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VICTORIA PORTO SOARES NUTRIÇÃO: MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS E PARASITOLOGIA PROFESSORA FERNANDA RABAIOLI DA SILVA CANOAS, 2024 INTRODUÇÃO Os microrganismos, invisíveis a olho nu, desempenham um papel significativo em nossa vida cotidiana. Eles estão presentes em todos os lugares, desde o ar que respiramos até os alimentos que consumimos. Neste experimento caseiro, exploraremos o mundo dos microrganismos, concentrando-nos em bactérias e fungos. Nosso objetivo é compreender como esses microrganismos podem contaminar o meio ambiente e, consequentemente, afetar nossa saúde. Ao cultivar bactérias e fungos em um ambiente controlado, seremos capazes de observar diretamente sua presença e compreender melhor suas características e comportamentos. Este experimento nos ajudará a explorar a importância da higiene e as práticas de manipulação adequadas para evitar a contaminação. Durante o processo, estaremos atentos às condições ideais para o crescimento desses microrganismos, bem como aos métodos de prevenção e controle de contaminação. Ao final, esperamos obter insights valiosos sobre a existência e propagação de microrganismos no nosso ambiente e a importância de medidas preventivas para garantir a saúde e a segurança. EXPERIMENTO - CULTIVANDO BACTÉRIAS E FUNGOS Objetivo do Experimento: Verificar a existência de microrganismos e como eles contaminam o meio de cultura. Materiais Utilizados para a Realização do Experimento: • Gelatina incolor; • Caldo de carne; • Água necessária para o preparo; • 5 colheres de sopa de água para o preparo da gelatina; • 1 xícara de água para dissolver o caldo de carne; • Recipiente e colher para a mistura/ preparo da gelatina e do caldo de carne; • Placas petri; • Amostras: alface sem higienização alguma + alface apenas lavado em água corrente + alface higienizado de forma completa e correta; • Cotonetes para coleta das amostras; • Película PVC (para vedar as amostras e não haver contaminação externa); • Caneta marcador para identificação das amostras; • Caixa para resguardar as amostras em ambiente escuro e que a temperatura fique de preferência entre 20 e 30 graus celsius. Preparo do Meio de Cultura: 1. Higienizei de forma correta a bancada e os utensílios que utilizei para realizar o experimento; 2. Higienizei minhas mãos com sabonete e álcool para diminuir as chances de contaminação dos meios de cultura para as futuras amostras; 3. Preparei primeiramente a gelatina incolor de acordo com o rótulo da mesma: - Hidratei a gelatina em 5 colheres de sopa de água em temperatura ambiente; - Esperei 1 minuto; - Coloquei a gelatina 15 segundos no micro-ondas; 4. Dissolvi o caldo de carne em uma xícara de água quente; 5. Misturei a gelatina após retira-lá do micro-ondas com o caldo de carne já dissolvido em água quente; 6. Coloquei este conteúdo nas placas petri; (Em razão da quantidade de líquido, realizei o preenchimento de 6 placas petri.) 7. Fechei as placas petri com as tampas das mesmas e com filme PVC, para aguardá-las solidificar e, desta forma, poder dar prosseguimento com o experimento. A espera pela solidificação ficou em torno de 6 horas, acredito que tenha demorado mais pois o líquido ainda estava quente por conta da água quente utilizada no preparo. Colheita das Amostras: Com os meios de cultura já solidificados, dei início à colheita das amostras. 