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[Digite texto] 2019 Apostila Ácido desoxirribonucleico e replicação do DNA Unidade 3 1 UNIDADE III Ácido desoxirribonucleico e replicação do DNA Introdução Nesta unidade III, abordaremos o ácido desoxirribonucleico e suas propriedades e como funciona o processo de replicação deste. Ácido desoxirribonucleico DNA ou ácido desoxirribonucleico é a molécula que contém o código genético. O nucleotídeo DNA é constituído de: UMA BASE NITROGENADA (carbono e nitrogênio); UMA PENTOSE (açúcar com cinco carbonos); UM GRUPO FOSFATO. 2 Grupo fosfato Este é formado por um anião trivalente (PO43-) constituído por um átomo de fósforo central e quatro átomos de oxigénio. Pentose (DNA) Pentose: é um tipo de açúcar que apresenta moléculas formadas por cinco átomos de carbono (monossacarídeos de 5 carbonos). A desoxirribose é a pentose presente na composição química do DNA. Bases nitrogenadas (DNA) As quatro bases nitrogenadas (divididas em dois grupos) que fazem parte do DNA são as: PURINAS: ADENINA (A) e GUANINA (G) PIRIMIDINAS: CITOSINA (C) e TIMINA (T). 3 OBS: No RNA, a Timina (T) é substituída pela Uracila (U). ADENINA (A) está emparelhada com TIMINA (T) por meio de DUAS PONTES DE HIDROGÊNIO. GUANINA (G) está emparelhada com CITOSINA (C) por meio de TRÊS PONTES DE HIDROGÊNIO. PS: No RNA, a pirimidina TIMINA (T) presente no DNA é substituída pela pirimidina URACILA (U). Ligações fosfodiéster Os nucleotídeos no DNA são interligados por LIGAÇÕES FOSFODIÉSTER. 4 Sentido 5’→3’ As duas fitas da molécula de DNA orientam-se em direções opostas (cadeias antiparalelas), de forma que uma apresenta a orientação 5´ → 3´, e a outra, 3´ → 5´. 5 Replicação do DNA A replicação da molécula de DNA, também conhecida por duplicação ou polimerização, é um fenômeno genético que assegura a autoduplicação das informações contidas nos cromossomos, especificamente nos genes. Esse processo ocorre durante a fase S da interfase (fase do ciclo celular, que prepara a célula para entrar em divisão), sendo necessário para a manutenção orgânica do indivíduo (crescimento, reposição e regeneração). Replicação semiconservativa Processo pelo qual cada fita na dupla hélice atua como modelo para a síntese de uma nova fita complementar. Enzimas importantes para replicação do DNA Topoisomerase: é responsável por reduzir a supertorção no DNA; Helicase: é responsável pela separação (abertura) das duas fitas da molécula de DNA; Primase: sintetiza primers de RNA complementares à fita de DNA; DNA polimerase III: responsável por formar o DNA a partir de nucleotídeos de DNA sobre um molde de DNA; DNA polimerase I: responsável por retirar o primer (RNA) e adicionar o nucleotídeo de DNA correspondente; DNA Ligase: responsável por unir (ligar) segmentos separados de DNA. 6 O processo de replicação começa pela enzima Topoisomerase que distorcerá a molécula de DNA num determinado ponto para iniciar a replicação. Após a distorção da molécula, entra em cena a Helicase, que inicia a separação da dupla fita (quebrando as pontes de hidrogênio das bases nitrogenadas), assim abre a dupla fita e forma a forquilha de replicação. Nesse momento, a Primase coloca os primers para funcionar como iniciadores da replicação. Uma fita receberá apenas um primer e, após isso, a DNA polimerase III começa adicionar os nucleotídeos, usando a própria fita de DNA como molde. Essa primeira fita complementar é chamada de fita mestre ou contínua. Já a outra fita terá adição de vários primers espalhados em segmentos, e estes segmentos receberão o nome de Fragmentos de Okasaki. Entre um fragmento ao outro, a DNA polimerase III começa a preencher com os nucleotídeos complementares. Esta fita será denominada fita retardada. Após o término do preenchimento dos nucleotídeos, a DNA polimerase I começa remover os primers e adicionar os nucleotídeos complementares. Feito isso, a DNA ligase vem unindo (ligando) os trechos de DNA que não estão ligados. Assim, termina a replicação do DNA, dando origem a duas fitas idênticas. 7 Referências LARA, F. J. S. Ácidos Nucleicos. Sociedade Brasileira de Genética, 1995. LODISH et al. Molecular Cell Biology. 4. ed. New York: W.H. Freeman, 1999. LUBERT, S. Bioquímica. 4. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 1996. STRACHAN; READ. Human molecular genetics. 2. ed. Oxford: BIOS, 2000.