Aula 1 Introdução a Microscopia

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INTRODUÇÃO A MICROSCOPIA
CURSO DE GRADUAÇÃO EM ENFERMAGEM
VITOR H.C.SERRULHA
Profº Espec. Biólogo 
dependem	das
a menor unidade de um organismo vivo (vida autônoma) é a célula;
as	propriedades	(morfologia	e	fisiologia)	de	um	organismo
propriedades de suas células;
Biosfera
Ecossistemas
Comunidades
Populações
Organismos
Órgãos
Tecidos
Células
as células se originam unicamente a partir de outras células e sua continuidade se mantém devido à transmissão de seu material genético ao longo das gerações (hereditariedade).
Organelas
Moléculas
TEORIA CELULAR
UNIDADES EM BIOLOGIA CELULAR
Unidade de comprimento:
1 mm = 1000 micrometros (µm)
1 µm = 1000 nanometros (nm)
1 nm = 10 Angstrons (A)
Árvore: 30 m
Homem: 1.5-2 m
Diâmetro de alga gigante: 5 mm
Ameba: 100 µm
Maioria das células eucarióticas: 10-50 µm Maioria das células procarióticas: 1-5 µm Maiores vírus: 300 nm
Menor vírus: 20 nm
 Organização estrutural e composição
Tecnologias de visualização Microscopia óptica Microscopia eletrônica
Tecnologias de coloração Células vivas ou fixadas
OBSERVAÇÃO DAS CÉLULAS
Células são extremamente pequenas, complexas e geralmente incolores.
Instrumento	de	precisão	para	observar	objetos	com dimensões inferiores ao poder de resolução do olho humano.
Resolução do olho humano a 25 cm é de 100 a 300 μm (0,1 a
0,3 mm)
MICROSCÓPIO
MICROSCOPIA ÓPTICA
O caminho da luz em um microscópio óptico
Fonte de luz
Espécime
Condensador
Objetica
Ocular
Olho humano
A História do Microscópio
Robert Hooke, estudioso inglês, foi o primeiro (em 1665) a observar células. Para tal valeu-se de um rudimentar microscópio, idealizado anos antes por um outro estudioso, Anthony Van Leeuwenhoeck.
Hooke observou cortes finos de cortiça, que se apresentavam ao microscópio com um aspecto similar a pequenos favos de mel empilhados. A cada um destes favos Hooke atribuiu a designação de cellulae (células).
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Cerca	de	dez	anos	mais	tarde	o	próprio	Leeuwenhoeck
observou	pequenos
seres
“protozoários”,	aos	quais
vivos,
mais
que
tarde
foi	dada
designou	por
a
designação de bactérias.
A História do Microscópio
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O MICROSCÓPIO ÓPTICO
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O MICROSCÓPIO ÓPTICO
Serve para ampliar um objeto.
Funciona com um conjunto de lentes (ocular e objetiva) que ampliam a imagem.
A Iluminação é natural ou artificial.
É constituído por uma parte mecânica que suporta e permite controlar uma parte óptica que amplia as imagens.
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braço
corpo
ocular
canhão
objetivas
mesa
controle de
intensidade
de luz
condensador controle do diafragma base com fonte de luz
nível do diafragma
parafuso macrométrico
parafuso micrométrico ajuste da mesa
MICROSCÓPIO ÓPTICO
revólver
Oculares
Ampliam a imagem fornecida pelo sistema de objetivas.
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Canhão ou tubo
Serve de suporte ao sistema ocular
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Braço
Serve de suporte à platina e ao revólver.
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Revólver
Serve de suporte às objetivas e permite a sua mudança.
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Objetivas
Amplia a imagem do objeto que está a ser observado.
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LENTES OBJETIVAS
4X
10X
40X
Objetiva de 4x Objetiva de 10x Objetiva de 40x
LENTES OBJETIVAS
óleo
ar
lâmina
Objetiva de 100x
lente objetiva
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4 X
10 X
40 X
CAMPO DE VISÃO
A total = A objetiva X A ocular
Objetiva de 4x	Ocular de 10x
Objetiva de 10x	Ocular de 10x
Objetiva de 40x
Ocular de 10x
O limite de resolução depende da objetiva (a ocular não acrescenta detalhes à imagem, sua função é apenas aumentar o tamanho da imagem).
É imposto por restrição física – comprimento de onda limite 200 nm
PODER DE RESOLUÇÃO
É a capacidade de fornecer imagens nítidas.
É inferido de forma indireta, tendo como base o limite de resolução.
LIMITE DE RESOLUÇÃO
Corresponde a menor distância que deve existir entre dois pontos, de modo que ainda apareçam individualizados na imagem formada pelo sistema de lentes.
Comprimento de onda
 poder de resolução
Platina
Serve de suporte à preparação a observar.
Tem uma abertura na pane central (janela da platina).
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Condensador
Distribui regularmente no campo da preparação a luz que atravessa o diafragma
Diafragma
Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparação.
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Fonte de Luz
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Parafusos Macrométrico e Micrométrico
Permite movimentos (de maior ou menor amplitude) de aproximação ou afastamento entre a preparação e as objetivas.
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Base ou pé
Constitui a base de suporte de todos os elementos do microscópio.
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Transportá-lo com ambas as mãos, apoiando a base numa
delas e segurando o braço com a outra.
Ao colocá-lo sobre a mesa, mantê-lo a alguma distância do bordo.
Evitar molhá-lo ao usar preparações temporárias.
As lentes são peças muito caras. Para as limpar, deve usar a flanela que normalmente acompanha o aparelho.
Após a utilização, encaixar a objectiva de menor ampliação alinhada com a ocular.
Cuidados a ter com o Microscópio
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Limpeza das lentes:
material não abrasivo;
as lentes de imersão devem ser limpas com papel
macio (se necessário embebido com álcool 70%);
as lentes de imersão com resíduos de óleo seco devem ser limpas com xilol.
Iluminação:
Fonte luminosa;
Condensador;
Diafragma.
Material fresco sem coloração: pouca luz (condensador em baixo, diafragma fechado);
Material corado: muita luz (condensador em cima, diafragma aberto).
COMO UTILIZAR O MICROSCÓPIO ÓPTICO?
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Como focalizar:
objetiva de menor ampliação;
parafuso macrométrico;
mudança para a objetiva de maior ampliação;
parafuso micrométrico.
Como deixar o microscópio:
luz apagada e desligado da tomada;
condensador em baixo;
objetiva de menor ampliação alinhada;
subir a mesa;
coberto.
COMO UTILIZAR O MICROSCÓPIO ÓPTICO?
CARACTERÍSTICAS DA IMAGEM
Antes
Depois
Ampliada Simétrica Invertida Virtual
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OBSERVAÇÕES AO M.O.C.
Diatomáceas
Ameba
Volvox
Ovo em desenvolvimento
Protozoários
Raiz de um cabelo
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