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Diretrizes para avaliação da eficácia de parasiticidas no tratamento, prevenção e controle de 
infestações por pulgas e carrapatos em cães e gatos. 2ª edição.
Associação Mundial para o...
Alan Marchiondo
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Zoetis
Klaus Hellmann
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Zoetis
Saúde Animal
Douglas Rugg
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Peter Holdsworth
Artigo · Julho de 2013
KLIFOVET GmbH
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Veja discussões, estatísticas e perfis de autores desta publicação em: https://www.researchgate.net/publication/311705309
35 1.663
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https://www.researchgate.net/publication/311705309_Guidelines_for_evaluating_the_efficacy_of_parasiticides_for_the_treatment_prevention_and_control_of_flea_and_tick_infestations_on_dogs_and_cats_2nd_ed_World_Association_for_the_Advancement_of_Veterina?enrichId=rgreq-a9304751a91594c773443e1eba70d5fa-XXX&enrichSource=Y292ZXJQYWdlOzMxMTcwNTMwOTtBUzoxMTQyNzE0OTk3NDQwNTEyQDE2NDk0NTU4OTQ3ODQ%3D&el=1_x_3&_esc=publicationCoverPdf
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informações do artigo abstrato
Marchiondoa AA,ÿ, Holdsworthb PA, Fouriec LJ, Rugga D, Hellmann 
K, Snyder DE , Drydenf MW
Segunda edição da Associação Mundial para o Avanço da 
Parasitologia Veterinária (WAAVP): Diretrizes para avaliar a eficácia 
de parasiticidas para o tratamento, prevenção e controle de infestações 
por pulgas e carrapatos em cães e gatos
f
Parasitologia Veterinária
1. Introdução
Estas diretrizes da segunda edição foram atualizadas a partir da 
versão de 2007 (Marchiondo et al., 2007), para avaliar o
A eficácia dos parasiticidas contra infestações por pulgas e carrapatos 
em cães e gatos segue publicações semelhantes da Associação Mundial 
para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliação de 
anti-helmínticos em uma variedade de espécies (Powers et al., 1982; 
Düwel et al . , 1986; Jacobs et al., 1994; Wood et al., 1995; Duncan et 
al., 2002; Yazwinski et al., 2003), detecção de resistência anti-helmíntica 
em nematóides de importância veterinária (Coles et al., 1992),
página inicial diária: www.elsevier.com/locate/vetpar
Listas de conteúdos disponíveis no SciVerse ScienceDirect
Estas diretrizes de segunda edição, atualizadas a partir da versão de 2007 (Marchiondo et al., 2007), 
têm como objetivo auxiliar o planejamento e a condução de estudos laboratoriais e clínicos para 
avaliar a eficácia de ectoparasiticidas aplicados em cães ou gatos com a finalidade de tratar, pré- 
-ventilação e controle de infestações por pulgas e carrapatos. As principais revisões desta segunda 
edição incluem diretrizes sobre a avaliação de produtos sistêmicos contra pulgas e carrapatos, uma 
atualização da distribuição geográfica das espécies comuns de pulgas e carrapatos em cães e gatos, 
determinação da eficácia contra pulgas e carrapatos com base em médias geométricas versus médias 
aritméticas. no que diz respeito às agências reguladoras geográficas, modificação da categorização 
de carrapatos na avaliação da eficácia, diretrizes ampliadas sobre repelência e efeitos antialimentares, 
orientações práticas aprimoradas para estudos de campo e considerações sobre as faixas de 
infestações de pulgas e carrapatos em estudos de laboratório. O termo ectoparasiticida inclui 
compostos inseticidas e acaricidas, bem como reguladores de crescimento de insetos. A gama de 
atividades biológicas do tratamento animal que são consideradas inclui: efeitos de repelência e anti-
alimentação, knockdown, velocidade de morte, efeitos letais imediatos e persistentes e interferência 
na fertilidade dos ovos e subsequente desenvolvimento de estágios do ciclo de vida fora do 
hospedeiro. São fornecidas informações sobre a seleção dos animais, determinação da dose, 
confirmação da dose e estudos de campo, manutenção de registros, interpretação dos resultados e 
bem-estar animal. Estas directrizes destinam-se também a auxiliar as autoridades reguladoras 
envolvidas na aprovação e registo de novos ectoparasiticidas tópicos ou sistémicos e a facilitar a adopção mundial de procedimentos harmonizados.
Ectoparasiticidas
Repelência
Categorização de ticks
Carrapatos
Pulgas
Diretrizes atualizadas
0304-4017/$ – ver matéria inicial 
http://dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.02.003
Endereço de e-mail: alan.marchiondo@zoetis.com (AA Marchiondo).
Eficácia persistente
Palavras-chave:
Eficáciapropostas/reais do rótulo. Em multi-animal de estimação
a formulação destinada ao marketing, a investigação
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–9792
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deve ser justificado com base nas características da raça, sexo,
ção.
e a contagem completa do pente não deve ser considerada
dentro do estudo. Portanto, aumentando o número de estudos
Para estudos utilizando carrapatos indutores de paralisia, cães hiperimunes 
de fornecedores comerciais e carrapatos inferiores
de maneira metódica padronizada, usando um método reconhecido, como 
a contagem de pentes (Apêndice A.2).
