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Aula: Líquido cefalorraquidiano Disciplina: Líquidos corporais Profa: Raissa Guará Curso: Biomedicina LÍQUIDO CEFALORRAQUIDIANO ❖ LCR ou Liquor ❖ Formado nas cavidades ventriculares do sistema nervoso central (SNC) nos plexos coróides ➢ Cerebelo e coluna espinal dorsal. ❖ Formado em duas etapas: ➢ Primeira - filtração passiva do sangue, através do endotélio capilar coroidal; ➢ Segunda - secreção ativa pelo ep. monoestratificado (sist. neuroendócrinos e hormonais) As duas principais funções do LCR são relacionadas à homeostase: proteção e circulação. • Constitui um eficiente amortecedor de choques para proteger o encéfalo e a medula espinhal de impactos. • Em sua função circulatória, o líquido distribui substâncias nutritivas filtradas do sangue e remove as impurezas e substâncias tóxicas produzidas pela célula do encéfalo e da medula espinhal. Produção: ❖ Diaria; ❖ Cerca de 500 mL/dia. Função: ❖ Nutrição; ❖ Excreção de produtos do metabolismo; ❖ Manutenção da homeostase; ❖ Proteção / amortecimento. Líquor Uma vez que o LCR é um material biológico com alto potencial de contaminação durante sua coleta e manuseio, é fundamental a utilização de equipamentos de proteção individual, e sua manipulação in vitro feita em câmara de fluxo laminar vertical sempre que possível. COLETA DE ESPÉCIME O exame do líquor pode ajudar a diagnosticar uma série de doenças. Para isso, é necessário obter uma amostra desse fluido, através de uma punção que pode ser: lombar, suboccipital, ventricular. COLETA DE ESPÉCIME ❖ Procedimento invasivo ➢ Assinatura do TCLE (Resolução 196 do CNS, 10/10/1996) ❖ Realizada na maioria das cavidades do SNC: ➢ Punção lombar (L3 e L4, L4 e L5 ou L5 e S1); ➢ Punção suboccipital (occipital e C1); ➢ Punção ventricular. ❖ São coletados de 10 a 20 mL de LCR; ❖ Cerca de 3 tubos estéreis: ➢ Sem anticoagulante ➢ Numerados de forma sequencial; Tubo 1 - Análise bioquimica e imunológica; Tubo 2 - Procedimentos microbiológicos; Tubo 3 - Contagem celulares. ▪ Coleta líquor: Como o procedimento diagnóstico é invasivo, o exame de LCR só pode ser realizado após assinatura do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (TCLE), pelo paciente ou por seu representante legal; A coleta da amostra de líquor é de responsabilidade do médico requisitante e das três vias clássicas para coleta, sendo a lombar a mais utilizada na rotina Transporte e armazenamento: A amostra coletada deve chegar ao laboratório o mais rápido possível, no máximo em 2 horas, pois, após esse tempo, podem ocorrer degradação e/ou alterações morfológicas de hemácias, leucócitos e outros tipos celulares; A temperatura de armazenamento do líquor nativo deve estar entre 5 °C e 12 °C, para minimizar danos às células Preparo da amostra: No setor de citologia/hematologia, a amostra de LCR deve ser fresca e centrifugada, para a análise visual, e fresca, não centrifugada e devidamente homogeneizada, para a contagem de leucócitos e hemácias em câmaras. Controle de qualidade das contagens: O controle de qualidade da contagem global de células, em câmara de Neubauer no LCR, pode ser feito diluindo-se uma amostra de sangue total pré- selecionada e comparando-se os resultados obtidos manualmente na câmara com os obtidos em analisadores hematológicos automatizados, com leucócitos procede-se da mesma forma EXAMES LABORATORIAIS ● Todos os setores laboratoriais; ● Realizado no LCR, avaliação: ○ Física; ○ Citológica; ○ Bioquímica; ○ Microbiológica; ○ Imunológica. Fisíco Etapa inicial Verifica aspecto e cor Normal - Limpido e incolor, com viscosidade similar à água; Xantocrômico (comum em rescem nascidos principalmente prematuros devido a imaturidade da função hepática) Anormal - Levemente turvo, turvo ou turvo leitoso: (Leucocitos, proteínas, lípidos, microrganismos e hemacias) Citológica Contagens celulares ❖ Câmara de Neubauer- amostras não diluídas e bem- homogeneizadas ➢ Amostras sanguinolenta, faz diluição em solução salina. ❖ LCR adulto - 0 a 5 leucócitos por mL; ❖ A quantidade de células ou o tipo celular encontrado e/ou predominante pode determinar o tempo de evolução da patologia e o agente ou grupo de agentes causais. Citológica O encontro de determinados tipos celulares caracteriza certos grupos de patologias. ▪ O predomínio de polimorfonucleares neutrófilos está, habitualmente, relacionado a meningites bacterianas; ▪ O encontro de eosinófilos no LCR pode indicar a vigência de processos infecciosos parasitários, como a neurocisticercose; ▪ A presença de hemácias no líquor indica a ocorrência de hemorragia, que pode ter ocorrido no momento da punção ou ser devido a um processo hemorrágico que atingiu o sistema LCR. É preciso reafirmar que, somente a análise do comportamento citológico não é suficiente para se fechar um diagnóstico, sendo necessária a determinação