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Biotecnologia é um conjunto de técnicas que utilizam seres vivos no desenvolvimento de processos e produtos. HISTÓRICO início com processos fermentativos. produção de bebidas alcoólicas pela fermentação de grãos de cereais já era conhecida pelos sumérios e babilônios antes de 6.000 a.C. produção de vinagre, iogurte e queijos são realizados a mui- to tempo não conheciam os agentes causadores das fermentações Antom Van Leeuwenhock descobriu a existência de seres minúsculos e em 1876 Pasteur provou que a causa das fermen- tações era a ação desses seres 1928: grande marco de referência na fermentação industrial. A produção de antibióticos Alexander Fleming descobre a penicilina, muitos tipos de antibióticos foram desenvolvidos no mundo Década de 40: antibióticos integram os processos industriais fermentativos, baseando inicialmente na síntese da penicilina e da estreptomicina Década de 50: biotecnologia passou a existir -descoberta da síntese química do DNA -manipulação genética: DNA recombinante -fusão celular ou híbrida Década de 70: biologia molecular- fusão das técnicas da en- genharia genética com a microbiologia industrial tradicional 1982: insulina humana é produzida por fermentação de micro-organismos BIOTECNOLOGIA TRADICIONAL BIOTECNOLOGIA MODERNAX mais antiga e rudimentar obtenção de produtos a partir de matéria-prima, mediante a intervenção de organismos vivos egípcios e babilônios a partir da década de 70 estudos e desenvolvimentos da química combinatório de biomoléculas, os processos de biotransformação, a tecnologia de ácidos nucleiocos, a aplicação de moléculas menores em controles de metabolismo e em farmacologia aplicações BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL compreende a aplicação da biotecnologia para o processamento sustentável e para a produção de diversos produtos no setor industrial. Processamento biotecnológico: utiliza enzimas e microrganismos para aprimorar os processos industriais e gerar materiais e produtos de alto valor • produtos químicos, • farmacêuticos, • agrícolas, • nutrição humana e animal, • pasta e papel, têxteis, • energia, • materiais e polímeros. O uso dessas biotecnologias em substituição aos processos existentes tem um potencial gigante para ajudar a resolver muitos problemas da sociedade: • baixa produtividade na agricultura, • degradação ambiental, • dependência de combustíveis fósseis, • problemas no setor da saúde, entre outros. Macromolécula formada por subunidades denominadas nucleotídeos que armazena a informação genética: DNA e RNA Cadeias quimicamente ligadas de nucleotídeos, as unidades básicas ou blocos construtores do DNA e RNA molécula composta por três componentes típicos: uma base heterocíclica, um açúcar de cinco carbonos denominado pentose e um grupamento fosfato. As duas fitas da dupla hélice são unidas pelo pareamento de bases em orientação antiparalela. A formação de pontes de hidrogênio é importante para a especificidade do pareamento de bases. propriedade mais significava da dupla hélice de DNA, como portadora da informação genética, é a formação dos pares de bases (pareamento) por pontes de hidrogênio. Como a adenina sempre forma ponte de hidrogênio com timina, e a guanina sempre forma ponte de hidrogênio com a citosina, cópias exatas da informação podem ser replicadas Biotecnologia: enorme contribuição para o setor da indústria - permitindo que as empresas invistam em tecnologia e gerem novos produtos. Permite que as empresas se alinhem a uma importante questão atualmente: proteger a natureza e nossos recursos naturais. Investimento em desenvolvimento tecnológico aliado à sustentabilidade. DNA recombinante A tecnologia do DNA recombinante é um grupo de técnicas moleculares para localizar, isolar, alterar e estudar segmentos de DNA A maior parte da informação genética eucariótica está armazenada no DNA encontrado no núcleo. Uma pequena quantidade está também estocada no DNA mitocondrial e no cloroplasto. ácidos nucleicos nucleotídeo proteínas Resultam da expressão da informação contida no gene. Constituem a maior parte da massa seca de uma célula. Unidades fundamentais das células - executam a maior parte das funções celulares. Uma molécula de proteína consiste em uma longa cadeia não ramificada de