Prévia do material em texto
A formação da imagem no microscópio ocorre quando a luz da fonte do microscópio atravessa o condensador, que direciona um cone de luz à amostra. A objetiva, localizada próxima à amostra, capta a luz que atravessou a amostra e projeta uma imagem real, invertida e ampliada no plano intermediário do microscópio. A lente ocular, situada no topo do microscópio, amplia ainda mais a imagem real projetada pela objetiva, criando uma imagem virtual e aumentada que é captada pelo olho do observador. Microscópio Como Acontece o Aumento da Imagem O aumento total é obtido multiplicando-se os valores de ampliação da lente ocular e da objetiva. Por exemplo: Ocular de 10X e objetiva de 40X → Aumento total: 10 × 40 = 400 vezes. As lentes objetivas são geralmente identificadas pelo seu poder de ampliação, que pode variar entre: 4X: Baixa ampliação, usada para localizar a amostra. 10X: Ampliação média, usada para observações gerais. 40X: Ampliação alta, usada para análises mais detalhadas (não usa óleo de imersão). 100X: Ampliação muito alta, usada com óleo de imersão para observar detalhes microscópicos (bactérias, por exemplo). As lentes oculares geralmente têm ampliação padrão de: 10X: Mais comum. 15X ou 20X: Usadas em alguns modelos para maior aumento. O aumento total é a multiplicação do aumento da objetiva pelo aumento da ocular: Aumento total = Aumento da objetiva × Aumento da ocular Exemplos de combinações comuns: 4X objetiva × 10X ocular = 40X 10X objetiva × 10X ocular = 100X 40X objetiva × 10X ocular = 400X 100X objetiva × 10X ocular = 1000X (com óleo de imersão). Estrutura e Funcionamento Canhão Parte óptica: espelho/fonte de luz,condensador/diafragma, lente objetiva e ocular. Procedimentos de Uso 1. Antes de ligar o microscopio, verifique se ele esta ligado a corrente eletrica, em seguida verifique ocontrole de intensidade da iluminação e certifique-se de que a objetiva de menor aumento (4 ou 5X) esta posicionada. 2. Ligue o microscopio e gire o parafuso macrométrico ate abaixar toda a platina. Coloque a lamina na platina, sempre com a laminula voltada para cima, prendendo-a convenientemente. Em seguida ajuste o foco do especime observado utilizando o parafuso macro e micrométrico. Ajuste a intensidade da iluminacao mais adequada. Certifique-se de estar observando a estrutura em focosimultaneamente com os dois olhos. Se nao estiver, acerte a distancia interpupilar aproximando ou afastando as duas oculares. Verifique tambem se as duas oculares estao em foco. Se nao estiverem,focalize bem o material olhando em apenas uma delas, e gire depois a outra ocular ate acertar o foco. 3.Utilizando os parafusos do Charriot, examine a lamina e selecione a area que devera ser observada com maior aumento. A area selecionada devera estar no centro do campo e em foco, antes de se passar ao aumento seguinte (10X). Posicione a objetiva e, desse momento em diante, ajuste o foco utilizando-se apenas do parafuso micrométrico. Ajuste sempre a iluminacao mais adequada para cada aumento, utilizando-se tambem do diafragma do condensador. 4.Para passar ao aumento seguinte (40X) proceda exatamente como no item anterior. 5. Para focalizar com a objetiva de 100X e necessaria a utilizacao de óleo de imersão. A lamina devera estar perfeitamente focalizada na objetiva de 40X, e a area a ser observada colocada no centro do campo. Desloque a objetiva de 40X girando o revolver, porem sem encaixar a objetiva de 100X, parando a meio caminho. Coloque uma pequena gota de oleo sobre a area iluminada da lamina e posicione a objetiva de imersao. Note que a extremidade inferior da lamina ficara imersa na gota de oleo. Utilizando-se apenas do parafuso micrometrico encontre o foco que devera estar bem proximo. Caso nao consiga, volte para a objetiva de menor aumento, reiniciando todos os passos. Importante: não tente focalizar o material nas objetivas de 10, 40 e 100X com o parafuso macrométrico, pois, com grande chance, você quebrará a lâmina. 6. Para retirar a objetiva da imersao, gire o revolver posicionando a objetiva de menor aumento (4X). Retire a lamina, limpe-a bem, fazendo o mesmo com a objetiva de imersao com lenco de papel embebido levemente em alcool-eter. Cuidado ao manusear estas substâncias que, além de serem solventes de plástico, são inflamáveis e seus vapores são tóxicos. 7. Verifique se as objetivas estao encaixadas, caso contrario voce vera o campo completamente escuro ou parcialmente iluminado. 8. Ao terminar a sua pratica, abaixe toda a platina, gire o revolver de modo a posicionar a objetiva de menor aumento. Desligue o microscopio e limpe-o utilizando lenco de papel. Verifique se a lamina foi retirada e guardada no seu respectivo lugar, e se o controle de iluminacao esta no minimo. https://docente.ifsc.edu.br/leandro.parussolo/MaterialDidatico/C%C3%A2mpus%20Lages/T%C3%A9cnico%20em%20An%C3%A1lises%20Qu%C3%ADmicas/Histofisiologia%20Animal/MICROSCOPIA%20DE%20LUZ.pdf Limpeza e Conservação Produtos Não Recomendados para Limpeza das Oculares · Álcool comum (etanol ou isopropílico não diluído): Pode danificar revestimentos antirreflexo nas lentes. · Acetona: Ataca plásticos e revestimentos, causando manchas ou opacidade. · Papéis ásperos ou lenços não adequados: Podem riscar a superfície da lente. · Produtos à base de amônia (como limpadores de vidro comuns): Podem corroer os revestimentos antirreflexo e deixar resíduos que prejudicam a qualidade óptica. · Água sanitária ou produtos clorados: São altamente corrosivos e podem danificar a lente e sua estrutura. · Detergentes ou sabões comuns: Podem deixar resíduos difíceis de remover e causar manchas. · Solventes orgânicos (como tolueno, benzeno, ou xileno): Podem dissolver ou degradar os revestimentos e materiais das lentes. · Óleos ou graxas: Deixam resíduos que atraem poeira e dificultam a limpeza posterior. · Sprays aerossóis multiuso: Contêm aditivos que podem danificar o material óptico. · Álcool isopropílico com concentração acima de 70%: Concentrações elevadas podem atacar os revestimentos óticos e evaporar rapidamente, deixando manchas. Para a limpeza, use papel de lente apropriado ou pano de microfibra com álcool isopropílico diluído (até 70%) ou produtos recomendados pelo fabricante. image1.jpeg