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Professor Mestre Diego Marlon Santos QUÍMICA INSTRUMENTAL REITOR Prof. Ms. Gilmar de Oliveira DIRETOR DE ENSINO PRESENCIAL Prof. Ms. Daniel de Lima DIRETORA DE ENSINO EAD Prof. Dra. Giani Andrea Linde Colauto DIRETOR FINANCEIRO EAD Prof. Eduardo Luiz Campano Santini DIRETOR ADMINISTRATIVO Guilherme Esquivel SECRETÁRIO ACADÊMICO Tiago Pereira da Silva COORDENAÇÃO DE ENSINO, PESQUISA E EXTENSÃO Prof. Dr. Hudson Sérgio de Souza COORDENAÇÃO ADJUNTA DE ENSINO Prof. Dra. Nelma Sgarbosa Roman de Araújo COORDENAÇÃO ADJUNTA DE PESQUISA Prof. Ms. Luciana Moraes COORDENAÇÃO ADJUNTA DE EXTENSÃO Prof. Ms. Jeferson de Souza Sá COORDENAÇÃO DO NÚCLEO DE EDUCAÇÃO A DISTÂNCIA Prof. Me. Jorge Luiz Garcia Van Dal COORDENAÇÃO DOS CURSOS - ÁREAS DE GESTÃO E CIÊNCIAS SOCIAIS Prof. Dra. Ariane Maria Machado de Oliveira COORDENAÇÃO DOS CURSOS - ÁREAS DE T.I E ENGENHARIAS Prof. Me. Arthur Rosinski do Nascimento COORDENAÇÃO DOS CURSOS - ÁREAS DE SAÚDE E LICENCIATURAS Prof. Dra. Katiúscia Kelli Montanari Coelho COORDENAÇÃO DO DEPTO. DE PRODUÇÃO DE MATERIAIS Luiz Fernando Freitas REVISÃO ORTOGRÁFICA E NORMATIVA Beatriz Longen Rohling Carolayne Beatriz da Silva Cavalcante Caroline da Silva Marques Eduardo Alves de Oliveira Jéssica Eugênio Azevedo Marcelino Fernando Rodrigues Santos PROJETO GRÁFICO E DIAGRAMAÇÃO Hugo Batalhoti Morangueira Bruna de Lima Ramos Vitor Amaral Poltronieri ESTÚDIO, PRODUÇÃO E EDIÇÃO André Oliveira Vaz DE VÍDEO Carlos Firmino de Oliveira Carlos Henrique Moraes dos Anjos Kauê Berto Pedro Vinícius de Lima Machado Thassiane da Silva Jacinto FICHA CATALOGRÁFICA Dados Internacionais de Catalogação na Publicação - CIP S237q Santos, Diego Marlon Química instrumental / Diego Marlon Santos. Paranavaí: EduFatecie, 2023. 120 p. : il. Color. 1. Análise instrumental. 2. Análise cromatográfica. 3. Eletroquímica. 4. Análise espectral. I. Centro Universitário UniFatecie. II. Núcleo de Educação a Distância. III. Título. CDD : 23 ed. 543 Catalogação na publicação: Zineide Pereira dos Santos – CRB 9/1577 As imagens utilizadas neste material didático são oriundas dos bancos de imagens Shutterstock . 2023 by Editora Edufatecie. Copyright do Texto C 2023. Os autores. Copyright C Edição 2023 Editora Edufatecie. O conteúdo dos artigos e seus dados em sua forma, correção e confiabilidade são de responsabilidade exclusiva dos autores e não representam necessariamente a posição oficial da Editora Edufatecie. Permitido o download da obra e o compartilhamento desde que sejam atribuídos créditos aos autores, mas sem a possibilidade de alterá-la de nenhuma forma ou utilizá-la para fins comerciais. https://www.shutterstock.com/pt/ 3 AUTOR Prof. Me. Diego Marlon Santos Doutorando em Educação para a Ciência e a Matemática pela Universidade Estadual de Maringá (2018). Mestre em Ensino: Formação Docente Interdisciplinar pela Universidade Estadual do Paraná (2016), Especialista em Informática Instrumental Aplicada à Educação pela Universidade Tecnológica Federal do Paraná (2018), Especialista em Gestão Ambiental em Municípios pela Universidade Tecnológica Federal do Paraná (2014), Especialista em Educação: Métodos e Técnicas de Ensino pela Universidade Tecnológica Federal do Paraná (2012), Especialista em Docência do Ensino Superior: métodos e práticas educativas pela Universidade Paranaense (2007), Especialista em Meio Ambiente com ênfase em Química Ambiental pela Universidade Paranaense (2007), Graduação em Química Industrial e Licenciatura em Química pela Universidade Paranaense (2005). Licenciando em Pedagogia pela Universidade Paranaense (2022). Professor PDE do Programa de Desenvolvimento Educacional pela Universidade Estadual do Centro Oeste do Paraná (2020). Atualmente leciona nos cursos de Química Licenciatura e Bacharelado e Processos Química da UniFatecie EAD e no Colégio Estadual Enira Moraes Ribeiro - EFMP, ministrando aulas na Educação Profissional, no curso Técnico em Química modalidade integrado e subsequente. Professor Preceptor da Residência Pedagógica do Curso de Licenciatura em Química do Instituto Federal do Paraná - Campus de Paranavaí. Tem experiência na área de Química, com ênfase em Análise de Traços e Química Ambiental, Gestão Ambiental, Educação Ambiental, Formação de Professores, Ensino de Química, Educação Profissional, Informática Aplicada a Educação, Ciência, Tecnologia e Sociedade (CTS). CURRÍCULO LATTES: http://lattes.cnpq.br/1739031666447757 http://lattes.cnpq.br/1739031666447757 4 APRESENTAÇÃO DO MATERIAL Olá Aluno (a)! Sejam-bem vindos (as), Fico feliz que você iniciará essa trilha de aprendizagem na disciplina de Química Instrumental. Neste caso, estou dando início ao estudo e a aplicação de métodos e técnicas de análise química em laboratório. é importante permitir que o aluno compreenda todas as etapas de uma análise química e quais fatores podem interferir no resultado final da análise e fornecer ao aluno subsídios para a interpretação de dados analíticos. Diante disto, o objetivo principal deste material é fornecer um fundamento completo dos princípios da química que são particulares importantes para a química analítica. Além disso, quero que você desenvolva habilidades necessárias para resolver problemas analíticos quantitativos. Sendo assim, pretendo transmitir alguns conhecimentos laboratoriais que darão a você confiança para o desenvolvimento das metodologias analíticas eficazes em laboratório. Logo, este material foi planejado de maneira que você possa encontrar os aspectos práticos da química instrumental. Na Unidade I vamos conhecer os fundamentos completos dos princípios da química analítica, para que o aluno desenvolva habilidades necessárias para resolver problemas analíticos quantitativos. Já na Unidade II você irá saber mais sobre o estudo da eletroquímica e potenciometria, apresentamos no decorrer dos quatro tópicos da nossa unidade as metodologias de análise instrumental para o entendimento e reconhecimento da importância das medidas eletroanalíticas e potenciométricas. Na sequência, na Unidade III, falaremos a respeito das medidas baseadas na luz e outras formas de radiação eletromagnética são amplamente empregadas na química analítica. As interações da radiação com a matéria são o objeto de estudo da ciência da espectroscopia. Em nossa Unidade IV, vamos finalizar o conteúdo desta disciplina, fazendo você mergulhar no universo das separações analíticas e cromatografia. As separações são extremamente importantes em síntese, na química industrial, nas ciências biomédicas e nas análises químicas. Bons Estudos! SUMÁRIO UNIDADE 1 Introdução aos Métodos Analíticos UNIDADE 2 Eletroquímica e Potenciometria UNIDADE 3 Espectroquímica UNIDADE 4 Separações Analíticas e Cromatografia 5 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .de amostras. 4.1 Componentes dos métodos Potenciométricos Diante dos casos mais simples dos métodos potenciométricos, Harris (2008) salienta que: 42UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA Os constituintes em análise participam da pilha galvânica. Imagine uma solução contendo uma espécie eletroativa (o constituinte em análise) cuja atividade (con- centração) desejamos medir. A espécie eletroativa pode doar ou receber elétrons de um eletrodo. Podemos pôr a amostra em uma semipilha pela inserção do eletrodo (tal com um fio de platina) dentro da solução para transferir elétrons para ou do constituinte em análise. Como esse eletrodo responde diretamente ao constituinte, ele é chamado de eletrodo indicador. Conectamos, então, essa semipilha a uma segunda semipilha através de uma ponte salina. A segunda semipilha tem uma composição fixa, portanto, teremos um potencial constante. Devido ao seu potencial constante, a segunda semipilha é chamada de eletrodo de referência. O potencial da pilha é a diferença entre o potencial variável que responde para a atividade do constituinte e o potencial constante do eletrodo de referência (HARRIS, 2008, p. 319). Portanto, o instrumento ideal para realizar as medidas potenciométricas deve ser de fácil montagem e custo viável, podemos citar por exemplo o eletrodo de referência, o indicador e a célula galvânica. FIGURA 6 – COMPONENTES DOS MÉTODOS POTENCIOMÉTRICOS Fonte: Skoog et al. (2006, p. 554). 4.2 Eletrodo de referência Considerando uma solução que contém íon ferroso (Fe2+) e íon férrico (Fe3+). Ao fa- zer dela uma das partes da pilha, temos que apontar a importância da distância percorrida do potencial que mostrará as quantidades relacionadas dos referentes íons. 43UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA FIGURA 7 – COMPONENTES DOS MÉTODOS POTENCIOMÉTRICOS Fonte: Harris (2008, p. 320). A pilha galvânica conforme Harris (2008, p. 320) pode ser usada para medir a “razão de [Fe2+] / [Fe3+]. Na semipilha da direita. O fio de platina é o eletrodo indicador, e o conjunto da semipilha da esquerda mais a ponte salina (dentro da linha pontilhada) pode ser considerada de um eletrodo de referência”. Assim, percebe-se que a quantidade de íons cloreto (Cl-) na semipilha da esquerda se mantém inalterada, devido estar em meio solúvel com o sal de cloreto de potássio (KCl), na qual a solução presente já está em meio saturado. Por fim, o potencial da pilha pode variar, caso haja uma variação da razão. O eletrodo de referência ideal de acordo com Skoog (2009, p. 555) tem que ser “reversível e obedece à equação de Nernst, mantém o potencial constante durante a medição e retorna ao seu potencial original após ter sido submetido a correntes pequenas. Deve ser robusto e de fácil construção”. 4.2.1 Eletrodo de Calomelano Um eletrodo de calomelano saturado com solução de KCl é chamado de eletrodo de calomelano saturado (ECS), está representado pela reação a seguir: 1/2Hg2Cl2(s) + e- ↔ Hg(l) + Cl- E0 = +0,268 V Os benefícios da utilização é que a concentração de cloreto (Cl-) não altere, caso um pouco desta solução se volatilize, a seguir na Figura 8. 44UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA FIGURA 8 – ELETRODO DE CALOMELANO SATURADO Fonte: Harris (2008, p. 321). Ao abordarmos as vantagens do eletrodo de calomelano saturado, se tornou um dos mais utilizados, devido ser fácil o seu manuseio, Skoog et al. (2009, p. 555) ressalta que “sua principal desvantagem é que ele é mais dependente da temperatura que os ele- trodos que empregam soluções 0,1 e 1,0 mol.L-1. Essa desvantagem é importante apenas naquelas raras circunstâncias nas quais variações substanciais de temperatura ocorrem durante as medidas”. Além disto, temos a oscilação do potencial conforme a temperatura e os possíveis riscos e contaminações. 4.2.2 Eletrodo de referência de prata/cloreto de prata O eletrodo de referência que está identificado pela linha tracejada na Figura 6 é denominado de eletrodo de prata-cloreto de prata. Harris (2008, p. 320) explica que “o potencial padrão de redução para o AgCl | Ag é +0,222 V a 25ºC. Este deverá ser o potencial de um eletrodo de prata-cloreto de prata se a atividade de cloreto (Cl-) for unitária. Mas, a atividade do cloreto em uma solução saturada de KCl a 25ºC não é unitária”. Mas, com relação as desvantagens dos eletrodos de referência, verifica-se que pode haver o entupimento dos poros do tampão, e por consequência alterações nas respostas que dependem dos sinais elétricos, deixando a leitura do eletrodo bastante demorada e sem estabilidade. 45UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA FIGURA 9 - ELETRODO DE PRATA/CLORETO DE PRATA Fonte: Harris (2008, p. 321). Neste contexto, o eletrodo de referência de prata-cloreto de prata conforme Harris (2008) apresenta as seguintes característica, como: compartimento externo pode conter uma solução de KCl ou outra solução que seja mais compatível, com a solução do constituinte. Se você não precisa Cl- em con- tato com o constituinte, por exemplo, o eletrodo externo pode ser preenchido com solução de KNO3. Como as soluções eletrolíticas interna e externa misturam-se lentamente, o eletrodo externo, às vezes tem que ser preenchido com nova solução de KNO3 (HARRIS, 2008, p. 321). Desta maneira, é fundamental tomar cuidados com relação ao uso do eletrodo de referência, como ter atenção com a quantidade da solução dentro do instrumento, evitando possíveis alterações que possam interferir no resultado da medida potenciométrica. Enfim, esse eletrodo é bastante acessível, pois existem diversos tipos e modelos que podem ser encontrados em empresas especializadas. 4.3 Eletrodo Indicador Neste item vamos conhecer os principais eletrodos indicadores, conhecidos como: eletrodo indicador metálico e o eletrodo indicador de membrana. 4.3.1 Eletrodo Indicador Metálico No eletrodo indicador metálico existe um crescimento do potencial elétrico conforme o resultado da reação de redução-oxidação que acontece nas extremidades ou superfície do metal de interesse. Harris (2008) destaca que: 46UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA O eletrodo indicador metálico mais comum é feito de platina, que é relativamente inerte – ela não participa em várias reações químicas. Seu propósito é simplesmente transmitir elétrons para uma espécie em solução ou a partir dela. Eletrodos de ouro são certamente mais inertes que os de platina. Vários tipos de carbono são usados como eletrodos indicadores, porque a taxa de várias gerações redox na superfície do carbono é rápida. Um eletrodo de metal trabalha melhor quando a superfície é grande e limpa. Um rápido mergulho em ácido nítrico concentrado, seguido por lavagem com água destilada, é muitas vezes eficazes para limpar a superfície de um eletrodo (HARRIS, 2008, p. 322). Com isso, percebemos o quanto o analista químico precisa estar capacitado profis- sionalmente para que consiga desempenhar as funções utilizando as metodologias corretas e conhecendo os instrumentos analíticos que serão úteis para o seu trabalho. Por exemplo, é importante saber qual a espécie química que o eletrodo indicador metálico vai determinar quando inserido na solução problema, e como as medidas potenciométricas apresentam resultados seletivos para certos íons em estudo. 1.1.2 Eletrodo indicador de membrana No caso do eletrodo indicador de membrana acontece um deslocamento de espé- cies iônicas que são selecionadas por meio da membrana do eletrodo responsável em produzir um potencial ou tensão elétrica. Skoog et al. (2009) salienta que: Por muitos anos, o método mais conveniente para determinar o Ph tem envolvido medidas de potencial que se desenvolve através de uma fina membrana de vidro que separa duas soluções com diferentes concentrações do íon hidrogênio. O fe- nômeno no qual a medida se baseia foi primeiramente descrito em 1906 e até hoje tem sido extensivamente estudadopor muitos pesquisadores. Como resultado, a sensibilidade e a seletividade das membranas de vidro ante os íons hidrogênio são razoavelmente bem compreendidas. Além disso, essa compreensão tem levado ao desenvolvimento de outros tipos de membranas que respondem seletivamente a muitos outros íons (SKOOG et al., 2009, p. 560). É fundamental deixar claro que os eletrodos indicadores de membrana divergem dos eletrodos indicadores metálicos, isso está relacionado ao formato e ao desempenho. Nessa perspectiva, o eletrodo indicador apresenta uma membrana que irá auxiliar na separação da espécie química de interesse, contribuindo para a determinação da concentração do analito. 47UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . FIGURA 10 - ELETRODOS INDICADORES E ELETRODOS DE REFERÊNCIA. Fonte: UFSC (2022). UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 48 Nada na vida deve ser temido, somente compreendido. Agora é hora de compreender mais para temer menos. Fonte: Marie Curie (1867 - 1934). […] O método potenciométrico pode ser satisfatoriamente empregado na determinação de %AGL de óleos com alto teor de pigmentos. Esse fato se torna essencial em amostras com elevado teor de pigmentos, como óleos brutos e degomados e óleos de fritura, cujo processo acarreta aumentos nos valores de cor ao longo do tempo. Fonte: OSAWA, C. C.; GONÇALVES, G.; RAGAZZ S. Titulação potenciométrica aplicada na determinação de ácidos graxos livres de óleos e gorduras comestíveis. Química Nova, 29 (3), p. 544, jun. 2006. 48 CONSIDERAÇÕES FINAIS Chegamos ao final da nossa segunda unidade II sobre Eletroquímica e Potenciometria sendo concluída uma boa parte desta jornada de conteúdos, espero que tenham aprendido os conhecimentos dos métodos instrumentais apresentados até o presente momento e que você tenha compreendido os conceitos estudados, pois estes conteúdos são importantes para a formação de analistas que saibam realizar medidas eletroanalíticas e potenciométricas diariamente. Durante essa unidade, foi possível compreender que o equipamento necessário para os métodos potenciométricos é simples e barato, e inclui um eletrodo de referência, um eletrodo indicador e um dispositivo de medida de potencial. Com diferentes formas e tipos de membranas sensíveis, os eletrodos são imprescindíveis em universidades, centros de pesquisa, nos laboratórios químicos de indústrias ou prestação de serviços, no controle e monitoramento de produtos químicos, alimentos, água, meio ambiente, de matrizes com- plexas de interesse de outras áreas, como agricultura, geologia, medicina, odontologia, etc. Com isso, esperamos que você reconheça e saiba solucionar os problemas relacionados aos métodos potenciométricos e amplie seus conhecimentos sobre suas aplicabilidades. Diante disto, é importante se precaver contra esse falso sentimento de segurança, pois o sistema de eletrodo tem limitações claras. Neste contexto, foi possível fornecer ferramentas necessárias que possibilite ao aluno identificar os métodos eletroquímicos e eletroanalíticos para análises em laboratório. Logo, os seus estudos não param por aqui! Vou escrever mais uma vez que: o químico é o profissional que desenvolve e aplica diversas metodologias analíticas em laboratório, portanto, é fundamental se aperfeiçoar e manter uma rotina de pesquisas e estudos. Por fim, o encerramento esta unidade nos traz uma sensação de dever cumprido, a leitura dos materiais complementares e a pesquisa em outras fontes, auxiliará bastante na construção do seu conhecimento científico. Sabemos que não existe receita pronta! Mas, realmente só se aprende os métodos instrumentais com a prática do dia-a-dia! A partir da prática, e pronto! Conto com a sua participação para darmos continuidade na próxima uni- dade! Até mais! UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 49 LEITURA COMPLEMENTAR Artigo: Determinação de cloreto em amostras de água por turbidimetria e potencio- metria com eletrodo íon seletivo: otimização dos parâmetros instrumentais para o método turbidimétrico. Resumo: A água é hoje um dos recursos ambientais mais preciosos e escassos da humanidade e, portanto, o aproveitamento racional e a preservação dos recursos da água doce devem ser metas prioritárias para a sociedade moderna. A qualidade da água é resultante de fenômenos naturais e das atividades antrópicas. Um dos parâmetros de potabilidade da água estabelecidos pelo CONAMA é a concentração de cloreto total. A quantificação de íons cloreto em água pode ser realizada por cromatografia de íons, titulação de precipitação, turbidimetria e potenciometria com eletrodo íon seletivo. Boas recuperações (entre 101 e 112%) de Cl foram obtidas para uma amostra de água certificada analisada pelos métodos testados (turbidimetria e potenciometria com eletrodo íon seletivo). Embora a precisão (RSD ≤ 9%) de todos os resultados fosse satisfatória, os resultados obtidos por potenciometria e turbidimetria foram estatisticamente diferentes quando comparados através do Teste-t de Student para 95% de nível de confiança. Os estudos continuam. A quantificação de Cl- por turbidimetria com adição de álcool polivinílico (PVA) à solução- amostra será testada. Fonte: COSTA, F. S. da; MONTEIRO, M. I. C. A.; ALEXANDRE, K. de C. B. Determinação de cloreto em amostras de água por turbidimetria e potenciometria com eletrodo íon seletivo: otimização dos parâme- tros instrumentais para o método turbidimétrico. VIII Jornada do Programa de Capacitação Institucional – PCI/ CETEM – 30 e 31 de outubro de 2019, p. 176 – 181. UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 50 MATERIAL COMPLEMENTAR LIVRO Título: Fundamentos da Química Analítica Autores: Donald M. West , Douglas A. Skoog, Holler F. James, Stanley R. Crouch. Editora: Tradução da 8ª edição Norte Americana. (2006). Sinopse: Este livro aborda aspectos tanto fundamentais quanto práticos da análise química. Seu maior objetivo é fornecer um fundamento completo dos princípios da quí- mica que são particularmente importantes para a química analítica a fim de que os alunos desenvolvam habilidades para a difícil tarefa de julgar a exatidão e a precisão de dados experimentais e de mostrar como esses julgamen- tos podem ser aprimorados pela aplicação de métodos estatísticos. Assim, atentos à evolução contínua da quí- mica analítica os autores incluíram nesta edição diversas aplicações em biologia, medicina, ciência dos materiais, ecologia, ciência forense e outras áreas correlatas. Há ainda inúmeros tópicos atuais tais como espectrometria de absorção atômica e de massa molecular fracionamento em fluxo tangencial e cromatografia quiral além de uma revisão de muitos tratamentos do passado para incorporar instrumentação e técnicas modernas. LIVRO Título: Eletroquímica: Princípios e Aplicações Autor: Edson Antonio Ticianelli, Ernesto R. Gonzalez Editora: Coleção Acadêmica - EDUSP Sinopse: Concebido para estudantes de graduação e pós- graduação em ciências exatas, esta obra serve de base para a leitura de textos mais aprofundados e especializados de eletroquímica. Os capítulos iniciais apresentam os conceitos básicos de eletroquímica termodinâmica eletroquímica, de potencial químico e eletroquímico, condução eletrolítica e teoria dos eletrólitos. Nos dois últimos capítulos são abordados: a conversão eletroquímica de energia, de grande importância hoje, quando são necessários m é todos mais eficientes de produção de energia sem que haja degradação ambiental, e ainda a utilização dos sistemas eletroquímicos em processos industriais, fato que demonstra a inserção da eletroquímica no processo produtivo. Em síntese, este livro fornece, de modo abrangente, os conceitos e aplicações fundamentais da eletroquímica. UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 51 https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_1?ie=UTF8&field-author=Donald+M.