RESUMO COLORIMETRIA E FOTOMETRIA

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Colorimetria - Fotometria 
↳ Métodos utilizados:
- Colorimetria= medida da cor;
- Espectrofotometria = medida de absorção transmissão de luz;
~Capez de determinar a 2) de uma amostra;LL Identificar um composto ;
Acompanhar uma reação enzimática
· LUZ
nética que possui característica de anda e particula (fotoul :Radiação eletromag
· Movimento andulatório : caracterizado pelo comprimento de onde /XI , que corresponde à
distância linear entre duas cristas
,
medido em nanómetros (nm) ;
· Comprimento de anda visível do olho humano : 7 = 380 a 750 um
Ultra-violeta Infravermelho
· O conteúdo energético da luz é inversamente proporcional ao comprimento de onde
X 38onm 730um
CE
4)
por conta disso a luz ultravioleta afeta mais
quando somos expostos - ex : sol
·
AbsorçdeLueservem fotons ;
-Absorção de luz pela matéria = incorporação da energia contida no fóton à estrutura das↓
moléculas absorventes;
-Cor dos objetos devido a reflexão e absorçãoS
Substâncias sólidas/opacas
>Papel vermelho: recebe todos os 7 da lue branca, mas reflete somente
o vermelho, sendo o restante absorvido
>Papel branco : todos os X são refletidos
> Papel preto : praticamente todos os 1 são absorvidas
-Relação de Lambert-Beer
O Padrão da [] da Detecta a transmi-
solução rem do laboratório tância e a absorvância
↳Ex : Aboomg/dL
PADRÃO (P) Ex : T= 50%
=Soomg/dL .....
0
.
35 A = 1
,
0
.......
X = 0. 52
& tubo T= 75%
p + R cor = 0
,
35 Amostra colorida A = 0, 3
A + R com = 0. 52
R = reagente A = amostra
P= padrão
PREPARAÇÃO DO TUBO BRANCO
- Tubo branco = contém todos os reativos menos a substância a ser dosada ([] 0)
& reagente + água
- fundamental para o ajuste do fotocolorimetro A = 0
T = 100%
- Deve ser feito antes de qualquer medida no fotocolorimetro
R .C = Reagente cromogéneo +
TUBO BRANCO R.C AMOSTRA
+
AMOSTRA R.C AMOSTRA
DETERMINAÇÃO DE CONCENTRAÇÃO
3
- Utilizando um único padrão :
Absorvância da amostra (2) conhecidal relaciona Absorvância da amostra ([]desconhecidal.
Ca = [] da amostra
Cp = [] padrão CA = AA CA = CP X AA
Aa = Absorvância da amostra CP Ap Ap
Ap = Absorvância do padrão
-Uso de curva padrão :
Corresponde à relação gráfica entre os valores de absorvancia e os de concentração :
· Com base na analise gráfica é possível verificar a linearidade da reação e calcular
um fator de conversão de valores de absorvância em concentração ;