aminoácidos. Polipeptídeos. Cada tipo de proteína tem uma sequência exclusiva de aminoácido. Existem milhares de proteínas diferentes em uma célula - desempenham inúmeras funções biológicas qualquer molécula de DNA composta por sequências derivadas de diferentes fontes. A primeira etapa na análise molecular de um segmento de DNA ou gene é isolá-lo do restante do DNA e fazer muitas cópias dele de modo que uma análise posterior possa ser feita. vetor+ fragmento DNA recombinate Replicação do DNA na célula hospedeira Isolamento, sequenciamento e manipulação do fragmento de DNA purificado clonagem mecanismo comum de propagação da espécie em plantas o bactérias técnica possibilita a identificação, localização e caracteri- zação de genes, criação de mapas genéticos e sequenciamento de genomas, etc clonagem reprodutiva: transferência do núcleo de uma célula somática (não reprodutiva) para um óvulo cujo núcleo tenha sido retirado clonagem terapêutica: produção de tecidos ou ógãos para transplante vetores Um vetor de clonagem é uma molécula de DNA replicante e estável para a qual um fragmento de DNA exógeno pode ser ligado para introdução em uma célula. Um vetor de clonagem efetivo tem três características importantes: uma origem de replicação, que garante que o vetor seja replicado dentro da célula; 1. marcadores selecionáveis, que permitem que qualquer célula contenha o vetor a ser selecionado ou identificado; e 2. um ou mais sítios únicos de restrição nos quais o fragmento de DNA pode ser inserido. 3. produção de proteínas recombinantes Expressão heteróloga - expressão de genes exógenos provenientes de outras espécies, em bactérias ou em outros tipos de organismos: um gene específico deve ser propagado, transcrito 1. necessário o conhecimento prévio sobre a estrutura e organização do gene de interesse, vetor de expressão e escolha correta do hospedeiro corretamente, e o RNA mensageiro correspondente deve ser traduzido em uma cadeia polipeptídica que possa ser convertida em uma proteína funcional. vacinas Proteínas recombinantes podem ser utilizadas para vacinas. Pode-se purificar uma proteína presente em um envelope viral, por exemplo, e injetá-la em um animal. A proteína será reconhecida pelo sistema imune como uma proteína exógena, e promoverá a produção de anticorpos específicos. Assim, o indivíduo exposto a proteína estará sensibilizado e, caso entre em contato com o vírus, já possuirá anticorpos de memória para combatê-lo. A tecnologia de DNA recombinante contribuiu significativamente para o desenvolvimento de vacinas seguras e eficazes. Ex: vacinas para prevenir infecções por HBV e formas oncogênicas de HPV. Proporciona os meios para a produção de antígenos proteicos em grandes quantidades para uso em vacinas. terapêutico insulina utilizada por pacientes com diabetes do tipo I (que não são capazes de produzir o hormônio) ou do tipo II (cujos receptores estão ausentes ou são resistentes à insulina) 1. primeiro hormônio produzido geneticamente para uso comercial 2. purificada de pâncreas de animais (como vacas e porcos)3. estratégia era mais suscetível a causar reações adversas pela presença de contaminantes e impurezas no extrato4. diagnóstico Diagnóstico de doenças: os testes imunológicos, com anticorpos recombinantes. Proteínas podem ser utilizadas para o desenvolvimento de técnicas laboratoriais, como ELISA (enzyme-linked immuno signalling assay) e imuno-histoquímica. pesquisa Proteínas recombinantes: podem ajudar a elucidar princípios básicos e fundamentais de um organismo. Utilizadas para identificar e localizar a posição de uma proteína codificada com determinadogene, para descobrir sua função fisiológica no ambiente celular. Genes anotados no DNA de um organismo podem possuir apenas função putativa (teórica): a obtenção dessas proteínas e de testes que avaliem sua real função é essencial para que tenhamos mais conhecimento sobre a fisiologia dos organismos Os anticorpos para esses ensaios podem ser obtidos por meio da sensibilização de animais, com uma proteína recombinante, e da recuperação dos anticorpos produzidos por eles. Além disso, proteínas purificadas podem ser utilizadas em testes in vitro, a fim de verificar sua função e sua interação com outras proteínas e moléculas.
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