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Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 HEMATOLOGIA Apostila 1 Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 HEMATOPOIESE Definição: É o processo responsável pela formação e desenvolvimento das células sanguíneas. Fases: Antes do nascimento: I- Período Embrionário: é no saco vitelino que já se inicia a produção das primeiras células sanguíneas. II- Período Hepato-Esplênico: nessa fase o fígado e o baço assumem a função de produzir as células sanguíneas. III- Período Medular: começa entre o 2º e 3º trimestre gestacional e vai ate o ultimo dia de vida, onde a medula óssea passa a ser a única responsável por produzir as todas as células sanguíneas. Depois do nascimento: Até os 2 anos de vida a medula óssea vermelha funcionante está presente em todas os ossos, depois disso passa a ser encontrada somente nos ossos da bacia, no osso esterno e na coluna vertebral. Os demais ossos são substituídos por medula óssea amarela (rica em lipídios) e medula óssea cinza. Fatores essenciais para produção de células sanguíneas: 1) Células progenitoras saudáveis; 2) Microambiente propício; 3) Hormônios de regulação (Ex.: Citocinas). Diferenciação celular: - Após a 1ª diferenciação celular as células troncos perdem a capacidade de auto- renovação. - Células progenitoras: Mielóide e Linfóide. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 GLÓBULOS VERMELHOS Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 ERITROPOIESE Definição: É o processo de produção de glóbulos vermelhos. Função da Eritropoetina (EPO): - Atua nos retículocitos e hemácias; - Regula a eritropoiese; - Hormônio estimulante; - Produzido pelos rins (Logo, um paciente com deficiência de EPO terá Anemia de Doença Crônica); - Levado para a medula óssea através da circulação sanguínea. Fisiologia: Quando há uma perda de hemácia no sangue periférico, a medula óssea envia a célula que a antecede na linhagem. Mas, por ser uma célula imatura, não desempenha a sua devida função no sangue periférico. Fisiopatologia: A hemácia dura cerca de 120 dias, após esse tempo sofre hemólise. No processo de hemólise ocorre a liberação da hemoglobina que se divide em 2 partes: o radical HEME e o radical GLOBINA. A radical HEME produz PROTOPORFIRINA que libera o FERRO que se liga a TRANSFERINA, que leva o mesmo até a medula óssea, fígado e baço. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 Linhagem: PROERITROBLASTO ERITROBLASTO BASÓFILO ERITROBLASTO POLICROMÁTICO ERITROBLASTO ORTOCROMÁTICO RETÍCULOCITOS HEMÁCIAS *A célula diminui de tamanho quando amadurece. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 HEMÁCIAS Definição: são células sanguíneas também conhecidas como glóbulos vermelhos ou eritrócitos. Origem: são produzidas na medula óssea. Função: transporte do oxigênio. Característica: - São células arredondadas; - Formato bicôncavo; - Ausência de núcleo (ausência de material genético); - A cor vermelha das hemácias resulta de um pigmento vermelho denominado de hemoglobina. Apoptose: a sua destruição é feita no fígado e baço após um período de vida útil de 120 dias. Patologias: a anemia é o nome dado às doenças que se caracterizam pela baixa quantidade de hemoglobina no sangue. Esse problema apresenta diversas causas, como uma alimentação com baixa quantidade de ferro ou, ainda, a produção baixa de hemácias, a destruição exagerada dessas células e hemorragias graves. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 MORFOLOGIA ERITROCITÁRIA 1- Esferócitos - Formato de esfera; 2- Acantócitos - De 2 a 20 espículas; - Espículas diferentes e irregulares. 3- Queratócitos - De 2, 4 ou 6 espículas; - Espículas iguais. 4- Esquizócitos - São fragmentos celulares, por isso possuem aspectos esquisitos. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 5- Eliptócitos - Alongados e delgados. 5.1- Ovalócitos - Menos alongados que os ELIPTÓCITOS; - Menos delgados que os ELIPTÓCITOS; - Mais ovais que os ELIPTÓCITOS. 6- Estomatócitos - Formato de boca; - Alongados na região central. 7- Equinócitos - Espículas iguais, uniformes e regulares; - Lembra uma tampinha de garrafa. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 8- Codócitos ou Células em alvo - Área central intensamente corada; - Excesso de citoplasma. 9- Dacriócitos - Formato de lágrima. 10- Drepanócitos - Formato de foice; - Achado hematológico da ANEMIA FALCIFORME. 11- Células em rouleaux - Hemácias empilhadas. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 GLÓBULOS BRANCOS Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 LEUCÓCITOS Definição: são células sanguíneas conhecidas como glóbulos brancos. Origem: são produzidos na medula óssea. Função: a defesa do organismo. Característica: - Células grandes e incolores; - Formato esférico; - Possuem núcleo (varia em forma de um tipo para outro); - São encontrados em menor quantidade no sangue. Tipos de leucócitos: granulócitos e agranulócitos. Tempo de vida: varia de acordo com as necessidades do organismo, duram horas e até dias. (Ex.: Eosinofilos) Patologias: a leucemia é um tipo de câncer, de origem muitas vezes desconhecida, que afeta os leucócitos. Nessa doença, observa-se que essas células começam a se multiplicar de maneira descontrolada, entretanto, não atingem seu estágio maduro. Assim ocorre o acúmulo de células jovens, que aos poucos, tornam-se superiores às células normais. https://brasilescola.uol.com.br/biologia/sangue.htm https://brasilescola.uol.com.br/doencas/o-que-e-leucemia.htm Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 MORFOLOGIA LEUCOCITÁRIA - A partir de 3 lóbulos (segmentação); - Citoplasma roxo; - Possuem grânulos; - Encontrados em maior quantidade; - São a 1ª linha de defesa do organismo; - Maior ação fagócitica. Tipos: *Neutrófilo segmentado: de 3 a 5 lóbulos; *Neutrófilo multi ou hipersegmentado: de 5 a 8 lóbulos; *Neutrófilo bastão ou bastonete: formatos de C, S ou U. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 - Até 2 lóbulos; - Possuem grânulos vermelhos; - Citoplasma rosa; - Responsáveis pela destruição de larvas de parasitas. - Só estarão elevados em 3 casos: 1) Processos alérgicos; 2) Reações dermatológicas; 3) Parasitoses em forma de larvas (por possuírem uma enzima que tem afinidade por larvas). Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 - Quase sempre não se ver o núcleo; - Citoplasma cheio de grânulos; - Grânulos roxos e grosseiros; - São células mais escassas; - São difíceis de serem encontrados no sangue periférico; - Fonte de histamina na circulação (aparecemno sangue periférico quando o organismo esta diante de uma reação alérgica com liberação de Histamina); - É um achado laboratorial de LMC (Leucemia Mielóide Crônica). Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 - Cromatina frouxa; - Citoplasma cinza; - Núcleo possui formato de feijão; - Núcleo roxo; - São as maiores células encontras na circulação. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 - São mononucleares (presença de apenas um núcleo); - Possuem formato esférico; - Possuem cor azul; - Encontrados em maior quantidade quando existe uma infecção no organismo; Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 HEMOGRAMA 1. ERITROGRAMA: RBC = VALOR TOTAL DE HEMÁCIAS - Varia conforme a idade e sexo. Homem: 4,5 a 5,5 m/mm3 Mulher: 3,8 a 4,8 m/mm3. (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) HTC = HEMATÓCRITO - Porcentagem de células vermelhas; Homem: 40 a 50% Mulher: 36 a 46% (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) Hb = HEMOGLOBINA - A quantidade indica se há ou não anemia; Homem: 13,0 a 17,0 g/dL Mulher: 12,0 a 15,0 g/dL (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) VCM = VOLUME CORPUSCULAR MÉDIO - Volume e tamanho das hemácias; - Valor de referencia: 92 fl. (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) - Classificação: Normocitose = volume normal/tamanho normal. https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 Macrocitose = volume elevado/tamanho aumentado. Microcitose = volume baixo/tamanho diminuído. Calcular: VCM = HT x 10 / RBC HCM = HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MÉDIA - Cor das hemácias; - Valor de referência: 27 a 32 pg. (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) - Classificação: Hipocrômia = diminuição na coloração. Calcular: HCM = Hb x 10 / RBC CHCM = CONCENTRAÇÃO DA HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MÉDIA - Cor total das hemácias; - Valor de referência: 31,5 a 34,5 g/dl. (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) - Classificação: Policromasia = cor intensa nas hemácias. Calcular: CHCM = Hb x 100 / HT https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 RDW = DISTRIBUIÇÃO DOS GLÓBULOS VERMELHOS OU RED CELL DISTRIBUTION - Variação do tamanho das hemácias; - Valor de referência: 11,6% a 14,5%. - Classificação: Anisocitose = Diferença de tamanho das hemácias. 2. LEUCOGRAMA: Valores de referência: - WBC = 4.000 a 11.000 - Neutrófilos bastões = 0 a 200 (0% a 5%) - Neutrófilos segmentados = 3.000 a 7.500 (40% a 65%) - Linfócitos = 1.500 a 3.500 (20% a 40%) - Monócitos = 200 a 800 (2% a 8%) - Eosinófilos = 100 a 500 (1% a 5%) - Basófilos = 0 a 100 (0% a 1%) Termos técnicos: OSE e FILIA = aumento PENIA = diminuição Mais usados: Leucocitose, Leucopenia, Linfocitose, Eosinofilia. Cálculo para valores absolutos: VA = VR x WBC ____________________________________________ 100 Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 3. PLAQUETAS: Valor de referência: 150 a 400 x 109 (Fonte: https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf) Termos técnicos: Plaquetose e plaquetopenia. Calcular: Método Bárbara H. O'Connor = nº de PLT contadas (10 campos) x 13.000 (constante de multiplicação) https://www.pncq.org.br/uploads/2019/VNH2019.pdf Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 ANEMIAS CARÊNCIAS Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 1. Anemia Ferropriva ou Anemia Ferropênica Ferro: É utilizado na síntese de hemoglobina e ajuda a medula óssea a produzir células sanguíneas. Não existe perda fisiológica de ferro no organismo, exceto nas mulheres durante o ciclo menstrual. Quando o homem perde ferro é um alerta para alguma patologia, tais como: parasitoses, neoplasias, sangramentos intra-uterinos, sangramentos gastrointestinais e carência alimentar. Ferritina: É considerado o ferro de reserva. Quando seu valor encontra-se diminuído significa que está sendo utilizado. Valor diminuído de ferritina comprova o diagnostico de Anemia Ferropriva. Sulfato de ferro: O uso indevido do sulfato de ferro causa uma sobre carga de ferro, sendo necessário o uso de quelante de ferro. Fisiopatologia: A hemácia diminui de tamanho para segurar o resto de hemoglobina que ainda resta em seu interior. Como a hemoglobina é composta por ferro, na ausência do mesmo a hemácia diminui sua concentração ficando hipocorada. Classificação morfológica: - Anisocitose - Microcitose - Hipocromia - Pecilocitoses: esquizócitos, eliptócitos, dacriócitos e células em alvo. Resultados hematológicos: - VCM = diminuído - HCM = diminuído - CHCM = diminuído ou normal - RDW = aumentado Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 2. Anemia Megaloblástica Fisiopatologia: Com a ausência de vitamina B12 e ácido fólico a