roteiro cromatografia

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LABORATÓRIO DE QUÍMICA ORGÂNICA 
CROMATOGRAFIA EM COLUNA E EM CAMADA DELGADA 
 
ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO 
CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 
E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br 
 
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INSTRUÇÕES GERAIS 
 
 
1. Neste experimento, você irá separar frações e componentes orgânicos a partir 
de um extrato vegetal utilizando procedimentos cromatográficos. 
 
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da 
experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do 
VirtuaLab. 
 
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial 
VirtuaLab” presente neste Roteiro. 
 
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as 
instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 
 
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação 
de Resultados”. 
 
 
 
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RECOMENDAÇÕES DE ACESSO 
 
PARA ACESSAR O VIRTUALAB 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 
4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 
5. Realize teste de velocidade da internet. 
 
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos 
Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção 
de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ 
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com 
nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por 
Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! 
ATENÇÃO: 
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER 
ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. 
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. 
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO 
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE 
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 
https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/
 
 
 
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PERGUNTAS FREQUENTES 
 
 
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. 
 
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> 
“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o 
computador. 
 
 
 
 
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2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente 
novamente. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Verifique se o navegador está atualizado. 
 
 
 
 
 
 
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DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
● Acetona; 
● Algodão; 
● Bastão de vidro; 
● Béquer de 50 mL; 
● Béquer de 1000 mL; 
● Coluna Cromatográfica; 
● Erlenmeyer de 100 mL; 
● Extrato de espinafre; 
● Funil simples; 
● Hexano/acetona; 
● Hexano; 
● Lápis; 
● Papel filtro; 
● Pipetas de Pasteur; 
● Pisseta; 
● Placa cromatográfica; 
● Régua; 
● Sílica em gel; 
● Suporte da coluna cromatográfica; 
● Tubo capilar; 
● Vidro de relógio. 
 
 
 
 
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PROCEDIMENTOS 
 
CROMATOGRAFIA EM COLUNA 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Inicialmente, coloque os equipamentos de proteção individual localizados no 
“Armário de EPIs”. 
 
2. PREPARANDO A COLUNA CROMATOGRÁFICA 
 
Coloque o algodão na bureta com o auxílio do bastão de vidro. Logo depois, acople o 
funil. Adicione a solução de hexano, armazenada na pisseta, no béquer contendo sílica 
em gel (béquer 1). Com o auxílio do bastão de vidro, misture o hexano com a sílica em 
gel. Em seguida, transfira o conteúdo do béquer 1 para bureta. Depois, sedimente o 
adsorvente da proveta com os dedos. 
 
3. REALIZANDO A CROMATOGRAFIA EM COLUNA 
 
Posicione o Erlenmeyer 1 abaixo da bureta. Abra a torneira da bureta. Note que o 
extrato de espinafre será adicionado à bureta. Quando a quantidade necessária for 
depositada a adição de extrato será interrompida automaticamente. Mantenha o 
Erlenmeyer 1 na bureta e abra a torneira novamente. Observe a adição da solução de 
hexano/acetona na coluna cromatográfica (bureta). Após finalizar a adição da solução 
anterior, abra novamente a torneira e observe a adição da solução de acetona. 
Coloque o Erlenmeyer 1 na bancada após a conclusão da adição de acetona na coluna 
cromatográfica. Observe, de perto, a coluna cromatográfica. 
 
 
 
 
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Mova o Erlenmeyer 2 para a bureta e abra a torneira. Observe o escoamento da 
mancha de líquido amarelo. Retorne o Erlenmeyer 2 para bancada. Mova o 
Erlenmeyer 3 para bureta, abra a torneira e observe o escoamento da mancha azul. 
Retorne o Erlenmeyer 3 para bancada ao final do processo. Mova o Erlenmeyer 4 para 
bureta, abra a torneira e observe o escoamento da mancha verde. Retorne o 
Erlenmeyer 4 para bancada ao final do processo. Observe, de perto, os Erlenmeyer. 
 