(ÿ50) por animal para determinar sua adequação como hospedeiro
obrigatório.
deve ser documentado. Estudos de campo bem controlados com
ÿ3 e 0) para calcular a dosagem do tratamento e
em produtos com alta variabilidade de animal para animal em pulgas
para parasitas internos, incluindo prevenção de dirofilariose
ou valor “livre de pulgas”. Embora esta seja uma medida descritiva útil do 
desempenho do produto, não deve ser usada como
eficácias; alguns dos quais têm eficácia ou persistência insignificantes, e 
outros que têm mais de um mês de alta
tratado. Quando os tratamentos em avaliação são obviamente
selecionar animais para um estudo e alocá-los em grupos homogêneos com 
base no critério “capaz de abrigar pulgas”.
métodos são mais rápidos e fáceis, mas são significativamente menos
endectocidas não devem ser considerados para estudos até que uma
estudo que promove o manejo de um ambiente estável com relação às 
influências da população de pulgas (por exemplo, controle
de raças com diferentes manejos. Além disso, os animais
estudos. Seis animais é normalmente o número mínimo para
A escolha dos animais de estudo para estudos laboratoriais
consideração e deve justificar a inclusão com base em
O banho pode facilitar a penteação durante a contagem de pulgas, mas pode
de carrapatos podem ser coletados para identificar em nível de espécie e
períodos de pico de atividade sazonal das espécies de carrapatos
afetar adversamente o estabelecimento de infestações por pulgas ou 
carrapatos e confundir a interpretação dos resultados de eficácia.
natureza da alegação no rótulo e os resultados dos estudos laboratoriais 
anteriores. A carga de pulgas deve ser quantificada
confirmação da eficácia e avaliar a administração em
uma consideração primordial. A supervisão adequada por pessoal qualificado 
deve garantir que as infestações parasitárias não atinjam níveis
infestado com ÿ50–100 pulgas de gato e/ou carrapatos de espécies-alvo
Os critérios do histórico de tratamento de pulgas requerem consideração 
cuidadosa. Os proprietários terão usado produtos com características muito diferentes
A porcentagem de animais em um grupo em que nenhuma evidência de 
infestação por pulgas é encontrada é conhecida como “pulga zero”.
utilizado na dose e via de administração recomendadas
As pulgas coletadas podem ser identificadas em nível de espécie se
com características da pelagem que não permitem
avaliação estatística. A validade dos resultados do programa de testes está 
diretamente relacionada ao grau de variabilidade
dietas prescritas. Os animais devem pertencer a uma variedade
estar infestado por carrapatos e a intensidade inicial da infestação
estudo deve ser pesado antes do tratamento (entreÿDia
Os animais do estudo devem ser devidamente vacinados e tratados
Os protocolos também precisam estipular condições durante o
Um número maior de animais pode ser usado e deve ser usado
pente, contagem de polegares e/ou pinça). Todos ou uma subamostra
Estudos clínicos de campo devem ser realizados durante
shampoo não inseticida cerca de 7–14 dias antes do tratamento.
de infestação. Essas contagens de parasitas pré-estudo podem servir para
endo e/ou ectoparasiticidas tópicos ou sistêmicos e/ou
Outras abordagens, como contagem de área e polegar
indevidamente afetados devem ser retirados do estudo e
requisitos regulamentares regionais devem estar disponíveis para
O bem-estar dos animais utilizados em estudos de eficácia deve ser
Os animais candidatos a estudos laboratoriais podem ser
para determinação e confirmação de dose em laboratório
5.4. Seleção, preparação e bem-estar dos animais
histórico de tratamento contra pulgas de cada animal inscrito precisa de cuidado
formulação de dose unitária destinada à comercialização deve ser
encerrado.
número de animais deve ser grande o suficiente para permitir uma boa
Consequentemente, só devem ser utilizados para recrutar animais infestados 
de pulgas.
O momento da contagem de pulgas será determinado pelo
produto não tem nenhuma eficácia contra pulgas ou carrapatos que possa
a picadas de carrapatos devem ser excluídos do estudo. Animais
duração da atividade parasiticida. Todos os animais selecionados para
diferenças em relação ao controle em um nível de eficácia de 90%.
idade, tamanho, comportamento, manejo, comprimento e origem da pelagem.
esses produtos.
mais de uma região geográfica. Todos os animais inscritos deverão
para esses parasitas e sua capacidade de tolerar os efeitos
taxas de infestação são recomendadas por razões de bem-estar animal. 
Animais tratados com produtos experimentais ou comerciais
Contagens numéricas são recomendadas para fins analíticos.
produtos para controle de pulgas e carrapatos, anestésicos, AINEs, anti-
histamínicos, remédios fitoterápicos/alternativos, xampus e
por períodos desnecessariamente prolongados. Animais individuais
único meio de avaliar a eficácia em campo.
eficácia. Isto pode influenciar a eficácia e a segurança. O
animais aumenta a confiabilidade dos resultados do estudo. Em geral, 
recomenda-se um mínimo de 6 animais por grupo
O número de carrapatos por animal hospedeiro deve ser determinado 
por um método padronizado confiável (por exemplo, pelo uso de um
5.3.2. Estudos de campo – carrapatos
para uso. Os animais podem ser lavados com água e um detergente suave
sobre incursões e excursões de animais e uso de produtos químicos).
expostos a um elevado risco de infestação (por exemplo, cães de caça, 
cães de caça, etc.) devem ser incluídos, se possível. O final
um número total de casos individuais de animais para satisfazer
e contagem de ticks.
medicação em áreas endêmicas de dirofilariose, desde que o
servir como outro critério para fins de alocação, se necessário.
depois contados numericamente por espécie.
sob investigação e deve ser realizada em mais
não atingir um nível de controle satisfatório, os estudos devem ser
e/ou cargas de ticks” (Seção 4.2.1). Qualquer animal que apresente mais do 
que sinais mínimos de alergia ou reação a picada de pulga
passou um tempo adequado desde que o tratamento foi administrado. O
preciso (Dryden et al., 1994; Heckenberg et al., 1994).
em conjunto com outros produtos veterinários frequentemente utilizados, 
tais como vacinas, anti-helmínticos, antibióticos, esteróides,
causando estresse indevido, e tais estudos não devem se estender
também remove óleos importantes da peleque podem influenciar o
ter poder estatístico adequado para determinar
as características de eficácia dos produtos específicos usados atualmente e 
anteriormente, e a consistência do uso de
93AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
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Os autores desejam agradecer aos Drs. Robert G. Arther (Bayer Health 
Care, EUA), Fred Beugnet (Merial, França), Byron L. Blagburn (Universidade 
de Auburn, EUA), Jacques Guil-lot (Alfort, França), Dennis E. Jacobs 
(Professor Emérito de Veterinária Parasitologia, Royal Veterinary College, 
Reino Unido), Marcelo E. Labruna (Universidade de São Paulo, Brasil), 
Dorothee Stanneck (Bayer AG, Alemanha), Jozef Vercruysse (Universidade 
de Gent, Bélgica) e Andrew von Berky (Von Berky Veterinary Services , 
Austrália) pelos comentários e revisão deste manuscrito.