maturação das células sanguíneas será comprometida. Classificação morfológica: - Anisocitose - Macrocitose - Normocromia - Pecilocitoses: ovalócitos, esquizócitos e dacriócitos. Resultados hematológicos: - VCM = aumentado - HCM = aumentado - CHCM = aumentado - RDW = aumentado Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 ANEMIAS HEMOLÍTICAS Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 1. Anemia falciforme Fisiologia: Até os 6 meses de vida do recém nascido não há manifestação clínica da doença, isso ocorre porque a mutação só ocorre nas hemoglobinas do tipo A1, e a hemoglobina de maior quantidade nessa fase da vida é a hemoglobina do tipo Fetal. Após os 6 meses a doença manifesta-se, pois as concentrações de A1 aumentam. Tipos de Hemoglobina: AA = normal A1 = 97% (2 α e 2 β) A2 = 2,5% (2 α e 2 ∆) Fetal = 0,5% (2 α e 2 γ) *Indivíduo falcêmico: 2 α normais e 2 β anormais. Fisiopatologia: A hemácia falciforme tem dificuldade de atravessar as paredes do vasos ficando presas, outros drepanócitos se unem na tentativa de também atravessar, mas acabam formando um trombo que interrompe o fluxo sanguíneo. Cinética da falcização: Com baixas tensões de O², ocorre o afoiçamento das hemácias. Diagnóstico diferencial: - Hemoglobina C - β Talassemia Exames confirmatórios: - Eletroforese de Hemoglobina Classificação morfológica: - Anisocitose - Normocítica - Normocrômica - Policromasia Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 - Pecilocitoses: Drepanócitos. Resultados hematológicos: - VCM = normal - HCM = normal - CHCM = normal - RDW = aumentado Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 115852. Talassemias Fisiologia: É a redução ou ausência da síntese de um tipo de cadeia globina. Tipos de talassemias: I. Talassemia maior ou β (beta) Talassemia II. Talassemia intermediária ou α (alfa) Talassemia III. Talassemia menor Classificação morfológica: - Normocítica - Normocrômica Homozigoto: Microcitose Hipocromia Policromosia Pecilocitoses: Esquizócitos, células em alvo. Heterozigoto: Microcitose Hipocromia Pecilocitoses: ausentes. Resultados hematológicos: - VCM = ausente - HCM = ausente - CHCM = ausente - RDW = normal - Hb = abaixo de 7,0 g/dl (homozigoto) entre 10 a 11,5 g/dl (heterozigoto) Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 3. Anemia de Doença Crônica Fisiopatologia: Nas doenças crônicas o sistema imune libera citocinas para combater a inflamação. Essas citocinas disputam espaço com o ferro, diminuído a sua concentração no sangue periferico. Mas, não atingue o ferro de reserva, ou seja, a ferritina. Classificação morfológica: - Normocítica - Normocrômica *Pode se tornar microcítica hipocrômica. Resultados hematológicos: - VCM = normal - HCM = normal - CHCM = normal - RDW = normal - RBC = diminuído - HTC = diminuído - Hb = diminuído Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 APLASIA MEDULAR OU ANEMIA APLÁSTICA Fisiologia: - É uma doença de curso lento; - Atinge uma linhagem sanguínea por vez; - Bloqueia a hematopoiese; - Pancitopenia: diminuição total das células sanguíneas. Incidência: Em mulheres dos 15 aos 25 anos e após os 60 anos. Agentes causadores: medicamentos, drogas, radiação, vírus (hepatites). Diagnóstico definitivo: - Biopsia de medula óssea; - Mielograma Resultados hematológicos: - Anemia - Leucócitos = diminuídos - Neutrófilos = diminuídos - Plaquetas = diminuídas. *De moderada (-500 células) à grave (-200 células). Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 HEMOGRAMA EM INFECCÕES Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 INFECÇÕES BACTÉRIANAS Leucograma: - WBC = aumentado - Neutrófilos = aumentados - Bastões = aumentados (desvio à esquerda) - Linfócitos = diminuídos - Eosinófilos = ausentes - Monócitos = aumentados Achados hematológicos: - Granulações tóxicas: é quando o neutrófilo vai fagocitar a bactéria e libera a enzima peroxidase causando as granulações. - Vacúolos citoplasmáticos: é quando a bactéria tem um alto grau de virulência e faz vacúolos na célula. Tanto no citoplasma quanto no núcleo. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 REAÇÃO LEUCEMÓIDE Definição: É uma infecção bacteriana grave. Diferenças entre Reação Leucemóide e Leucemia Mielóide Crônica (LMC): Reação Leucemóide LMC WBC - 50.000 + 50.000 Desvio à esquerda Até mielócitos Até mieloblasto Eosinófilos e Basófilos Ausentes Presentes Plaquetas Normais Aumentadas ou diminuídas Granulações tóxicas Presente Ausente Vacúolos citoplasmáticos Presente Ausente Fosfatase alcalina Elevada Diminuída Cromossomo Philadelfia (PH) Ausente Presente (achado laboratorial de LMC). Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 INFECÇÕES VIRAIS Leucograma: - WBC = diminuído - Neutrófilos = diminuídos - Linfócitos = aumentados - Plaquetas = diminuídas - Atípias linfocitárias. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 TESTES HEMATOLÓGICOS Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 CONTAGEM DE RETICULÓCITOS Finalidade: Serve para avaliar a resposta da medula óssea nos casos de anemia. Quando o número de reticulócitos aumenta, indica atividade eritropoética e a anemia é classificada em regenerativa; quando não há aumento no número de eritrócitos, a anemia é considerada arregenerativa e a medula pouco ativa. Valor de referencia: De 0,5% a 2%, podendo variar para 0,6% a 2,5%. Método de contagem: Etapas: 1) Homogeneizar o sangue, coletado com anticoagulante; 2) Pingar uma gota de sangue e uma gota de novo azul de metileno (ou azul de cresil brilhante) em um tubo de ensaio; 3) Homogeneizar as gotas de sangue e corante; 4) Aguardar quinze minutos e então confeccionar um esfregaço com esta mistura; 5) Deixar o esfregaço secar ao ar; 6)Focalizar o esfregaço em aumento de 100x no microscópio óptico; 7)Contar mil células vermelhas (hemácias + reticulócitos) e destas, qual o número de reticulócitos; 8) Calcular a porcentagem de reticulócitos. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 Cálculo: RT = 5,23 x 106 / 100% (unidade de medida é em %) - Conta-se 10 campos e soma a quantidade de retículocitos encontrados. Classificação: Reticulocitose = representa HIPERatividade da medula óssea. Condição relacionada: Anemias hemolíticas. Reticulocitopenia = representa HIPOatividade da medula óssea. Condição relacionada: Aplasia medular. Dra. Millena Tavares Esp. Hematologia e Hemoterapia Laboratorial Biomédica – CRBM 11585 VELOCIDADE DE HEMOSSEDIMENTAÇÃO (VHS) Definição: É um teste hematológico inespecífico onde expressa processos infecciosos bacterianos em fase aguda e crônica. Valor de referência: - Normal = até 10mm à 15mm em 1 hora - Elevado = acima de 30mm, quando está em 100mm é indicativo de patologia grave. - Diminuido = abaixo de 10mm em 1 hora. *Interferências nos resultados: Elevado = alimentação protéica antes da coleta do material. Diminuído = uso de alguns medicamentos. Fisiopatologia: As hemácias possuem carga elétrica negativa e com isso se repelem normalmente. Durante infecções, os antígenos modificam a carga de algumas hemácias, tornando-as positivas. Logo positivo com negativo se atraem com uma velocidade ainda maior, causando assim a hemossedimentação das hemácias. Procedimento: - Metódo de Westergreen: Colocar em uma pipeta graduada 1ml de sangue e marcar 1hora para observar a sedimentação. Finalidade: Serve para avaliar a resposta da medula óssea nos casos de anemia. Quando o número de reticulócitos aumenta, indica atividade eritropoética e a anemia é classificada em regenerativa; quando não há aumento no número de eritrócitos, a anemia...