 
 
 
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CROMATOGRAFIA EM PAPEL 
 
1. PREPARANDO A PLACA CROMATOGRÁFICA 
 
Com o lápis, trace uma linha na base e outra no topo da placa cromatográfica. Utilizeum tubo capilar para coletar uma amostra do extrato de espinafre do béquer 1 e 
deposite na linha da base da placa cromatográfica. Colete uma amostra do 
Erlenmeyer, utilizando um novo tubo capilar, e aplique sobre a linha da base da placa. 
 
2. ELUINDO A PLACA CROMATOGRAFIA 
 
Transfira a solução de hexano/acetona para o béquer (câmara cromatográfica). 
Adicione o papel filtro dentro do béquer e utilize o vidro de relógio para tampar. 
Aguarde 10 minutos para que a ambientação seja concluída e então destampe o 
béquer. Leve a placa cromatográfica ao béquer e tampe com o vidro de relógio 
novamente. Aguarde 15 minutos até o final da eluição, então aproxime-se do béquer 
para retirar a placa cromatográfica e movê-la para a bancada. 
 
3. COLHENDO OS DADOS OBTIDOS 
 
Posicione a placa ao lado da régua (bancada de medição) para analisar a distância 
percorrida pelas substâncias separadas no processo. Utilize a linha guia para auxiliar 
na observação da distância. 
 
 
 
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4. REPETINDO O EXPERIMENTO 
 
Retorne a placa para bancada. Troque a placa por uma nova, repita a etapa de adição 
das amostras. Retire o papel filtro da câmara cromatográfica e troque por um novo. 
Limpe o conteúdo da câmara e, em seguida, repita o processo de eluição substituído 
a solução de hexano/acetona pela solução de acetona pura. Observe o resultado 
obtido. 
 
5. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação dos Resultados”, localizada nas páginas de 09 a 11 deste 
roteiro, e responda de acordo com o que foi observado nos experimentos, associando 
também com os conhecimentos aprendidos sobre o tema. 
 
 
 
 
 
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AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 
 
 
 
1. Quais os principais adsorventes usados em cromatografia? Que outros adsorventes 
podem ser usados para a cromatografia? 
 
 
 
2. Quais os principais fatores que afetam a ordem de eluição de uma substância em 
uma coluna cromatográfica. 
 
 
 
3. Quais as principais diferenças entre cromatografia de adsorção e partição? 
 
 
 
4. Como se classificam os métodos cromatográficos quanto à técnica e ao mecanismo 
de separação? 
 
 
 
 
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5. Qual o tipo de mecanismo de separação envolvido na cromatografia em camada 
delgada e em cromatografia em coluna? 
 
 
 
6. Duas substâncias que interagem da mesma forma com uma fase estacionária podem 
ser separadas por cromatografia em papel? Explique. 
 
 
 
7. O que é o fator de retenção (Rf) na CCD? Como ele é calculado? 
 
 
 
 
 
 
 
 
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TUTORIAL VIRTUALAB 
 
CROMATOGRAFIA EM COLUNA 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Visualize o armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o 
nome “Armário de EPIs” localizada dentro do painel de visualização no canto superior 
esquerdo da tela. Se preferir, também pode ser utilizado o atalho do teclado “Alt+6”. 
 
 
 
 
 
 
 
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Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas. 
 
 
 
Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo 
do mouse sobre eles. Nesse experimento, é obrigatório o uso de jaleco, máscara, óculos 
e as luvas. 
 
 
 
 
 
 
 
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Feche as portas do armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas. 
 
 
 
 
 
 
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2. PREPARANDO A COLUNA CROMATOGRÁFICA 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+2”. 
 
 
 
Coloque o algodão na bureta clicando com o botão esquerdo do mouse no pote de 
algodão. 
 
 
 
 
 
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Posicione o funil na bureta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele. 
 
 
 
Posicione a pisseta com hexano no béquer contendo sílica em gel clicando na pisseta 
com o botão esquerdo do mouse. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Despeje o hexano no béquer clicando e pressionando o botão esquerdo do mouse sobre 
a pisseta. 
 
 
 
Retorne a pisseta para a bancada clicando com o botão direito do mouse sobre ela. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Misture os compostos clicando no bastão de vidro com o botão direito do mouse e 
selecionando a opção “Misturar béquer 1”. 
 