Conflito de interesses
Os autores Alan A. Marchiondo e Douglas Rugg são atuais funcionários 
da Zoetis inc. (anteriormente Pfizer Animal Health), EUA, Peter A. Holdsworth 
é atual funcionário da Animal Health Alliance (Australia) Ltd., Austrália, Leon 
F.
Reconhecimentos
Os animais receptores devem estar livres de pulgas ou carrapatos antes da 
infestação.
O número de pulgas e carrapatos em cães e gatos é influenciado pelo 
comportamento de higiene, que varia consideravelmente entre espécies e 
indivíduos. Em testes laboratoriais controlados, é portanto necessária uma 
infestação pré-alocação com pulgas e/ou carraças para determinar a 
capacidade de transporte do parasita de cada animal (Secção 5.4). Os 
animais podem então ser classificados por contagens pré-alocadas de pulgas 
ou carrapatos e, se necessário, por sexo ou peso corporal para formar réplicas 
(blocos). Dentro de cada réplica, os animais são então alocados aleatoriamente 
em grupos tratados ou de controle. Se os cães estiverem co-infestados com 
pulgas e carrapatos no mesmo estudo, qualquer uma das contagens de 
parasitas poderá ser usada para fins de alocação. Em estudos de campo, os 
animais infestados podem ser alocados de forma completamente aleatória 
para grupos de tratamento ou controle, ou aleatoriamente com base na ordem 
de recrutamento dentro de cada local de estudo.
não há interesses conflitantes que possam ter distorcido as informações 
aqui relatadas.
Anestesia e coleiras também podem aumentar a taxa de infestação por 
carrapatos. As coleiras elisabetanas podem ser úteis para facilitar e manter 
infestações em gatos. Para projetos específicos, os carrapatos podem ser 
depositados no fundo de uma caixa e não diretamente no animal. As taxas de 
fixação de I. ricinus podem ser aumentadas usando um número maior de 
carrapatos (60) e um número menor de machos em comparação com fêmeas 
(ÿ25:75), já que o macho I. ricinus se fixa apenas brevemente ou não se fixa 
(Kiszewski et al ., 2001; Kuzner et al., 2012), mas a presença do macho I. 
ricinus é suficiente para estimular a fixação das fêmeas do carrapato e 
alcançar maiores taxas de fixação. A origem e o histórico de propagação de 
pulgas e carrapatos utilizados devem ser documentados e sua conhecida 
suscetibilidade ou resistência às principais classes de ectoparasiticidas/
endectocidas deve ser documentada.
5.5. Alocação de animais
As infestações por pulgas devem ser estabelecidas usando adultos não 
alimentados recém-emergidos de uma colônia estabelecida mantida em 
cães ou gatos. As pulgas obtidas a partir de um sistema de membrana artificial 
não devem ser utilizadas para estudos laboratoriais, pois terão se adaptado 
a esse sistema de alimentação. Carrapatos adultos são recomendados para 
estudos de infestação e devem estar sem alimentação e com idade 
relativamente uniforme. Como regra geral, os animais devem estar infestados 
com 50 a 100 pulgas e/ou 25 a 50 carrapatos. A proporção sexual das pulgas 
deve ser ÿ1:1 ou ponderada em favor das fêmeas (ÿ 2:1), especialmente para 
a avaliação de IGRs ou IDIs. A proporção sexual dos carrapatos deve ser 
aproximadamente equilibrada, mas apropriada para a biologia da espécie, ou 
seja, Ixodes. A infestação por pulgas e carrapatos é feita espalhando os 
parasitas pelo corpo dos animais, mas evitando o local de aplicação de 
qualquer produto tópico. As infestações por carrapatos podem ser facilitadas 
mantendo os frascos de carrapatos na área de teste dos animais de controle 
por aproximadamente 12 a 18 horas antes da infestação e forrando o piso 
ralado da gaiola do animal de teste com carpete durante o período de 
infestação ( ÿ12–18 h) (Marchiondo, comunicação pessoal). Anestesia e/ou 
coleiras elisabetanas podem ser usadas para facilitar a infestação do animal 
e para testar a atividade de repelência de um composto.
Nos estudos laboratoriais, todos os animais devem ser alojados ou 
confinados em condições ambientais e de criação semelhantes. Se a 
contaminação cruzada com o composto ativo for um problema potencial, por 
exemplo, em alguns estudos de IGR ou IDI, os animais tratados e de controle 
podem ser alojados em áreas ou salas separadas, desde que as condições 
ambientais sejam idênticas. Caso contrário, a alocação dos currais deve ser 
aleatória ou determinada por estudo e/ou desenho estatístico. Deve ser 
fornecido um diagrama da construção e colocação dos animais. As fontes 
de água e alimentos devem estar livres de quaisquer contaminantes potenciais 
que possam interferir no estudo e devem ser fornecidas para manter o peso 
corporal e as necessidades nutricionais adequadas. Para animais alojados 
durante longos períodos de tempo, devem ser incluídas rotinas de exercício 
e socialização para satisfazer os requisitos de bem-estar animal. É preciso 
ter cuidado na seleção de brinquedos de plástico, se fornecidos para 
enriquecimento ambiental, pois muitos contêm agentes plastificantes de éster 
de ácido ftálico com propriedades documentadas de repelência a artrópodes 
(Hartley e West, 1969). As jaulas e os corredores para alojamento dos animais 
devem ter tamanho adequado para cumprir as diretrizes regulatórias e locais 
de bem-estar animal. As observações de saúde devem ser realizadas para 
cada animal começando no primeiro dia de aclimatação ou de acordo com os 
requisitos do protocolo e continuando até o final da fase do estudo do animal 
em vida.