1. Higienizei (novamente) de forma correta a bancada e os utensílios que utilizei para realizar o experimento; 2. Higienizei (novamente) minhas mãos com sabonete e álcool para diminuir as chances de contaminação dos meios de cultura para as futuras amostras; 3. Separei, preparei e colhi as amostras: - Primeira amostra: Alface sem higienização alguma. (Colhi a amostra com cotonete limpo da alface sem higienização.) - Segunda amostra: Alface apenas lavado em água corrente. (Primeira higienização do alface feita apenas em água corrente - folha por folha e já fazendo a seleção de folhas ruins para descarte.) (Colhi a amostra com cotonete limpo de uma folha de alface higienizada apenas em água corrente.) - Terceira amostra: Alface higienizado primeiro em água corrente, depois colocado de molho por 15 minutos em água com solução desinfetante para frutas, legumes e verduras, e por fim lavado/ enxaguado novamente em água corrente. (Coloquei as folhas de molho em água com solução desinfetante para frutas, legumes e verduras - 10ml ou uma tampinha do produto para 1 litro de água. Deixado de molho durante 15min.) (Após os 15min de molho, lavei novamente folha por folha em água corrente.) (Colhi a amostra com cotonete limpo de uma folha de alface higienizada por completo.) - Quarta amostra: Ambiente interno da geladeira. (Colhi a amostra com cotonete limpo do ambiente interno da geladeira.) - Quinta amostra: Esponja em uso da cozinha. (Colhi a amostra com cotonete limpo da esponja de lavar louça que estava sendo utilizada na cozinha.) - Sexta amostra: Mãos higienizadas com sabonete e álcool. (Sabonete e álcool utilizado para higienizar as mãos.) (Colhi a amostra com cotonete limpo da mão higienizada.) Fechando e Armazenando o Experimento: - Todas as amostras colhidas foram fechadas com a própria tampa da placa petri, além de receberem uma camada de filme PVC para melhor vedação e proteção das amostras. - Foram identificadas com caneta marcador. 1 - Alface sem higienização. 2 - Alface higienizada apenas em água corrente. 3 - Alface higienizada de maneira completa. GEL. - Ambiente interno da geladeira. ESP. - Esponja em uso da cozinha. MÃO - Mão higienizada de maneira completa. (Amostras fechadas, vedadas e identificadas - recém-colhidas.) (Amostras colocadas dentro de uma caixa de MDF.) (Caixa em MDF devidamente fechada para melhor resultado durante o experimento.) Análise das Amostras: DIA 01 Não reparei nenhuma mudança nas amostras. DIA 02 Reparei que se formaram muitos pontinhos brancos na amostra da esponja, nas outras amostras apenas algumas “gotículas” mais opacas, que aparecem como uma sombra nas fotos. (1) Alface sem higienização (2) Alface higienizada apenas em água corrente (3) Alface higienizada corretamente (G) Ambiente interno da geladeira (E) Esponja em uso da cozinha (M) Mão higienizada de maneira completa DIA 03 Começaram a aparecer mudanças mais significativas. Todas as amostras parecem estar “derretendo”. As amostras de alface não higienizadas (1) e não higienizadas de maneira completa (2) já apresentam pontos escuros, sendo a higienizada apenas em água corrente (2) a que apresenta mais “focos” de pontos escuros de todas as amostras até agora. A amostra de alface higienizada de forma correta (3) ainda não apresentou nenhuma mudança visível. As outras amostras não demonstraram mais alterações, apenas a amostra do ambiente interno da geladeira (G) que continua com os pontinhos brancos. DIA 04 Os pontos escuros nas amostras de alface não higienizada (1) e alface higienizada apenas em água corrente (2) continuam crescendo e se multiplicando, sendo perceptível a diferença de apenas um dia entre as fotos. A alface higienizada de forma correta (3) continua sem apresentar alterações drásticas, mas parece estar criando uma película fosca sobre ela. Os pontos brancos da amostra da esponja (E) aumentaram de tamanho. A amostra da geladeira (G) não aparenta alteração, porém a amostra da mão (M) parece ter um ponto escuro único. As amostras estão ainda mais “derretidas”, aparentando liquidez praticamente total. DIA 05 Os pontos escuros nas amostras de alface não higienizada e alface higienizada apenas em água corrente não parecem ter se multiplicado mais, porém aparentam estar maiores. A alface higienizada de forma correta continua sem apresentar alterações, apenas parece ter ficado com aparência mais fosca, como se tivesse criadouma “película” plástica em cima da amostra. A amostra do ambiente interno da geladeira, assim como a amostra da alface higienizada corretamente, aparenta ter