+West&text=Donald+M.+West&sort=relevancerank&search-alias=stripbookshttps://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_2?ie=UTF8&field-author=Douglas+A.+Skoog&text=Douglas+A.+Skoog&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks SÉRIE Título: CSI: Crime Scene Investigation Sinopse: Uma série dramática americana exibida pelo canal Columbia Broadcasting System (CBS). A série é centrada nas investigações do grupo de cientistas forenses do departamento de criminalística da polícia de Las Vegas, Nevada. Criada por Anthony E. Zuiker, estreou no dia 6 de outubro de 2000 nos Estados Unidos e passou quinze anos no ar, sendo finalizada no dia 27 de setembro de 2015. Estes cientistas desvendavam crimes e mortes em circunstâncias misteriosas e pouco comuns. VÍDEO Título: #QUÍMICA - MEDINDO PH COM PHMETRO Sinopse: Realização: Colégio Técnico da UFMG Link de acesso: https://www.youtube.com/wa- t c h ? v = z o s q q u h A Q x 0 & a b _ c h a n n e l = C o l t e c Tu b e VÍDEO Título: Aula Prática - Determinação de Condutividade Elé- trica em Águas Sinopse: Nesta videoaula sobre Condutividade Elétrica apresentamos o funcionamento básico de um Condutiví- metro, como realizar sua calibração e alguns conceitos im- portantes no momento da medição. Também realizamos a medição de Sólidos Totais Dissolvidos (STD) no mesmo equipamento. Link de acesso: https://www.youtube.com/wat- c h ? v = j S 1 w w 7 g 9 Q U g & a b _ c h a n n e l = A n d r % C 3 % A - 9 C e ra - C u r s o T % C 3 % A 9 c n i c o e m Q u % C 3 % A D m i c a UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 52 https://pt.wikipedia.org/wiki/S%C3%A9rie_de_televis%C3%A3o https://pt.wikipedia.org/wiki/Drama https://pt.wikipedia.org/wiki/Estados_Unidos https://pt.wikipedia.org/wiki/Columbia_Broadcasting_System https://pt.wikipedia.org/wiki/Perito_criminal https://pt.wikipedia.org/wiki/Perito_criminal https://pt.wikipedia.org/wiki/Las_Vegas https://pt.wikipedia.org/wiki/Nevada https://pt.wikipedia.org/wiki/Anthony_E._Zuiker https://pt.wikipedia.org/wiki/Estados_Unidos https://www.youtube.com/hashtag/qu%C3%ADmica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Plano de Estudos • Introdução aos métodos espectroquímicos; • Instrumentos para a espectrometria óptica; • Espectroscopia de fluorescência molecular; • Espectroscopia atômica. Objetivos da Aprendizagem • Conceituar e contextualizar os métodos espectroquímicos; • Compreender os componentes dos instrumentos de espectrometria óptica; • Conhecer as técnicas e os instrumentos de análise da espectrometria de absorção molecular UV-VIS e no Infravermelho; • Entender os métodos analíticos instrumentais como uso da espectrometria de absorção e de emissão atômica para interpretação de resultados mais precisos. 3UNIDADEUNIDADE ESPECTROQUÍMICAESPECTROQUÍMICA Professor Mestre Diego Marlon Santos INTRODUÇÃO Caro (a) aluno (a) quero agradecer você por ter chegado até aqui, pois daremos continuidade neste momento na disciplina de química instrumental. Portanto, lembre-se que as nossas discussões são, também, uma maneira para que você se sinta instigado a ir em busca do aprofundamento no conhecimento dos métodos espectroquímicos que serão estudados na Terceira Unidade. Nesta unidade serão apresentadas informações básicas, esclarecemos as defini- ções, diferenças e aplicações dos métodos espectroquímicos de instrumentação que estão relacionados a energia eletromagnética, e depende da luz emitida para obter o resultado e determinar o constituinte químico. Portanto, iremos discutir nesta unidade os princípios bá- sicos que são necessários para se entender as medidas feitas com a radiação eletromag- nética, particularmente aquelas que lidam com a absorção da radiação ultravioleta-visível, visível e infravermelho. A natureza da radiação eletromagnética e suas interações com a matéria são enfatizadas. E também serão estudados os instrumentos da espectroscopia de absorção molecular, espectroscopia de absorção atômica e emissão atômica. Finalmente, sua participação nesta unidade é essencial para que consiga compreen- der os métodos espectroscópicos que serão abordados, e as suas aplicações analíticas na determinação qualitativa e quantitativa de compostos orgânicos e inorgânicos nas diversas áreas da química. Então, vamos dar início?! Espero que você tenha bastante atenção no estudo deste material e aproveite o conhecimento aqui nesta unidade e faça as leituras complementares dos artigos, livros, filmes e outras fontes de pesquisa! Bons Estudos! UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 54 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Atualmente, podemos distinguir os vários métodos espectroscópicos e a sua relação com a energia eletromagnética. Estes métodos se embasam na ocorrência da emissão de radiação. Os métodos espectroscópicos de análise de acordo com Skoog et al. (2009) são: baseados na medida da quantidade de radiação produzida ou absorvida pelas mo- léculas ou pelas espécies atômicas de interesse. Podemos classificar os métodos espectroscópicos de acordo com a região do espectro eletromagnético envolvida na medida. As regiões espectrais que têm sido empregadas incluem os raios ỿ, raios X, ultravioleta (UV), visível, infravermelha (IV), microondas e radiofrequencia (RF). De fato, o uso corrente estende mais ainda o significado da espectroscopia de forma a incluir técnicas que nem mesmo envolvem o uso de radiação eletromagnética, como a espectroscopia acústica, de massas e de elétrons (SKOOG et al., 2009, p. 670). Schröder (2017) salienta que: Os métodos espectrométricos consistem em um grande número de métodos analí- ticos baseados na espectroscopia atômica ou molecular. Eles podem ser resumidos como métodos que se baseiam na interação entre energia eletromagnética e maté- ria. Essa interação pode resultar em fenômenos, como absorção, emissão, fotode- composição, reflexão, aquecimento, entre outros, e suas magnitudes dependerão das características tanto das moléculas como da energia radiante (SCHRÖDER, 2017, p. 118). Sob este olhar, é possível verificar o quanto são importantes esses métodos espec- troquímicos para entendermos a estrutura das moléculas e para análise qualitativa e quan- titativa das espécies químicas. Nesta unidade, serão abordados os conhecimentos básicos para compreender as medições realizadas com a radiação eletromagnética e as suas interações com os consti- tuintes químicos das amostras analisadas. UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ESPECTROQUÍMICOS TÓPICO 55 1.1 Propriedades da Radiação Eletromagnética A radiação eletromagnética é uma forma de energia que para Skoog et al., (2009, p. 671) “é transmitida através do espaço a velocidades enormes. Denominamos a radiação eletromagnética nas regiões do UV/visível e algumas vezes no infravermelho (IV) luz, embora estritamente falando o termo deveria se referir somente à radiação visível”. A radiação eletromagnética se propaga de distintas formas na natureza, e Schröder (2017, p. 119) afirma que “desde as ondas geradas pelos processos naturais, como a luz visível até as criadas pelo homem, até as ondas de rádio e TV ou raios X. Todas têm uma característica comum, são resultados das oscilações do campo elétrico e do campo magnético”. Assim, podemos destacar que a radiação eletromagnética é interpretada quanticamente como pequenos pacotes de energia, denominados Fótons. São partículas que não possuem massa e uma energia discreta, proporcional a frequência da radiação eletromagnética. 1.1.1 Propriedades das Ondas Em primeiro lugar, é fundamental que a luz seja descrita na forma de partículas ou de onda. Como você pode ver, Harris (2008, p. 435) aborda que “as ondas luminosas con- sistem em campos magnéticos e elétricos oscilantes, perpendiculares”. Skoog et al. (2009) relata que: Quando se lida com fenômenos como a reflexão, refração, interferência e difração, a radiação eletromagnética é modelada de forma conveniente como ondas constituídas de um campo elétrico e um campo magnético oscilantes e perpendiculares entre si, como a Figura 1. O campo elétrico para uma dada frequência oscila de forma senoidal no espaço e no tempo, como exposto na Figura 2. Aqui, o campo elétrico é representado como um vetor cujo comprimento é proporcional à intensidade de campo. O eixo x nesse gráfico pode representar o tempo quando a radiação passa por um ponto fixo no espaço ou a distância para um tempo fixo. Observe que a direção na qual o campo oscila é perpendicular aquela na qual a radiação se propaga (SKOOG et al., 2009, p. 671). Na Figura 1 demostra uma onda plano-polarizada, em que o plano elétrico se encon- tra no eixo xy e o campo magnético no eixo plano xz. 56UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 1 – A NATUREZA ONDULATÓRIA DE UM FEIXE DE RADIAÇÃO COM UMA ÚNICA FREQUÊNCIA Fonte: Skoog et al. (2006, p. 671) FIGURA 2 – REPRESENTAÇÃO DIMENSIONAL DO VETOR CAMPO ELÉTRICO Fonte: Skoog et al. (2006, p. 671) Radiação Eletromagnética São propriedades descritas por meio de onda senoidal → comprimento de onda (λ), velocidade (c) e amplitude (A). Radiação Eletromagnética: ondas eletromagnéticas de dois campos oscilantes, um elétrico (E) e um magnético (B), orientados em ângulos retos na direção de propagação. Unidade de λ - Metros (m); - Centímetros (cm, 10-2 m ); - Micrômetro (μm, 10-6 m); - Nanômetro (nm, 10-9 m); - Ângstrom (A, 10-10 m); - Outra relação importante é o número de onda (ū): ū = 1/ λ utilizado na espectrometria de infravermelho, sendo que o inverso do comprimento de onda é a própria frequên- cia da onda. 57UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA Espectro eletromagnético → espectro de energia radiante → dividido em várias re- giões. Divisões de acordo com a origem das radiações, suas fontes e os detectores para a sua detecção. As diferentes regiões espectrais têm significado importante nas interações físicas entre matéria e energia → fornecem informações importantes Relação entre Energia e Frequência Skoog et al. (2009, p. 673) “em muitas interações entre radiação e matéria, é mais útil considerar a luz como constituída por fótons ou quanta. Podemos relacionar a energia de um fóton com seu comprimento de onda, frequência e número de onda”. Do mesmo modo, Harris (2008): Com relação a energia, é mais conveniente pensar na luz como partículas chama- das fótons. Cada fóton transporta a energia e, é dada por: E = hv Onde h é a constante de Planck (=6.626 x 10-34 J.s). → A equação estabelece que a energia é proporcional a frequência. Combinando a equação (1) e (2): Onde v = (1/λ) é chamado de número de onda (m-1 ou cm-1). A energia é inversamente proporcional ao comprimento de onda e diretamente proporcional ao número de onda. Ex.: A luz vermelha tem comprimento de onda maior do que a luz azul, ou seja, é menos energética que a luz azul (HARRIS, 2008, p. 436). FIGURA 3 – ESPECTRO ELETROMAGNÉTICO Fonte: Lazo e Islas (2022). Quando a radiação eletromagnética atravessa uma camada de sólido, líquido ou gás → algumas frequências são absorvidas; Pode ocorrer absorção da radiação: 58UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA - Absorção atômica: absorção pela radiação pelos átomos; - Absorção molecular: absorção da radiação pelas moléculas. QUADRO 1 – ESPECTRO ELETROMAGNÉTICO Fonte: O Autor (2022). 59UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Os métodos da espectrometria de absorção atômica, espectrometria de emissão e fluorescência, são notavelmente semelhantes em sua função e nos seus requisitos de desempenho, que sejam desenhados para a radiação ultravioleta (UV), visível ou infravermelho (IV). Em razão dessas semelhanças, esses instrumentos são frequentemente designados por instrumentos ópticos, mesmo sabendo-se que o olho humano é sensível somente a região do visível. Nesta unidade, examinaremos primeiro as características dos componentes comuns a todos os instrumentos ópticos. Então, iremos considerar as características de instrumentos ópticos. Então iremos considerar as características de instrumentos típicos projetados para a espectroscopia de absorção no UV, visível e IV. 2.1 Espectrofotometria ultravioleta e visível Trata-se de uma das metodologias muito utilizadas em análises químicas, devido a sua grande eficiente, de alta confiabilidade nos resultados analíticos, com custo barato, apresenta uma alta sensibilidade sendo possível aumentar a faixa de implementação da técnica, permitindo que as leituras das medições sejam cada vez menores. Harris (2008) salienta que: a espectrometria ultravioleta e visível, uma amostra líquida é geralmente colocada numa célula chamada de cubeta que possui faces planas de sílica (SiO2) fundida. O vidro é apropriado para espectroscopia visível, mas não para a espectroscopia ultravioleta. As cubetas mais comuns possuem largura de 1.000 cm e são vendidas em duplas para a amostra e a referência (HARRIS, 2008, p. 441). Rocha e Teixeira (2004) afirmam que: UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 INSTRUMENTOS PARA A ESPECTROMETRIA ÓPTICA TÓPICO 60 Apesar da extensa utilização, várias inovações recentes relacionadas às medidas espectrofotométricas ainda são pouco conhecidas. Com respeito ao aspecto instru- mental, é notável a evolução desde os procedimentos baseados em comparações visuais e dos fotômetros empregando filtros para a seleção de comprimentos de onda até os equipamentos mais recentes, que empregam arranjos de fotodetecto- res. Esses permitem a aquisição de espectros de absorção em intervalos de tempo da ordem de milésimos de segundos e são disponíveis, inclusive, em versões mi- niaturizadas acopladas a computadores do tipo "palm-top" (ROCHA e TEIXEIRA, 2004, p. 01). 2.1.1 O processode absorção Dando enfoque nesse momento no processo de absorção da radiação UV-Vis. Schröder (2017) salienta que: A absorção da radiação UV-Vis por moléculas ocorre, geralmente, em uma ou mais bandas de absorção eletrônicas, cada uma formada por linhas muito próximas, po- rém discretas. Cada linha resulta da transição de um elétron do E0 para um dos es- tados de energia vibracional e rotacional associados a cada estado eletrônico exci- tado. Como há muitos desses estados e suas energias diferem muito pouco, muitas linhas bem próximas estão contidas em uma banda típica. Isso pode ser visualizado quando analisamos uma mesma estrutura na forma de vapor (molécula individual, espectro cheio de picos) em um solvente não polar (bandas) e em solução aquosa (única banda de absorção) (SCHRÖDER, 2017, p. 121). Neste viés, o processo de absorção precisa das medidas, no caso, deve ser realiza- da uma antes do feixe atravessar no centro que consta a amostra com o analito (radiação incidente, P0), e outra logo em seguida (radiação transmitida, P). Skoog et al. (2009, p. 678) afirma que “a medida que a luz atravessa um meio con- tendo um analito que absorve, um decréscimo de intensidade ocorre na proporção que o analito é excitado”. FIGURA 5 – LEI DE BEER Fonte: O Autor (2022) Existe uma relação matemática entre a absorbância (A), a espessura da amostra (b) e a concentração das espécies absorventes (c) → Lei de Beer. 61UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA A = a b c ou A = ε b c ε → absortividade molar → propriedade característica da substância. Existe uma relação matemática → gráfico de A x c → linha reta (até uma determina- da faixa de concentração). 2.1.2 O espectro de absorção Os cientistas realizam estudos acerca da radiação luminosa com diferentes comprimentos de onda, demonstram que o espectro de absorção está relacionado a análise da concentração através da absorção da solução química de interesse que pode ser adquirida com o uso do método espectrofotométrico. Logo, é fundamental buscar esclarecimentos dos princípios da técnica de espectrofotometria, para determinar as substâncias químicas por meio da absorção da luz. Skoog et al. (2009) traz a seguinte definição do espectro de absorção, é um gráfico de absorbânica versus o comprimento de onda, como pode ser visto na Figura 6. A absorbância pode também ser apresentada em forma de gráfico contra o número de onda ou a frequência. Muitos espectrofotômetros modernos de varredura produzem os espectros de absorbância diretamente. Muitos espectrofotômetros modernos de varredura produzem os espectros de absorbância diretamente. Os instrumentos antigos muitas vezes indicam a transmitância e produzem os gráficos de T ou %T versus o comprimento de onda. Ocasionalmente, os gráficos que empregam o log A como ordenada são utilizados. O eixo logaritmo leva a uma perda de detalhes espectrais, mas é conveniente para se comparar soluções com amplas diferenças de concentrações. Um gráfico da absortividade molar E em função do comprimento de onda é independente da concentração. Um gráfico de absortividade molar E em função do comprimento é independente da concentração. Esse tipo de gráfico espectral é característico para uma da molécula e algumas vezes é empregado para auxiliar na atribuição ou confirmação da identidade de uma espécie em particular. A cor de uma solução está relacionada com o seu espectro de absorção (SKOOG et al., 2009, p. 684). FIGURA 6 – ESPECTRO DE ABSORBÂNCIA DE UMA SOLUÇÃO DE IODO EM CLOROFÓRMIO Fonte: Sala (2022) 62UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA A técnica da curva de calibração é utilizada quando não se conhece a absortividade (a) da amostra, a seguir na figura 7. Quando se conhece a absortividade (a) para a amostra, aplica-se a equação de Beer (A = a b c), utilizando-se o valor de A para a amostra, encontra-se a concentração na amostra problema. FIGURA 7 – CURVA DE CALIBRAÇÃO DA SOLUÇÃO DO FENOL Fonte: Mallak et al. (2022) Quando a quantidade de soluto está muito elevada → desvios da linearidade na reta anterior → desvios na Lei de Beer. Deve-se trabalhar com soluções diluídas, controlar pH e temperatura. Escolha do solvente → importante. Para se determinar a concentração de uma espécie pode ser necessário fazê-la rea- gir com um reagente que forme com esta um composto colorido. Metal + Ligante → Composto colorido. Exemplo: Determinação espectrofotométrica de ferro. Reação do Fe com orto-fenantrolina → forma complexo fenantrolina-ferro, de cor laranja-avermelhado → absorve no Vis. Para se determinar em qual λ se realizarão as leituras da curva de calibração → de- terminação do espectro de absorção do composto → varredura Absorbância x λ na região UV-Vis. 63UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 8 – ESPECTROS DE ABSORÇÃO DO REAGENTE COMPLEXANTE 1,10 FENANTROLINA Fonte: XDOCS (2022) 2.1.2 Método da espectrometria UV-VIS Preparam-se padrões de concentração exatamente conhecidos do analito. Faz-se a leitura de absorbância no valor máximo de absorbância (espectro de absorção). Lê-se a absorbância da amostra problema (analito) e interpola-se na curva de calibração. 2.1.3 Componentes dos instrumentos para espectrometria óptica Neste momento da unidade, vamos conhecer os instrumentos para a espectrometria óptica, em que Skoog et al. (2009) apresenta: os componentes dos instrumentos espectroscópicos para uso nas regiões do UV- visível (UV) e Infravermeho (IF) apresentam cinco componentes: (1) uma fonte estável de energia radiante; (2) um seletor de comprimento de onda que isola uma região limitada do espectro para a medida; (3) um ou mais recipientes para a amostra; (4) um detector de radiação, o qual converte a energia radiante para um sinal elétrico mensurável; e (5) uma unidade de processamento e de leitura do sinal, geralmente constituída por um circuito eletrônico e, nos instrumentos modernos, por um computador (SKOOG et al., 2009, p. 704). A seguir, verifica-se na Figura 9 que ela demonstra os componentes da espectroscopia óptica. 64UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 9 – COMPONENTES DE VÁRIOS TIPOS DE INSTRUMENTOS PARA A ESPECTROSCOPIA ÓPTICA Fonte: Adaptado de: Skoog et al. (2022, p. 705). Instrumentação para Espectrometria UV-Vis: • Colorímetros: trabalham apenas na região do visível → equipamentos mais simples; • Espectrofotômetros: equipamentos mais complexos → trabalham a região UV e Vis; • O λ é separado por monocromadores → melhor separação no λ → banda mais es- treita → menor erro; • Feixe simples ou feixe duplo. • Fotômetro: o λ é separado por filtros ópticos → separação de λ não tão eficiente → banda mais larga. FIGURA 10 - ESQUEMA DE FOTÔMETROS E ESPECTROFOTÔMETROS Fonte: Martinez (2022). Fonte luminosa: lâmpadas de tungstênio ou descarga de H2. Meio para separar os λ → filtros, prismas ou redes de difração. Cubetas → porta amostras (região visível: vidro especial; ultravioleta: quartzo). Detector de energia radiante → foto tubos, células fotoelétricas/fotovoltáicas Medidor/registrador. 65UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 11 - ESPECTROFOTÔMETRO UV-VIS Fonte: Marconi (2022) FIGURA 12 – TIPOS DE CUBETAS Fonte: Labconch (2022). Espectrofotometria UV-Vis → técnica muito utilizada na Análise Quantitativa. Aparelhos: feixe simples → mais baratos. Feixe duplo → mais caros. De maneira geral: fáceis de operar. O limite de detecção da Espectrofotometria UV-Vis depende das absortividades mo- lares (ε) dos grupos cromofóricos (104 até 105). A limitação da técnica UV-Vis é devida à limitação instrumental, variáveis químicas e a habilidade do operador do instrumento. A limitação instrumental está na perda da radiação pelo instrumento (seletor de λ) e na largura da banda. 