A.1. Métodos de infestação por pulgas e carrapatos
ÿ
Apêndice A.
Ltd., República da África do Sul, e Klaus Hellmann é o atual gerente geral da 
Klifovet AG, Alemanha. Daniel E. Snyder é funcionário atual da Elanco Animal 
Health, Greenfield, IN, EUA, e Michael W. Dryden é professor universitário 
ilustre na Kansas State University, Man-hattan, KS, EUA. Os autores estiveram 
diretamente envolvidos na preparação e revisão do manuscrito, e houve
5.6. Habitação de animais
Fourie é funcionário atual da ClinVet International (Pty)
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–9794
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A troca de roupasde proteção entre os grupos tratados e controle é altamente 
recomendada, bem como o uso de pentes separados para cada grupo.
ReferênciasB.1. Eficácia
A contagem do pente demonstrou ser mais sensível do que o método da 
contagem do polegar (Gregory et al., 1995). O pessoal envolvido na 
penteação e contagem do ectoparasita deve ser treinado, experiente e 
mascarado para o tratamento.
A avaliação precisa do número de pulgas que infestam um animal é 
fundamental para gerar dados precisos de eficácia, mas é difícil de conseguir 
porque as pulgas podem mover-se através da pelagem muito rapidamente. 
Os métodos para determinar o número de pulgas adultas em um animal 
incluem: (1) contagens de pente em que um animal é penteado com um 
pente de dentes finos (cerca de 11 a 13 dentes por centímetro) sobre todo o 
corpo por um determinado período de tempo ( geralmente 5 a 20 minutos 
dependendo da precisão necessária) ou até que nenhuma outra pulga seja 
recuperada após 50 golpes (Dryden et al., 1994; Marchiondo, comunicação 
pessoal), (2) remoção total de pulgas em que o animal é completamente 
pulverizado com um spray antipulgas de piretrina à base de álcool, ou 
dosado oralmente com nitenpiram, e depois escovado ou penteado até que 
todas as pulgas sejam removidas, usando uma população de pulgas não 
resistente a um dos ativos (Baker e Farver, 1983; Dryden, 1992) , e (3) 
contagem de polegares ou áreas em que as pulgas são contadas/estimadas 
por inspeção visual durante um determinado período de tempo enquanto o 
cabelo é repartido manualmente em locais predeterminados no animal (Fox 
et al., 1969).
Várias autoridades reguladoras emitiram orientações relativas aos seus 
requisitos específicos. A seção a seguir resume as fontes disponíveis no 
momento da publicação.
infestações por pulgas em cães e gatos (EMEA/CVMP/055/00- Rev 2, março 
de 2009, novembro de 2011). Outra revisão da EMEA/CVMP/005/2000-Rev 
2 está actualmente em curso.
Apêndice B.
A.2. Métodos de contagem de pulgas
Todos os estudos devem cumprir as diretrizes nacionais existentes que 
regem os estudos em animais dos países onde tais estudos são conduzidos, 
como a Lei de Bem-Estar Animal do USDA do Departamento de Agricultura 
dos Estados Unidos (9 CFR), a Política do Serviço de Saúde Pública sobre 
o Cuidado Humanitário e Uso de Animais de Laboratório, 1966, Comitê 
Institucional de Cuidado e Uso de Animais (IACUC), Diretiva 2010/63/UE do 
Parlamento Europeu e do Conselho (22 de setembro de 2010) sobre a 
Proteção de Animais Utilizados para Fins Científicos, Boas Práticas Clínicas , 
(VICH GL9, 2000), e Good Target Animal Study Practices: Clinical 
Investigators and Monitors, FDA, CVM, maio de 1997.
B.2. Bem estar animal
Os métodos de contagem de carrapatos incluem localizar carrapatos 
presos, de preferência com dedos enluvados, e contar enquanto ainda estão 
no lugar (contagem com o polegar) ou remover carrapatos presos, de 
preferência com dedos enluvados, pinça ou pente para pulgas. Neste último 
caso, todo o corpo do animal é penteado com um pente de dentes finos 
(~11-13 dentes por centímetro) por um período de tempo definido, como 
5-20 minutos ou até que nenhum outro carrapato seja recuperado após 50 
pinceladas. As orelhas, o pavilhão auricular, a prega pinnal e os espaços 
interdigitais dos cães devem ser cuidadosamente verificados quanto à 
presença de carrapatos. Um pente contra pulgas é particularmente eficaz na 
recuperação de carrapatos Brown Dog (R. sanguineus) e American Dog (D. 
variabilis) que não são visíveis ou aparentes à palpação (Mar-chiondo, 
comunicação pessoal).
