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MEMBRANAS BIOLÓGICAS Prof. Dr. Cleber Machado de Souza Transporte de membrana Várias funções realizadas pelo transporte através da MP... Importação de nutrientes (açúcares e aminoácidos) Eliminação de resíduos metabólicos (CO2) Regulação das concentrações intracelulares de íons inorgânicos Introdução Dessa forma é necessário entender o transporte através de 2 estruturas: Através da bicamada Através de canais protéicos Introdução A membrana plasmática é uma estrutura lipoprotéica... Lembrar que... O transporte através da bicamada lipídica Depende de 2 características da molécula considerada: Bicamada lipídica versus moléculas Solubilidade relativa nos lipídeos Taxa de difusãoTaxa de difusãoTaxa de difusãoTaxa de difusão Tamanho da molécula Bicamada lipídica versus moléculas Molécula apolar -> solúveis em lipídeos Molécula polar -> “insolúveis” em lipídeos Solubilidade relativa nos lipídeos... Bicamada lipídica versus moléculas Temos que lembrar que o interior da bicamada lipídica é... Hidrofóbico Solubilidade relativa nos lipídeos... Bicamada lipídica versus moléculas Solubilidade relativa nos lipídeos... Solúveis em lipídios Apolar (Hidrofóbico) Atravessam com mais facilidade a bicamada Bicamada lipídica versus moléculas Solubilidade relativa nos lipídeos... Insolúveis em lipídios Polar (Hidrofílico) Atravessam com dificuldade a bicamada lipídica Bicamada lipídica versus moléculas Molécula apolar -> solúveis em lipídeos Molécula polar -> “insolúveis” em lipídeos Solubilidade relativa nos lipídeos... Não carregadas Carregadas (íons) Bicamada lipídica versus moléculas Tamanho das moléculas... Molécula pequenas -> “mais fácil” sua difusão Molécula grandes -> “mais difícil” sua difusão Uma análise mais específica Análise mais específica Solubilidade relativa nos lipídeos Taxa de difusãoTaxa de difusãoTaxa de difusãoTaxa de difusão Tamanho da molécula -> apolar ou polar -> pequenas ou grandes Não carregadas Carregadas Moléculas apolares Análise mais específica Pequenas Grandes Moléculas polares Não carregadas Carregadas Moléculas polares não carregadas Pequenas Grandes Moléculas polares carregadas Hidrofóbico � solúvel em lipídeos Prontamente se dissolvem na bicamada lipídica Moléculas apolares Porém existe outro aspecto que influencia na possibilidade de difusão pela bicamada... Moléculas apolares O seu tamanho... Hidrofóbico � solúvel em lipídeos Rapidamente se dissolvem na bicamada lipídica... Moléculas apolares Tais como O2 (32 Da) e o CO2 (44 Da) (apolares pequenas) ... e pequenas Moléculas apolares Cortisol - C21H30O5 (51.000 Da) Devido ao seu grande tamanho Menos prontamente serão dissolvidas na bicamada lipídica... ... e grandes Moléculas apolares O2 (32 Da) e CO2 (44 Da) Cortisol (C21H30O5 - 51.000 Da) A possibilidade de sofrer difusão pela bicamada depende... Moléculas polares Hidrofílico � insolúvel em lipídeos 1: de estarem 2: do seu tamanho Não carregadas Carregadas Pequenas Com uma velocidade de difusão bastante reduzida... Moléculas polares não carregadas Atravessarão a bicamada... Água (18 Da), etanol (46 Da) Difundem mais demoradamente pela bicamada O2 (32 Da), CO2 (44 Da) (apolares pequenas) (polares não carregadas e pequenas) Moléculas polares não carregadas Com uma velocidade ainda menor de difusão através da bicamada lipídica Moléculas polares não carregadas Grandes “Atravessarão” a bicamada... Dependendo do seu tamanho algumas moléculas não atravessaram a bicamada Moléculas polares não carregadas Glicerol (92 Da) Grandes Elas terão uma velocidade ainda menor de difusão através da bicamada lipídica Água (18 Da), etanol (46 Da) (polares não carregadas e pequenas) Mais o quesito CARGA Hidrofílico � insolúvel em lipídeos São impedidos de ultrapassar a bicamada lipídica, qualquer que sejam os seus tamanhos Moléculas polares e carregadas As bicamadas são fortemente impermeáveis a essas moléculas não importando o tamanho... Moléculas polares e carregadas H2O versus Na + Bicamada lipídica versus moléculas Adaptação: Alberts, 616 O transporte através das proteínas de membrana As proteínas de transporte Existem 2 tipos de complexos protéicos relacionados com a atividade de transporte: Proteínas de transporte Proteínas canal Proteínas carreadoras Proteína canal Proteína canal � Tamanho compatível do soluto � Carga compatível Quesitos importantes... � Canal esteja compatível Proteína canal - Solutos pequenos Tamanho compatível do soluto Proteína canal - Carga elétrica entre o soluto/canal