dos parâmetros bioquímicos, no mínimo. Bioquímico Glicose ❖ Concentração normal - 50 a 80 mg/dL; ❖ Hipoglicemia: ➢ Infecção do SNC; ➢ Transporte de glicose comprometido; ➢ Atividade glicolítica aumentada do SNC; ➢ Carcinoma metastático. Proteínas ❖ Derivadas de proteínas plasmáticas ❖ Variam normalmente de 15 a 45 mg/dL ❖ Neonatos e adultos acima de 40 anos ➢ Concentrações mais altas. Estágio inicial da meningite se encontra elevada (>40 mg/100 mL). Lactato ❖ Metabolismo anaeróbio do SNC; ❖ Concentração normal - 11 a 22 mg/dL; ❖ Auxilia na diferenciação das meningites: ➢ Meningite viral - raramente eleva além de 30 mg/dL; ➢ Outras formas - niveis de lactato acima de 35 mg/dL. Cloreto ❖ relacionada à osmolaridade do meio extracelular e alterações do equilíbrio ácido-básico; ❖ Valores normais: ➢ 702 a 749 mg% em recém-nascidos ➢ 680 a 750 mg% em adultos ❖ Concentrações baixas nos processos crônicos e na neurotuberculose. Procedimentos Microbiológicos Complementares aos diagnósticos ❖ normalmente são realizados na alteração (exames físicos e bioquímicos); ❖ ou necessidade de continuidade da investigação. Exames bacterioscópicos Coloração de Gram - Sensibilidade 60 a 90%; Coloração de Ziehl-Neelsen ou fluorescente rodamina - Mycobacterium turberculosis; Tinta nanquim ou corante nigrosina - sensibilidade 25 a 50%, Cryptococcus neoformans; Cultura e testes de sensibilidade ❖ Sedimento centrifugado e inoculo em: ➢ Meningite bacteriana - caldo tioglicolato, placas de ágar sangue, chocolate e MacConkey; ➢ Meningite fúngica - placa com ágar dextrose de Sabouraud; ➢ Suspeita de micobactérias - caldo e ágar Middlebrook. Tecnicas moleculares ❖ Reação de polimerização em cadeia (PCR) ➢ Identificação de agentes infecciosos Teste imunológicos ❖ Método rápido para detecção de agentes patológicos da meningite; ❖ Sensibilidade e especificidade variável de acordo o ensaio; ❖ Falso-positivo e/ou falso negativos, dificultam a interpretação. ❖ Métodos utilizados: ❖ coagulação, contraimunoeletroforese, ensaio imunoabsorvente ligado a enzimas, teste com anticorpo treponêmico fluorescente, aglutinação do látex, radioimunoensaio e teste do Venereal Disease Research Laboratory (VDRL). Doenças que podem ser diagnosticadas pelo líquor Neurocisticercose: • O exame do líquido cefalorraquidiano permite o diagnóstico e o estabelecimento da existência ou não de um processo inflamatório relacionado à neurocisticercose; • A fase inflamatória caracteriza-se por discreta pleocitose, com a presença de neutrófilos e/ou eosinófilos, aumento dos teores de globulinas gama, que reflete a presença de imunoglobulinas e positividade das reações de fixação de complemento, imunofluorescência, hemaglutinação passiva e ELISA; Meningites: • É uma inflamação das meninges, membranas que envolvem o cérebro e a medula espinhal; • Se o médico suspeita de meningite, ele solicita a coleta de amostras de sangue e líquido cerebroespinhal (líquor);• O aspecto do líquor funciona como um indicativo. O líquor normal é límpido e incolor, enquanto nos processos infecciosos, ocorre o aumento de elementos figurados (células), causando turvação, podendo ficar acinzentado Esclerose múltipla: • Tem no exame de LCR um excelente método diagnóstico e de acompanhamento; • Marcadores biológicos são proteínas do líquido cefalorraquidiano que apresentam correlação com a atividade e a progressão da doença e a resposta ao tratamento. • A neurotuberculose é um tipo de tuberculose que invade o sistema nervoso central, considerada uma grave infecção causada pela bactéria que transmite a tuberculose comum; • A doença acontece quando o bacilo cai na corrente sanguínea e entra no sistema nervoso; • O diagnóstico e, consequentemente, o tratamento é feito com base nos achados clínicos associados à pleocitose liquórica e às alterações bioquímicas, sobretudo hiperproteinorraquia, hipoglicorraquia e aumento da atividade enzimática; Neurotuberculose: • O líquor por se encontrar em um local hermeticamente fechado e estéril, pode ser modificado por doenças infecciosas e não infecciosas que alteram sua composição e produção. • A avaliação laboratorial do LCR contribui para a definição diagnóstica de diferentes doenças, auxiliando no diagnóstico e tratamento. Obrigada!!! Slide 1: Aula: Líquido cefalorraquidiano Slide 2: LÍQUIDO CEFALORRAQUIDIANO Slide 3 Slide 4 Slide 5 Slide 6 Slide 7: Líquor Slide 8: COLETA DE ESPÉCIME Slide 9: COLETA DE ESPÉCIME Slide 10 Slide 11 Slide 12 Slide 13 Slide 14 Slide 15 Slide 16: EXAMES LABORATORIAIS Slide 17: Fisíco Slide 18: Citológica Slide 19: Citológica Slide 20 Slide 21 Slide 22 Slide 23: Bioquímico Slide 24 Slide 25: Procedimentos Microbiológicos Slide 26 Slide 27 Slide 28 Slide 29 Slide 30: Doenças que podem ser diagnosticadas pelo líquor Slide 31: Meningites: Slide 32: Esclerose múltipla: Slide 33 Slide 34 Slide 35 Slide 36