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Dermatófitos FUNGOS QUERATINIOFÍLICOS (usam queratina e se estabelecem na superfície, provocam zoonoses) • Produtores de queratinase; • Hidrolisam a queratina da pele e fâneros para obtenção de nutrientes (área de pele sem pelo – borda avermelhada); • Não invadem a epiderme; Fungos • Não sobrevivem em áreas inflamadas; Bactérias DERMATÓFITOS ANTROPOFÍLICOS: Trichophyton rubrum; T. tonsurans; T. violaceum; T. mentagrophytes var. lanosa DERMATÓFITOS ZOOFÍLICOS: Microsporum canis; Trichophyton mentagrophytes var. granulosa; T. equinum; T. verrucosum DERMATÓFITOS GEOFÍLICOS: Microsporum gypseum; M. nanum; M. cookei; Trichophyton terrestre. Infecção cruzada resposta mais grave, bordas limitadas e vermelhas. Estabelecimento da Dermatofitose: ARTROCONÍDIOS / HIFAS • Hifa – habilidade de competição com a microbiota residente; geram conídios que geram mais hifas…… • Hifa /Vencer a barreira (filme de gordura sobre a camada córnea); • Hifa/ Contato com a queratina do extrato córneo; • Crescimento longitudinal no extrato córneo (Hifas – artroconídios – hifas.....) • Intensa produção de QUERATINASE; • Consequente hidrólise da Queratina; • Produção de metabólitos e produtos de excreção; • Ação irritante, alergênica e tóxica; • Resposta inflamatória local; • Lesões dos pelos tipo: • Ectotrix • Endotrix OBS: Substâncias irritantes fazem as bordas ficarem avermelhadas. Metabólitos -> tóxicos 2 Material para diagnóstico -> nas bordas da lesão. Dermatofitoses Humanas = Tinea ( Microsporiasis – Tricofitiasis) Animais = Tinhas • Tinea cruris • Tinea corporis • Tinea barbae • Tinea pedis • Tinea captis • Tinea imbricata • Tinea unguineum Tinea captis Lesões por Microsporum canis Onicomicose Trichophyton mentagrophytes Tinha dos bovinos Trichophyton verrucosum Trichophyton mentagrophytes Microsporum canis Microsporum gypseum Microsporum nanum Diagnóstico Clínico • Lâmpada de Wood: – Lâmpada de UV d 356 nm ( UV longo); – Lesões com Fluorescência x não fluorescente; RadiaçãoUV (356 nm) = Lâmpada de Wood =pelos fluorescentes OBS: no teste da lâmpada pode haver falha no diagnóstico -> direciona o raspado. 3 COLETA DE AMOSTRAS PARA EXAME DIRETO: *RASPADOS E AVULSÃO DE PELOS DAS BORDAS DAS LESÕES; *RETIRADAS DE CROSTAS; *DESCAMAÇÕES; *RASPADOS DE MATERIAL DE ASPECTO ESPONJOSO DE UNHAS; *FRAGMENTO DE UNHA, CASCO, CHIFRE DA ÁREA AFETADA; O MATRIAL COLETADO PODERÁ SER ACONDICIONADO EM PAPEL ESTÉRIL (ENVELOPE, PAPEL MANILHA, ETC.) NÃO NECESSITANDO DE MANTER SOB REFRIGERAÇÃO. PODERÁ SER ACONDICIONADO EM TUBOS DE ENSAIO, PLACAS DE PETRI, SACOS PLÁSTICOS, FRASCOS DE VIDRO COM TAMPA; NESSE CASO HÁ NECESSIDADE DE MANTER O MATERIAL SOB REFRIGERAÇÃO, EVITANDO A PROLIFERAÇÃO BACTERIANA. Diagnóstico Laboratorial Rotina: Microscopia Direta Exame direto raspado de fâneros (elementos com queratina: pele, pelos, casco, chifre, unha..). Montagem de Lâmina com Clarificante: *Hidróxido de sódio (10 a 30%) *Hidróxido de potássio (10 a 15%) Ou *Calcofluor (corante fluorescente) OBS: Crosta: Tritura com gral e pistilo -> colocar uma amostra na lâmina -> usar clarificante (NaOH ou KOH) -> lamínulas Montagem de Lâmina / Microscopia Direta Exame direto de raspado de pele: Artroconídios Ectothrix 4 Exames histopatológicos Tipos de colônia Isolamento em meios de cultura seletivos: Ágar Seletivo Para Fungo Patogênico, Ágar Mycosel, etc... A- Pulverulenta B- Algodonosa Montagem de lâminas para microscopia a partir da colônia: • Utilização de Azul de algodão OBS: Meios com Cloranfenicol e siplescimida (seletivo para dermatófitos) GêneroMicrosporum Microsporum canis - algodonosa branca, pig. amarelo, septação larga -> macroconídeo. Microsporum gypseum (bovinos) – pulverulenta, creme, septo e membrana pequenas e extremidade reta Microsporum nanum (suíno) – pulverulenta, creme, macroconídeo OBS: Observar colônia macroscopicamente, microscopicamente e por testes bioquímicos. 5 TESTES LABORATORIAIS PARA IDENTIFICAÇÃO DE Microsporum spp • (1)UREASE. • (2)PERFURAÇÃO DO PELO HUMANO “IN VITRO”. • (3)PRODUÇÃO DE CONÍDIOS EM AGAR ARROZ. • (4)TOLERÂNCIA AO FUNGICIDA BENOMYL. Ex: Microsporum canis (1) = +; (2) = +; (3) = +; (4) = -. Gênero Trichophyton T. bovis - clamidoconídeo Trichophyton rubrum (bovino, humanos) – colônia vermelha Trichophyton mentagrophytes – colônia algodonosa branca, macroconídeo alongados com 3 a 6 septações, hifas com laços na extremidade. Trichophyton verrucosum (bovinos – crostas) – colônias verrugosas, algodonoso branca, baixo, hifas e clamidoconideos. Trichophyton terrestre – algodonosa branca, hifas e macroconídio curtos e presos a hifa. TESTES LABORATORIAIS PARA IDENTIFICAÇÃO DE Trichophyton spp *CRESCIMENTO EM AGAR CASEÍNA PÚRPURA-BROMOCRESOL GLICOSE. *UREASE. *PERFURAÇÃO DO PELO HUMANO “IN VITRO”. *CRESCIMENTO A 37ºC. *CRESCIMENTO EM AGAR TRICHOPHYTON DE 1 A 7. EXEMPLOS DE TESTES PARA Trichophyton: Trichophyton rubrum = Trichophyton agar: T1, T2, T3, T4, T5 e T7 (++) T6 (+, -). Perfuração do pelo = (-) Crescimento a 37ºC = (+) Urease = (+) Agar Bromocresol púrpura = (+) Trichophyton equinum = Trichophyton agar: T2, T3, T4 e T7 (-) T1 (+, -) T5 (+). Perfuração do pelo = -(+) Crescimento a 37ºC = (+) Urease = (v) Agar Bromocresol púrpura = -(+) Teste de perfuração do pelo 6 Trichophyton mentagrophytes, Teste de perfuração POSITIVO. Trichophyton rubrum, Teste de perfuração NEGATIVO. Epidermophyton floccosum (Pé-de-atleta) Apresenta colônias algodonosas, creme, macroconídio duplo. Tiabendazole
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