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14/03/2013 1 Espermograma Exames imediatos e mediatos do sêmen Cuidados gerais Método de colheita X espécie Variações esperadas do sêmen: – Técnica utilizada – Espécie Cuidados na colheita: – Corte de pelos – Limpeza local (pênis e/ou prepúcio) – Luvas – Outras formas de estimulação do macho Pós colheita de sêmen após colheita: – sêmen deve ser mantido em banho- maria a 37ºC – Todo a vidraria a ser usada no exame deve estar previamente aquecido a 37ºC (placas aquecedoras para a bancada e microscópio) Exames imediatos do sêmen: Macroscópicos: – Volume, cor, odor, movimento de massa, densidade e pH Microscópicos: – Turbilhonamento, motilidade e vigor Exames imediatos - VOLUME Colheita em tubo graduado Valores médios Touro - 5 ml Carneiro - 0,8 ml Búfalo – 5 ml Bode - 1,0 ml Eqüino - 60 ml Suíno – 190-350 ml Cão – 10 ml Galo – 0,5 a 1,5 ml Primatas, roedores e suínos – tampão gelatinoso Exames imediatos - COR Branca: Jumento, touro, garanhão, aves, cachaço, coelho. Marfim ou perolado: carneiro Amarelado: bodes e alguns touros (riboflavina) Avermelhado: sangue – pode haver algum ferimento na uretra, na parte externa da glande ou nas glândulas anexas. Esverdeado: presença de pus – infecção. Amarelado anormal para espécie – pus ou urina Marrom – sangue velho com degradação celular, alguma lesão antiga. 14/03/2013 2 Exames imediatos - ODOR Característico – “sui generis” (fosfato de espermina) Odor urinoso ou cítrico – presença de urina no sêmen Odor hircino – característico do bode Odor pútrido – presença de bactérias Exames imediatos – M.MASSA Observa-se movimento a olho nu Classificação: presente ou ausente Observado em touros, carneiros e bodes – sêmen concentrado Se os pequenos ruminantes estiverem sendo muito utilizados pode não haver esse movimento, mas pode ser considerado normal Exames imediatos - DENSIDADE indica a quantidade de espermatozóides presentes Aspecto Densidade Cremoso .................................. Muito denso = peq. Rumin. (leite condensado) Leitoso .................................... Denso = touro e búfalos Aquoso-seroso ...................... Semi-denso = cães, eqüinos e suínos Aquoso (sem células)............. Ralo (patológico) Aquoso .................................... Azoospérmico (patológico) Exames imediatos - pH concentração de íons hidrogênio presentes no sêmen Touro - 6,5 a 6,9 Carneiro – 5,9 a 7,3 Cão – 6,3 a 6,8 Cachaço – 6,8 a 7,9 Exames imediatos - TURBILHONAM. similar ao exame de movimento de massa, porém é observado ao microscópio. Coloca-se uma gota de sêmen em uma lâmina aquecida a 37ºC e leva-se ao microscópio sobre uma placa aquecida, observa-se em aumento de 100X. Observa-se a borda da gota. O = parado, células mortas 1 = pouquíssima motilidade 2 = pouca motilidade 3 = motilidade normal (Peq. Ruminantes, touro, búfalo) 4 = motilidade aumentada ( com ondas mais claras (touro e peq. Ruminantes) 5 = presença de ondas rápidas e escuras (aumento de motilidade está relacionado com aumento de concentração) Exames imediatos - TURBILHONAM. 14/03/2013 3 Exames imediatos - TURBILHONAM. 5 3 1 2 4 Exames imediatos - MOTILIDADE Número de células vivas e móveis Gotas de sêmen em solução fisiológica aquecida – aumento de 200x Sptz com movimento retilíneo progressivo Grau 5 – 100 a 80% Grau 4 – 80 a 60 % Grau 3 – 60 a 40% Grau 2 – 40 a 20% Grau 1 – 20 a 10% Exames imediatos - VIGOR Usar a mesma lâmina da motilidade Avalia a propulsão do espermatozóide, ou seja pela velocidade do espermatozóide O = espermatozóides mortos – não saem do lugar 1 = moribundos – péssimo 2 = Muito lentos – ruim 3,4,5 = Bons Exames mediatos do sêmen: Microscópicos: – Concentração e patologia espermática Exames mediatos - CONCENTRAÇÃO Câmara de Neubauer – aumento de 400x Diluição conforme a espécie (1 parte de sêmen : 1 parte formol salino) Cão 1 : 100 Suíno 1 : 100 Bovino 1 : 200 Ovino 1 : 1000 Exames mediatos - CONCENTRAÇÃO Câmara de Neubauer – aumento de 400x Diluição conforme a espécie Cão 1 : 100 Suíno 1 : 100 Bovino 1 : 200 Ovino 1 : 1000 Ex.: 20 l de sêmen em 2 mL solução formol salina (1:100) 14/03/2013 4 Exames mediatos - CONCENTRAÇÃO Câmara de Neubauer [ ] sptz = média das duas lâminas . 5 . 10 . diluição [ ] sptz = sptz / mm³ Exames mediatos - PATOLOGIA Alterações da cabeça: – Método de Williams modificado (fucsina-eosina) ou Panótico – Esfregaço de sêmen – Artefatos de técnica Exames mediatos - PATOLOGIA Alterações de peça intermediária e cauda: – Método da Câmara Úmida – Gota de sêmen diluído em formol salino entre lâmina e lamínula, vedado com esmalte – contar 200 células e registrar a % de alterações Patologia espermática Defeitos Maiores Defeitos menores Bovinos: Total D. Maiores - 20% D. Menores - 25% Individual D. maiores – 5% D. menores 10% Patologia espermática Normal para as espécies abaixo: Caprinos e ovinos – 15% Bovinos – 30% Suínos – 20% Eqüinos – 25-30% 14/03/2013 5 14/03/2013 6 14/03/2013 7 Patologia espermática - MAIORES Formas duplas Knobbed sperm Diadem defect Cabeça Piriforme Cabeça Estreita na base Cabeça De contorno anormal Cabeça Solta anormal Cabeça Pequena anormal Corkscrew defect Gota proximal Dag defect Defeitos de Acrossomo Cabeça Pequena normal Cabeça Gigante Cabeça Estreita Cabeça Solta normal Implantação abaxial Gota distal Cauda simplesmente dobrada ou enrolada Cauda enrolada na porção terminal Patologia espermática - MENORES
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