2.1.4 Aplicações da espectrometria de UV-Vis Análise qualitativa: auxilia na identificação de espécies moleculares → comparação do espectro da substância em estudo com a da literatura. Análisequantitativa → maior emprego da técnica UV-Vis. Podem ser determinadas duas substâncias simultaneamente numa amostra. Podem ser analisados amostras sólidas, líquidas e gasosas. Amostras sólidas requerem porta amostra adequados. Tempo de análise: 1 a 10 minutos para obter um espectro de absorção completo. O tempo de análise depende da técnica empregada para preparar a amostra e do tipo de análise. Precisão: é altamente dependente da complexidade da amostra e cuidados na cali- bração (do aparelho e dos padrões). Sensibilidade e limite de detecção: para compostos com intensa fluorescência → concentrações de 10-11 a 10-12 M podem ser determinadas. Exemplo de Determinação de Compostos por UV-Vis: • Determinação Espectrofotométrica de Ferro Total (Compostos Ferrosos e Férricos) em Águas por Espectrometria UV-Vis; • Óxidos de ferro II solúveis em água → concentrações superiores de ferro em torno de 0,3 mg/L → indesejável → provoca manchas em superfícies; 66UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA • Determinação do Ferro pelo Método da Fenantrolina: • Princípio da técnica → o ferro II reage com a 1,10 – fenantrolina para formar um com- plexo vermelho alaranjado [(C12H8N2)3Fe]2+. A intensidade da cor é independente da acidez no intervalo de pH 2 a 9 e é estável por longos períodos. Reação: Fe2+ + 3 fenH+ ↔ Fe(fen)3 2+ + 3H+ • O ferro II e o ferro III podem ser determinados espectrofotometricamente; • O complexo laranja avermelhado do ferro II absorve a 515 nm e o complexo amarelo do ferro II absorvem a 396 nm. 2.2 Espectrofotometria de infravermelho Radiação infravermelho (IV) ou em inglês (infrared – IR): situada no espectro eletro- magnético entre as regiões visíveis e das microondas. A região de maior utilidade está entre 4000 e 670 cm-1 (número de onda (ū): ū = 1/λ). Princípio da técnica: Quando a radiação eletromagnética incide sobre a molécula → esta começa a vibrar como bolas e as ligações como molas. Em qualquer situação → o sistema está em movimento. Porém, quando se aplica uma radiação externa → começa a haver movimento nas ligações → estiramentos. Estes estiramentos dependem: do tipo de átomo envolvido e força da ligação. Quando a molécula ou grupo de átomos absorve a radiação → consome um deter- minado valor de energia → registrado pelo aparelho. Exemplo: Molécula de CO2. Deformação axial simétrica: Dá origem a uma banda em 1340 cm-1. Deformação angular simétrica no plano: Dá origem a uma banda em 666 cm-1. Assim, a cada valor de energia fornecida → origem a “bandas” (picos) no espectro de IV → gráfico de Absorbância (ou transmitância) versus número de onda (ū). Cada grupo funcional orgânico (hidroxila, carbonila, ligações carbono-carbono, du- plas, triplas, etc) das diferentes funções orgânicas vão absorver a radiação em regiões diferentes do infravermelho → cada grupamento apresentará um pico numa região limitada do espectro IV. Com o uso de tabelas → faz-se uma previsão do possível grupo na substância em estudo. A espectrometria IV é utilizada para auxiliar na identificação de grupos funcionais e compostos orgânicos. Na identificação de compostos orgânicos → compara-se o espectro do composto em estudo com um espectro padrão (referência). Exemplos: Grupos carbonila C = O → absorvem em 1900 – 1500 cm-1. Grupos O – H → absorvem em 3800 – 2700 cm-1. A espectrometria IV juntamente com outras técnicas instrumentais (Ressonância Magnética Nuclear, Espectrometria de massa, etc) são empregadas na determinação de estruturas químicas de compostos orgânicos. 67UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 13 – FREQUÊNCIAS DE ABSORÇÃO NO IV DE GRUPOS CARACTERÍSTICOS Fonte: O Autor (2022). Fonte de radiação em IR: Óxidos de terras raras moldados, quando aquecidos forne- cem a radiação necessária. Filamento de Nernst: óxido de zircônio, tório e cério; temperatura de 1.000 a 1.800ºC). Problemas apresentados pelo Espectrofotômetro de IR Dispersivo: • Grande número de partes móveis em seu interior; • Baixa velocidade de varredura (amostras em cinética não podem ser analisadas); • Decréscimo da sensibilidade do sistema com os efeitos da fenda (separação da energia emitida pela fonte); • Aquecimento da amostra; • O aquecimento da amostra pode gerar radiação; 2.2.1 Espectrofotometria de infravermelho com transformada de FOURIER – FTIR Variando-se a distância percorrida pelos feixes, cria-se uma intensidade maior da radiação. Uma transformada de Fourier (função cosseno) transforma a informação obtida para frequência (com algoritmo matemático). Vantagens do Espectrofotômetro de FTIR: • Maior velocidade de varredura; • Melhor resolução (melhor definição dos picos), eliminação de picos estranhos e au- mento de sensibilidade; • Um espectrômetro de FTIR pode ser acoplado em sequência com HPLC ou CG; 68UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA Preparação das amostras: • Amostras líquidas: para amostras isentas de água → colocadas entre placas de NaCl → obtém-se filme com espessura de 0,01 mm ou menos; • Amostras sólidas: dissolve-se o sólido em solvente adequado → Nujol, Fluorolube (polímero halogenado); • Pode-se utilizar pastilhas sólidas de KBr, KCl → material moído em gral de ágata → a seguir, forma-se um filme sólido por prensagem; • Amostras gasosas: usa-se uma cela fechada de material não absorvente no IV; Quantidade de amostra: Sólidos → 50 a 200 mg; Líquidos → 0,5 μL; Gases → 50 ppb. Tempo de análise: 1 a 10 minutos. Precisão: análise de misturas → maior do que 1%. Análises de rotina → +/- 5%. 2.2.2 Aplicações da espectrometria IV na química ambiental Análise de poluentes atmosféricos → podem ser detectados gases como CO e SO2 em amostras de atmosfera. O CO mostra uma banda de absorção forte na região 2250 – 2050 cm-1 (acima de 10 ppm). No solo, pode ser investigada a presença de contaminantes → pesticidas. Pode ser feitos estudos de degradação de substâncias sujeitas à exposição ao meio ambiente → degradação de polímeros por luz UV, radicais livres produzidos por processos naturais e ataques por microorganismos. 69UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . A respeito da Luminescência existem dois tipos, a Fluorescência e a Fosforescência, esclarecendo um pouco mais esses conceitos, o autor Harris (2008, p. 452) explica que “estão relacionados a emissão de luz de qualquer estado de excitação da molécula”. Schröder (2019, p. 137) define “a fluorescência como a radiação responsável pela excitação retirada, e a emissão que cessa imediatamente, o que indica que as transições de energia envolvidas não provocaram mudança no spin eletrônico”. Sob o mesmo ponto de vista, acreditamos que na fluorescência molecular ocorrem muitas coincidências entre os divergentes de energia, causando uma emissão bastante difícil com comprimentos de ondas maiores, por causa de outras transformações que acon- tecem. Segundo Skoog et al. (2009): A fluorescência é um processo de fotoluminescência no qual os átomos ou moléculas são excitados por absorção de radiação eletromagnética. As espécies excitadas então relaxam ao estado fundamental, liberando seu excesso de energia como fótons. Uma das características mais relevantes da fluorescência molecular está na sua sensibilidade intrínseca, a qual frequentemente é de uma a três vezes maior que a da espectroscopia de absorção. De fato, para determinadas espécies sob condições controladas, a presença de uma única molécula pode ser determinada pela espectroscopia de fluorescência. Outra vantagem está na faixa linear de concentração dos métodos de fluorescência, a qual é significativamente maior que aquela encontrada na espectroscopia de absorção. Contudo, os métodos de fluorescência são muito menos aplicados que os métodos de absorção em razão do número limitado de sistemas químicos que fluorescem com intensidade apreciável. A fluorescência está também sujeitaa muitos outros efeitos de interferência ambiental que os métodos de absorção. Portanto, destacam-se alguns dos mais importantes aspectos dos métodos de fluorescência molecular (SKOOG et al., 2009, p. 782). UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 ESPECTROMETRIA DE FLUORESCÊNCIA MOLECULAR TÓPICO 70 Trata-se de um método muito utilizado para determinação de constituintes químicos orgânicos, entretanto, dá pra analisar compostos inorgânicos por meio de uma reação que possibilita a produção de quelato, que é usado pra fabricar agentes quelantes que atuam na complexação e inativação de íons metálicos (magnésio, ferro, cobre e cálcio) extremamen- te presentes em água ou aditivos químicos de formulações de vários produtos. Para Schröder (2019, p. 146) “a maior utilização das técnicas baseadas no fenôme- no da fluorescência na área farmacêutica é como detectores de CLAE. Assim, a técnica é utilizada para o doseamento de fármacos em formulações farmacêuticas (…)”. Neste viés, podemos lembrar de outros componentes de origem fluorescentes, estão proteínas, compostos poliaromáticos, drogas e a riboflavina. Harris (2008) relata que: A maioria dos compostos não é naturalmente luminescente.Todavia, juntando com uma parte fluorescente, tornam-se um caminho fácil para análises sensíveis. A fluo- resceína é um composto altamente fluorescente que pode ser adicionado a várias moléculas para fins analíticos. A marcação fluorescente das impressões digitais é um ferramenta poderosa na análise forense. Os íons metálicos podem ser analisa- dos por meio de suas reações com um agente quelante, fluorescente. Por exemplo, um derivado da fluoresceína chamado de calceína forma um composto fluorescente com o cálcio (HARRIS, 2008, p. 455) Assim, percebemos que os métodos de fluorescência têm limites de detecção bai- xos, sendo uma das técnicas de alta sensibilidade com menor precisão e exatidão. 71UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . A anos a população mundial têm consumido produtos sem conhecer os componentes químicos que podem causar riscos a saúde de cada indivíduo. Nos dias atuais, uma preocupação que aumenta é a presença de metais em produtos consumidos no cotidiano, como; água, alimentos e medicamentos, que podem ser tóxicos dependendo da concentração ingerida pela pessoa. Dando destaque os métodos espectroscópicos atômicos, Skoog et al. (2009) ressal- tam que são: empregados na determinação qualitativa e quantitativa de mais de 70 elementos. Tipicamente, esses métodos podem detectar quantidades de partes por milhão a partes por bilhão e, em alguns casos, concentrações ainda menores. Os métodos espectroscópicos são, além disso, rápidos, convenientes e geralmente de alta seletividade. Podem ser divididos em dois grupos: espectrometria atômica óptica e espectrometria de massas atômicas (SKOOG et al., 2009, p. 796). Conforme o ponto de vista do autor, os métodos são usados para provocar uma atomização da amostra que será preparada para análise espectroscópica. Portanto, desta- cam-se para Schröder (2017) nesta análise: a fotometria de chama, a espectrometria de absorção atômica (AAS) e a espectrometria de emissão atômica (AES). Todas essas técnicas obedecem à Lei de Beer e baseiam se na absorção ou emissão de radiação visível ou ultravioleta por parte dos elétrons que, ao sofrerem um salto quântico depois de devidamente excitados, devolvem a energia recebida para o meio, voltando para a sua camada orbital de origem. A fotometria de chama, apesar da sua simplicidade e baixo custo, tem sido suplantada pelas demais técnicas, já que é restrita aos metais alcalinos e não alcança os limites de quantificação obtidos nas demais. Já a fluorescência atômica, apesar de muito útil para determinação quantitativa de vários elementos, tem poucas vantagens em relação às técnicas já consagradas de absorção e emissão atômica, além de os equipamentos serem mais caros. Por isso, não trataremos dessas duas técnicas, mas as demais veremos no decorrer desta seção, iniciando pela absorção atômica (SCHRÖDER, 2017, p. 151-152). UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 ESPECTROSCOPIA ATÔMICA TÓPICO 72 Nesta perspectiva, sabemos que as águas contaminadas podem causar sérios prejuízos a saúde da população, logo, a determinação multielementar de traços em águas através da espectrometria de absorção atômica, poderá contribuir no monitoramento dos mananciais e lençol freático. A poluição da água contaminada por resíduos químicos do tratamento de efluente com a presença de metais pesados, como o cromo hexavalente, chumbo e mercúrio. 4.1 Espectrometria de absorção atômica A espectroscopia de absorção atômica em chama (EAA) é corretamente o método atômico mais empregado, em razão da sua simplicidade, efetividade e custo relativamente baixo. A técnica foi introduzida em 1955 por Walsh na Austrália e por Alkemade e Milatz na Holanda. O primeiro espectrômetro de absorção atômica (AA) comercial foi introduzido em 1959 e, depois disso, o uso da técnica cresceu de forma explosiva. Os métodos de absorção atômica não eram utilizados até aquela data por problemas criados pelas larguras estreitas das linhas de absorção atômica. Princípio da Técnica A Espectrometria de Absorção Atômica (AA) se baseia na quantidade de radiação absorvida pelos átomos neutros no estado fundamental do elemento de interesse, os quais são produzidos na chama. Qual o pré-requisito da AA? → a amostra deve estar em solução. FIGURA 14 – DIAGRAMA DE UM ESPECTRÔMETRO DE ABSORÇÃO ATÔMICA POR CHAMA Fonte: Veiga (2022). 4.1 Espectrometria de absorção atômica Toma-se conhecimento que a espectrometria de absorção atômica, de acordo com Schröder (2019, p. 152) “conhecidas como técnicas fundamentadas na interação entre a radiação e os átomos no estado livre. Por isso, o elemento a ser determinado deve ser, primeiramente, atomizado, ou seja, deve estar em um estado neutro e isolado”. 73UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA Visão Geral da Espectrometria de Absorção Atômica (EAA) – Etapas: 1) A amostra líquida é aspirada para a chama (temperatura de 2.000 a 3.000 K) → pro- cesso de nebulização → transformação em fino aerosol e misturada com os gases combustível e oxidante que produzem a chama; 2) Na chama o líquido evapora e o sólido restante é atomizado (quebrado em átomos); 3) A fonte de radiação (lâmpadas de cátodo oco) bombardeia a amostra com a radiação no comprimento de onda necessário para ocorrer o processo de transição eletrônica do átomo de interesse; Exemplos: FIGURA 15 – COMBUSTÍVEL, OXIDANTE E TEMPERATURA DO EAA Fonte: O Autor (2022). Fontes de radiação para AA Lâmpadas de cátodo oco (LCA). O Cátodo oco é formado pelo metal em análise. Podem ser encontradas para único elemento ou para vários elementos (lâmpada de aplicação). 74UNIDADE 3ESPECTROQUÍMICA FIGURA 16 – LÂMPADA DE CÁTODO Fonte: Luiz (2022). Em EAA → a atomização pode ser de dois tipos: atomização por chama ou atomi- zação eletrotérmica. Atomização por Chama → conjunto nebulizador/queimador, pode ser visto na Fi- gura 17. FIGURA 17 – ATOMIZAÇÃO POR CHAMA. Fonte: Labelopucrs (2022). Nebulizador: Um dos componentes mais importantes da instrumentação em EAA. Nele, a amostra é nebulizada e atomizada no caminho ótico do feixe de luz da fonte de radiação. Queimadores: Para a chama de ar acetileno → aço inoxidável; fenda de 1 mm; (figura a seguir). Para a chama óxido nitroso-acetileno → titânio; fenda de 1 mm. Interferência espectral → radiação observada quando a medida da radiação absorvida é erroneamente mais elevada devido à absorção de uma espécie que não seja o elemento de interesse. Para minimizar o efeito da interferência espectral → utilizam-se corretores de fundo. Exemplo: lâmpada de deutério → emite a radiação para neutralizar o efeito da interferência espectral. Interferência Química → Interferência causada pelos efeitos da não decomposição completa do composto em estudo → controle correto da temperatura da chama. Interferência da Matriz → causada pelos efeitos físicos da matriz → concentração e 75UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA viscosidade → afetam velocidade de sucção, nebulização e atomização → erros nas leitu- ras. Para minimizar ou eliminar → os padrões devem ter a mesma composição química e física da amostra. Técnica de Determinação da concentração em EAA Preparo de soluções padrões do elemento de interesse. Leitura da absorbância dos padrões → geração da curva de calibração. Leitura da absorbância das amostras. Fotômetro de Chama A fotometria de chama, apesar da sua simplicidade e baixo custo, tem sido suplanta- da pelas demais técnicas, já que é restrita aos metais alcalinos e não alcança os limites de quantificação obtidos nas demais, como pode ser visto na Figura 18 e Figura 18 e Figura 19. FIGURA 18 – FOTÔMETRO DE CHAMA Fonte: Atlasdiagnostica (2022). FIGURA 19 – FOTOMETRIA X ESPECTROMETRIA DE AA Fonte: O Autor (2022). 76UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA Atomização Eletrotérmica É notório como a atomização eletrotérmica se tornou essencial para muitas inves- tigações da análise instrumental, transformando a amostra em solução para átomos ou espécies iônicas voláteis. Segundo Schröder (2019) convém lembrar que: toda a amostra é atomizada em um curto período de tempo. O processo inicia quan- do alguns microlitros da amostra são evaporados em baixa temperatura e queima- dos a uma temperatura superior nos tubos de grafite. Após a queima, a temperatura aumenta rapidamente, promovendo a atomização da amostra em poucos milisse- gundos. A absorção do vapor atômico é, então, medida. Geralmente, a amostra é depositada sobre a plataforma de L’vov (dentro do tubo), e isso permite que a temperatura não varie tão bruscamente, aumentando a reprodutibilidade. A técnica é usada tanto para amostras líquidas como sólidas (SCHRÖDER, 2019, p. 152). Com base nos métodos espectroscópicos atômicos Skoog et al. (2009) abordam que: nos atomizadores contínuos, como os plasmas e as chamas, as amostras são intro- duzidas de forma contínua. Nos atomizadores discretos, as amostras são introduzi- das de forma discreta com um dispositivo com uma seringa ou um auto-amostrador. O atomizador discreto mais comum é o atomizador eletrotérmico (SKOOG et al., 2009, p. 800). Logo, temos que reconhecer a importância deste instrumento analítico como forno de grafite e destacar o quanto são empregados para auxiliar no preparo de amostras que serão atomizadas, com o intuito de determinar os metais traços em amostras de alimentos, ambientais (água e solo) e biomoléculas, entre outras. 1.2 Espectrometria de emissão atômica A espectrometria de emissão atômica é bastante usada, conforme Schröder (2019, p. 159) esse método se fundamenta “na propriedade dos átomos neutros ou íons monoa- tômicos em estado gasoso de emitir, quando térmica ou eletricamente excitados, radiações com λ característicos nas regiões do UV-Vis”. Por isso, devemos considerar que as energias emitidas por uma determinada espé- cie contribui para a formação do seu espectro. Nesta perspectiva, os sistemas de energia devem promover uma volatilização da amostra para transformar a espécie do analito em átomos ou íons elementares, e por fim, atender a demanda energética. Em seguida, na Figura 20 demonstramos um fluxograma com as Etapas da Espec- trometria de Emissão Atômica. 77UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA FIGURA 20 – ETAPAS DA ESPECTROMETRIA DE EMISSÃO ATÔMICA Fonte: Silva (2013). Skoog et al. (2009) relatam que: A emissão atômica ou iônica do plasma é separada em seus comprimentos de onda constituintes por um dispositivo isolador de comprimentos de onda. Essa separação pode ocorrer em um monocromador, em um policromador ou em um espectrógrafo. O monocromador isola um só comprimento de onda por vez em uma única fenda de saída, enquanto um policromador isola vários comprimentos de onda silmultaneamente em múltiplas fendas de saída. O espectrógrafo provê uma grande abertura na sua saída permitindo a saída de uma faixa de comprimentos de onda. A radiação isolada é convertida em sinais elétricos por um único transdutor, por múltiplos transdutores ou por um arranjo de detectores. Os sinais elétricos são então processados e supridos como entrada para o sistema computacional (SKOOG et al., 2009, p. 810-811). Quando os átomos são excitados na chama saltam para o estado menos energético de emissão de energia. Um equipamento de espectroscopia por emissão atômica é constituído de uma fonte de energia, um local para injetar a espécie da solução do analito, um espectrômetro - ICP e o registro dos resultados. De acordo com Schröder (2017): A espectrometria por emissão por plasma (ICP), arco ou centelha oferece muitas vantagens quando comparada aos métodos de absorção de chama ou forno, como menor interferência química (resultado direto das altas temperaturas) e bons espectros de emissão para muitos elementos sob as mesmas condições de excitação, permitindo obter espectros de inúmeros elementos simultaneamente. Além disso, fontes de plasma permitem a determinação de não-metais, como cloretos, brometos, iodetos e enxofre. Os espectros são bastante complexos, constituídos de centenas ou milhares de linhas, requerendo alta resolução e equipamentos ópticos caros (SCHRÖDER, 2017, p. 160). Desta maneira, o analista químico através do seu conhecimento e experiências vai aprofundando seus estudos sobre os métodos espectroquímicos por emissão de plasma, formado por causa da grande intensidade do campo de energia elétrica, implementado por um gerador, que causa a ionização e o uso do gás de argônio. Enfim, para a Skoog et al. (2009, p. 810) “a espectrometria de emissão atômica é amplamente usada em análise elementar: O ICP é no momento a fonte popular para espec- trometria de emissão atômica”. 78UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA A partir da Figura 21 é possível ter um embasamento sobre o sistema de funcionamento do espectrometria de emissão atômica – ICP e como estão organizadas as etapas referentes ao método espectroquímico. FIGURA 21 – ESPECTROMETRIA DE EMISSÃO ATÔMICA Fonte: Adaptado de: Skoog et al. (2006, p. 803) Schröder (2017) busca esclarecer o que ocorre no espectrômetro de ICP que: As amostras são introduzidas com uma vazão de argônio, na forma de aerossol, ou pó fino formado em um nebulizador. As partículas da amostra ascendem por um canal axial estreito, com temperatura emtorno de 7000K. A elevada temperatura e o tempo relativamente longo de interação das partículas do plasma garantem a completa vaporização do soluto e o alto grau de atomização. Os átomos livres fluem em uma corrente ascendente por um canal cilíndrico e, então, são observados. Observações espectrais, geralmente, são feitas a 6000 K (onde não aparecem as li- nhas do argônio). A tocha pode ser visualizada axialmente (de cima) ou radialmente (corte). O tempo e a temperatura são de duas a três vezes x maiores do que AAS, resultando em atomizações mais completas e com menos interferências químicas (SCHRÖDER, 2017, p. 160). Por fim, foi possível aprofundar os conhecimentos sobre a espectrometria de emissão atômica com fonte de plasma acoplado indutivamente (ICP), verificamos que uma das principais vantagens é a imensa aplicação de realizar análises de qualquer amostra que tenha possibilidade de transformá-la para o estado líquido. Claro que mesmo com as suas características, os métodos apresentam um elevado potencial de análise e uma grande aplicabilidade em outros setores, podendo realizar metodologias analíticas muito eficientes que podem ser empregadas em laboratórios sofisticados que realizam grandes investimentos em equipamentos modernos de análise instrumental. 79UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 80 A espectrometria atômica teve papel fundamental no desenvolvimento da química. Esta página da história teve início com os experimentos de Joannes M. Marci, em 1648, através de suas observações a respeito da origem do arco-íris com bases no espalhamento da luz solar nas gotículas d’água. Mais tarde, em 1672, Isaac Newton descrevia a decomposição e recomposição da luz do sol por um prisma. Fonte: AMORIM, F. A. C.; LOBO, I. P.; SANTOS, V. L. C. S.; FERREIRA, S. L. C. Espectrometria de absorção atômica: o caminho para determinações multielementares. Química Nova, v. 31, n. 7, p. 1784-1790, 2008. Se hoje vivemos essa realidade na química instrumental, é graças aos químicos, físicos e engenheiros que realizaram um trabalho em conjunto ao longo de décadas para desenvolver esses tipos de metodologias e instrumentos analíticos. Por isso, todos os cientistas que contribuíram com seus conhecimentos merecem o meu respeito! Fonte: O autor (2022). 80 CONSIDERAÇÕES FINAIS Diante disto, chegamos ao fim da nossa terceira unidade sendo concluída uma grande parte desta jornada de conteúdos, e espero que tenham aprendido os diversos métodos instrumentais apresentados até o presente momento. Pois tenho certeza de que seus conhecimentos sobre os conteúdos apresentados na nossa disciplina de química instrumental foram importantes para sua formação profissional como analista. Além disso, ajuda a aprofundar seus saberes acerca do universo da química analítica, espero que você tenha compreendido os conceitos estudados, pois são importantes para a sua formação e entendimento das técnicas espectrométricas em laboratório. Nesta perspectiva, podemos ressaltar que nesta unidade foi dado destaque as ferramentas da espectrometria, que tratam-se de métodos instrumentais analíticos. Sendo assim, os conteúdos relacionados aos métodos espectroquímicos, espectrometria óptica, espectroscopia de fluorescência molecular e espectroscopia atômica são fundamentais para o conhecimento das técnicas de determinação de compostos orgânicos e inorgânicos, em amostras biológicas, tais como soro sanguíneo, urina e outros fluídos biológicos. Assim, seus estudos não podem parar por aqui, pois agora é sua vez de procurar livros, revistas, pesquisa em sites, entre tantas outras fontes. Desta maneira, um analista químico fazendo o uso das técnicas apresentadas, pode utilizar as metodologias analíticas em laboratório, para a determinação de metais alcalinos e alcalinos terrosos em amostras diversas solubilizadas em água ou solventes orgânicos. Enfim, só se aprende o método e técnica de uma análise química instrumental através da prática laboratorial, por isso, é necessário a sua participação para darmos continuidade e no aprofundamento desses conhecimentos na próxima unidade! Até mais! UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 81 LEITURA COMPLEMENTAR Artigo: Determinação de Sódio em Cachaça por Espectrometria de Emissão Atômi- ca: Efeito das Propriedades Físico-Químicas da Solução. Resumo: O uso de amostras do cotidiano dos alunos pode chamar sua atenção para o ensino de conteúdos a serem apresentados. Já apresentamos uma série de experimentos simples demonstrando o uso da emissão atômica de chama espectrometria na determinação de cátions em amostras presentes em nosso dia a dia. Aqui o sódio é determinado na cachaça aguardente, uma bebida brasileira muito popular, para demonstrar o efeito da composição da matriz e suas propriedades físico-químicas no volume de amostra nebulizado em um fotômetro de chama e consequentemente em sinais analíticos usando diferentes solventes etanol: água misturas para calibração. Fonte: PEREIRA, J. G.; RAMOSA, L. A.; CAVALHEIRO, E. T. G.; NOBREGA, J. de A. Determinação de Sódio em Cachaça por Espectrometria de Emissão Atômica: Efeito das Propriedades Físico-Químicas da Solução. Química Nova, v. 41, n. 4, 451-456, 2018. UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 82 MATERIAL COMPLEMENTAR LIVRO Título: Fundamentos da Química Analítica Autores: Donald M. West , Douglas A. Skoog, Holler F. James, Stanley R. Crouch. Editora: Tradução da 8ª edição Norte Americana. (2006). Sinopse: Este livro aborda aspectos tanto fundamentais quanto práticos da análise química. Seu maior objetivo é fornecer um fundamento completo dos princípios da quí- mica que são particularmente importantes para a química analítica a fim de que os alunos desenvolvam habilidades para a difícil tarefa de julgar a exatidão e a precisão de dados experimentais e de mostrar como esses julgamen- tos podem ser aprimorados pela aplicação de métodos estatísticos. Assim, atentos à evolução contínua da quí- mica analítica, os autores incluíram nesta edição diversas aplicações em biologia, medicina, ciência dos materiais, ecologia, ciência forense e outras áreas correlatas. Há ain- da inúmeros tópicos atuais tais como espectrometria de absorção atômica e de massa molecular, fracionamento em fluxo tangencial e cromatografia quiral além de uma revisão de muitos tratamentos do passado para incorporar instrumentação e técnicas modernas. LIVRO Título: Fundamentos de Espectrometria e Aplicações Autor: Valdemar Lacerda Jr. Editora: Atheneu (2018) Sinopse: O presente volume - Fundamentos de Espectro- metria e Aplicações - apresenta dois grandes diferenciais em relação a outros livros sobre o assunto. O primeiro deles são capítulos específicos sobre RMN de 13C e multi- -núcleos, RMN no estado sólido e RMN em baixo campo. O segundo diferencial expressa-se por novo modelo didático, ao fugir do foco tradicional de outros livros que abordam a elucidação estrutural dos compostos orgânicos. Aqui, pelo contrário, transmite-se uma gama enorme de outras aplicações, como petroleômica, química forense, desenvol- vimento de métodos analíticos, farmacocinética, metabolô- mica e proteômica, aplicações qualitativas e quantitativas, multinúcleos, os materiais lignocelulósicos e materiais carbonizados, alimentos/agropecuária, entre outras. UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 83 https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_1?ie=UTF8&field-author=Donald+M.+West&text=Donald+M.+West&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_2?ie=UTF8&field-author=Douglas+A.+Skoog&text=Douglas+A.+Skoog&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks VÍDEOTítulo: Como realizar análise da concentração de ALUMÍ- NIO na água [Método Espectrofotômetro] .(2020). Sinopse: A análise da concentração de alumínio na água é indicado para estações de tratamento onde o sulfato de alumínio é usado como coagulante. A dosagem incorreta desse coagulante é denotada pela quantidade significativa de alumínio que persiste na água tratada. A Portaria nº 2.914/2011 do Ministério da Saúde estabelece que o pa- drão organoléptico para consumo humano é de 0,2 mg/L. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=TDy- Z3lrTOV8&ab_channel=AmbientalAn%C3%A1lise VÍDEO Título: Espectrofotômetro Manual – Ajuda Galeno! (2018) Sinopse: Vídeo aula com o intuito demonstrativo do manu- seio do Espectrofotômetro UV-Vis. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=W- JH8wGq5BZQ&ab_channel=AjudaGaleno%21 VÍDEO Título: Determinação do teor de cobre por espectroscopia de absorção (2022). Sinopse: Trabalho de analítica realizado por: Camilla Valadares; Felipe Ferreira; Gabriel Polito; Isabella Queirós; Ítala Teixeira; Lucas da Hora; Jéssica Gabrielly e Renato Mendes. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=bKfFb- 4ml_7E&ab_channel=felipeferreira UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 84 VÍDEO Título: Fotometria de Chama - Determinação de Sódio e Potássio em Água de Coco. (2021) Sinopse: Nesta vídeo aula realizamos a determinação de Sódio (Na) e Potássio (K) em uma amostra de Água de Coco, pelo método da Fotometria de Chama ou Emissão Atômica. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=n- 7VXxERlvBM UNIDADE 3 ESPECTROQUÍMICA 85 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Plano de Estudos • Introdução as separações analíticas; • Cromatografia gasosa; • Cromatografia líquida de Alta Eficiência; • Outros métodos de separação. Objetivos da Aprendizagem • • Capacitar o aluno a desenvolver o raciocínio, método de trabalho e capacidade de observação crítica durante o uso dos métodos cromatográficos; • • Identificar as técnicas de separações analíticas e os métodos cromatográficos, como: cromatografia gasosa (CG), cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE); • • Familiarizar o aluno com o funcionamento dos instrumentos analíticos de cromatografia; • • Apresentar os principais métodos de separações analíticas bem como suas aplicações. 4 UNIDADEUNIDADE SEPARAÇÕES SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIACROMATOGRAFIA Professor Mestre Diego Marlon Santos INTRODUÇÃO Nesta quarta unidade da nossa disciplina de fundamentos de química instrumental, vai fazer você mergulhar no universo das separações analíticas e cromatografia. Por exemplo, a primeira etapa no processo de refino do petróleo é separá-lo em duas frações com base no ponto de ebulição em grandes torres de destilação. O petróleo é enviado a um grande destilador e a mistura, aquecida. O vapor move-se para cima na torre ou coluna de destilação onde se recondensa. Controlando-se as temperaturas da caldeira e da coluna, pode-se controlar a faixa de ponto de ebulição da fração condensada. As separações analíticas ocorrem em uma escala de laboratório muito menor que na escala industrial. Os métodos de separação introduzidos nesta unidade incluem a precipitação, a destilação, a extração, a troca iônica e várias outras técnicas cromatográficas. Precisamos de conhecimentos sólidos e essenciais que nos darão embasamento para entendermos esta unidade, em que deverão ser esclarecidas os fundamentos para o emprego das técnicas de separações analíticas e cromatográficas. Portanto, se faz necessário obter informações mais precisas acerca das técnicas cromatográficas, tal como seus usos nas diferentes áreas, as vantagens e desvantagens. Assim, a partir de todos esses conhecimentos, espero que se aprofunde nesse universo das separações analíticas e dos métodos cromatográficos, de maneira que você se sinta motivado com os estudos relacionados aos conteúdos abordados nesta unidade. Nesta perspectiva, é importante que você tenha muita atenção e aproveite este conhecimento que será transmitido, fazendo as leituras complementares dos materiais disponíveis e outras fontes de pesquisa. Bons Estudos! UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 87 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 INTRODUÇÃO AS SEPARAÇÕES ANALÍTICAS TÓPICO As separações analíticas são técnicas utilizadas em grande escala em laboratório, existem algumas que são específicas na análise de um analito: em consequência, uma parte importante da maioria das análises lida com as espécies concomitantes que ou atenuam o sinal do analito ou produzem um sinal que é indistinguível daquele do analito. A substância que afeta o sinal analítico ou o sinal de fundo é denominada interferência ou interferente. Muitos métodos podem ser empregados para se lidar com as interferências nos procedimentos analíticos. As separações isolam o analito dos constituintes potencialmente interferentes. Além disso, as técnicas como a de modificação de matriz, o mascaramento, a diluição e a saturação são frequentemente empregadas para compensar ou reduzir o efeito de interferentes. Nesta unidade, será dado foco aos métodos de separação, os quais constituem os métodos mais empregados e poderosos de tratamento de interferências. Segundo Collins, Braga e Bonato (2006, p. 17) “os métodos modernos de análise, a cromatografia ocupa um lugar de destaque devido à facilidade com que efetua separação, identificação e quantificação das espécies químicas”. Logo, existe uma variedade de técni- cas de separação analítica, que ainda serão estudados. Da mesma forma Skoog et al. (2009) aponta que: Os objetivos de uma separação analítica são geralmente a eliminação ou redução de interferentes de forma que a informação analítica quantitativa sobre uma mistura complexa possa ser obtida. As separações também podem permitir a identificação dos constituintes separados se as correlações apropriadas forem feitas ou se uma técnica de medida sensível à estrutura, como espectrometria de massas, for empre- gada. Em técnicas como a cromatografia, a informação quantitativa é obtida quase simultaneamente com a separação. Em outros procedimentos, a etapa de separa- ção é distinta e bastante independente da etapa de medida posterior (SKOOG et al., 2009, p. 862). 88 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Plano de Estudos ● Aspectos históricos e conceitos da química analítica; ● Campos de estudos e as aplicações da química analítica; ● Métodos de análise qualitativa e análise quantitativa; ● Etapas e Classificação dos métodos de uma análise química quantitativa. Objetivos da Aprendizagem ● Compreender os conceitos e as diversas aplicações da química analítica; ● Discutir os princípios básicos dos métodos analíticos, visando a aplicação em análises qualitativa e quantitativa das espécies químicas em laboratório; ● Reconhecer a diferença entre os métodos clássicos e os métodos instru- mentais; ● Fornecer ferramentas necessárias que possibilite ao aluno escolher e avaliar diferentes métodos e ainda verificar a precisão e a exatidão de cada um. 1UNIDADEUNIDADE INTRODUÇÃO AOS INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOSMÉTODOS ANALÍTICOS Professor Mestre Diego Marlon Santos INTRODUÇÃO Olá Aluno (a)! Seja bem-vindo (a), Fico feliz em que você iniciará essa trilha de aprendizagem na disciplina de Química Instrumental. Neste caso, estou dando início ao estudo e a aplicação de métodos e técnicas de análise química em laboratório. É importante permitir a compreensão de todas as etapas de uma análise química e quais fatores podem interferir no resultado final da análise, oferecendo subsídios para a interpretação de dados analíticos. Diante disto, o objetivo principal deste material é fornecer uma base sobre os conceitos da química bastante importantes para a química analítica. Além disso, quero que você desenvolva competências para solucionar situações que envolvam análises quantitativas. Sendo assim, pretendo transmitir alguns saberes e noções sobre laboratório químico que lhe darão confiança para o desenvolvimento das metodologias analíticas eficazes em laboratório. Logo, este material foi planejado de maneira que você possa encontrar os aspectos práticos da química analítica instrumental. E, com base nisso, no primeiro tópico da nossa unidade vamos abordar os aspectos históricos e conceitos da química analítica para compreender como eram feitas as primeiras análises químicas e a influência dos alquimistas que foram os primeiros químicos que iniciaram a longa jornada para a criação da química analítica. No segundo tópico, avançamos nas discussões para compreender o que é, de fato, os campos de estudos e as aplicações da química analítica. Logo, no terceiro tópico será destacado os métodos de análise qualitativa e análise quantitativa. Finalmente, no quarto tópico vamos aprofundar os conhecimentos sobre as etapas da análise quantitativa, em que avaliamos a qualidade dos resultados e estimamos a confiabilidade do método analítico. UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 7 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . No decorrer do tempo, a Química tem se tornado uma das áreas da ciência que mais se consolidaram durante séculos. Logo, várias metodologias analíticas foram descobertas para auxiliar na determinação de constituintes químicos. Neto (2008) afirma que: Através dos conhecimentos herdados de alquimistas, os primeiros químicos inicia- ram uma longa jornada de interpretação desta ciência que acabaria por culminar com a criação da química analítica. O desenvolvimento de procedimentos ainda continua sendo realizado por químicos de todas as áreas, mas atualmente se con- centram procedimentos e técnicas nesta macroárea e os químicos que a ela se dedicam são responsáveis pela atualização, desenvolvimento e consolidação de novos processos de análise química, além da elucidação dos preceitos teóricos destes processos. Alinhados com o desenvolvimento tecnológico atual, os proce- dimentos analíticos da química encontram aplicabilidade em praticamente todo o setor produtivo da sociedade (NETO, 2008, p. 01). FIGURA 1 – LABORATÓRIO DE ANÁLISES QUÍMICAS Fonte: Rocha (2022). UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 ASPECTOS HISTÓRICOS E CONCEITOS DA QUÍMICA ANALÍTICA TÓPICO 8 Nesta perspectiva, a química analítica se tornou uma área científica relacionada a determinação de componentes químicos, com o uso de técnicas instrumentais das mais diversas aplicações, como: medicina, alimentos, meio ambiente, química forense, entre outros. Segundo Skoog et al. (2009): Um fato excitante que ilustra o potencial e a relevância da química analítica ocorreu em 4 de julho de 1997, quando a nave espacial Pathfinder quicou várias vezes até estacionar no Ares Vallis em Marte, e liberou o robô Sojourner do seu corpo tetraé- drico para a superfície marciana. O mundo ficou fascinado pela missão Pathfinder. Como resultado, inúmeros sites que acompanhavam a missão ficaram congestio- nados pelos milhões de navegadores da rede mundial de computadores que mo- nitoravam com atenção os progressos do minúsculo jipe Soujourner em busca por informações relacionadas com a natureza do planeta vermelho. O experimento-cha- ve do Sojourner utilizou o APXS, ou espectrômetro de raios X por prótons alfa, que combina três técnicas instrumentais avançadas, a espectroscopia retrodispersiva de Rutherford, espectroscopia de emissão de prótons e fluorescência de raios X. Os dados de APX foram coletados pela Pathfinder e transmitidos para a Terra para aná- lise posterior, visando determinar a identidade e concentração da maioria dos ele- mentos da tabela periódica. A determinação da composição elementar das rochas marcianas permitiu que geólogos as identificassem e comparassem com rochas terrestres. A missão Pathfinder é um exemplo excelente que ilustra uma aplicação da química analítica a problemas práticos. Os experimentos realizados pela nave espacial e os dados gerados pela missão também ilustram como a química analítica recorre à ciência e à tecnologia por meio de disciplinas amplamente diversificadas, como a física nuclear e química, para identificar e determinar as quantidades relati- vas das substâncias em amostras de matéria (SKOOG et al., 2009, p. 01). Com relação ao exemplo acima percebe-se que os conhecimentos apresentados se relacionam a química analítica qualitativa e quantitativa. Em que é preciso aprender a diferenciar os dois métodos de análises químicas, sendo que a análise qualitativa se expressa na identificação dos componentes químicos, enquanto a análise quantitativa é baseada na quantificação das substâncias químicas analisadas, também denominados, analitos. FIGURA 2 – CALIBRAÇÃO EM QUÍMICA ANALÍTICA Fonte: Zucchini (2018). 9UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Os campos de estudos da química analítica são dos mais diversos, presentes em laboratórios de pesquisa, na indústria química, petroquímica, farmacêutica, alimentícia, polímeros, química ambiental, química forense, em várias áreas. Com relação as aplicações da química analítica Skoog et al. (2009) citam a seguir: As concentrações de oxigênio e de dióxido de carbono são determinadas em milhões. . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA De tal forma, essas separações e técnicas analíticas são muito encontradas nos laboratórios de análises de: medicamentos, saneamento ambiental, alimentos, polímeros, combustíveis, bioquímica, agronomia e química forense, etc. Uma vez que, é necessário realizar toda a separação, isolamento, purificação, identificação e quantificação dos consti- tuintes presentes na mistura, quase sempre, com elevado grau de complexidade. 1.1 Separação por Precipitação As separações por precipitação apresentam diferenças de propriedades, conside- rando que a mais importante é a solubilidade entre a espécie química de interesse, e as substâncias interferentes. Infelizmente, muitos outros fatores podem impedir o uso da preci- pitação para produzir uma separação. Por exemplo, os vários fenômenos de coprecipitação podem causar uma contaminação extensiva do precipitado por um componente indesejado, mesmo que o produto de solubilidade do contaminante não tenha sido excedido. TABELA 1 – MÉTODOS DE SEPARAÇÃO Fonte: Skoog et al. (2009, p. 863). De forma distinta, a velocidade de uma precipitação pode ser tão lenta que impeça o seu uso em uma separação. Finalmente, quando os precipitados formam-se como suspensões coloidais, a coagulação pode ser difícil ou lenta, particularmente quando se pretende isolar uma pequena quantidade de fase sólida. Muitos agentes precipitantes têm sido empregados para separações inorgânicas quantitativas. 1.2 Separação de espécies por destilação Segundo Skoog et al. (2009, p. 867) “as destilações são amplamente empregadas para separar os compostos voláteis de interferentes não voláteis”. Um exemplo comum é a 8989 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA separação de analitos de nitrogênio de muitas outras espécies pela conversão do nitrogê- nio à amônia, a qual é então destilada a partir de uma solução alcalina. Outros exemplos incluem a separação do carbono como dióxido de carbono. 1.3 Separação por Extração Na separação por extração, Skoog et al. (2009, p. 867) “[…] distribui-se em duas fases líquidas imiscíveis que se diferem significativamente e essas diferenças têm sido empregadas por décadas para realizar as separações de espécies químicas”. Em síntese, esse é mais um dos conceitos abordados nesta unidade enfatizados nas técnicas de sepa- ração e os seus usos no cotidiano em laboratório químicos. 