A.3. Métodos de contagem de ticks
(EMEA/CVMP/005/2000-Rev 2-conforme modificado em 12 de Novembro de 
2007 e Perguntas e Respostas sobre a Directriz do CVMP sobre “Testes e 
avaliação da eficácia de substâncias antiparasitárias para o tratamento e 
prevenção de carraças e
A USA-EPA publicou diretrizes de avaliação que abordam parasiticidas 
aplicados externamente não absorvidos internamente pelo animal de 
estimação tratado, foram revisadas e harmonizadas em um único conjunto 
de diretrizes pelo Escritório de Prevenção, Pesticidas e Substâncias Tóxicas 
(OPPTS 810.3300, Diretrizes de teste de desempenho de produto, 
Tratamentos para controlar pragas de humanos e animais de estimação, 
EPA 712-C-98-411, março de 1998, para minimizar variações entre os 
procedimentos de teste que devem ser realizados para atender aos requisitos 
de dados da EPA sob o Tóxico Lei de Controle de Substâncias (TSCA, 15 
USC 2601) e a Lei Federal de Inseticidas, Fungicidas e Rodenticidas (FIFRA, 
7 USC 136, et seq.).A Autoridade Australiana de Pesticidas e Medicamentos 
Veterinários publicou duas diretrizes: No. alegações aceitáveis baseadas em 
constituintes atualmente aprovados para parasiticidas usados em gatos, 
cães e aves ornamentais em gaiolas, maio de 1996, e Diretrizes Nº 17 para 
submissão de eficácia de ectoparasiticidas em pequenos animais, julho de 
1996. A CVM não publicou diretrizes formais para aplicação sistêmica de 
ectoparasiticidas. parasiticidas ativos contra pulgas e carrapatos. No 
entanto, tais produtos são regulamentados como New Animal Drug 
Applications (NADA) sob o Código de Regulamentações Federais FDA 21 
CFR Parte 514, 1º de abril de 2004 (http://www.fda.gov/cvm/) . Os requisitos 
da FDA são paralelos às diretrizes da EPA com relação aos procedimentos 
de teste e critérios de avaliação de eficácia com a adição de um estudo de 
eficácia de campo clínico e estudos de segurança/tolerância em animais-
alvo. No entanto, o FDA muitas vezes exige um protocolo aprovado que 
especifique o uso apenas da metade inferior da faixa de dose unitária em 
estudos principais de confirmação de dose. No Japão, a Lei de Controle de 
Produtos Químicos Industriais (correspondente à TSCA nos EUA) e a Lei de 
Regulamentação de Produtos Químicos Agrícolas (correspondente à FIFRA 
nos EUA) tratam principalmente de parasiticidas contra pulgas e carrapatos.
Documentos de orientação para avaliar a eficácia de parasiticidas no 
tratamento e controlo de pulgas e carraças em cães e gatos foram adotados 
pela EMA
95
ticídio. J.Econ. Entomol. 18, 265–267.
Apanaskevich, DA, Horak, IG, Camicas, JL, 2007. Redescrição de 
Haemaphysalis (Rhipistoma) elliptica (Koch, 1844), um antigo táxon do 
grupo lixiviado Haemaphysalis (Rhipistoma) do leste e
Abbott, WS, 1925. Um método para comparar a eficácia de um inseticida
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
Anon., 1971. Métodos recomendados para detecção e medição da resistência 
de pragas agrícolas a pesticidas. Método provisório para larvas do 
carrapato do gado, Boophilus spp. Proteção de Plantas da FAO. B., 15, 
Método FAO nº 19.
Machine Translated by Google
http://www.fda.gov/cvm/
Fox, I., Rivera, GA, Bayona, IG, 1969. Controle de pulgas de gato com coleiras impregnadas 
com diclorvós. J.Econ. Entomol. 62,1246–1249.
Donahue, WA, Teel, PD, Strey, OF, Meola, RW, 1997. Efeitos do piriproxifeno em larvas e 
ninfas recém-ingurgitadas do carrapato estrela solitário (Acari: Ixodidae). J. Med. Entomol. 
34 (2), 206–211.
Jacobs, DE, Arakawa, A., Coutrney, CH, Gemmell, MA, McCall, JW, Myers, GH, Vanparijs, O., 
1994. Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária 
(WAAVP) para avaliar a eficácia de anti-helmínticos para cães e gatos. Veterinario. 
Parasitol. 52, 179–202.
ÿ
Sou. J. Sabe. resp. 56, 464–467.
Holdsworth, PA, Vercruysse, J., Rehbein, S., Peter, R., De Bruin, C., Letonja, T., Green, P., 
2006a. Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária 
(WAAVP) para avaliar a eficácia de ectoparasiticidas contra moscas que picam e 
incomodam em ruminantes. Veterinario.
343–350.
Fisher, MA, Jacobs, DE, Hutchinson, MJ, Dick, IG, 1996. Avaliação de programas de controle 
de pulgas para gatos usando fenthion e lufenuron. Veterinario.
Heckenberg, K., Costa, SD, Gregory, LM, Michael, BF, Endris, RG, Shoop, WL, 1994. 
Comparação de métodos de contagem de polegares e contagem de pente para 
determinar os níveis de infestação por Ctenocephalides felis em cães. Veterinario.
Dryden, MW, Boyer, JE, Smith, V., 1994. Técnicas para estimar populações animais de 
Ctenocephalides felis (Siphonaptera: Pulicidae).
Baker, NF, Farver, TB, 1983. Falha da levedura de cerveja como repelente de pulgas em cães. 
Geléia. Veterinario. Med. Assoc. 183, 212–214.
Dautel, H., Kahl, O., Siems, K., Oppenrieder, M., Muller-Kuhrt, L., Hilker, M., 1999. Um novo 
sistema de teste para detecção de repelentes de carrapatos. Entomol.
Kiszewski, E., Matuschka, FR, Spielmann, A., 2001. Estratégias de acasalamento e 
espermiogênese em carrapatos ixodídeos. Anu. Rev. Entomol. 46, 167–182.
Carroll, JF, Solberg, VB, Klun, JA, Kramer, M., Debboun, M., 2003. Atividade comparativa 
dos repelentes Deet e AI3-37220 contra o carrapato Ixodes scapularis e Amblyomma 
americanum (Acari: Ixodidae) em laboratório bioensaios. J. Med. Entomol. 41, 249–254.
Parasitol. 136, 15–28.
Halos, L., Baneth, G., Beugney, F., Bowman, AS, Chomel, B., Farkas, R., Franc, M., Guillot, 
J., Inokuma, H., Kaufman, R., Jongejan , F., Joachim, A., Otranto, D., Pfister, K., Pollmeier, 
M., Sainz, A., Wall, R., 2012. Parasitologia 139, 419–423.
Dobson, RJ, Sangster, NC, Besier, RB, Woodgate, RG, 2009. As médias geométricas fornecem 
um resultado de eficácia tendencioso ao realizar um teste de redução da contagem de 
ovos fecais (FECRT). Veterinario. Parasitol. 161, 162-167.
Dryden, MW, 1992. Atividade diferencial do citioato contra fêmeas e machos de Ctenocephalides 
felis em gatos. Sou. J. Veterinário. Res. 53, 801–802.