diferentes Carga elétrica compatível Proteína canal Canal compatível - Canal aberto ou fechado Proteína canal Canal compatível A maioria das proteínas canal permite a passagem apenas de íons inorgânicos... Proteína canal canais iônicos Proteína canal Canais iônicos h ttp :// d o w n lo a ds .p as s e iw e b .c om /im a g en s /n e w s ite /s a la de a ul a /b io lo g ia /n e u ro n io .jp g Proteína canal Canais iônicos... h ttp :// d o w n lo a ds .p as s e iw e b .c om /im a g en s /n e w s ite /s a la de a ul a /b io lo g ia /n e u ro n io .jp g Proteína canal Canais iônicos... http://1.bp.blogspot.com/_qugjzoZGP_Q/SGAmEvmYUmI/AAAAAAAADV4/tqBOKZA9A10/s400/Digitalizar0001.jpg Proteína canal Canais iônicos... Canal de potássio... Um importante canal iônicos Esse canal iônicocanal iônicocanal iônicocanal iônico é composto de quatro subunidades transmembranas idênticas* Canal iônico de K+ Que juntas formam... Vestíbulo do canal Poro do canal Canal iônico de K+ Aminoácidos carregados negativamente Concentrados na entrada citossólica do poro do canal... Atraem cátions... Seletividade do canal K+ K+K+ Repelem ânions K+ K+ K+ A cadeia polipeptídica que conecta as duas α-hélices formam uma alça Canal iônico de K+ Que é revestida de átomos de oxigênios Formando um... Filtro de seletividade K+ K+ K+ Canal iônico de K+ Filtro de seletividade Canal iônico de K+ Filtro de seletividade Canal iônico de K+ Atraem os íons... K+ K+ K+ K+ Aminoácidos carregados negativamente Para o lado de fora da célula... Componentes importantes... Canal iônico de K+ -> Poro -> Vestíbulo -> Filtro Esses canais podem ser conhecidos como... Canal iônico de K+ Importante papel na manutenção do potencial de membrana Canais de vazamento de potássio Proteínas carreadoras Especificidade com o soluto Proteína carreadora Quesitos importantes... Mudança conformação (energia) Só permite a passagem de moléculas que... Proteína carreadora Encaixam no sítio de ligação da proteína Especificidade... Proteína carreadora Especificidade... Proteína carreadora Na mudança de conformação do transportaador Ela precisa “acoplar” algum tipo de “energia” para ajudar... Conformação (energia) Proteína carreadora Especificidade Conformação (energia) +- - + + Resumindo... Na dependência da sua complexidade estrutural elas podem realizar o... Transporte de um único soluto Transporte de dois solutos Proteína carreadoraTransporte mediado por carreador Transporte mediado por carreador Proteína carreadora Gradiente eletroquímico Gradiente eletroquímico Esse gradiente “impele” um soluto através da membrana Gradiente de concentração Gradiente elétrico ou voltagem É resultante da aaaaçççção de ão de ão de ão de dois componentes...dois componentes...dois componentes...dois componentes... Meio extra-celular Meio intra-celular Gradiente eletroquímico Gradiente de concentração... Meio extra-celular Meio intra-celular Gradiente eletroquímico Gradiente elétrico ou voltagem... Na+ Na+ Na+ Na+ Ca+2 Ca+2 Ca+2 K+ K+ K+ K+ Na+ Ca+2 Gradiente eletroquímico Gradiente de concentração Gradiente elétrico ou de voltagem Meio extra-celular Meio intra-celular Na+ Na+ Na+ Na+ Na+ Gradiente de concentração Gradiente elétrico ou de voltagem K+ K+ K+ K+ Gradiente eletroquímico Tipos de transporte Tipos de transporte Transporte passivo São todos os movimentos espontâneos no sentido... Sem a necessidade de “nenhum” outro tipo de força motriz... Transporte passivo Gradiente de concentração Por exemplo... um soluto está presente em uma concentração mais alta fora da célula do que dentro dela... Transporte passivo E exista um canal compatível Então, o soluto se moverá de forma espontânea... Para dentro da célula através da membrana Transporte passivo Meio extra-celular Meio intra-celular Proteína canal Transporte passivo Todas as proteínas-canal... E muitas carreadoras... Podem agir como um conduto para o transporte passivo Transporte passivo Também pode ser conhecido pelo termo... Transporte passivo Difusão facilitada Transporte passivo Exemplo de transporte passivo realizado por proteína carreadora Existe uma proteína carreadora que realiza transporte da glicose... Proteína carreadora de glicose Transporte passivo_proteína carreadora Sem gasto energético É uma cadeia protéica que atravessa 12X a membrana Ela muda de conformação dependendo da concentração extra ou intracelular de glicose Transporte passivo_proteína carreadora Proteína carreadora de glicose “Após uma refeição” Transporte passivo_proteína carreadora Do modo inverso, quando os níveis de