1.4 Separação de íons pelo processo de troca iônica As propriedades de troca iônica de argilas e zeólitas têm sido reconhecidas e estu- dadas por mais de um século. As resinas foram inicialmente produzidas em 1935 e desde essa época encontraram ampla aplicação no amolecimento de água, na deionização de água, na purificação de soluções e na separação de íons. Com relação as resinas sintéticas de troca iônica, Skoog et al. (2009) salienta que: as resinas sintéticas trocadoras de íons são polímeros de alto peso molecular que contém um grande número de grupos funcionais iônicos por molécula. As resinas trocadoras de cátions contém grupos ácidos, enquanto as resinas trocadoras de ânions possuem grupos básicos. As resinas trocadoras de íons são empregadas para eliminar os íons que, de outra forma, causariam interferência nas análises. Por exemplo, o ferro (III), o alumínio(III) e muitos outros cátions tendem a co-preci- pitar com o sulfato de bário durante a determinação de íon sulfato. A passagem da solução contendo sulfato por uma resina trocadora de cátions resulta na retenção destes e na liberação de um número de mols equivalente de íons hidrogênio. Os íons sulfato passam livremente através da coluna e podem ser precipitados como sulfato de bário a partir do efluente (SKOOG et al., 2009, p. 872). Sem dúvida o processo de troca iônica se tornou um dos mais aplicados no mundo, pois através de resinas trocadoras de íons que entra em contato com a resina. Neste caso, podemos citar como exemplo, as resinas de poliestireno com ligações cruzadas. Convém lembrar que Collins, Braga e Bonato (2006, p. 20) ressalta que “as resinas de poliestire- no-divinilbenzeno com substituintes iônicos são muito aplicadas em bioquímica, e seu uso teve início com as experiências, efetuadas por Cohn, de separação de aminoácidos origi- nados de proteína”. 9090 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 1.5 Cromatografia A cromatografia passou a ser utilizada no início do século XX, sendo muito relevante para separação das constituintes químicos das misturas de interesse. Portanto, isto acabou contribuindo, para melhorar o processo de separação cromatográfico, podemos destacar a confiabilidade, a precisão, resultados mais rápidos e flexível em se adaptar em diferentes processos. De acordo com Schröder (2017) a cromatografia ela, foi desenvolvida pelo botânico russo M. Tswett (1872-1919) para a separação de clorofilas e xantofilas de plantas através da passagem de soluções de amostras de plantas por uma coluna de vidro recheada com carbonato de cálcio. As substâncias separadas apareciam como bandas coloridas nas colunas, o que o ajudou a nomear a técnica como cromatografia (em grego, chroma = cor e graphein = escrita). O impacto tremendo desses métodos na ciência é comprovado pelo Prêmio Nobel de Química de 1952 para A. J. P. Martin e R. L. M. Synge, pela descoberta da croma- tografia de partição. Muitos outros prêmios foram concedidos a partir de então para trabalhos baseados na cromatografia (SCHRÖDER, 2017, p. 62). O intuito do método da cromatografia é separar cada espécie química de uma mistura de compostos, sendo feita uma análise qualitativa e quantitativa da substância de interesse. Collins, Braga e Bonato (2006) afirmam que: A cromatografia é um método físico-químico de separação dos componentes de uma mistura, realizada através da distribuição desses componentes em duas fases, que estão em contato íntimo. Uma das fases permanece estacionária, enquanto a outra se move através dela. Durante a passagem da fase móvel sobre a fase esta- cionária, os componentes da mistura são distribuídos pelas duas fases de tal forma que cada um deles é seletivamente retido pela fase estacionária, o que resulta em migrações diferenciais desses componentes (COLLINS; BRAGA e BONATO, 2006, p. 17). Nesta perspectiva, para a separação cromatográfica é feita a inserção da amostra no cromatográfo, em que os constituintes devem ser espalhados entre fase: a fase móvel e a fase estacionária. Devido, estes ficarem aprisionados na fase estacionária acabam movendo-se devagar, já os constituintes que agem menos são transportados com mais rapidez na fase móvel. Para Degani, Cass e Vieira (1998, p. 21) “a cromatografia é um método físico-quí- mico de separação. Ela está fundamentada na migração diferencial dos componentes de uma mistura, que ocorre devido a diferentes interações, entre duas fases imiscíveis, a fase móvel e a móvel fase estacionária”. Com o propósito de apresentar e conhecer os tipos de cromatografia mais usadas, sendo diferenciadas pelas características das suas fases, por exemplo, a fase móvel que pode ser líquida, gás ou supercrítica. Então, iremos dar continuidade e discutiremos alguns métodos cromatográficos: a Cromatografia Gasosa (CG) e a Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). 9191 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA Dando início, para esclarecer um pouco mais a respeito dos aspectos históricos da cromatografia gasosa. Collins,Braga e Bonato (2006) nos trazem conhecimentos importan- tes para entendermos ainda mais o princípio da cromatografia e cita que: A cromatografia gás-sólido foi descrita em 1941, por Hesse e colaboradores, que separaram dois ácidos graxos, no vapor a 100 ºC, arrastando-os sobre sílica com um gás, dióxido de carbono, enquanto Cremer e Prior foram os primeiros a descrever um cromatógrafo a gás completo, utilizando hidrogênio como gás de arraste, sílica como fase estacionária e um catarômetro como detector. A cromatografia gás-líquido foi relatada por Martin e James em 1952, e o uso de um detector por condutividade térmica, por Ray, em 1954. Um ano depois, os primeiros equipamentos foram colocados no mercado dos Estados Unidos e da Inglaterra. O desenvolvimento, quase simultâneo, do detector por ionização em chama, por Pretorius e colaboradores e por McWilliams e Dewar, em 1958, ampliou a detectibilidade do método cromatográfico, enquanto a introdução de colunas capilares por Golay, também em 1958, ampliou seus poderes analíticos a ponto de tornar a cromatografia gasosa o método analítico de separação e determinação mais usado no mundo (COLLINS; BRAGA e BONATO, 2006, p. 19). Skoog et al. (2009) relata que: Na cromatografia gasosa, os componentes de uma amostra vaporizada são sepa- rados sem consequência de sua partição entre a fase móvel gasosa e uma fase es- tacionária líquida ou sólida contida dentro da coluna. Ao realizar-se uma separação por cromatografia gasosa, a amostra é vaporizada e injetada na cabeça da coluna cromatográfica. A eluição é feita por um fluxo de fase móvel gasosa inerte. Em con- traste, com muitos outros tipos de cromatografia, a fase móvel não interage com as moléculas do analito; a sua única função é transportar o analito através da coluna. (SKOOG et al., 2009, p. 899). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 CROMATOGRAFIA GASOSA (CG) TÓPICO 92 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA Para Degani, Cass e Vieira (1998, p. 25) “a cromatografia gasosa é uma das técnicas analíticas mais utilizadas. Além de possuir um alto poder de resolução, é muito atrativa devido à possibilidade de detecção em escala de nano a picogramas”. Por outro lado, a maior desvantagem deste método está relacionado as propriedades da amostra e tendo que estar na forma de gás, contudo, as amostras são independentes das suas características e podem ser derivadas. Para esclarecer a finalidade da técnica de cromatografia gasosa, Schröder (2017, p. 96) diz que é para “separar os componentes de uma amostra através da sua distribuição entre as FM e FE. No entanto, o grande diferencial em relação à CLAE é que, neste caso, a FM é um gás inerte e a amostra deve estar na forma de vapor, para então ser carreada pelo gás”. A técnica da cromatografia gasosa, apresenta aplicações das mais diversas, sendo uma ferramenta imprescindível para as pesquisas na área fitoquímica, análise orgânica de alimentos, análise drogas, análises de exames antidoping, química forense, detecção da concentração de poluentes em águas de rios, entre outros. De acordo com os autores Penteado, Magalhães e Masini (2008): Em linhas gerais, os principais componentes de um cromatógrafo a gás são: cilindro de gás, injetor, forno, coluna, detector, sistema de controle do instrumento e aquisição de dados. Inicialmente a amostra é introduzida no injetor aquecido (com o auxílio de uma micro-seringa), onde é vaporizada e transferida com o auxílio do gás de arraste para a coluna cromatográfica colocada dentro de um forno pré-aquecido. Os componentes da amostras são eluídos e conduzidos para o detector conectado na saída da coluna. O detector emite um sinal elétrico que é registrado graficamente sob a forma de picos. (PENTEADO; MAGALHÃES e MASINI, 2008, p. 2190). Schröder (2017) explica o funcionamento do CG: Por meio de um sistema de injeção adequado, a amostra é introduzida na coluna cromatográfica contendo a FE. O uso de altas temperaturas no local da injeção da amostra possibilita a vaporização das substâncias presentes na amostra. Conforme as propriedades das substâncias e da FE empregada, os compostos são seletivamente retidos e chegam à saída da coluna em tempos diferentes, sendo detectados pelo sistema de detecção localizado na saída da coluna (SCHRÖDER, 2017, p. 97). Com a cromatografia gasosa pode ser investigado, um número maior de componentes químicos em menor tempo, trabalha com pequenos volumes da amostra e considerada um método analítico bastante eficiente para análises quantitativas. Além disto, temos que apontar que utiliza-se uma quantidade mínima de volume que será injetado nas colunas capilares. Schröder (2017, p. 98) expressa que “um sistema cromatográfico básico é constituído de um cilindro com gás de arraste, controladores de pressão e vazão, um injetor, um forno de colunas, um detector e um registrador”. 9393 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA FIGURA 1 - DIAGRAMA DE UM CROMATÓGRAFO GASOSO Fonte: Avileis (2022). FIGURA 2 - DIAGRAMA DE UM CROMATÓGRAFO GASOSO Fonte: Dctech (2022). 9494 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA FIGURA 3 - UM FORNO DE CROMATOGRAFIA A GÁS, ABERTO PARA MOSTRAR UMA COLUNA CAPILAR Fonte: Stringfixer (2022). QUADRO 1 - CARACTERÍSTICAS FÍSICAS DE UMA COLUNA CROMATOGRÁFICA Parâmetro Recheada Analítica Capilar Diâmetro Interno (mm) 1 - 4 0,15 – 0,75 Comprimento (m) 1 - 3 10 - 100 Pratos Teóricos por metro 2.400 3.000 Espessura do filme Líquido (µm) 5 0,5 - Volume da Amostra (µL) 0,2 - 20 0,001 – 0,5 Fonte: O Autor (2022). De fato, as colunas cromatográficos variam em comprimento e na composição do material, conforme Skoog et al. (2009, p. 902) variam em comprimento desde: “menos que 2 m até 50 m ou mais. São construídas de aço inoxidável, vidro, sílica fundida ou Teflon. Para ser inseridas nos fornos para termostatização, as colunas são geralmente enroladas em bobinas com diâmetro de 10 a 30 cm”. Degani, Cass e Vieira (1998) trazem reflexões sobre algumas etapas fundamentais da cromatografia gasosa. Os autores relatam que: Os gases utilizados como fase móvel devem ter alta pureza e ser inertes em relação à fase estacionária. Hidrogênio, nitrogênio e hélio são os mais usados. A injeção da amostra é feita através de microsseringas ou válvulas semelhantes às utiliza- das em CLAE. Os detectores de maior aplicação são o detector por ionização em chama e o detector de condutividade térmica. Os dados podem ser obtidos através de um registrador potenciométrico, um integrador ou um microcomputador, sendo as amostras identificadas por seus tempos de retenção (DEGANI; CASS e VIEIRA, 1998, p. 25). 9595 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA Pode-se observar na cromatografia gasosaque existem vários tipos de detectores, mas somente o ideal que irá ter as características certas para a detecção dos componentes da amostra de hidrocarbonetos, halogenados, nitrogênio e fósforo, entre outras. Enfim, destacam-se a confiança, sensibilidade, estabilidade e fácil uso em laboratório. FIGURA 4 - PRINCÍPIO DE FUNCIONAMENTO DA CROMATOGRAFIA GÁS-SÓLIDO Fonte: O Autor (2022). FIGURA 5 - PRINCÍPIO DE FUNCIONAMENTO DA CROMATOGRAFIA GÁS-LÍQUIDO Fonte: O Autor (2022). No separação cromatográfica, segundo Schröder (2017, p. 61) “os componentes que ficam retidos mais fortemente na fase estacionária movem-se mais lentamente, e os componentes que interagem menos com a FE movem-se (ou eluem) mais rapidamente na FM”. O cromatograma é a relação entre a resposta do detector e distância dos picos, se- parados e simétricos. 9696 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA FIGURA 6 - CROMATOGRAMA Fonte: Silva (2015). Visto que um cromatograma por algum motivo apresente uma leitura de nenhuma determinação do analito na amostra, isso quer dizer que é possível prever um resultado de alta confiabilidade da falta do analito ou presente em quantidades muito abaixo do valor delimitado. Com base nos componentes do Cromatograma Schröder (2017) afirma que: […] utiliza gases como fase móvel; e uma maior resolução e eficiência na separação, pois ocorre menor alargamento de banda, visto que os compostos se dispersam menos durante a passagem pela coluna capilar (transferência de massa mais rápida), proporcionando picos mais estreitos, separados e simétricos. Na Figura 7, é possível ver a grande capacidade de separação devido à alta eficiência de separação. Em CG, são comuns picos com 300.000 pratos teóricos (SCHRÖDER, 2017, p. 97-98). Com relação a coluna cromatográfica, Degani, Cass e Vieira (1998) afirmam que: Nesses equipamentos é necessário o controle da temperatura do injetor, da coluna e do detector, as quais são mantidas por termostatos. Como a temperatura é um fa- tor extremamente importante, grande parte das análises por cromatografia gasosa é feita com programação de temperatura, obtendo-se melhor separação com picos mais simétricos em menor tempo (DEGANI; CASS e VIEIRA, 1998, p. 25). Skoog et al. (2009, p. 915) relata que “a cromatografia gasosa deve seu enorme crescimento em parte à sua velocidade simplicidade, custo relativamente baixo e ampla aplicabilidade e separações” Então, podemos dizer que se hoje a cromatografia gasosa é tão amplamente usada, devido se tornar uma ferramenta analítica essencial na obtenção de resultados quantitati- vos seguros a respeito do analito que se deseja separar. Neste método, para Skoog et al. (2009, p. 915) está “baseado na comparação da altura ou da área de um pico analítico com aquele de um ou mais padrões”. 9797 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA No contexto atual, a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) é um método ins- trumental de análise químicas, imprescindíveis, para os diversos laboratórios forenses, que assistimos em reportagens, documentários e séries internacionais de investigação criminal. Porém, pode ser aplicada em áreas como laboratórios de: meio ambiente, indústrias de alimentos, biomedicina, toxicologia, petroquímicas, produtos de higiene pessoal, fármacos, entre outras. Dessa forma, enorme quantidade de análises promovidas pela cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) para Schröder (2017, p. 96) é notório que a colocam como uma das mais versáteis e mais utilizadas dentre as técnicas ins- trumentais. Praticamente qualquer amostra que possa ser dissolvida pode ser ana- lisada por CLAE, e seus limites de detecção chegam a partes por bilhão ou abaixo disso. Convém lembrar opinião dos autores, Degani, Cass e Vieira (1998) sobre a CLAE onde afirmam que: O grande avanço na cromatografia em coluna foi o desenvolvimento e a utilização de suportes com partículas diminutas responsáveis pela alta eficiência, as quais tornam necessário o uso de bombas de alta pressão para a eluição da fase móvel, devido a sua baixa permeabilidade (DEGANI; CASS e VIEIRA, 1998, p. 24). No processo da CLAE ocorre a distribuição do solvente (fase móvel), uma válvula de injeção de amostra, uma coluna forno de grande pressão, um equipamento detector e um computador para realizar a obtenção e o tratamento dos dados, como pode ser visto na Figura 7 a seguir. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 CROMATOGRAFIA LÍQUIDA DE ALTA EFICIÊNCIA (CLAE) TÓPICO 98 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA FIGURA 7 - ESQUEMA DE UM CROMATÓGRAFO CLAE Fonte: Jota (2022). FIGURA 8 - ESQUEMA DE UM CROMATÓGRAFO CLAE Fonte: Schröder (2017, p. 96). 9999 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA Aliás, as colunas para cromatografia líquida de alta eficiência, Skoog et al. (2009, p. 928-929) esclarecem que são formadas por “tubos de aço inoxidável, embora tubos de vidro ou Tygon sejam alguma vezes empregados em aplicações de baixa pressão (extremamente lenta. O fluxo da FM também deve ser constante, a fim de garantir a reprodutibilidade, sensibilidade e resolução da análise […] As bombas empregadas em CLAE devem operar a pressões de até 500 atm com a mesma precisão e exa- tidão de operações à pressão quase ambiente; não devem ser corroídas pelas FM empregadas; as válvulas e os pistões devem ser extremamente resistentes a altas pressões, atritos etc […] 4. Sistema de introdução (ou injeção) da amostra: a quantidade de amostra que deve ser injetada na coluna depende da sensibilidade do detector, que deve res- ponder com exatidão e precisão aos analitos separados na coluna. Os injetores de amostra devem ser reprodutíveis e ter grande variedade de volumes de injeção. Os tipos de injetores disponíveis em CLAE são os manuais (microsseringas), de válvula rotatória e os automáticos. 5. Colunas cromatográficas: as maiores contribuições para o alargamento de banda em CLAE são as descritas na Equação de Van Deemter, e todas são rela- cionadas às características das colunas, por exemplo, o comprimento da coluna, o tamanho médio das partículas (FE), a distribuição das partículas, a configuração da coluna e o empacotamento. As colunas utilizadas em CLAE devem ser de material inerte, ter diâmetro interno uniforme e resistir ao ataque e à pressão da fase móvel. Como o tempo de retenção e outras propriedades do cromatograma dependem da temperatura, em muitos casos, a coluna é mantida dentro de um termostato. Quanto às FE utilizadas na CLAE, elas variam em termos de rigidez (rígida, como a sílica, ou semirrígida, como a DVB), estrutura (porosa ou não porosa) e forma (regulares e irregulares) […] 6. Sistemas de detecção: é a parte do equipamento que mede de forma contínua alguma propriedade física dos componentes da amostra separados na coluna ana- lítica, enviando como resposta um sinal elétrico que será registrado no processador como um pico. Existem vários tipos de detectores que podem ser utilizados, de- pendendo do tipo de composto que será analisado. Porém, todos devem atender a alguns requisitos, como alta sensibilidade, eficiente detecção mínima, baixo nível de 100100 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA ruído, grande intervalo de linearidade, alta estabilidade e boa repetibilidade. Dentre os detectores: de absorção, por índice de refração e o de fluorescência […] 7. Tratamento dos dados: após a obtenção do cromatograma, faz-se a integra- ção dos sinais, que tem por finalidade transformar a intensidade do sinal emitido pelo detector em uma medida relacionada à quantidade da substância analisada na amostra. A integração dos sinais, geralmente, é feita usando-se a área do pico, a qual pode ser relacionada à concentração de uma dada substância na amostra através de métodos, como a calibração interna, a padronização externa ou pelo mé- todo de adição-padrão, independentemente do método de quantificação utilizado, a solução de padrões e a matriz da amostra devem ser as mais similares possíveis. As concentrações das soluções de padrões devem ser similares às dos compostos desconhecidos e na faixa de linearidade do detector. As condições de análise de- vem ser idênticas para curva padrão e amostra […] (SCHRÖDER, 2017, p. 83-88). Sem dúvida, esse método instrumental apresenta uma grande multivalência pois consegue-se ajustá-la a novas situações, e por causa da grande quantidade de fases esta- cionárias, é possível realizar as várias separações analíticas com alta performance. Entre tantos usos da cromatografia líquida de alta eficiência, Degani, Cass e Vieira (1998, p. 24) citam “[…] o acompanhamento de sínteses, em análises de pesticidas, fero- mônios, no isolamento de produtos naturais e sintéticos e na produção e controle de quali- dade de medicamentos, dentre tantas outras aplicações”. Além destes, a Schröder (2017, p. 89) destaca uma enorme aplicação da CLAE em compostos: “aminoácidos, explosivos, lipídeos polares, metabólitos de plantas e animais, pigmentos de plantas, polímeros sinté- ticos, polissacarídeos, produtos farmacêuticos, pesticidas, proteínas, tintas, entre outros”. Sendo assim, o método de cromatografia líquida de alta eficiência é considerado uma das melhores técnicas de separação analítica, bastante versátil e de enorme confiabi- lidade, e com muitas aplicações diversificadas. Bem como, um ótimo instrumento para os mais variados estudos envolvendo a separação de espécies químicas de íons ou molécu- las, possibilitando uma análise imediata das substâncias. 101101 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA A seguir, serão abordados neste tópico outros métodos de separação. 4.1 Cromatografia supercrítica A história da cromatografia supercrítica segundo os autores Carrilho, Tavares e Lan- ças (2001) começou a ser construída em meados do século XX, pois: Em 1952, James e Martin introduziram a cromatografia gás-líquido. Pouco depois, Golay introduziu o uso de colunas de tubo aberto (capilares) em cromatografia gasosa, re-escrevendo algumas equações clássicas em cromatografia. Devido à baixa viscosidade da fase móvel gasosa e à baixa resistência ao fluxo apresentadas pelas colunas tubulares abertas, uma pequena queda de pressão foi observada através de toda extensão da coluna capilar. Então, colunas de grande comprimento puderam ser utilizadas, gerando um elevado número de pratos teóricos, o que passou a permitir a análise de amostras mais complexas (CARRILHO; TAVARES e LANÇAS, 2001, p. 509). Em princípio, a cromatografia supercrítica (CS) compreendida pelos autores Skoog et al. (2009, p. 946) está baseada “na qual a fase móvel é um fluído supercrítico, é uma técnica híbrida entre a cromatografia gasosa e líquida que combina algumas das melhores características de cada uma delas”. Com relação as propriedades físico-químicas de um fluído supercrítico, Carrilho, Tavares e Lanças (2001, p. 511) ressaltam que “a densidade de um fluido supercrítico é maior que a dos gases e muito próxima a dos líquidos. Existe um relacionamento direto entre a densidade de um fluido supercrítico e seu poder de solvatação (...)”