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GENÉTICA BACTERIANA Generalidades e Conceitos A sobrevivência de um organismo requer alta estabilidade genética Gene estável = sobrevivência Taxa de mutação: é a frequência com que uma mutação específica surge, ou seja, é a probabilidade de um gene sofrer mutação quando a célula se divide As velocidades das mutações são geralmente baixas e são afetadas por fatores ambientais e genéticos. Baixas taxas de mutação são necessárias à vida que conhecemos Genoma: Informação genética de uma célula (cromossomo e plasmídeos) Cromossomos: Estruturas contendo DNA que transportam fisicamente a informação hereditária, contém os genes Genes: Segmentos de DNA que codificam produtos funcionais DNA Transcrição: É a síntese de uma fita complementar de RNA a partir de um molde de DNA RNA Tradução: sempre acontece na porção 70s. a informação genética é copiada no DNA, ou transcrita, em uma sequência de bases de RNA Proteína: Formação da proteína a partir das informações genéticas Expressão genética: É um sistema de regulação para utilizar de forma natural os recursos presentes na célula Cromossomo Bacteriano DNA Circular Único, raramente 2, Dupla fita, helicoidal e compactado O material genético fica separado do citoplasma em uma região chamada de nucleóide Todo material genético possui uma região que origina ptn denominadas regiões transcritas Região não transcrita (introns) ou DNA lixo Variabilidade Genética Alterações na sequência de bases do DNA. Essa alteração pode causar modificações no produto codificado por aquele gene. MUTAÇÃO: É uma alteração na sequência de bases na molécula de DNA Necessárias para a evolução Pode não haver alterações Pode trazer características desfavoráveis, favoráveis ou neutras As mutações potencialmente são causadas por uma série de diferentes fatores naturais e não naturais: Mutações espontâneas: acontece ao acaso, rara e aleatória Mutações induzidas: radioatividade, luz UV Tipos: Substituição de bases do DNA: uma única base em um ponto na sequência do DNA é substituída por uma base diferente Inserção ou deleção de bases do DNA: Os mutantes podem ser detectados por seleção ou teste para um fenótipo alterado: seleção positiva (direta): envolve a detecção das células mutantes pela rejeição das células parentais não mutadas. Por exemplo, suponha que estivéssemos tentando descobrir bactérias mutantes resistentes à penicilina. Quando as células bacterianas são colocadas em um meio contendo penicilina, o mutante pode ser identificado diretamente. As poucas células na população que são resistentes (mutantes) crescerão e formarão colônias, enquanto as células parentais normais, sensíveis à penicilina, não poderão crescer seleção negativa (indireta): Esse processo seleciona uma célula que não pode realizar certa função, utilizando a técnica de placas réplicas. RECOMBINAÇÃO Transferência de material genético entre as bactérias É a troca de genes entre duas moléculas de DNA, para formar novas combinações Essa transferência pode ocorrer de 3 formas: transformação, transdução e transformação. 1 Transformação: Os genes são transferidos de uma bactéria para outra como DNA “nu” em solução Competência bacteriana: Quando uma célula receptora está em um estado fisiológico em que pode captar o DNA. A competência resulta de alterações na parede celular, tornando-a permeável a moléculas grandes de DNA. 2 Transdução: Nesse processo, o DNA bacteriano é transferido de uma célula doadora para uma célula receptora dentro de um vírus que infecta bactérias, denominado bacteriófago, ou fago Como ocorre: O DNA do bacteriófago é injetado para iniciar um ciclo lítico Durante o ciclo lítico, fragmentos de DNA bacteriano são empacotados em capsídeos do fago Em uma “infecção” subsequente, o DNA bacteriano insere-se dentro do novo cromossomo do hospedeiro por meio de recombinação Tipos: transdução generalizada: Todos os genes contidos dentro de uma bactéria infectada têm probabilidades iguais de serem empacotados em um revestimento de fago e transferidos transdução especializada: somente certos genes bacterianos são transferidos 3 Conjugação: A conjugação é mediada por um tipo de plasmídeo, um fragmento circular de DNA que se replica de modo independente do cromossomo da célula Os plasmídeos responsáveis pela conjugação são transmissíveis entre as células durante a conjugação Como ocorre: A bactéria com plasmídeo vai entrar em contato com a bactéria sem plasmídeos Esse contato em gram-negativa: pili sexuais Gram-positiva: produzem moléculas aderentes Quando as bactérias conjugam, os plasmídeos podem passar através do tubo de conjugação para a bactéria receptora Os plasmídeos tornam-se parte do genoma das células receptoras Plasmídeos Elemento genético além do cromossomo; Circulares; Menores que os cromossomos; Replicam independentemente do cromossomo; Podem estar presentes em muitas cópias em uma única célula; Bactérias Gram positivas e Gram negativas; A coloração de Gram é um passo muito importante na caracterização e classificação inicial das bactérias. Afinal, esse método de coloração permite que as bactérias sejam visualizadas no microscópio óptico, uma vez que sem a coloração é impossível observá-las ou identificar sua estrutura As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano (polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias) em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa. Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final. Carregam informação genética não essencial a célula, mas podem conferir uma vantagem adaptativa. Carreiam genes que exercem influência no fenótipo da célula. Plasmídeo de resistência – ameaça a terapia antimicrobiana. fatores sexuais: também chamados de fatores de fertilidade ou fator F Conferem a bactéria possibilidade de realizar conjugação; fator col: produção de colicinas, substâncias letais para bactérias coliformes; fatores de resistência (fator R) por exemplo a antibióticos; Possui genes que promovem resistência a antimicrobianos. lactamases (penicilinases) de estafilococos resistência a penicilina. Transposons Os transposons são pequenos segmentos de DNA que podem se mover de uma região para outra do mesmo cromossomo, ou para um cromossomo diferente ou para um plasmídeo. 17. Os transposons são encontrados nos principais cromossomos dos organismos, em plasmídeos e no material genético dos vírus. Eles variam de simples (sequências de inserção) a complexos. Os transposons complexos podem transportar qualquer tipo de gene, incluindo genes de resistência a antibióticos, sendo assim, um mecanismo natural para mover genes de um cromossomo para outro. Recombinação homóloga: troca que é semelhante a sequência correspondente Recombinação análoga: o gene ou a informação será inserida em um local diferente do que estava antes, sendo denominado de transposição e o gene de transpossio.