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Cromatografia em Camada Delgada
Objetivo da Aula:
O objetivo desta aula prática é introduzir os alunos ao conceito e à técnica da Cromatografia em Camada Delgada (CCD), capacitando-os a realizar separações e identificações qualitativas de substâncias presentes em uma mistura.
Materiais Necessários:
1. Placas de sílica gel (ou outro suporte cromatográfico)
2. Mistura de amostras (por exemplo, mistura de corantes)
3. Vidro de relógio
4. Pipetas Pasteur ou microseringas
5. Solventes (exemplo: acetona, etanol, hexano)
6. Desenvolvedor de cromatografia (câmara fechada ou bandeja)
7. Gases inertes (opcional, para acelerar a evaporação)
8. Lâmpada UV (opcional)
9. Roteiro impresso da aula prática
10. Equipamentos de segurança (luvas, óculos de proteção)
Procedimento:
1. Preparação da Placa de Cromatografia:
1. Marque uma linha a cerca de 1 cm da borda inferior da placa de sílica gel, utilizando um lápis ou marcador não-permanente.
2. Prepare a mistura de amostras em um vidro de relógio, adicionando uma pequena quantidade de cada componente.
3. Utilize uma pipeta Pasteur ou microseringa para aplicar uma pequena quantidade da mistura na linha marcada da placa de sílica gel, formando pequenos pontos.
2. Desenvolvimento da Cromatografia:
1. Coloque a placa de cromatografia na câmara de desenvolvimento, com a fase móvel (solvente) na parte inferior.
2. Cubra a câmara para evitar a evaporação dos solventes.
3. Deixe a cromatografia ocorrer até que a linha de solvente atinja cerca de 1 cm da borda superior da placa.
4. Remova a placa da câmara e deixe-a secar completamente ao ar ou utilizando uma corrente de ar suave.
3. Visualização das Substâncias:
1. Se desejar, utilize uma lâmpada UV para visualizar substâncias que fluorescem sob essa luz.
2. Marque as manchas que aparecem na placa para futura análise.
4. Análise e Interpretação:
1. Meça as distâncias percorridas pelas manchas a partir da linha de aplicação.
2. Calcule os fatores de retenção (Rf) para cada substância utilizando a fórmula: Rf = distância percorrida pela substância / distância percorrida pelo solvente.
3. Compare os resultados com padrões conhecidos para identificar as substâncias presentes na mistura.
5. Conclusão:
Discuta os resultados obtidos, incluindo a eficiência da separação, a identificação das substâncias presentes na mistura e possíveis fontes de erro.