. Diante desta propriedade de ser um fluído altamente dependente da pressão e temperatura, podemos citar como exemplo as variações de ambas que podem influenciar no aumento do valor da densidade, sendo fundamental para separar misturas complexas. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 OUTROS MÉTODOS DE SEPARAÇÃO TÓPICO 102 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 4.2 Cromatografia planar Este tipo de técnica cromatográfica é muito comum podendo ser aplicada em um espaço plano, por exemplo temos a cromatografia em papel, que com certeza pode ser realizada no ambiente domiciliar, enquanto que cromatografia de camada delgada (CCD), já é muito aplicada em corriqueiras análises laboratoriais. Em termos teóricos baseados na cromatografia planar, Skoog et al. (2009) enfatizam que: os métodos de cromatografia planar incluem a cromatografia em camada delgada (CCD),a cromatografia em papel (CP) e a eletrocromatografia. Todas elas fazem uso de uma camada relativamente fina de material que é auto-suportado ou que recobre uma superfície de vidro, plástico ou metal. A fase móvel movimenta-se através da fase estacionária por ação de capilaridade, algumas vezes assistida pela gravidade ou por um potencial elétrico. A cromatografia planar foi inicialmente denominada cromatografia bidimensional, muito embora esse termo atualmente signifique o acoplamento de duas técnicas cromatográficas com mecanismos de separação diferentes. Atualmente, a maior parte da cromatografia planar é baseada na técnica de camada delgada que é mais rápida, apresenta uma melhor resolução e é mais sensível que a cromatografia em papel (SKOOG et al., 2009, p. 950). Hoje a técnica de cromatografia de camada delgada é a mais empregada pelos la- boratórios, pois apresentam resultados que não demoram, bastante seguros e alta confia- bilidade. Em contraste, a técnica clássica da cromatografia em papel. 4.3 Eletroforese capilar A eletroforese foi desenvolvida na década de 30 no século XX, em ficou conhecida mundialmente pela comunidade científica, e se baseia na velocidade de separação dos componentes químicos que se transportam para um campo carregado eletricamente. De acordo com Skoog et al. (2009, p. 953) “essa técnica de separação para as amostras de tamanho macro foi desenvolvida inicialmente por Arne Tiselius, um químico sueco, nos anos 1930, para o estudo de proteínas do soro sanguíneo, que ganhou o Prêmio Nobel por esse trabalho”. Nas últimas décadas, a Eletroforese segundo Spudeit, Dolzan e Micke (2012, p. 288): Foi sendo aperfeiçoada de forma a se obter uma maior eficiência e diminuição dos efeitos térmicos provenientes da aplicação de um campo elétrico. Com esta finalidade, o avanço instrumental das técnicas de eletroforese permitiu a introdução de colunas capilares no sistema eletroforético, e esta foi denominada Eletroforese Capilar (CE, do inglês Capillary Electrophoresis). (SPUDEIT; DOLZAN e MICKE, 2012, p. 288). De tal forma, a eletroforese capilar, tem sido empregada para separações específicas de íons, Skoog et al. (2009, p. 953) apontam o amplo campo envolvendo as separações analíticas, de: 103103 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA aminoácidos, catecolaminas, drogas, vitaminas, carboidratos, peptídeos, proteínas, ácidos nucléicos, nucleotídeos, polinucleotídeos e inúmeras outras espécies. Uma característica particular marcante da eletroforese está na sua habilidade única de separar moléculas carregadas de interesse dos bioquímicos, biólogos e químicos clínicos. Por muitos anos, a eletroforese tem sido o método mais empregado para a separação de proteínas (enzimas, hormônios, anticorpos) e ácidos nucléicos (DNA, RNA), para os quais oferece uma resolução que não encontra paralelo (SKOOG et al., 2009, p. 953). Em virtude dos fatos mencionados sobre o crescimento do campo da eletroforese capilar, os autores Spudeit, Dolzan e Micke (2012, p. 295) enfatizam que “isto se deve principalmente as características como baixo custo operacional, abrangência das análises (versatilidade), simplicidade instrumental, tempo e quantidades e toxicidade de reagentes e resíduos extremamente reduzidos”. 4.4 Fracionamento por campo e fluxo No contexto atual, toma-se conhecimento do mecanismo, método de separação analítica baseado no fracionamento por campo e fluxo (FCF). Segundo Skoog et al. (2009): se têm tornado bastante úteis para a separação e caracterização de materiais em suspensão como polímeros, partículas grandes e colóides. Embora o conceito do FCF tenha sido primeiramente descrito por Giddings em 1966, apenas recentemen- te suas vantagens sobre outros métodos e suas aplicações práticas foram demons- tradas (SKOOG et al., p. 963). Técnica utilizada para determinação do tamanho de partículas, distribuição de tama- nho e morfologia de nanocarreadores. É a única técnica acoplada a detecção de fluorescên- cia disponível para a verificação da associação do marcador fluorescente às nanopartículas em meio coloidal sem etapas adicionais de separação ou preparo de amostra (MILLER, et al., 2012 apud PONTÍFICE, 2019, p. 22). FIGURA 9 - ESQUEMA REPRESENTATIVO DO FRACIONAMENTO EM CAMPO DE FLUXO ASSIMÉTRICO Fonte: Pontífice (2019, p. 22). Do mesmo modo, procurando entender melhor a técnica de separação analítica em FCF. Skoog et al. (2009) descreve que: 104104 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA As separações em FCF ocorrem em um canal estreito e plano. O canal tem comprimento típico de 25 a 100 cm e de 1 a 3 cm de largura. A espessura da estrutura planar é normalmente de 50 a 500 mm. O canal é geralmente recortado em um espaçador fino que é inserido entre duas paredes. Um campo elétrico, térmico ou centrífugo é aplicado perpendicularmente à direção do fluxo. Alternativamente, um fluxo transversal perpendicular ao fluxo principal pode ser empregado. As subtécnicas de FCF diferentes resultam da aplicação de diferentes tipos de campos ou gradientes. Até o momento, os métodos que têm sido empregados são FCF por sedimentação, campos elétrico, térmico e por fluxo (SKOOG et al., 2009, p. 953). A fim de reconhecer o fracionamento em campo de fluxo (FCF) é preciso entender que esta técnica pode ser usada junto com o método cromatográfico, que se apresenta bastante eficaz na determinação de compostos químicos com pequena massa molecular. Portanto, o FCF está sendo amplamente utilizado para separações analíticas, por exemplo, colóides, polímeros, biomoléculas, cafeína de um medicamento para a gripe, entre outras. 105105 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 106 O termo cromatografia foi primeiramente empregado em 1906 e sua utilização é atribuída a um botânico russo ao descrever suas experiências na separação dos componentes de extratos de folhas. Nesse estudo, a passagem de éter de petróleo (fase móvel) através de uma coluna de vidro preenchida com carbonato de cálcio (fase estacionária), à qual se adicionou o extrato, levou à separação dos componentes em faixas coloridas. Este é provavelmente o motivo pelo qual a técnica é conhecida como cromatografia (chrom = cor e graphie = escrita), podendo levar à errônea idéia de que o processo seja dependente da cor. Fonte: DEGANI, A. L. G.; CASS, Q. B.; VIEIRA, P. C. Cromatografia um breve ensaio. Química Nova na Escola, n. 7, maio, 1998. Eu tentei 99 vezes e falhei, mas na centésima tentativa eu consegui, nunca desista de seus objetivos mesmo que esses pareçam impossíveis, a próxima tentativa pode ser a vitoriosa. Fonte: Albert Einstein. 106 CONSIDERAÇÕES FINAIS Assim, chegamos ao final da nossa quarta e última unidade desta jornada de estudos da disciplina de química instrumental sobre separações analíticas e cromatografia. Diante disto, é possível com que o aluno tenha uma melhor compreensão das técnicas de separação analíticas, cromatografia gasosa, cromatografia líquida de alta eficiência e outros métodos de separação, tendo por base a afinidade química relativa de cada componente da amostra pelas fases móvel e estacionária, sendo que este parâmetro depende dos tipos, propriedades, forças intermoleculares e temperatura. Com relação aos tópicos desta unidade, destacamos a importância de capacitaro aluno para desenvolver o raciocínio, método de trabalho e a capacidade de observação crítica, para interpretar e a aprender a solucionar problemas relacionados aos métodos cromatográficos. A química instrumental se destaca devido ao seu caráter interdisciplinar, o que a torna fundamental em laboratórios de pesquisas de universidades, de desenvolvimento nas indústrias, de biomedicina, de meio ambiente, fármacos, sendo esta a análise mais empregada para identificar substâncias, purificação ou separação de compostos, determinação de poluentes no ar atmosférico, qualidade da água potável, identificação de drogas no sangue, análise de alimentos, polímeros, agrotóxicos, química forense, entre outros. Logo, o avanço dos métodos de análises instrumentais podem trazer grandes benefícios e possibilidades de aplicações. Diante disto, é essencial que você compreenda as diferentes metodologias analíticas e consiga desempenhar um bom trabalho em laboratório, buscando por resultados cada vez mais precisos, e refletir sobre a importância do seu papel de químico na sociedade. Por fim, isso tudo quer dizer que seus estudos não param por aqui, este material vai te dar uma base sobre os fundamentos da química instrumental. Além disso, os verdadeiros profissionais são eternos estudantes, que passam a se aperfeiçoar constantemente, em busca de novos conhecimentos. Nos veremos em uma outra oportunidade! UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 107 LEITURA COMPLEMENTAR Artigo: Cromatografia um breve ensaio Autor: Ana Luiza G. Degani, Quezia B. Cass, Paulo C. Vieira Link de Acesso: http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc07/atual.pdf Resumo: A seção "Atualidades em química" procura apresentar assuntos que mostrem como a química é uma ciência viva, seja com relação a novas descobertas, seja no que diz respeito a sempre necessária redefinição de conceitos. Este artigo apresenta os conceitos básicos da cromatografia. Os diferentes tipos de cromatografia são descritos e classifica- dos considerando-se a forma física do sistema cromatográfico empregado, a fase móvel/ estacionária utilizada ou o modo de separação. Especial ênfase é dada à cromatografia em camada delgada, à cromatografia líquida clássica e de alta eficiência e à cromatografia gasosa de alta resolução. Fonte: DEGANI, A. L. G.; CASS, Q. B.; VIEIRA, P. C. Cromatografia um breve ensaio. Química Nova na Escola, n. 7, maio, 1998. UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 108 MATERIAL COMPLEMENTAR LIVRO Título: Fundamentos da Química Analítica Autores: Donald M. West , Douglas A. Skoog, Holler F. James, Stanley R. Crouch. Editora: Tradução da 8ª edição Norte Americana. (2006) Sinopse: Este livro aborda aspectos tanto fundamentais quanto práticos da análise química. Seu maior objetivo é fornecer um fundamento completo dos princípios da química que são particularmente importantes para a química analítica a fim de que os alunos desenvolvam habilidades para a difícil tarefa de julgar a exatidão e a precisão de dados experimentais e de mostrar como esses julgamentos podem ser aprimorados pela aplicação de métodos estatísticos. Assim, atentos à evolução contínua da química analítica, os autores incluíram nesta edição diversas aplicações em biologia medicina, ciência dos materiais, ecologia, ciência forense e outras áreas correlatas. Há ainda inúmeros tópicos atuais tais como espectrometria de absorção atômica e de massa molecular, fracionamento em fluxo tangencial e cromatografia quiral além de uma revisão de muitos tratamentos do passado para incorporar instrumentação e técnicas modernas. LIVRO Título: Fundamentos da Cromatografia Autor: Carol H. Collins, Gilberto L. Braga, Pierina S. Bonato Editora: Unicamp (2006) Sinopse: Edição revista e atualizada de introdução a métodos cromatográficos, este livro apresenta princípios básicos de cromatografia, descreve as diferentes técnicas cromatográficas e reúne sugestões para experimentos. Destina-se ao uso em cursos de graduação ou como livro introdutório às técnicas de separação cromatográfica para pós-graduandos, podendo também servir ao pesquisador que pretende usar a cromatografia como ferramenta em suas experiências. UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 109 https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_1?ie=UTF8&field-author=Donald+M.+West&text=Donald+M.+West&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_2?ie=UTF8&field-author=Douglas+A.+Skoog&text=Douglas+A.+Skoog&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_1?ie=UTF8&field-author=Carol+H.+Collins&text=Carol+H.+Collins&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_2?ie=UTF8&field-author=Gilberto+L.+Braga&text=Gilberto+L.+Braga&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Pierina+S.+Bonato&text=Pierina+S.+Bonato&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks VÍDEO Título: GC – Parte 1 Cromatografia Gasosa (2021) Sinopse: Aula de cromatografia gasosa. Desenvolvida por um especialista da USP. Pontos discutidos: - Primeiros passos; - Instrumento; - Software; - Ajustes necessários; Graduação ou pós-graduação em química? www.iq.usp.br (link para o Instituto de Química - USP). Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=- Cy1A_umx2mE&ab_channel=ChemicalLab VÍDEO Título: GC – Parte 2 Cromatografia Gasosa e os Pri- meiros Passos. (2021) Sinopse: Aula de cromatografia gasosa. Desenvolvida por um especialista da USP. Pontos discutidos: - Primeiros passos; - Instrumento; - Software; - Ajustes necessários; Graduação ou pós-graduação em química? www.iq.usp.br (link para o Instituto de Química - USP). Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?- v=NEOcROqeiWo&ab_channel=ChemicalLab VÍDEO Título: #1 Curso HPLC - instrumentação - Aula ani- mação 3D - UPLC, UHPLC. (2019) Sinopse: Desenvolvido por um especialista da USP. Aula animação 3D de cromatografia líquida. Este é o primeiro vídeo de uma sequência que trata sobre a determinação de princípios ativos de fármacos por HPLC. Tópicos deste vídeo: Quais os componentes de um HPLC? Para que servem? Tudo em 3D, com gráficos que você provavelmente ainda não viu em uma aula de HPLC. Graduação ou pós-graduação em química? www.iq.usp.br (link para o Instituto de Química - USP). Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?- v=fOL6yhGT1hA&ab_channel=ChemicalLab UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 110 VÍDEO Título: Conceitos Básicos em Cromatografia Líquida | HPLC. (2019) Sinopse: A cromatografia é uma técnica utilizada na separação dos componentes de uma amostra, os quais se distribuem em duas fases, uma estacioná- ria e a outra móvel. A fase estacionária pode ser um sólido, um líquido retido sobre um sólido, ou um gel. A fase móvel pode ser líquida ou gasosa. Link de acesso: https://www.youtube.com/ watch?v=tf0Rkcq-l-0&ab_channel=CentrodeSolu%- C3%A7%C3%B5esAnal%C3%ADticas VÍDEO Título: Experimento de Cromatografia em Papel (2019) Sinopse: Atividade prática para a disciplina ENCI-A do curso de especialização em ensino de ciências por investigação - CECI, da Faculdade de Educação da Universidade Federal de Minas Gerais. Aluno: Elton Martins Pimenta Silvério Turma: C Pólo: La- goa Santa. Link de acesso: https://www.youtube.com/wat- ch?v=qkI0qqNTXJM&ab_channel=EltonSilverio UNIDADE 4 SEPARAÇÕES ANALÍTICAS E CROMATOGRAFIA 111 REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS ALIBABA.COM. Espectrômetro de plástico akm lab consumíveis.2022. Disponível em: ht- tps://portuguese.alibaba.com/product-detail/AKM-LAB-Consumables-Plastic-Spectropho- tometer-Cuvette-60726565376.html. Acesso em: 26 jun. 2022. ANALYSER. Eletrodo de PH. Analyser Instrumentação Analítica. 2022. Disponível em: ht- tps://www.analyser.com.br/eletrodo-ph. Acesso em: 06 ago. 2022. ATLASDIAGNOSTICA. 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Por fim, nosso papel como profissionais da área química, é trabalhar para que estes produtos como medicamentos, alimentos e produtos de higiene e limpeza, sejam fabricados com uma melhor qualidade, tanto para a saúde do consumidor e de quem os produz, quanto para minimizar ao máximo os impactos ambientais. Destacamos também a importância dos conceitos estudados, pois estes conteúdos são importantes para a formação de analistas que saibam realizar medidas eletroanalíticas e potenciométricas diariamente. Tenho certeza de que seus conhecimentos sobre os conteúdos apresentados na nossa disciplina de química instrumental foram importantes para sua formação profissional como analista. Além disso, ajuda a aprofundar seus saberes acerca do universo da química analítica, espero que você tenha compreendido os conceitos estudados, pois são importantes para a sua formação e entendimento das técnicas espectrométricas em laboratório. A química instrumental se destaca devido ao seu caráter interdisciplinar, o que a torna fundamental em laboratórios de pesquisas de universidades, de desenvolvimento nas indústrias, de biomedicina, de meio ambiente, fármacos, entre outros. Nesta perspectiva, o avanço dos métodos de análises instrumentais pode trazer grandes benefícios e possibilidades de aplicações. A partir de agora acreditamos que você tenha conhecimentos para seguir em frente e de- senvolver suas habilidades com as metodologias de análise instrumental nos laboratórios das mais diversas áreas, realizando com sucesso o seu trabalho como analista. Até uma próxima oportunidade. Muito Obrigado! 120 ENDEREÇO MEGAPOLO SEDE Praça Brasil , 250 - Centro CEP 87702 - 320 Paranavaí - PR - Brasil TELEFONE (44) 3045 - 9898 Shutterstock Site UniFatecie 3:de amostras de sangue diariamente e usadas para diagnosticar e tratar doenças. As quantidades de hidrocarbonetos, óxidos de nitrogênio e monóxido de carbono presentes nos gases de descarga veiculares são determinadas para se avaliar a eficiência dos dispositivos de controle da poluição do ar. As medidas quantitativas de cálcio iônico no soro sanguíneo ajudam no diagnóstico de doenças da tireóide em seres humanos. A determinação quantitativa de nitrogênio em alimentos indica o seu valor proteico e, desta forma, o seu valor nutricional. A análise do aço durante sua produção permite o ajuste nas concentrações de elementos, como o carbono, níquel e cromo, para que se possa atingir a resistência física, a dureza, a resistência à corrosão, e a flexibilidade desejadas. O teor de mercaptanas no gás de cozinha deve ser monitorado com frequência, para garantir que este tenha um odor ruim a fim de alertar a ocorrência de vazamentos. Os fazendeiros planejam a programação da fertilização e a irrigação para satisfazer as necessidades das plantas, durante a estação de crescimento, que são avaliadas a partir de análises quantitativas nas plantas e nos solos nos quais elas crescem (SKOOG et al., 2009, p. 02). Diante disto, é fundamental darmos destaque ao papel da química analítica na so- ciedade em atuar em diversos segmentos de pesquisa. Assim, podemos também destacar as análises quantitativas dos elementos químicos que causam impactos ao meio ambiente em altas concentrações, no caso do chumbo, mercúrio e cromo, pois estes cátions podem causar intoxicações para as plantas e os animais. UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 CAMPOS DE ESTUDOS E AS APLICAÇÕES DA QUÍMICA ANALÍTICA TÓPICO 10 FIGURA 3 – FUNDAMENTOS DA QUÍMICA ANALÍTICA Fonte: Metroquimica (2022). Para Harris (2008, p. 01) “a química analítica exerce uma função decisiva na identi- ficação de origem do chumbo consumido por pessoas e na avaliação da eficácia dos regu- lamentos designados para reduzir a exposição do chumbo”. Logo, a química analítica se tornou fundamental, pois ela está no centro e que se relaciona com outras áreas da ciência. FIGURA 4 – RELAÇÕES ENTRE A QUÍMICA ANALÍTICA, OUTRAS ÁREAS DA QUÍMICA E OUTRAS CIÊNCIAS. Fonte: Rocha (2022). Harris (2008, p. 01) relata que o excesso de cafeína é prejudicial para a maioria das pessoas, e mesmo pequenas quantidades não são bem toleradas por algumas pessoas. Quanto de cafeína possui uma barra de chocolate? Quanto é em comparação com a quan- tidade de café ou de um refrigerante? Diante deste olhar, os acadêmicos precisam aprender a solucionar problemas com os conhecimentos de química analítica, através de questões como essa. Assim, faça uma reflexão de como você realizaria a medida da concentração de cafeína? 11UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS FIGURA 5 – EFEITO DA CAFEÍNA Fonte: Toledo (2015). 12UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Com o passar do tempo os cientistas foram em busca de metodologias analíticas que fossem cada vez mais interessantes para a pesquisa na área da química, bioquímica, química medicinal, etc., trazendo conhecimentos sobre determinações e quantificações de diferentes substâncias. Neste contexto, por meio das ideias destes profissionais foram descobertos novos métodos e técnicas de análises químicas qualitativa e quantitativa. Com relação a análise química qualitativa tem como foco identificar seus componentes químicos, cátions e ânions de uma certa amostra que será analisada, por exemplo, como o ferro presente no medicamento, e o cloreto presente em uma solução de soro fisiológico. Durante a realização destas análises é possível observar nas reações analíticas com a formação de uma substância insolúvel que decanta para o fundo da vidraria, e que além disso, através do aquecimento e da adição de outros reagentes, pode ocorrer alterações nas cores durante e o final do processo. Enquanto, que na análise química quantitativa está relacionada a determinação da quantidade e a concentração do analito, presente na matriz da amostra, por exemplo, uma análise volumétrica para determinar a concentração de ácido sulfúrico na solução de bateria de automóveis. Além disto, existem outros métodos de análise bem mais precisos e exatos. Skoog et al. (2006) ressalta que: Os métodos gravimétricos determinam a massa do analito ou de algum composto quimicamente a ele relacionado. Em um método volumétrico, mede- se o volume da solução contendo reagente em quantidade suficiente de alguma propriedade elétrica, como o potencial, corrente, resistência e quantidade de carga elétrica. Os métodos eletroanalíticos envolvem a medida de alguma propriedade elétrica, como o potencial, corrente, resistência e quantidade de carga elétrica. Os métodos espectroscópicos baseiam-se na medida de interação entre a radiação eletromagnética e os átomos ou as moléculas do analito, ou ainda, a produção de radiação pelo analito. Finalmente, um grupo de métodos variados inclui a medida de grandezas, como razão massa-carga de moléculas por espectrometria de massas, velocidade de decaimento radiativo, calor da reação, condutividade térmica de amostras, atividade óptica e índice de refração (SKOOG et al., 2009, p. 04). . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 MÉTODOS DE ANÁLISE QUALITATIVA E ANÁLISE QUANTITATIVA TÓPICO UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 13 Podemos destacar que os métodos acima são fundamentais e muito utilizados em diversas investigações analíticas, por isso, que os profissionais dessa área precisam ser inovadores na realização do seu trabalho, e buscar informações atualizadas sobre as me- todologias mais eficazes, com relação a identificação e quantificação de um determinado elemento ou íons que está sendo investigado pelo analista em laboratório. FIGURA 6 – CONCEITOS E DEFINIÇÕES DE QUÍMICA ANALÍTICA Fonte: Ferreira (2022). 14UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Neste momento, a análise química quantitativa apresenta uma organização em to- das o desenvolvimento de suas etapas. Nesta perspectiva, Vasconcelos (2019, p. 15) res- salta que envolve: a definição do problema; a amostragem; o tratamento adequado da amostra; se necessário, a separação do analito ou dos interferentes ou o mascaramento dos interferentes; a realização das medidas apropriadas; interpretação e tratamentos dos dados. Uma análise química quantitativa envolve uma sequência de etapas, como mostra a Figura 7 a seguir: UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 ETAPAS DE UMA ANÁLISE QUÍMICA QUANTITATIVA TÓPICO 15 FIGURA 7 – FLUXOGRAMA MOSTRANDO AS ETAPAS ENVOLVIDAS NUMA ANÁLISE QUANTITATIVA Fonte: Skoog et al. (2009, p. 05). 4.1.1 Preferência pelo Método A preferência ou seleção do método, faz necessário noções específicas que o não torna simples de ser executado e muito menos instinto. Quando o analista está no labo- ratório investigando alguma amostra, ele precisa ter certeza do método analítico que será usado, por isso, que deve considerar a seleção para garantir um resultado final confiável com uma elevada precisão ou exatidão. Mas para isso, dependemos de altos investimentos em equipamentos, reagentes químicos, e infraestrutura nos laboratórios das instituições. Conforme Vasconcelos (2019): A escolha de um método analítico é, geralmente, uma etapa difícil, requerendo mui- tas vezes, experiência e conhecimento químico, sendo função de vários parâme- tros. Com relação à amostra é importante destacar o tipo e a quantidade disponível para ser analisada. Outros fatores limitantes são o tempo e a finalidade da análise. Algumas vezes, a obtenção de um rápido resultado de uma análise é muito impor- tante, como, por exemplo, na elaboração de um diagnóstico clínico ou no monitora- mento de um determinado processo industrial. Com relação ao método empregado, alguns parâmetros devem ser observados, como a sensibilidade, a seletividade, o limite de detecção (faixa de concentração), a exatidão e a precisão requeridas. 16UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS Para uma apropriada seleção do método analítico, também deve ser considerada a disponibilidade de materiais, de reagentes e de equipamentos, além da experiência do analista e de fatores econômicos (VASCONCELOS, 2019, p. 16). Algo que deve ser considerado com certeza é a exatidão e a precisão do método analítico, para isso é importante ter uma boa infraestrutura e temos que apontar também a situação financeira, econômica, relacionada as despesas que muitas vezes são elevadas para trabalhos corriqueiros em laboratório analíticos, ainda mais com a grande quantidade de amostras que são investigadas. Skoog et al. (2009, p. 04) relata que “se existem muitas amostras, podemos nos dar o direito de gastar um tempo considerável em operações preliminares como montando e calibrando instrumentos e equipamentos e preparando soluções-padrão”. Logo, os analistas precisam pensar em estratégias que sejam mais econômicas, rá- pidas e eficientes, no caso da análise de apenas uma amostra, consegue-se poupar várias etapas iniciais. FIGURA 8 – CONCEITOS E DEFINIÇÕES DE QUÍMICA ANALÍTICA Fonte: Rocha (2022). 4.1.1. Obtenção da Amostra ou Amostragem: Atualmente, para que uma análise química seja significativa e de alta confiabilidade é importante se preocupar com as etapas iniciais. Harris (2008, p. 08, grifo nosso) destaca a importância de se “obter uma amostra pequena e homogênea cuja composição seja re- presentativa do objeto como um todo. Amostragem é o processo de seleção do material representativo para análise”. Na etapa de amostragem traz conhecimentos sobre a obtenção da amostra que será analisada, podemos utilizar o seguinte conceito como a seleção de uma amostra que seja de origem e representativa. Diante disto, se faz necessário um método que evite as etapas iniciais. Caso este material seja abrangente e desuniforme, é essencial uma maior 17UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS dedicação para obtenção desta amostra, por exemplo, é o que ocorre com a escolha da amostra de solo e rochas. - Recomendação p/ áreas de 10 a 15 ha: retirada de 10 a 30 amostras simples (ou subamostras) para formar uma amostra composta, recolhidas em ziguezague. 4.1.2. Processamento da amostra de laboratório Nesta etapa a amostra representativa é processada para que tenha condições de ser analisada de forma adequada. Além disto, a amostra bruta é dissolvida, e em seguida ocorre a remoção ou eliminação dos interferentes para a análise química. Harris (2008) relata que: da amostra representativa, é retida uma amostra laboratorial que deverá possuir a mesma composição da amostra bruta. Por exemplo, podemos obter uma amostra laboratorial por moagem total de uma amostra bruta, transformando-a em um pó fino, perfeitamente homogeneizado, e guardado para teste em um frasco apropriado (HARRIS, 2008, p. 08). A escolha da amostra bruta, ou amostra geral, deve ser representativa de toda a complexidade existente, portanto, é crítica na obtenção de análises confiáveis. Harris (2008, p. 08) traz a seguinte definição de preparação da amostra, que: é a coleção de etapas necessárias para converter uma amostra bruta representativa em uma forma apropriada de análise química. Para a barra de chocolate, a prepara- ção da amostra consistiu na remoção da gordura e na dissolução dos constituintes desejados. Conforme Skoog et al. (2009): Uma amostra de laboratório sólida é triturada para diminuir o tamanho das partículas, misturadas para garantir homogeneidade e armazenada por vários períodos antes do início da análise. A absorção ou liberação de água pode ocorrer durante cada uma das etapas, dependendo da umidade do ambiente. Como qualquer perda ou ganho de água altera a composição química de sólidos, é uma boa ideia secar as amostras logo antes do início da análise. Alternativamente, a umidade de uma amostra pode ser determinada no momento da análise, em um procedimento analítico a parte. As amostras líquidas apresentam um conjunto de problemas ligeiramente diferentes, mas ainda assim relacionados, durante a etapa de preparação. Se essas amostras forem deixadas em frascos abertos, os solventes podem evaporar e alterar a concentração do analito. Se o analito for um gás dissolvidos em um líquido, como em nosso exemplo sobre gases sanguíneos, o frasco da amostra deve ser mantido dentro de um segundo recipiente selado, talvez durante todo o procedimento analítico, para prevenir a contaminação por gases atmosféricas. Medidas especiais, incluindo a manipulação da amostra e a medida em atmosfera inerte, podem ser exigidas para preservar a integridade da amostra (SKOOG et al., 2009, p. 06). Nessas circunstâncias, existem vários tipos de amostras que podem ser analisadas, com diferentes propriedades, portanto, temos que destacar a importância das análises de amostras em réplicas ou replicata, relacionadas com a repetição do método analítico, utilizando instrumentação de laboratório aferida, como balança analítica, balões volumétricos, pipetas volumétricas, que são muito precisos. Portanto, quero apontar que a análise em 18UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS réplicas apresenta uma enorme eficiência e confiança sobre os resultados analíticos da amostra de interesse. Skoog et al. (2009) afirma que: A maioria das análises é realizada com soluções de amostras preparadas em um solvente adequado. Idealmente, o solvente deve dissolver toda a amostra, incluindo o analito, de forma rápida e completa. As condições da dissolução devem ser suficientemente brandas de forma que perdas do analito não venham a ocorrer. Infelizmente vários materiais que precisam ser analisados são insolúveis em solventes comuns. Os exemplos incluem os minerais a base de silício, os polímeros de alta massa molar e as amostras de tecido animal. Nessas circunstâncias, devemos seguir o fluxograma para a etapa a direita e realizar alguns tratamentos químicos drásticos. A conversão do analito em materiais dessa natureza em umaforma solúvel é, frequentemente, a tarefa mais difícil e demorada no processo analítico. A amostra pode necessitar de aquecimento com soluções aquosas de ácidos fortes, bases fortes, agentes oxidantes, agentes redutores ou alguma combinação desses reagentes. Pode ser necessária a ignição da amostra ao ar ou ao oxigênio para realizar sua fusão, sob elevadas temperaturas, na presença de vários fundentes. Uma vez que o analito esteja solubilizado, perguntamos se a amostra apresenta uma propriedade que seja proporcional a sua concentração e se podemos medi-la. Caso contrário, outras etapas químicas podem ser necessárias para converter o analito a uma forma adequada para a etapa de medida. Por exemplo, na determinação de manganês em aço, o manganês deve ser oxidado para MnO4 - antes da medida da absorbância da solução colorida. Nesse momento, da análise pode-se prosseguir diretamente para a etapa de medida, porém, na maioria dos casos, devemos eliminar as interferências na amostra antes de realizar as medidas (SKOOG et al., 2009, p. 06). Estas ideias podem ser fundamentais para os resultados analíticos que podem au- xiliar na saúde da população, por exemplo, como determinar a concentração de metais pe- sados em hortaliças, frutas e verduras, que podem ser tóxicos dependendo da quantidade ingerida. Sendo assim, somente através das pesquisas que conseguiremos monitorar a qualidade destes produtos comercializados em mercados e feiras. 4.1.3. Eliminação dos Interferentes Essa etapa envolve a remoção de interferentes na amostra que possam influenciar na medição e resultados da análise. Desta maneira, temos que conhecer a espécie que interfere e causa um possível erro analítico, para isso, existem técnicas específicas e sele- tivas para investigar o analito presente na amostra. Vasconcelos (2019) ressalta que: A presença de algumas substâncias na amostra pode interferir em certas determina- ções analíticas. Uma das maneiras de evitar a interferência é empregar técnicas de separação ou adicionar um agente de mascaramento. Existem diversos métodos de separações analíticas, destacando-se as separações por precipitação, destilação, ex- tração, além de diversas técnicas cromatográficas. O mascaramento consiste na adi- ção de um reagente químico que reaja com o interferente, impedindo que este afete a determinação analítica. Nesse caso, não é feita a separação do interferente, ou seja, o mesmo permanece no sistema investigado, mas a ação interferente é impedida através de uma reação química, normalmente uma reação de complexação. Na aná- lise volumétrica de leite, usando-se o ácido etilenodiaminotetraacético como titulante, são empregados íons cianetos para mascarar a presença de cobre que interfere na determinação de cálcio. Esses íons mascaradores formam complexos estáveis com cobre, evitando que reajam com o titulante (VASCONCELOS, 2019, p. 17). 19UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS Para Skoog et al. (2009, p. 07) “um plano deve ser traçado para se isolar os analitos das interferências antes que a medida final seja feita. Não há regras claras e rápidas para a eliminação de interferências [...]”. Sob este olhar, é possível observar que o papel do analista químico é complexo, pois ele precisa conhecer bem as metodologias que serão executadas, de modo que possa remover qualquer tipo de elemento que causa dano ou prejuízo para o resultado analítico. FIGURA 9 – LABORATÓRIO DE ANÁLISES QUÍMICAS Fonte: Quevedo (2016). 4.1.4. Calibração e Medida Os equipamentos que medem pH e a condutividade são essenciais nos processos de transformações, tanto para a gestão de qualidade e para o produto acabado, no monitoramento dos resíduos emitidos pela indústria, uma vez que as medições feitas, podem proporcionar um controle da toxidez de compostos inorgânicos e orgânicos para a população. Skoog et al. (2009) ressalta que: Todos os resultados analíticos dependem de uma medida final X de uma propriedade física ou química do analito. Essa propriedade deve variar de uma forma conhecida e reprodutível com a concentração cA do analito. Idealmente, a medida da propriedade é diretamente proporcional a concentração. Isto é: cA = kX. Em k é uma constante de proporcionalidade. Com duas exceções, os métodos analíticos requerem a determinação empírica de k com padrões químicos para os quais cA é conhecido. O processo de determinação de k é então uma etapa importante na maioria das análises; essa etapa é chamada de calibração (SKOOG et al., 2009, p. 07). A calibração também pode ocorrer por adição de padrão quando a matriz da amos- tra é bastante complexa e prejudica o resultado analítico, sendo importante que todas as análises possam encontrar a sua curva de calibração referente a amostra que está sendo analisada. 20UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS FIGURA 10 - PHMETRO E SOLUÇÕES TAMPÕES PARA CALIBRAÇÃO Fonte: CRMLab (2022). Segundo Harris (2008): para muitos tipos de análises químicas, a resposta para o procedimento analítico, deve ser avaliada para quantidades conhecidas de constituintes (chamado padrão), de forma que a resposta para uma quantidade desconhecida possa ser interpretada. Para esse propósito normalmente preparamos uma curva de calibração, que é um gráfico que mostra a resposta de um método analítico como uma função de uma quantidade conhecida de constituinte a ser medida (HARRIS, 2008, p. 81). Por isso, que a vantagem de ter instrumentos calibrados, minimizam erros e incertezas, sendo importante para confiança das medições realizadas nas empresas de processos químicos. 4.1.5. Resultados dos Experimentos e Cálculos para Análises Dando continuidade aos cálculos dos resultados das determinações da concentração e quantidade de constituintes químicos fazendo o uso de metodologia analítica, que apresenta um resultado rápido e eficaz, os resultados destes cálculos podem ser obtidos por meio de planilhas confeccionadas em notebooks com softwares modernos, aplicativos de smartphones e calculadoras científicas. Skoog et al. (2009, p. 08) expressa que “esses cálculos são baseados nos dados experimentais crus (na forma em que foram originalmente obtidos) coletados na etapa de medida, nas características dos instrumentos de medida e na estequiometria das reações químicas”. 21UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 4.1.6. Avaliação e a confiabilidade analítica dos resultados obtidos Para que os resultados obtidos sejam confiáveis, é preciso verificar as medidas re- lacionadas as incertezas articuladas aos dados da análise, e espera-se que os resultados sejam realmente significantes. Conclui-se que para o garantir a confiabilidade e a qualidade do resultado analítico é necessário que os métodos usados sejam validados para que a concentração do analito consiga ser determinada na matriz da amostra. FIGURA 11 - CONFIABILIDADE ANALÍTICA Fonte: Controllab (2021). 22UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 23 O processo de medir e controlar é com frequência denominado sistema controlado por realimentação e o ciclo envolvendo medida, comparação e controle é chamado ciclo de realimentação. Essas ideias encon- tram vasta aplicação em sistemas biológicos e bioquímicos, e sistemas mecânicos e eletrônicos. Da medida e do controle da concentração de manganês em aço até a manutenção dos níveis adequados de cloro em uma piscina, a análise química desempenha um papel central em uma ampla gama de sistemas. Fonte: Skoog et al. (2006, p. 09). Os profissionais da química trabalham para o desenvolvimento técnico-científico e industrial do país, impulsionando centros de pesquisas e adequando a química à solução de problemas tecnológicos. Fonte: O autor (2022). 23 CONSIDERAÇÕESFINAIS Diante disso, conseguimos chegar ao final da nossa Unidade I, e espero que tenha compreendido os conhecimentos apresentados até este momento sobre a Introdução aos Métodos Analíticos. Quero dizer que os estudos não se encerram por aqui, pode dar continuidade fazendo o uso de sites, artigos científicos, livros e vídeos, de modo que enriqueça cada vez mais os seus saberes e forneça ferramentas necessárias que possibilitem a escolha de trabalhar com diferentes metodologias analíticas em laboratório. Sendo assim, a química analítica trata-se de um ramo da ciência importante para as determinações e medições químicas. Com isso, a evolução dos métodos analíticos e da instrumentação utilizada para as medições, têm sido imprescindíveis para o desenvolvi- mento das pesquisas relacionadas a essa área de atuação. Desta maneira, temos que destacar que o papel dos químicos no desenvolvimento de metodologias analíticas que são amplamente aplicadas nas mais diversas. Por fim, nosso papel como profissionais da área química, é trabalhar para que estes produtos como medicamentos, alimentos e produtos de higiene e limpeza, sejam fabricados com uma melhor qualidade, tanto para a saúde do consumidor e de quem os produz, quanto para minimizar ao máximo os impactos ambientais. Quero agradecer a sua participação e até a próxima unidade! Abraço! UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 24 LEITURA COMPLEMENTAR Artigo: Morte de Veados: Um Estudo de Caso Ilustrando o Uso da Química na Solução de um Problema em Toxicologia. Resumo: As ferramentas da química analítica instrumental amplamente aplicadas em investigações ambientais. Neste destaque, descrevemos um estudo de caso no qual a análise quantitativa foi empregada para se determinar o agente que causava mortes em uma população de Veados de caudas brancas, habitantes de uma área recreacional de preservação da vida selvagem em Jundiaí. Vamos começar por uma descrição do problema e então mostrar como as etapas que foram utilizadas para resolver o problema analítico. Este estudo de caso também mostra como a análise química é empregada em um contexto amplo, como parte essencial de um sistema de controle por realimentação. Fonte: SKOOG, WEST; HOLLER,CROUCH. Fundamentos de Química Analítica. Tradução da 8ª Edição norte-ame- ricana. Editora Thomson: São Paulo, p. 9 -13, 2006. Disponível em: https://www.inesul.edu.br/site/documentos/QUIMI- CA_ANALITICA_SKOOG.pdf. Acesso em: 01 ago. 2022. UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 25 https://www.inesul.edu.br/site/documentos/QUIMICA_ANALITICA_SKOOG.pdf https://www.inesul.edu.br/site/documentos/QUIMICA_ANALITICA_SKOOG.pdf MATERIAL COMPLEMENTAR LIVRO Título: Fundamentos da Química Analítica Autores: Donald M. West , Douglas A. Skoog, Holler F. James, Stanley R. Crouch. Editora: Tradução da 8ª edição Norte Americana. (2006) Sinopse: Este livro aborda aspectos tanto fundamentais quanto práticos da análise química. Seu maior objetivo é fornecer um fundamento completo dos princípios da química que são particularmente importantes para a química analítica a fim de que os alunos desenvolvam habilidades para a difícil tarefa de julgar a exatidão e a precisão de dados experimentais e de mostrar como esses julgamentos podem ser aprimorados pela aplicação de métodos estatísticos. Assim, atentos à evolução contínua da química analítica, os autores incluíram nesta edição diversas aplicações em biologia, medicina, ciência dos materiais, ecologia, ciência forense e outras áreas correlatas. Há ainda inúmeros tópicos atuais tais como espectrometria de absorção atômica e de massa molecular, fracionamento em fluxo tangencial e cromatografia quiral, além de uma revisão de muitos tratamentos do passado para incorporar instrumentação e técnicas modernas. LIVRO Título: Métodos Instrumentais de Análise Quí- mica – Vol. 2. (2006) Autor: Galen W. Ewing Editora: Blucher. Sinopse: O objetivo geral deste livro é fornecer um panorama dos instrumentos analíticos modernos e técnicas, e apresentar teoria suficiente para sua compreensão. Coloca-se ênfase nas possibilidades e limitações inerentes aos vários métodos. O texto é planejado para ser usado por estudantes dos níveis superiores de graduação ou para primeiro ano de pós- graduação. Para ensinar-se mais efetivamente, este curso deverá seguir trabalhos em análise quantitativa elementar e um ano de física; pode seguir ou pode ministrar-se paralelamente com físico química. UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 26 https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_1?ie=UTF8&field-author=Donald+M.+West&text=Donald+M.+West&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_2?ie=UTF8&field-author=Douglas+A.+Skoog&text=Douglas+A.+Skoog&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.amazon.com.br/s/ref=dp_byline_sr_book_3?ie=UTF8&field-author=Holler+F.+James&text=Holler+F.