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BIOLOGIA MOLECULA – 21/01/25 - REGULAÇÃO DA EXPRESSÃO GÊNICA EM BACTÉRIAS; CONTROLE DA CÉLULA PARA SABER QUAIS GENES VÃO SER TRADUZIDOS OU REPRIMIDOS. A CÉLUA CRIA MECANISMO QUE DESLIGAM A TRANSCRIÇÃO DE TODOS OS GENES QUE CODIFICAM ENZIMAS QUE NÃO SÃO NECESSÁRIAS EM DETERMINADO TEMPO E LIGAM ESSES GENES QUE CODIFICAM ENZIMAS QUANDO ELAS SÃO NECESSÁRIAS. OS MECANISMO PRECISAM PREENCHER DOIS CRITERIOS: 1. ELAS TEM DE SER CAPAZES DE RECONHECER CONDIÇÕES AMBIENTAIS NAS QUAIS DEVEM ATIVAR OU REPRIMIR A TRANSCRIÇÃO DOS GENES RELEVANTES. 2. ELAS TEM DE SER CAPAZRS DE LIGAR OU DESLIGAR, COMO UM INTERRUPTOR, A TRANSCRIÇÃO DE CADA GENE ESPECÍFICO OU GRUPO DE GENES. - A REGULAÇÃO DA TRANSCRIÇÃO DEPENDE DE DOIS TIPOS DE INTERAÇÕES DNA-protéina: 1. A interação DNA-proteina determina o local onde a transcrição irá iniciar, ocorrendo perto no qual começa a transcrição gênica. - A região do DNA onde a proteína interage é denominada promotor (sequência regulatória). - A proteína que se liga ao promotor é a RNA polimerase. - Quando a RNA polimerase se liga ao DNA promotor , a transcrição pode começar algumas bases distantes do sí o promotor. Todo gene precisa ter um promotor ou não será transcrito. A regulação precisa da interação promotor - > rna polimerase. 2. A interação DNA-proteína determina se a transcrição a vada pelo promotor ocorre. - Os segmentos de DNA perto do promotor servem como pontos de ligação para proteínas reguladoras sequência-específicas chamadas a vadores e repressores. - Nas bactérias, a sequência de DNA onde se liga proteína repressora é denominada operador. Para alguns genes, uma proteína a vadora deve ligar-se a seu sí o-alvo no DNA denominado intensificador como um pré-requisito para a transcrição começar. A ligação de proteínas reguladoras pode a var ou bloquear a transcrição. Existem duas formas de regulação da transcrição (posi va ou nega va), a vando-a ou reprimindo-a: - A a vação da transcrição ocorre via: A presença da proteína a vadora ligada ao seu sí o-alvo (intensificador) no DNA. Esse evento é chamada de REGULÃO POSITIVA porque a presença da proteína ligada permite a transcrição. A ausência da proteína repressora ligada no seu sí o-alvo no DNA. Esse evento é chamado de REGULAÇÃO NEGATIVA, porque a ausência do repressor ligado permite o início da transcrição. - SEQ DNA; PROMOTOR, OPERADOR, INTESIFICADOR. > A ina vação da transcrição ocorre via regulação posi va na ausência de proteína a vadora e via regulação nega va na presença de proteína repressora. - A enzima RNA-polimerase par cipa SEMPRE. COMO OS ATIVADORES E REPRESSORES REGULAM A TRANSCRIÇÃO? - A proteína a vadora ligada ao DNA AJUDA FISICAMENTE a levar a RNA polimerase para seu promotor vizinho, de modo que a polimerase possa começar a transcrição - A proteína As proteínas a vadoras e repressoras são capazes de reconhecer as condições ambientais especificas para elas atuarem Essas proteínas encontram-se em dois estados: 1. Não possa se ligar a seu DNA-alvo 2. Possa se ligar a seu DNA-alvo - O estado de ligação deve ser apropriado para o conjunto de condições fisiológicas presentes na célula e seu ambiente. - as protepinas reguladoras interagem com o DNA através de dois sí os – domínio de ligação ao DNA e o sí o alostérico. - Sí o alostérico interage com pequenas moléculas denominadas efetores alostérios e atua como um sensor que ajusta o domínio de ligação ao DNA para um modo funcional ou não funcional. No metabolismo de lactose (açúcar dissacarídeos – formado por 2 açúcar diferentes) – Metabolismo de organismo de PROCARIOTOS. Um isômero do açúcar lactose (chamado alolactose) é um efetor alostérico: o açúcar liga-se a uma proteína reguladora (muda a forma e a estrutura do domínio de ligação ao DNA) e ATIVA a expressão de genes necessários para o metabolismo de lactose. - A proteína repressora controla o óperon lac - A expressão coordenada dos gens Z, Y e A está sob controle nega vo do produto do gene, o repressor. Quando o indutor se liga ao repressor, o operon é totalmente expresso. Os genes estruturais lac (metabolismo de lactose) - O metabolismo da lactose demanda 2 enzimas: 1. Permease, que transporta a lactose para a célula codificada pela sequência Z 2. Beta-galactosidade, que cliva a molécula de lactose para produzir glicose e galactose codificada pela sequência Y. A sequeência A codifica a transace lase, que não é necessária para o metabolismo de lactose. - A estrutura do operon lac contem os genes Z,Y e A que são transcritos em uma única molécula de mRNA. - Genes cuja transcrição é controlada por um meio comum são ditos genes controlados coordenadamente. Componentes reguladoras do sistema lac (metabolismo de lactose): 1. Um gene que codifica uma proteína reguladora da transcrição e dois sí os de ligação no DNA; uma para a proteína reguladora e outro para a RNA polimerase. Gene / que codifica a proteína repressora Lac responsável por bloquear a expressão dos genes Z, Y e A. O promotor P é o sí o no DNA ao qual se liga RNA polierase para iniciar a transcrição dos genes estruturais LAC( Z, Y e A). O operador O é o sí o do DNA ao qual se liga o repressor LAC (gene I ). Ele está situado entre o promotor e o gene Z, perto do ponto no qual começa a transcrição do mRNa mul gênico. OPERON LAC: corresponde aos segmentos P, O, Z, Y e A e é definido como um segmento de DNA que codfica um mRNA mul gênico e que apresenta um promotor (P) comum adjacente e uma região O. O OPERON LAC: é transcrito apenas na PRESENÇA DE LACTOSE. Obje vo da lactose é produzir energia.