Gabarito exercício de cinética enzimática

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EXERCÍCIO DE CINÉTICA ENZIMÁTICA
(GABARITO)
Um grupo de pesquisadores descobriu uma nova enzima, que catalisa a reação abaixo, e que eles nomearam de felicidase: 
FELICIDADE ↔ TRISTEZA 
Os pesquisadores iniciaram a caracterização da enzima. 
(a) No primeiro experimento, com uma concentração de enzima total (E0) de 4 nM, eles observaram que a Vmáx é 1,6 μM.s-1 Com base nesse experimento, qual é o kcat da felicidase? 
Para isto, precisamos utilizar a equação da Kcat: 
k𝑐𝑎𝑡 = 𝑉𝑚a𝑥/[𝐸0] → k𝑐𝑎𝑡 = 1,6 / 4.10-3
Portanto: 𝐾𝑐𝑎𝑡 = 400𝑠-1
(b) Em outro experimento, com concentração de enzima total (E0) de 1 nM e concentração do substrato FELICIDADE de 30μM, os pesquisadores observaram que Vo= 300 nM.s-1. Qual é o valor de KM medido para a felicidase para o substrato FELICIDADE? 
Para este exercício, precisamos utilizar o valor de Kcat obtido no exercício anterior (b). 
Com este valor, e utilizando a fórmula da Kcat, podemos calcular o novo valor de Vmax, com [E0] = 1 nM: 
𝐾𝑐𝑎𝑡 = 𝑉𝑚a𝑥[𝐸0] → 400 = 𝑉𝑚á𝑥. 1n𝑀 → Vmax = 400 nM.s-1 = 0,4 M.s-1
Agora é só utilizar a equação de Michaelis-Menten e calcular KM :
𝑉𝑜=𝑉𝑚a𝑥.[_𝑆]/(𝐾𝑚+[𝑆])
0,3μ𝑀.𝑠-1 = 0,4 . 30 / (𝐾M + 30)
KM = 10μM
(c) Pesquisas posteriores indicaram que a felicidase isolada no primeiro experimento estava contaminada com um inibidor, denominado RAIVA. Quando RAIVA foi totalmente removido da preparação de felicidase e os dois experimentos foram repetidos, observou-se que a Vmax não foi alterada, mas o valor de KM passou a 2 μM. Com base nestas informações, qual o tipo de inibição realizada por RAIVA? 
Inibidor reversível, do tipo competitivo.