açúcar no sangue são baixos O glucagon estimula as células hepáticas a quebrarem o glicogênio Produzindo a glicose Transporte passivo_proteína carreadora Transporte passivo_proteína carreadora “baixos níveis de açúcar” Tipos de transporte Transporte ativo São os movimentos impulsionados de solutos através da membrana Transporte ativo Contra um gradiente É conduzido por tipos especiais de proteínas transportadoras... Proteínas carreadoras Especificidade com o soluto Conformação (energia) Transporte ativo Transporte ativo Especificidade Conformação (energia) Transporte ativo Transporte ativo Existem várias maneiras de “dirigir” o transporte ativo Gradiente de íons pode dirigir o transporte ativo “Transporte acoplado” Transporte ativo e gradiente de íons O carreador conseguem captar a energia presente no gradiente eletroquímico de um soluto (íon) Para transportar outro soluto Transporte ativo e gradiente de íons “Transporte acoplado” O íon sódio é habitualmente o agente cotransportador... Seu gradiente eletroquímico fornece uma grande força motriz Para o transporte ativo de uma segunda molécula Transporte ativo e gradiente de íons O exemplo desse transporte acoplado usando a energia do gradiente de íons... Transporte acoplado de glicose usando a energia do sódio Transporte ativo e gradiente de íons Transporte ativo e gradiente de íons Transporte ativo de glicose usando o sódio Transporte ativo e gradiente de íons Transporte ativo de glicose usando o sódio O tipo de transporte ativo que é mediado por íons é chamado... Transporte ativo secundário Transporte ativo e gradiente de íons Transporte ativo de glicose usando o sódio As proteínas carreadoras de sódio regulam o pH citossólico O transporte ativo move solutos utilizando bombas Transporte ativo e bombas “Bombas dependentes de ATP” O transporte que utiliza bombas dependentes de ATP é chamado de... Transporte ativo primário Transporte ativo e bombas Tipos de bombas que se relacionam com o ATP Transporte ativo e bombas Bomba de sódio/potássio Bomba de sódio/potássio É uma bomba do tipo P que realiza constantemente Bombeamento do Na+ (para fora da célula) Bombeamento do K+ (para dentro da célula) Para realizar o transporte Bomba de sódio/potássio Esse tipo de bomba utiliza a quebra do ATP... Bomba de sódio/potássio “Fosforila” a bomba... Adicionando um grupo fosfato... Causa a mudança de conformação da mesma... Bomba de sódio/potássio A bomba de Na/K executa a sua ação em estágios Bomba de sódio/potássio: estágio 1 O sódio se liga a bomba nos sítios expostos no lado interno da célula... Ativando a ação de ATPase da bomba... Bomba de sódio/potássio: estágio 2 O ATP é quebrado... E ocorre a transferência do grupo fosfato (P) para a própria bomba de Na/K Bomba de sódio/potássio: estágio 3 A fosforilação causa uma mudança de conformação da bomba de Na/K... Liberando o sódio no meio extracelular Bomba de sódio/potássio: estágio 4 Ao mesmo tempo ocorre a exposição do sítio para a ligação do potássio (K+) A ligação extracelular do K+ provoca a remoção do grupamento fosfato... Bomba de sódio/potássio: estágio 5 Causando o retorno da bomba de Na/K à sua conformação original... Descarregando o potássio no interior da célula... Bomba de sódio/potássio: estágio 6 Leva cerca de 10 milissegundos O ciclo completo Bomba de sódio/potássio Bomba de cálcio Bomba de cálcio O cálcio é mantido em baixas concentrações no citoplasma... Na+ Na+ Na+ Na+ Na+ K+ K+ K+ K+ Ca+2 Ca+2 Ca+2 Ca+2 Bomba de cálcio Ca+2 Ca+2 Ca+2 Ca+2 Bomba de cálcio Bomba de cálcio 1 2 3 4 4 5 Bomba de cálcio É uma ATPase que durante seu ciclo de bombeamento Difere da bomba de Na/K O seu retorno a conformação original ocorre sem a ligação e o transporte de um segundo íon Bomba de cálcio A ocorrência de um influxo de cálcio é utilizado na realização de vários tipos de tarefas... Para desencadear secreções de moléculas sinalizadoras (1) Ou para desencadear a contração muscular (2) Bomba de cálcio Bomba de cálcio Bomba de cálcio Uma distribuição assimétrica de diferentes proteínas carreadoras garante o transporte transcelular Transporte transcelular Neurônios Neurônios Canais iônicos Neurônios Neurônios Canais iônicos Neurônios Neurônios Neurônios Neurônios Neurônios Neurônios Neurônios Neurônios Canais iônicos Neurônios Canais iônicos e propriedades elétricas das MP Potencial de membrana Potencial de repouso Canais catiônicos controlados por voltagem Canais iônicos controlados por transmissor nas sinapses
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