criado uma “película” fosca. Os pontos brancos da amostra da esponja aumentaram de tamanho, e aparentemente viraram círculos, onde suas bordas externas ficaram finas e de cor esbranquiçada, mas sem nenhum ponto escuro aparente. Já, a amostra da mão higienizada de maneira completa, se mostrou visível agora um ponto grande escuro (na lateral esquerda em baixo na imagem). Alface sem higienização Alface higienizada apenas em água corrente Alface higienizada corretamente Ambiente interno da geladeira PS. Todas as amostras no quinto dia estavam de forma líquida. Esponja em uso da cozinha Mão higienizada de maneira completa CONCLUSÃO DO EXPERIMENTO Com base nos resultados obtidos, é possível concluir que a presença de microrganismos foi observada em todas as amostras analisadas, indicando contaminação. As amostras de alface não higienizada e higienizada apenas em água corrente apresentaram um aumento significativo na quantidade e tamanho de pontos escuros ao longo dos dias, sugerindo uma rápida proliferação bacteriana nessas condições. Por outro lado, a alface higienizada de forma correta mostrou uma resistência maior à contaminação, apresentando apenas pequenas alterações superficiais ao longo do experimento. Além disso, tanto a amostra da esponja quanto a da mão higienizada exibiram sinais de contaminação, com a formação de pontos brancos e escuros, respectivamente. Esses resultados ressaltam a importância da higienização adequada tanto de alimentos quanto de superfícies de contato, como esponjas e mãos, para prevenir a proliferação de microrganismos prejudiciais à saúde. Ao longo dos dias de observação, foi notado que todas as amostras apresentaram uma transição para o estado líquido, indicando uma possível decomposição dos meios de cultura e dos microrganismos presentes. Esse fenômeno sugere uma atividade metabólica dos microrganismos, que podem ter contribuído para a degradação dos componentes dos meios de cultura e das amostras. Essa liquidez observada nas amostras ao longo do experimento reforça a hipótese de contaminação microbiológica, uma vez que a presença de microrganismos pode promover a fermentação e a produção de enzimas que contribuem para a decomposição dos substratos. Essa transformação das amostras em um estado líquido também ressalta a importância do armazenamento e manipulação adequados dos materiais utilizados no experimento, a fim de minimizar a contaminação e preservar as condições ideais para a análise microbiológica. Em suma, os resultados deste experimento destacam a importância da higiene e da manipulação adequada de alimentos e superfícies na prevenção da contaminação por microrganismos, contribuindo para a promoção da saúde e segurança alimentar. REFERÊNCIAS Universidade La Salle. Microbiologia de Alimentos e Parasitologia. (2024). 1a ed. [E-book] Silvia Souza. (2020). Experimento: cultura de microrganismos - Como fazer meio de cultura caseiro. [Vídeo]. Disponível em: https://www.youtube.com/watch?v=3Rbnw7OZCBI [Acesso em: 20 de abril de 2024] Vítor Gomes. (2021). Meio de cultura caseiro (Para crescimento de fungos e bactérias) - Experimento de Microbiologia. [Vídeo]. Disponível em: https://www.youtube.com/watch? v=5L5JNS1Hu7g [Acesso em: 20 de abril de 2024] Aprendendo em Casa. (2022). PRÁTICA INVESTIGATIVA MEIO DE CULTURA DE FUNGOS E BACTÉRIAS. [Vídeo]. Disponível em: https://www.youtube.com/watch? v=QpbhdCQS63A [Acesso em: 20 de abril de 2024] Oliveira, S. Escolhendo Bem. (2023). Conheça o Universo dos Micróbios: A Vida Invisível. Disponível em: https://escolhendobem.com.br/desvende-os-segredos-dos-microbios-a-vida- invisivel/ [Acesso em: 25 de abril de 2024] Universidade La Salle. Manual para apresentação de trabalhos acadêmicos da Universidade La Salle [recurso eletrônico] / [elaboração Cristiane Pozzebom, Samarone Guedes Silveira]. – 3. ed. – Dados eletrônicos. – 2021. Disponível em: https://www.unilasalle.edu.br/uploads/ files/c197e1076ab70f6ce0963330bb2185df.pdf [Acesso em: 19 de abril 2024]