14 (4), 235–245.
Bissinger, BW, Roe, RM, 2010. Repelentes de carrapatos: passado. presente e futuro.
Blagburn, BL, Hendrix, CM, Vaughn, JL, Lindsay, DS, Barnett, SH, 1995. Eficácia do lufenuron 
contra estágios de desenvolvimento de pulgas (Cteno-cephalides felis felis) em cães 
alojados em ambientes domésticos simulados.
Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) 
para avaliar a eficácia de medicamentos anticoccidianos em galinhas e perus. Veterinario. 
Parasitol. 121, 189–212.
Duncan, JL, Abbott, EM, Arundel, JH, Eysker, M., Klei, TR, Krecek, RC, Lyons, ET, Reinemeyer, 
C., Slocombe, JOD, 2002. Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia 
Veterinária (WAAVP): segunda edição das diretrizes para avaliação da eficácia de anti-
helmínticos equinos. Veterinario. Parasitol. 103, 1–8.
África Austral, e de Haemaphysalis (Rhipistoma) leachi (Audouin, 1826) (Ixodida, 
Ixodidae). Onderstepoort J. Vet. Res. 74, 181–208.
293 (Suplemento 37), 182–188.
Holdsworth, PA, Vercruysse, J., Rehbein, S., Peter, R., Letonja, T., Green, P., 2006d. Diretrizes 
da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar 
a eficácia de ectoparasiticidas contra piolhos mordedores, piolhos sugadores e piolhos 
sugadores em ruminantes. Veterinario. Parasitol. 136, 45–54.
Marchiondo, AA, 1993. Controle seguro e eficaz de pulgas para gatos. Veterinario. Tecnologia.
Finney, DJ, 1971. Análise Probit. Imprensa da Universidade de Cambridge, Cambridge.
Gregory, LM, Zakson, M., Endris, RG, Shoop, WL, 1995. Uma comparação adicional das 
técnicas de contagem de polegares e contagem de pentes usadas para determinar os 
níveis de infestação de Ctenocephalides felis em cães. Veterinario. Para-sitol. 56, 349–
352.
Boophilus annulatus e B. microplus: estudos laboratoriais de inseticidas. J.Econ. 
Entomol. 66, 130–133.
Veterinario. Parasitol. 52, 1–19.
Estrada-Pena, ̃ A., Bouattour, Camicas, JL, Walker, AR, 2004. Carrapatos de Animais 
Domésticos na Região Mediterrânica: Um Guia para Identificação de Espécies. 
Universidade de Saragoça, Espanha.
Holdsworth, PA, Vercruysse, J., Rehbein, S., Peter, R., De Bruin, C., Letonja, T., Green, P., 
2006b. Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária 
(WAAVP) para avaliar a eficácia de ectoparasiticidas contra parasitas causadores de 
miíase em ruminantes. Veterinario.
Endris, RG, Cooke, D., Amodie, D., 2002. Repelência e eficácia de 65% de permetrina e 
selamectina contra Ixodes ricinus. Veterinario. Lá. 3 (1), 64–71.
Carlotti, DN, Jacobs, DE, 2000. Terapia, controle e prevenção da dermatite alérgica a pulgas 
em cães e gatos. Veterinario. Dermatol. 11 (2), 83.
Dryden, MW, Payne, PA, 2004. Biologia e controle de carrapatos que infestam cães e gatos 
na América do Norte. Veterinario. Lá. 5 (2), 139-154.
Dautel, H., Cranna, R., 2006. Avaliação da repelência e mortalidade de imidaclopride mais 
solução spot-on de permetrina contra Ixodes holocy-clus usando um bioensaio de objeto 
em movimento. Austrália. Veterinario. Pratique. 36, 138–147.
Jongejan, F., Fourie, JJ, Chester, ST, Manavella, C., Mallouk, Y., Pollmeier, MG, Baggott, D., 
2011 combinação de fipronil, amitraz e (S)-metopreno. Veterinario. Parasitol. 179,
Economia. Entomol. 74, 466-469.
Dautel, H., 2004. Sistemas de teste para repelentes de carrapatos. Internacional J. Med. Microbiol.
Parasitol. 136, 29–43.
Eficácia de um novo spot-on de fipronil para o tratamento e controle de infestações 
induzidas por pulgas de gatos adultos (Ctenocephalides felis) e carrapatos da mamona 
(Ixodes ricinus) em gatos. Parasitol. Res. 111, 1–8, Online primeiro.
Pestício. Bioquímica. Fisiol. 96, 63-79.
Holdsworth, PA, Conway, DP, McKenzie, ME, Dayton, AD, Chapman, HD, Mathis, GF, Skinner, 
JT, Mundt, HC, Williams, RB, 2004.
Dryden, MW, Rust, MK, 1994. A pulga do gato: biologia, ecologia e controle.
Marchiondo, AA, Holdsworth, PA, Green, P., Blagburn, BL, Jacobs, DE, 2007. Diretrizes da 
Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar 
a eficácia de parasiticidas para o tratamento, prevenção e controle de infestações por 
pulgas e carrapatos em cães e gatos. Veterinario. Parasitol. 143, 332–344.
Franc, M., Beugnet, F.,Vermot, S., 2007. Eficácia do Fipronil – (S) - Metopreno em pulgas, 
coleta de ovos de pulgas e desenvolvimento de ovos de pulgas após transplante de 
pulgas grávidas em gatos tratados. Veterinario. Lá. 8, 285–295.
Drummond, RO, Crust, SF, Trevino, J., Gladney, l., Graham, WJOH, 1973.
96
Parasitol. 136, 3–13.
Düwel, D., Barth, DW, Battle, EG, Berger, H., Stewart, TB, Theodor-ides, VJ, 1986. Diretrizes 
da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar 
a eficácia de anti-helmínticos em suínos . Veterinario. Parasitol. 21, 69–82.
