Aula - Técnicas histológicas

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<p>Disciplina: Histologia</p><p>Prof. Fabrício Alves de Oliveira</p><p>Preparo de tecidos para estudo em microscopia de</p><p>luz e eletrônica</p><p>Relati</p><p>srn 1</p><p>moleoo.</p><p>A m O</p><p>d</p><p>cel dt r pooents</p><p>nt</p><p>t li</p><p>m 100 m 1</p><p>tm= O-� m</p><p>mm rn-5 m</p><p>�m IO 6 m</p><p>nm rn-9 m</p><p>A 1 IO m</p><p>1</p><p>Microscópio de Luz (ML)</p><p>Microscópio Eletrônico de</p><p>Transmissão MET</p><p>Microscópio Eletrônico de</p><p>Transmissão</p><p>- Imagem produzida a partir da</p><p>passagem de elétrons pelo tecido</p><p>-Estruturas elétron-densas:desviam</p><p>a passagem dos elétrons</p><p>-Estruturas elétron-lúcidas:</p><p>permitem a passagem dos elétrons</p><p>Microscópio Óptico</p><p>X</p><p>Microscópio Eletrônico</p><p>-Menor limite de resolução</p><p>-Feixe de luz</p><p>-Maior limite de resolução</p><p>-Feixe de elétrons</p><p>- Utilizado no estudo de superfícies</p><p>celulares</p><p>Microscópio Eletrônico de</p><p>Varredura</p><p>Planos de corte histológico</p><p>Célula</p><p>Tecnologia</p><p>Conhecimento</p><p>Preparo de tecidos para estudo em microscopia de luz e</p><p>eletrônica</p><p>Etapas:</p><p>Coleta</p><p>Fixação</p><p>Desidratação</p><p>Inclusão</p><p>Microtomia</p><p>Coloração</p><p>Montagem</p><p> Coleta: Obedecem a normas dos comitês de ética.</p><p> Fixação: conservação das propriedades biológicas</p><p>do tecido.</p><p>- Evita autólise</p><p>- Impede atividade bacteriana</p><p>- Aumenta afinidade das estruturas</p><p>celulares aos corantes (MO) ou</p><p>aumenta o contraste (ME)</p><p>- Específica para cada tipo de material</p><p>biológico</p><p> Desidratação: retirada de água dos tecidos</p><p>- realizada em soluções crescentes de álcoois e</p><p>cetonas</p><p> Inclusão: infiltração do tecido em polímeros</p><p>plásticos com o objetivo de enrijecer o tecido para a</p><p>próxima etapa (microtomia)</p><p> Microtomia: consiste no corte fino do material (0,1mm a</p><p>5mm ) a necessário para a confecção das lâminas (ML) ou</p><p>para a contrastação (ME)</p><p>ML: Inclusão do tecido em</p><p>parafina</p><p>ME: Inclusão do tecido em</p><p>resinas mais resistentes</p><p> Coloração: Consiste no</p><p>tratamento do tecido com</p><p>determinados produtos</p><p>químicos de forma a permitir</p><p>sua visualização</p><p>-Técnicas histológicas:</p><p>baseada principalmente na</p><p>afinidade dos corantes pelas</p><p>diferentes estruturas celulares</p><p>• Corantes ácidos: afinidade</p><p>pelas estruturas básicas como</p><p>as proteínas</p><p>• Corantes básicos: afinidade</p><p>pelas estruturas celulares</p><p>ácidas (DNA, RNA)</p><p> Coloração</p><p>-Técnicas citoquímicas: finalidade de localizar as diversas</p><p>moléculas presentes nas células (DNA, RNA,</p><p>catecolaminas, proteínas, polissacarídeos, enzimas)</p><p>-Técnicas Imunocitoquímicas: finalidade de localizar</p><p>proteínas específicas na célula</p><p> Montagem: confecção e conservação de</p><p>lâminas para o observação em ML</p>