 
 
Despeje o conteúdo do béquer 1 na bureta clicando no béquer com o botão esquerdo 
do mouse. 
 
 
 
 
 
 
 
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Sedimente o adsorvente presente na bureta clicando com o botão direito do mouse na 
bureta. 
 
 
 
 
 
 
 
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3. REALIZANDO A CROMATOGRAFIA EM COLUNA 
 
Mova o Erlenmeyer 1 para a bureta clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 
 
 
 
Abra a válvula clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Aguarde até que a 
adição do extrato de espinafre esteja completa. 
 
 
 
 
 
 
 
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Abra a válvula da bureta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela e observe 
a adição do hexano/acetona na bureta. 
 
 
 
Abra, novamente, a válvula da bureta e observe a adição da solução de acetona pura. 
 
 
 
 
 
 
 
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Observe a coluna cromatográfica clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a 
bureta. 
 
 
 
Note que uma janela pop-up será exibida no canto superior direito com a visualização 
aproximada. Para fechá-la, clique no “X” com o botão esquerdo do mouse. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Retorne o Erlenmeyer 1 para a posição inicial clicando nele com o botão direito do 
mouse e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
Mova o Erlenmeyer 2 para a bureta clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 
 
 
 
 
 
 
 
 
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Abra a válvula da bureta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Aguarde 
até que a transferência da macha amarela esteja completa 
 
 
 
Retorne o Erlenmeyer 2 para a posição inicial clicando nele com o botão direito do 
mouse e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
 
 
 
 
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Mova o Erlenmeyer 3 para a bureta clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 
 
 
 
Abra a válvula da bureta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Aguarde 
até que a transferência da macha azul esteja completa. 
 
 
 
 
 
 
 
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Retorne o Erlenmeyer 3 para a posição inicial clicando nele com o botão direito do 
mouse e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
Mova o Erlenmeyer 4 para a bureta clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 
 
 
 
 
 
 
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Abra a válvula da bureta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Aguarde 
até que a transferência da macha verde esteja completa. 
 
 
 
Retorne o Erlenmeyer 4 para a posição inicial clicando com o botão direito do mouse 
sobre ele e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
 
 
 
 
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CROMATOGRAFIA EM PAPEL 
 
1. PREPARANDO A PLACA CROMATOGRÁFICA 
 
Visualize as amostras clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Amostras” ou através do atalho do teclado “Alt+4”. 
 
 
 
Marque a base da placa clicando com o botão direito do mouse no lápis e selecionando 
a opção “Riscar base”. 
 
 
 
 
 
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30 
Marque o limite da placa clicando com o botão direito do mouse no lápis e selecionando 
a opção “Riscar limite”. 
 
 
 
Adicione a amostra do extrato de espinafre na placa clicando com o botão direito do 
mouse no tubo capilar e selecione a opção “Do béquer”. Repita o processo com um novo 
tubo capilar para coletar uma amostra do Erlenmeyer. 
 
 
 
 
 
 
 
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31 
Adicione a amostra do Erlenmeyer na placa clicando com o botão direito do mouse no 
tubo capilar e selecione a opção “Do Erlenmeyer”. 
 
 
 
 
 
 
 
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2. ELUINDO A PLACA CROMATOGRÁFICA 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Bancada” ou através do atalho do teclado “Alt+1”. 
 
 
 
Mova a garrafa com solução de hexano/acetona para bancada clicando com o botão 
direito do mouse na garrafa e selecionando a opção “Colocar na mesa”. 
 
 
 
 
 
LABORATÓRIO DE QUÍMICA ORGÂNICA 
CROMATOGRAFIA EM COLUNA E EM CAMADA DELGADA 
 
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Adicione a solução no béquer clicando com o botão direito do mouse na garrafa e 
selecionando a opção “Colocar no béquer”. 
 
 
 
Mova a garrafa de hexano acetona para a prateleira clicando com o botão direito do 
mouse e selecionando a opção “Colocar na prateleira”. 
 
 
 
 
 
 
 
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Mova o papel filtro para o béquer clicando com o botão esquerdo do mouse no papel 
filtro. 
 