Cadiergues, MC, Hourcq, P., Cantaloube, B., Franc, M., 2000. Primeira refeição sanguínea 
de Ctenocephalides felis felis (Siphonaptera: Pulicidae) em gatos: tempo até o início e 
duração da alimentação. J. Med. Entomol. 37 (4), 634-636.
Barnard, DR, Jones, BG, Rodgers, GD, Mount, GA, 1981. Suscetibilidade ao acaricida no 
carrapato estrela solitária: técnicas de ensaio e dados de linha de base. J.
Exp. Apl. 91, 431–441.
Jacobs, DE, Hutchinson, MJ, Stanneck, D., Mencke, N., 2001. Acúmulo e persistência da 
atividade larvicida de pulgas no ambiente imediato de gatos tratados com imidaclopride. 
Med. Veterinario. Entomol. 15 (3), 342–345.
Estrada-Pena, A., Ascher, F., 1999. Comparação de coleira impregnada de amitraz com 
administração tópica de fipronil para prevenção de infestações experimentais e naturais 
pelo carrapato marrom do cão (Rhipicephalus sanguineus). Geléia. Veterinario. Med. 
Assoc. 214, 1799-1803.
Hartley, GS, West, TF, 1969. Repelentes, Atraentes e outros Compostos de Controle de 
Comportamento. Em Produtos Químicos de Controle de Pragas. Pergamon Press, 
Londres.
Parasitol. 53, 153–157.
J. Med. Entomol. 21, 631–634.
Gravando. 138 (4), 79–81.
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
Kuzner, J., Turk, S., Fourie, JJ, Grace, S., Marchiondo, AA, Rugg, D., 2012.
Coles, GC, Bauer, C., Borgsteede, FHM, Klei, TR, Taylor, MA, Waller, PJ, 1992. Métodos da 
Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para a 
detecção de resistência anti-helmíntica em nematóides de importância veterinária. 
Veterinario. Parasitol. 44, 35–44.
Holdsworth, PA, Kemp, D., Green, P., Peter, RJ, De Bruin, C., Jonsson, NN, Letonja, T., 
Rehbein, S., Vercruysse, J., 2006c. Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da 
Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar a eficácia de acaricidas contra carrapatos 
em ruminantes. Veterinario.
Dryden, M., Gaafar, S., 1991. Consumo de sangue pela pulga do gato, Cteno-cephalides felis 
felis (Siphonaptera: Pulicidae). J. Med. Entomol. 28 (3), 394–400.
Marchiondo, AA, Riner, JL, Sonenshine, DE, Rowe, KF, Slusser, JH, 1990. Modos de ação 
ovicida e larvicida do fenoxicarbe contra a pulga do gato (Siphonaptera: Pulicidae). J. 
Med. Entomol. 27, 913–921.
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Glossário de termos
Estudo de determinação de dose: um estudo controlado, utilizando animais em instalações de 
curral, para determinar a dose eficaz ideal contra o(s) parasita(s) alvo. Este tipo de 
estudo também é usado para determinar as espécies de parasitas menos suscetíveis que 
provavelmente estarão presentes no campo.
carrapatos e ácaros.
Prullage, JB, Tran, HV, Timmons, P, Harriman, J, Chester, ST, Powell, K, 2011c. O modo de 
ação combinado do fipronil e do amitraz na motilidade de Rhipicephalus sanguineus. 
Veterinario. Parasitol. Apocalipse 179, 302–310.
Sinergismo entre fipronil e amitraz em teste de contato residual de carrapato Rhipicephalus 
sanguineus. Exp. Apl. Acarol. 54 (2), 173-176.
Schwantes, U., Dautel, H., Jung, G., 2008. Prevenção de doenças infecciosas transmitidas 
por carrapatos em humanos: estudos comparativos da repelência de diferentes 
formulações de ácido dodecanóico contra carrapatos Ixodes ricinus (Acari: Ixodidae). 
Parasita. Vetores 1 (1), 8–19.
Controle ambiental em animais: a aplicação de substâncias terapêuticas (por exemplo, 
inseticidas, RCI ou IDI) a um animal com a finalidade de reduzir progressivamente ou 
eliminar o número de estágios do ciclo de vida fora do hospedeiro que procuram 
hospedeiro em ambiente próximo daquele animal.
McCall, JW, Baker, CF, Mather, TN, Chester, ST, McCall, SD, Irwin, JP, Young, SL, Cramer, 
LG, Pollmeier, MG, 2011. A capacidade de uma nova combinação tópica de fipronil, 
amitraz e (S)-metopreno para proteger cães contra infecções por Borrelia burgdorferi e 
Anaplasma phagocytophilum transmitidas por Ixodes scapularis. Veterinario. Parasitol. 
179, 335–342.
Expulsão de carrapatos (=repelência “sensu lato”): fazer com que os carrapatos caiam do 
animal hospedeiro, interrompendo os mecanismos de fixação, ou seja, causando o 
desprendimento de carrapatos já fixados ou impedindo a fixação de novos carrapatos 
infestantes (Halos et al. , 2012).
Prevenção: ação de impedir o estabelecimento de infestações por ectoparasitas, geralmente 
por um intervalo de tempo definido após o tratamento.
Eficácia (=eficácia terapêutica): a resposta terapêutica real produzida por um produto contra 
um ectoparasita, conforme determinado numa série de estudos controlados utilizando 
animais infestados.
Rust, MK, Reierson, DA, 1989. Atividade de inseticidas contra a pulga de gato adulto pré-
emergente no casulo (Siphonaptera: Pulicidae). J. Med.
Res. 53, 563–578.
Vercruysse, J., Rehbein, S., Holdsworth, PA, Letonja, T., Peter, R., 2006.
Wood, IB, Amaral, NK, Bairden, K., Duncan, JL, Kassai, T., Malone Jr., JB, Pankavich, JA, 
Reinecke, RK, Slocombe, O., Taylor, SM, Ver-cruysse, J ., 1995. Diretrizes da Associação 
Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar a eficácia de 
anti-helmínticos em ruminantes (bovinos, ovinos, caprinos). Veterinario. Parasitol. 58, 181–
213.