+James&sort=relevancerank&search-alias=stripbooks https://www.estantevirtual.com.br/livros/galen-w-ewing?busca_es=1 LIVRO Título: Princípios de analisis instrumental Autores: Douglas A. Skoog, James F. Holler, Stanley R. Crouch. Editora: Cengage Learning; 7ª edição (17 julho 2018) Sinopse: Princípios de análise instrumental, 7ª edição estabelece o padrão para cursos sobre os princípios e aplicações de instrumentos analíticos modernos. Nesta 7ª edição os autores Skoog, Holler e Crouch complementam sua obra com técnicas atualizadas e novos estudos de caso orientados à ação. Um enfoque probado que enfatiza os princípios fundamentais de operação para cada tipo de instrumento, sua área ideal de aplicação, como sua sensibilidade, precisão e limitações. O conteúdo da obra também mostra a parte eletrônica analógica e digital elementar, os computadores e o tratamento de dados analíticos. Os tutoriais em linha, os arquivos Excel de análise de dados das simulações de técnicas analíticas ajudam a reforçar os conceitos LIVRO Título: Análise Química Quantitativa – 7ª Ed. (2008) Autor: Daniel C. Harris. Editora: LTC. Sinopse: Análise Química Quantitativa apresenta os princípios da Química Analítica de uma maneira clara e objetiva e mostra como esses princípios podem ser aplicados em química e outras disciplinas relacionadas – especialmente nas ciências da vida e ambientais. Os assuntos são apresentados de uma maneira rigorosa, de fácil leitura e atraente, independentemente de o principal interesse do leitor ser ou não ser química. Um texto acessível a especialistas de outras áreas, até mesmo por conter informações importantes para estudantes de graduação que estejam em um nível mais avançado… UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 27 https://www.travessa.com.br/Daniel_C._Harris/autor/c626ef24-7d78-4de4-85b0-df87c3bdc829 FILME/VÍDEO Título: Erin Brockovich - Uma Mulher de Talen- to (2006) Sinopse: Erin (Julia Roberts) é a mãe de três filhos que trabalha num pequeno escritório de advocacia. Quando descobre que a água de uma cidade no deserto está sendo contamina- da e espalhando doenças entre seus habitan- tes, convence seu chefe a deixá-la investigar o assunto. A partir de então, utilizando-se de todas as suas qualidades naturais, desde a fala macia e convincente até seus atributos físicos, consegue convencer os cidadãos da cidade a cooperarem com ela, fazendo com que tenha em mãos um processo de 333 milhões de dó- lares. VÍDEO Título: Aula 3 - Laboratório de Química do Solo (2022) Sinopse: Nesta aula serão apresentados equipamentos do laboratório de química do solo e análises químicas que podem ser feitas no solo. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=tfu- dLJSUMdM&ab_channel=WellingtonSoares VÍDEO Título: Amostragem para Análise Química (2021) Sinopse: Neste vídeo aula discutimos a amostragempara a análise química, definindo a quantidade de amostras, quantas parcelas, massa mínima, porção da amostra e número de replicatas. Disciplina CEN 5768 - Preparo de amostras para análise elementar #USP, #Esalq, #CENA, #PreparodeAmostras, #Química, #QuímicaAnalítica. Link de acesso: https://www.youtube.com/watch?v=p- z7f_dahVN4&ab_channel=Qu%C3%ADmicaAplicada UNIDADE 1 INTRODUÇÃO AOS MÉTODOS ANALÍTICOS 28 https://www.youtube.com/hashtag/usp https://www.youtube.com/hashtag/esalq https://www.youtube.com/hashtag/cena https://www.youtube.com/hashtag/preparodeamostras https://www.youtube.com/hashtag/qu%C3%ADmica https://www.youtube.com/hashtag/qu%C3%ADmicaanal%C3%ADtica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Plano de Estudos • Eletroquímica; • Células eletroquímicas; • Potenciais de eletrodos; • Potenciometria. Objetivos da Aprendizagem • Compreender as transformações de Lorentz; • Conceituar e aplicar as transformações da velocidade relativística; • Compreender os principais aspectos da dinâmica relativística. 2UNIDADEUNIDADE ELETROQUÍMICA E ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIAPOTENCIOMETRIA Professor Mestre Diego Marlon Santos INTRODUÇÃO Olá Pessoal! Vamos iniciar mais uma unidade?! Nessa Segunda Unidade da nossa disciplina vamos aprofundar nossos conhecimentos sobre os métodos eletroquímicos e a potenciometria. Tais fundamentos são necessários para a compreensão dos princípios desses procedimentos que fazem parte desta unidade. Os métodos potenciométricos de análises se baseiam na medida de potencial estudados de células eletroquímicas. Nesta perspectiva, destacamos a importância da química instrumental, portanto, é fundamental que continuem ainda mais atentos aos conteúdos a serem estudados. Entendendo a importância do estudo da eletroquímica e potenciometria, apresentamos no decorrer dos quatro tópicos da nossa unidade as metodologia de análise instrumental para o entendimento e reconhecimento da importância das medidas eletroanalíticas e potenciométricas para os pesquisadores e fabricantes que medem o pH de muitos produtos comerciais, temos como exemplo; água, medicamentos, alimentos, produtos de limpeza, polímeros, combustíveis entre outros. Ao final desta segunda unidade, espero que você consiga diferenciar cada um des- ses métodos instrumentais e as suas aplicações analíticas nas diversas áreas. Lembrando que é fundamental a realização de pesquisas em outras fontes. Bons Estudos pra você! UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 30 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 ELETROQUÍMICA TÓPICO Os métodos eletroquímicos relacionados a química analítica incluem a titulometria de oxidação-redução, a potenciometria, a coulometria, a eletrogravimetria e a voltametria. Os fundamentos eletroquímicos necessários para a compreensão dos princípios desses procedimentos são apresentados nesta unidade. Importante que, com o término do conteúdo da unidade, venha também um encerramento, para que se concluam as propostas realizadas na Introdução e para que se retome criticamente tudo o que foi trabalhado durante o desenvolvimento. Isso auxilia o aluno a fixar o conteúdo já trabalhado e organizar melhor a informação em sua linha de raciocínio. 1.1 Caracterização das reações Segundo Skoog et al. (2009) em uma reação de oxidação-redução: os elétrons são transferidos de um reagente para outro. Um exemplo é a oxidação de íons ferro (II) por íons cério (IV). A reação é descrita pela equação: Ce4+ + Fe2+ ↔ Ce3+ + Fe3+. Nessa reação, um elétron é transferido do Fe2+ para o Ce4+ para formar íons Ce3+ e Fe3+. Uma substância que tem uma grande afinidade por elétrons, como o Ce4+, é chamada agente oxidante ou oxidante. Um agente redutor, ou redutor, ou redutor, é uma espécie, tal como o Fe2+, que doa facilmente um elétron para ou- tra espécie. Para descrever o comportamento representado pela equação a seguir, dizemos que o Fe2+ é oxidado pelo Ce4+; de forma similar, Ce4+ é reduzida por Fe2+ (SKOOG et al., 2009, p. 464). Logo, precisamos compreender a reação de oxidação-redução para que possa auxi- liar na medição dos potenciais das células eletroquímicas, promovendo um equilíbrio entre as semirreações. UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA 31 FIGURA 1 – A FORMAÇÃO DA FERRUGEM, O FERRO SOFRE OXIDAÇÃO E O OXIGÊNIO SOFRE REDUÇÃO Fonte: Fogaça (2022) FIGURA 2 – OXIDAÇÃO E REDUÇÃO Fonte: Dias (2022) 32UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA https://mundoeducacao.uol.com.br/quimica/oxidacao-reducao.htm https://blogdoenem.com.br/reacoes-de-oxireducao-quimica-enem/ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Com relação ao conceito de células eletroquímicas, está relacionada a medida das propriedades elétricas de uma determinada substância química. Quero dizer que, a partir do momento que comecei a compreender uma célula eletroquímica, passei a ter mais inte- resse em conhecer cada componente, como: o eletrodo, o condutor metálicos e a solução de eletrólitos. Skoog et al. (2009) ressalta que: Uma célula eletroquímica consiste em dois condutores chamados eletrodos, cada um deles imerso em uma solução eletrolítica. Na maioria das células que serão in- teresse para nós, as soluções nas quais os eletrodos estão imersos são diferentes e precisam ser mantidas separadas para evitar a reação direta entre os reagentes. O modo mais comum de evitar a mistura é pela inserção de uma ponte salina, com aquela mostrada na Figura 3, entre as soluções. Então a condução de eletricidade de uma solução eletrolítica para a outra ocorre pela migração de íons potássio pre- sentes na ponte para uma direção e íons cloreto para a outra. Portanto, o contato direto, entre o cobre metálico e os íons prata é evitado (SKOOG et al., 2009, p. 468). Neste momento, ocorre um deslocamento dos íons das soluções eletrolíticas, ha- vendo um contato com a ponte salina. Na Figura 3 observa-se o trabalho de uma célula galvânica. UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2 CÉLULAS ELETROQUÍMICAS TÓPICO 33 FIGURA 3 – CÉLULA GALVÂNICA REALIZANDO TRABALHO Fonte: SKOOG et al. (2006, p. 468). Conforme Schrödier (2017, p. 43) “As células eletroquímicas são de dois tipos: as células galvânicas e as eletrolíticas. Aquelas geram energia elétrica através da transformação de energia química em elétrica”. Com relação aos métodos eletroquímicos temos que apontar alguns de seus benefícios, como: simples, rápido, sensível, bastante seletivo e o custo baixo do equipamento. Schröder (2017) ressalta que os métodos eletroquímicos: Também, fornecem informações sobre a atividade e não sobre a concentração de um analito; e permitem: aumentar as reações de eletrodo desejáveis e inibir as indesejáveis, mudando o material do eletrodo; o estudo de sistemas complexos em que ocorrem, simultaneamente, muitas reações de eletrodos, como a bioeletroquímica; medir concentrações de espécies eletroativas, fazendo uso da seletividade do potencial e do material do eletrodo; determinação in loco de um analito na amostra sem a necessidade de pré-tratamento da amostra; a análise de amostras coloridas e materiais em suspensão; e a determinação de analitos simultaneamente (SCHRÖDER, 2017, p. 43). Como pode ser visto, o analista precisa buscar informações sobre a célula eletroquímica, como os eletrodos são constituídos e compreender as suas funções, para análises das espécies químicas eletroativas. Vasconcelos (2019) salienta que: As células eletroquímicas podem ser de dois tipos: 1) galvânicas, voltaicas ou pilhas; 2) eletrolíticas. As células galvânicas são células eletroquímicas que armazenam ou acumulam energia elétrica. São sistemas formados por dois eletrodos geralmente metálicos, imersos numa mesma ou em diferentes soluções eletrolíticas. As reações eletroquímicas nas interfaces dos eletrodos têm tendência a ocorrer espontaneamente e geram corrente elétrica. Os elétrons fluem do anodo para o catodo através do condutor externo (VASCONCELOS, 2019, p. 115). 34UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA A função das células eletrolíticas é transmitir a energia para que ocorram as reações químicas com os eletrodos. No caso, a célula galvânica necessita estar em equilíbrio para que atue com confiabilidade. Vasconcelos (2019, p. 115) relata que na “célula galvânica o ânodo é negativo, mas é positivo na célula eletrolítica, enquanto o cátodo é positivo na cé- lula galvânica e negativo na célula eletrolítica”. 35UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . O potencial do eletrodo que ocorre na célula eletroquímica, será usado para medir os componentes químicos eletroativos, ocorrendo uma dissociação de cargas com o meio que permite a interação do eletrodo com a solução. Vasconcelos (2019, p. 117) afirma que “desenvolve-se uma d.d.p. entre o metal e a solução e o potencial que aparece no eletrodo é chamado de Potencial Absoluto de Eletrodo, associado à semi-reação que ocorre em cada eletrodo”. 3.1 O eletrodo padrão de hidrogênio como referência O eletrodo padrão de hidrogênio é bastante útil, sendo muito empregado mundialmente em análises dos constituintes químicos, mostrando a importância da meia-célula como referência. Logo, encontramos vários benefícios, relacionados a esse tipo de eletrodo: ser de simples montagem, apresentar potenciais que sejam constantes e possam ser reproduzidos e caso haja um desequilíbrio eletrolítico, que denominamos de comportamento reversível. Skoog et al. (2009) considera que: Esse eletrodo precisa ser de fácil construção, reversível e ter um comportamento altamente reprodutível. O eletrodo padrão de hidrogênio (EPH) encontra essas especificações e tem sido empregado em todo o mundo por muitos anos como o eletrodo de referência universal. É um eletrodo gasoso típico. O metal condutor é um pedaço de platina que tenha sido recoberto, ou platinizado, com platina finamente dividido (negro de platina) para aumentar sua área superficial específica (SKOOG et al., 2009, p. 476). Ao relacionar a teoria e prática temos que dar atenção ao eletrodo padrão que sob o olhar de Vasconcelos (2019, p. 117) “deve ser conectado ao eletrodo cujo potencial se deseja medir e a medida de potencial é feita em relação a esse eletrodo. Essa associação do eletrodo padrão ao eletrodo de interesse resulta numa pilha”. UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 POTENCIAIS DE ELETRODOS TÓPICO 36 FIGURA 4 – ELETRODO GASOSO DE HIDROGÊNIO Fonte: Skoog et al. (2006, p. 477) 3.2 Potencial de eletrodo e potencial padrão de eletrodo Desde o início da Unidade II tivemos que nos aprofundar nas definições de reações de oxidação-redução que são noções fundamentais para o estudo dos métodos eletroquímicos. Por isso, para um melhor entendimento do potencial de eletrodo, destacamos a Figura 5. Skoog et al. (2009, p. 477) esclarece que “nessa célula, a meia célula da direita consiste em uma lâmina de prata pura em contato com uma solução contendo íons prata; o eletrodo do lado esquerdo é o eletrodo padrão de hidrogênio”. Neste viés, Skoog et al. (2009, p. 477) relata que “o potencial de um eletrodo, por exemplo, o eletrodo na Figura 5, é referido como EAg versus EPH para enfatizar que é o potencial de uma célula completa medida contra o eletrodo padrão de hidrogênio como referência”. FIGURA 5 – MEDIDA DE POTENCIAL DE ELETRODO PARA UM ELETRODO DE AG Fonte: SKOOG et al. (2006, p. 478). 37UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA Skoog et al. (2006, p. 478) salienta que “o potencial padrão de eletrodo, E0, de uma semi-reação é definido como seu potencial de eletrodo quando as atividades dos rea- gentes e produtos são todas iguais a unidade”. 3.4 O potencial padrão de eletrodo Por conceituação, o potencial padrão de eletrodo (E0) fornece conhecimentos so- bre a concentração das espécies através do desenvolvimento da reação eletroquímica da meia-célula e trata-se de uma constante representativa. Skoog et al. (2009) considera as seguintes características: 1. O potencial padrão de eletrodo é uma grandeza relativa no sentido de que é o potencial de uma célula eletroquímica na qual o eletrodo de referência (eletrodo da esquerda) é o eletrodo padrão de hidrogênio, a cujo potencial foi atribuído o valor de 0,000 V. 2. O potencial padrão de eletrodo para uma semi-reação refere-se exclusivamente a reação de redução; isto é, é relativo ao potencial de redução. 3. O potencial padrão de eletrodo mede a força relativa da tendência de guiar uma semi-reação de um estado no qual os reagentes e produtos têm atividade igual a um para um estado no qual os reagentes e produtos estão com suas atividades de equilíbrio em relação ao eletrodo padrão de hidrogênio. 4. O potencial padrão de eletrodo é independente do número de mols de reagentes e produtos mostrados na semi-reação balanceada. 5. Um potencial de eletrodo positivo indica que a semi-reação em questão é es- pontânea em relação a semi-reação do eletrodo padrão de hidrogênio. Isto é, na semi-reação o oxidante é mais forte que o íon hidrogênio. Um sinal negativo indica exatamente o contrário. 6. O potencial padrão de eletrodo para uma semi-reação é dependente da tempera- tura(SKOOG et al., 2009, p. 482). As características citadas acima correspondem aos dados de potenciais padrão de eletrodo que estão acessíveis para uma grande quantidade de semi-reações. Sendo que vários potenciais conseguiram ser encontrados por meio das medições que ocorrem nas células eletroquímicas. Mas, existe a possiblidade de serem realizados cálculos através de dados específicos de cada reação. Schröder (2018, p. 201) diz que “podemos prever a diferença de potencial elétrico de duas meias células diferentes conectadas se conhecermos o potencial padrão de cada uma delas, chamado também de potencial padrão de eletrodo (Eº)”. Os potenciais padrão de eletrodos para algumas reações. Os dados de E0 que serão mostrados na Tabela 1 estão baseados em algumas espécies como Ag+, Cu2+ e Zn2+. Os valores desta tabela fornecem ricas informações aos analistas sobre as reações químicas e como ocorrem a transferência dos íons neste processo. 38UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA TABELA 1 – POTENCIAIS PADRÃO DE ELETRODOS Fonte: Skoog et al. (2006, p. 483). 3.5 Equação de Nernst Conclui-se que a convenção de medidas pode ser empregada mundialmente, e as semi-reações devem ser apresentadas como reações que promovem a redução. Vascon- celos (2019) nos traz informações sobre o surgimento da Equação de Nernst: O efeito da concentração sobre os potenciais de eletrodo é descrito pela equação desenvolvida por volta de 1889 pelo químico e físico alemão Walther Hermann Nernst. A partir de raciocínios termodinâmicos, Nernst desenvolveu a relação quantitativa conhecida como equação de Nernst, que relaciona o potencial ou a força eletromotriz de uma pilha às concentrações das espécies oxidantes e redutoras. Essa equação é muito empregada em volumetria de oxidação-redução (VASCONCELOS, 2019, p. 120). Logo, esta equação a seguir busca encontrar resultados quantitativos de E e Eº 39UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA FIGURA 6 – EQUAÇÃO DE NERNST Fonte: Skoog et al. (2006, p. 480). 40UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . Na potenciometria são realizadas medições com instrumentos analíticos que são encontrados internacionalmente. Portanto, estão presentes em laboratórios de análises clínicas, controle de qualidade, oceanografia, monitoramento ambiental e outras funções. Baseando-se nas ideias de Schröder (2017, p. 44) “as medidas potenciométricas tem como objetivo conhecer a atividade de uma espécie iônica específica em uma solução de eletrólitos”. As medições analíticas, devem auxiliar na compreensão da relação teoria e prática, pois ocorre a transferências de elétrons, de modo que sejam realizadas leituras da diferen- ça de potencial das espécies químicas que estão sendo analisadas. Schröder (2017) relata que: A potenciometria na medida do potencial de células eletroquímicas, sem o consumo apreciável de corrente. Há cerca de um século, as técnicas potenciométricas têm sido utilizadas para localizar o ponto final em titulações. Em métodos mais recentes, as concentrações de espécies iônicas são medidas diretamente a partir do potencial de eletrodos de membranas seletivas a íons. Esses eletrodos são relativamente livres de interferência e representam uma forma rápida, conveniente e não des- trutiva de se determinar quantitativamente inúmeros cátions e ânions importantes (SCHRÖDER, 2017, p. 44). De acordo com Skoog et al. (2009): Os analistas realizam mais medidas potenciométricas do que, talvez, qualquer outro tipo de medida química instrumental. O número de medidas potenciométricas feitas diariamente é surpreendente. Os fabricantes medem o pH de muitos produtos comerciais; os laboratórios clínicos determinam gases sanguíneos como importantes indicadores no diagnóstico de doenças; os efluentes industriais e municipais são continuamente monitorados para determinar pH e a concentração de poluentes; os UNIDADE 2 ELETROQUÍMICA E POTENCIOMETRIA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 POTENCIOMETRIA TÓPICO 41 oceanógrafos determinam dióxido de carbono e outras propriedades relacionadas em água do mar. Medida potenciométricas também são empregadas em estudos fundamentais para se determinar constantes de equilíbrio termodinâmicas, tais como Ka, Kb e Kps. Esses exemplos são apenas alguns poucos das milhares de aplicações das medidas potenciométricas (SKOOG et al., 2009, p. 553). Os instrumentos usados para medição potenciométrica são simples e acessíveis, podendo ser adquiridos, os eletrodos de referência e o indicador (metálicos e de membra- na), como também outros dispositivos que possam realizar estas análises. Neste contexto, Harris (2008, p. 319) confirma que o eletrodo indicador responde a atividade do constituinte em análise, enquanto o eletrodo de referência mantém um potencial fixo (referência). Harris (2008) afirma que: Químicos engenhosos projetaram eletrodos que respondem seletivamente a um constituinte específico em solução ou em fase gasosa. Eletrodos íon-seletivos tí- picos são quase do tamanho de sua caneta. Realmente, os engenhosos químicos criaram transistores com efeito de campo íon-sensíveis que são do tamanho de centenas de micrômetros e podem ser inseridos em um vaso sanguíneo. O uso dos eletrodos para medir potenciais que produzem informações químicas é chamado de potenciometria (HARRIS, 2008, p. 319). Os instrumentos usados para medir os potenciais das células eletroquímicas, são conhecidos como pHmetros. Desse modo, possibilitam medições bem mais eficientes. O pH das amostras que corresponde à faixa de pH entre 1 e 14, normalmente, não é realizado tratamento da amostra, pois são muitas os tipos de soluções que podem ser analisadas. Conclui-se que o circuito deve ser calibrado com soluções tampões. De acordo com Schröder (2017) os sistemas para medidas de pH podem ser: Simples: consistem em um eletrodo indicador de vidro (com um eletrodo de refe- rência interno) e um eletrodo de referência imerso na solução na qual se deseja conhecer o pH. O eletrodo indicador consiste em uma fina membrana de vidro na forma de bulbo, sensível ao pH, que contém na sua parte interna uma solução de HCl diluído, saturado com NaCl (ou uma solução tampão). Combinado: nesse caso, tanto o eletrodo de vidro (com seu eletrodo de referência interno) quanto o eletrodo de referência externo estão dentro de um mesmo arranjo. O eletrodo de referência externo faz contato com a amostra através de uma junção de vidro ou outro material poroso (SCHRÖDER, 2017, p. 44). No momento atual, vários eletrodos de membrana que apresentam liberados para comércio. Assim, destacamos a importância para área análise de fármacos, os eletrodos são muito usados para determinação do Ca+2. Finalmente, os eletrodos do tipo íon sele- tivos, mostram que terão bastante aplicações na bioquímica, alimentos, meio ambiente, análises clínicas entre outras, que contribui para a determinação da concentração nestas fontes