pode apresentar células ca ncerígenas. A resposta correta é: O paciente pode possuir câncer uma vez que o padrão da expressão gênica da célula cancerígena é diferente do padrão de expressão das células referências. Questão 4 correto Atingiu 1,60 de 1,60 Dentre as técnicas da biologia molecular voltadas para a tecnologia do DNA recombinante, existem aquelas que auxiliam na confirmação do desempenho dos experimentos. Elas servem para monitorar a qualidade do trabalho, garantindo que o tempo e materiais não sejam perdidos com amostras inviáveis ou erradas. Um técnica de confirmação amplamente utilizada está representada abaixo. Tradução: Gene insert = gene inserto. Sobre essa técnica podemos afirmar que: Escolha uma opção: Não é possível identificar em quais colônias de bactérias o plasmídeo pUC57-Kan foi inserido, porém, a entrada do inserto dentro da bactéria ativa o gene LacZ responsável pela quebra do x- gal e liberação de pigmento azul, já as colônias brancas podem ter sido transformadas pelo plasmídeo porém ele pode estar vazio sem o inserto. A entrada do gene de interesse no plasmídeo pode ser confirmada por meio do crescimento de bactérias transformadas com plasmídeo recombinante em meio de cultivo que possuam o antibiótico que o plasmídeo confere resistência. Além disso, as bactérias que não receberam o plasmídeo apresentam coloração azul devido incapacidade de quebrar o x-gal presente no meio, já as bactérias que apresentam o plasmídeo apresentam coloração branca. As bactérias de coloração branca apresentam o gene de interesse inserido no meio do gene LacZ, interrompendo-o e bloqueando a quebra do x-gal presente no meio. As bactérias de coloração azul foram transformadas com o plasmídeo vazio e por isso não são resistentes ao antibiótico presente no meio de cultivo, facilitando a sua identificação. É possível identificar a transformação da bactéria com o plasmídeo pUC57-Kan a partir do crescimento da bactéria em um meio de cultivo com o antibiótico que o plasmídeo oferece resistência, além de identificar colônias brancas que devem apresentar o inserto devidamente ligado ao plasmídeo, uma vez que o inserto no plasmídeo interrompe a expressão do gene LacZ que, quando ativo, estimula a produção de pigmento azul nas bactérias. Ao inserir o gene de interesse em um plasmídeo, é possível identificar essa ligação por meio da expressão do gene de interesse. Quando o gene se encontra no plasmídeo, ele produz um pigmento branco para a bactérias que cresce apenas em meio de cultura com o antibiótico que o plasmídeo pUC57-Kan confere resistência. Sua resposta está correta. A resposta correta é: É possível identificar a transformação da bacté ria com o plasmídeo pUC57-Kan a partir do crescimento da bactéria em um meio de cultivo com o antibiótico que o plasmídeo oferece re sistência, além de identificar colônias brancas que devem apresenta r o inserto devidamente ligado ao plasmídeo, uma vez que o inserto no plasmídeo interrompe a expressão do gene LacZ que, quando ati vo, estimula a produção de pigmento azul nas bactérias. Questão 5 Correto Atingiu 1,10 de 1,10 As técnicas de análises da integridade do DNA são utilizadas no diagnóstico das mais diversas doenças, incluindo o câncer. É importante que o profissional saiba identificar as características e aplicações de cada técnica, para que possa realizar um diagnóstico preciso e eficiente. Algumas técnicas estão listadas abaixo,seguidas das características principais de cada uma delas. Assinale a alternativa que apresenta a relação correta entre o nome da técnica e sua descrição 1. Cariótipo por bandeamento G. 2. FISH 3. CGH (Array genômico) A. Permite identificar defeções e duplicações no material genético de fragmentos de DNA extremamente pequenos, porém não identifica translações equilibradas. B. Amplamente utilizada para encontrar variações no número de cromossomos e, embora uma excelente técnica para identificar translocações, deleções e duplicações, essa técnica é imitada a identificar apenas alterações cromossômica muito grandes. C. Utiliza de sondas para marcar o material genético e essas sondas podem marcar qualquer região do material genético. Permite identificar deleções, duplicações e translocações, entretanto é preciso saber exatamente o que está procurando para utilizar sondas específicas para cada região do DNA. A associação correta é Escolha uma opção: 1B; 2C; 3A. 1A; 2B; 3C. 1B; 2A; 3C. 1C; 2A; 3B. 1A; 2C; 3B. Sua resposta está correta. A resposta correta é: 1B; 2C; 3A. Questão 6 Correto Atingiu 0,80 de 0,80 As seguintes etapas constituem a reação em cadeia da polimerase (PCR), onde milhões de cópias do fragmento de DNA que se quer amplificar são gerados, I. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 30s). II. Anelamento dos iniciadores no DNA genômico (30-60ºC, 30s). III. Desnaturação do DNA genômico (94ºC, 5min). IV. Síntese do DNA pela polimerase (72ºC, 2-5 min). A sequência correta da reação apresentada está na opção Escolha uma opção: III, IV, II, I. II, I, IV, III. I, III, IV, II. I, II, III, IV. III, I, II, IV. Sua resposta está correta. A resposta correta é: III, I, II, IV. Questão 7 Correto Atingiu 1,10 de 1,10 As técnicas de microarray pode ser utilizada tanto para o diagnóstico de câncer, quanto para identificar alterações cromossômicas. Sobre essas aplicações, analise as assertivas abaixo e as relações entre elas. I. É importante saber a finalidade da utilização da técnica de microarranjo. PORQUE II. a técnica aplicada ao diagnóstico de câncer monitora a expressão gênica da amostra do paciente por meio do RNAm enquanto a aplicada a citogenômica identifica regiões específicas do DNA. Sobre o exposto avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas. Escolha uma opção: As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições falsas. A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. Sua resposta está correta. A resposta correta é: As asserções I e II são proposições verdadeira s, e a II é uma justificativa correta da I. Questão 8 Correto Atingiu 0,80 de 0,80 A figura abaixo ilustra uma das etapas para a produção de anticorpos. Analise-a. Esta etapa é chamada de : Escolha uma opção: PCR. Ligação. Biossimilar. Trangenia. Biopanning. Sua resposta está correta. A resposta correta é: Biopanning. Questão 9 Correto Atingiu 0,80 de 0,80 Considere que as Tm dos primers que você desenhou são 68 ºC para o sense e 66 ºC para o anti-sense. Determine os parâmetros de uma reação de PCR, completando a tabela abaixo. Os dados de A, B e C são, respectivamente: Escolha uma opção: 67 ºC - Primers - 55 ºC. 95 ºC - Inicialização - 67 ºC. 64 ºC - Inicialização - 95 ºC. 67 ºC - Desnaturação - 95 ºC. 95 ºC - Desnaturação - 64 ºC. Sua resposta está correta. A desnaturação do DNA ocorre a altas temperaturas como 95 ºC no início da PCR. A segunda etapa também é uma desnaturação mais curta que se repetirá em cada ciclo. A temperatura de anelamento c onsiste da médias das Tm menos 3º C. A resposta correta é: 95 ºC - Desnaturação - 64 ºC. Questão 10 Correto Atingiu 1,10 de 1,10 Sobre a técnica de PCR em tempo real, analise as assertivas abaixo e a relação entre elas: I. A técnica de PCR em tempo real pode ser utilizada para monitorar a carga viral presente no indivíduo infectado. PORQUE II. O processo de transcrição reversa produz moléculas de DNA a partir de um molde de RNA do vírus. Escolha uma opção: A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira. As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa correta da I. As asserções I e II são proposições falsas. As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa correta da I. A asserção I é uma proposição verdadeira, e a II é uma proposição falsa. Sua resposta está correta. A carga viral é determinada pelo cálculo da fluorescência emitida pela sonda que se liga às moléculas de DN A novas. Embora o processo de transcrição reversa esteja corretam ente descrito, ele deve ser feito antes da qPCR, em reação separad a, ainda a transcrição reversa não permite quantificar a carga viral. A resposta correta é: As asserções I e II são proposições verdadeira s, mas a II não é uma justificativa correta da I.