 
 
Tampe o béquer clicando com o botão direito do mouse no vidro de relógio e selecione 
a opção “Posicionar no béquer”. 
 
 
 
 
 
 
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Aguarde 10 minutos até que o béquer esteja ambientado. Avance o tempo clicando 
com o botão esquerdo do mouse em “Avançar”. 
 
 
 
Mova a placa cromatográfica para o béquer clicando com o botão direito do mouse na 
placa e selecionando a opção “Mover para o béquer”. 
 
 
 
 
 
 
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Tampe o béquer clicando com o botão direito do mouse no vidro de relógio e selecione 
a opção “Posicionar no béquer”. 
 
 
 
Observe que, ao tampar o béquer, um novo cronômetro aparece na tela. Utilize o 
cronômetro caso queira marcar o tempo que o solvente leva para chegar até a marcação 
final ou selecione a opção “Avançar” para avançar ao final da eluição. 
 
 
 
 
 
 
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Visualize o béquer clicando com o botão esquerdo do mouse nacâmera com o nome 
“Béquer” ou através do atalho do teclado “Alt+5”. 
 
 
 
Coloque a placa sobre a bancada clicando com o botão direito do mouse sobre a placa 
e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
 
 
 
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Remova o papel filtro do béquer clicando com o botão esquerdo sobre o papel filtro. 
 
 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Frontal” ou através do atalho do teclado “Alt+2”. 
 
 
 
 
 
 
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3. COLHENDO OS DADOS OBTIDOS 
 
Mova a placa clicando com o botão direito do mouse na placa e selecione a opção 
“Mover para medição”. 
 
 
 
Visualize aplaca cromatográfica clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera 
com o nome “Medição” ou através do atalho do teclado “Alt+6”. 
 
 
 
 
 
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Observe que, no canto inferior esquerdo da tela, existe a opção de utilizar uma linha 
guia facilitando o processo de leitura. Faça os cálculos e anote os resultados em uma das 
tabelas da seção “Avaliação de resultados”. 
 
 
 
 
 
 
 
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4. REPETINDO O EXPERIMENTO 
 
Mova a placa para a bancada clicando com o botão direito do mouse na placa 
cromatográfica e selecionando a opção “Mover para a bancada”. 
 
 
 
Visualize a amostra clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
“Amostras” ou através do atalho do teclado “Alt+4”. 
 
 
 
 
 
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Substitua a placa utilizada clicando com o botão direito do mouse na placa 
cromatográfica e selecionando a opção “Trocar placa”. 
 
 
 
Adicione a amostra do extrato de espinafre na placa clicando com o botão direito do 
mouse no tubo capilar e selecione a opção “Do béquer”. Repita o processo com um novo 
tubo capilar para coletar uma amostra do Erlenmeyer. 
 
 
 
 
 
 
 
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Adicione a amostra do Erlenmeyer na placa clicando com o botão direito do mouse no 
tubo capilar e selecione a opção “Do Erlenmeyer”. 
 
 
 
Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome 
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Limpe o béquer clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o béquer. 
 
 
 
Troque o papel filtro clicando com o botão direito do mouse sobre ele. 
 
 
 
 
 
 
 
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Mova a garrafa de acetona para bancada clicando com o botão direito do mouse sobre 
ela e selecionando a opção “Colocar na mesa”. 
 
 
 
Adicione a solução de acetona no béquer clicando com o botão direito sobre a garrafa e 
selecionando a opção “Colocar no béquer”. 
 
 
 
 
 
 
 
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Coloque a garrafa na prateleira clicando com o botão direito do mouse sobre ela e 
selecionando a opção “Colocar na prateleira”. 
 
 
 
Repita o processo de incubação da placa cromatográfica e do papel filtro na câmara 
cromatográfica e observe o resultado obtido. 
 
 
 
 
 
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5. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Realize a leitura da placa cromatográfica. Em seguida, siga para a seção “Avaliação dos 
Resultados”, localizada nas páginas 09 a 11 deste roteiro, e responda de acordo com o 
que foi observado nos experimentos, associando também com os conhecimentos 
aprendidos sobre o tema.