Tratamento (Tratamento terapêutico): intervenção destinada a matar (velocidade de morte ou 
ação) e/ou eliminar parasitas já presentes no animal no momento do tratamento, ou seja, 
uma infestação existente.
McCoy, C., Broce, AB, Dryden, MW, 2008. Padrões de alimentação sanguínea de pulgas em 
gatos tratados com nitenpiram oral e os inseticidas tópicos imid-aclopride, fipronil e 
selamectina. Veterinario. Parasitol. 156 (3–4), 293–301.
Carrapato ingurgitado: uma fêmea adulta ixodídeo (“carrapato duro”) que fez uma única grande 
refeição de sangue para produzir um preenchimento visível do aloscuto.
Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) 
para avaliar a eficácia de ectoparasiticidas contra ácaros (sarna e coceira) em ruminantes. 
Veterinario. Parasitol. 136, 55-66.
Entomol. 21, 727–731.
Período de proteção: o período de tempo, expresso em dias ou semanas após o tratamento, 
durante o qual um produto evitará a reinfestação do animal pelo ectoparasita. Às vezes 
referido como período profilático ou período de eficácia persistente.
Controle: o efeito benéfico geral de uma intervenção clínica. Por exemplo, no caso de um 
composto pulicida, pode ser o efeito combinado da capacidadedo produto para matar 
pulgas no animal e a redução progressiva da pressão de infestação ambiental assim 
alcançada.
Eficácia imediata ou curativa: o efeito terapêutico de um produto numa população de 
ectoparasitas residente (pré-existente) dentro de um período definido a partir do tratamento 
(por exemplo, entre 4 e 72 horas).
Efeito anti-alimentação: interferência no processo natural de alimentação, evitando qualquer 
repasto sanguíneo.
Rust, MK, Waggoner, M., Hinkle, NC, Mencke, N., Hanson, O., Vaughn, M., Dryden, MW, 
Payne, P., Blagburn, BL, Jacobs, DE, Bach, T., Bledsoe, D., Hopkins, T., Mehlhorn, H., 
Denholm, I., 2002. Desenvolvimento de um bioensaio larval para suscetibilidade de pulgas 
de gato (Siphonaptera: Pulicidae) ao imidaclopride. J. Med. Entomol. 39 (4), 671-674.
Repelência (sensu stricto): Caracterizada por efeito irritante, fazendo com que o carrapato se 
afaste do animal tratado levando-o a cair logo após o contato com sua pelagem (Halos et 
al., 2012).
O gênero Rhipicephalus (Acari Ixodidae): Um Guia para os Carrapatos Marrons do Mundo. 
Cambridge University Press, Cambridge.
Knockdown: ação inicial imediata de alguns produtos químicos no sistema nervoso dos 
artrópodes, caracterizada pela incapacidade de se mover de forma coordenada 
(imobilização). O knockdown pode ser seguido pela recuperação ou pela morte do parasita.
Stone, BF, Haydock, KPA, 1962. Método para medir a suscetibilidade a acaricidas do 
carrapato bovino Boophilus microplus (Can.). Touro. Entomol.
Yazwinski, TA, Chapman, HD, Davis, RB, Letonja, T., Pote, L., Maes, L., Jacobs, DE, 2003. 
Diretrizes da Associação Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) 
para avaliar a eficácia de anti-helmínticos em galinhas e perus. Veterinario. Parasitol. 116, 
159-173.
Acaricida: agente que mata membros da ordem Acarina, especificamente
Powers, KG, Wood, IB, Eckert, J., Gibson, T., Smith, HJ, 1982. Diretrizes da Associação 
Mundial para o Avanço da Parasitologia Veterinária (WAAVP) para avaliar a eficácia de 
anti-helmínticos em ruminantes (bovinos e ovinos) . Veterinario. Parasitol. 10, 265–284.
Prullage, JB, Hair, JA, Everett, WR, Yoon, SS, Cramer, LG, Franke, S, Cornelison, K, Hunter, 
JS, 2011b. A prevenção dos efeitos de fixação e descolamento de uma nova combinação 
de fipronil, amitraz e (S)-metopreno para Rhipicephalus sanguineus e Dermacentor vari-
abilis em cães. Veterinario. Parasitol. 179(4), 311–317.
'Estágio zero de pulgas' ou “estágio livre de pulgas”: Determinação, por um método de 
avaliação confiável, de que nenhuma evidência de infestação por pulgas (adultos, ovos 
ou fezes de pulgas) está presente em um animal em um momento de avaliação. O “valor 
zero de pulgas” para um grupo de tratamento é uma medida descritiva útil do desempenho 
do produto em estudos clínicos de campo, mas não deve ser usado como o único meio 
de avaliar a eficácia de campo.
Richman, DL, Koehler, PG, Brenner, RJ, 1999. Sangue bovino seco por pulverização: uma 
dieta de laboratório eficaz para Ctenocephalides felis felis (Siphonaptera: Pulicidae). J. 
Med. Entomol. 36, 219–221.
Estudo de confirmação de dose: um estudo controlado, utilizando animais normalmente em 
instalações de currais, para confirmar a dose eficaz contra o(s) parasita(s) alvo(s), 
conforme determinado no estudo de determinação da dose. Este tipo de estudo também 
é utilizado para definir a eficácia persistente contra o(s) parasita(s) alvo após a reinfestação.
97
Moser, BA, Koehler, PG, Patterson, RS, 1991. Efeito da dieta larval nos tempos de 
desenvolvimento da pulga de gato (Siphonaptera: Pulicidae) e na emergência do adulto. 
J.Econ. Entomol. 84, 1257–1261.
(Antes da alimentação eles são conhecidos como “carrapatos não ingurgitados”).
Rust, MK, 2005. Avanços no controle de Ctenocephalides felis (pulga de gato) em cães e 
gatos. Tendências Parasitol. 21 (5), 232–236.
Eficácia persistente (residual ou sustentada): atividade terapêutica prolongada de um produto 
medida em dias ou semanas após o dia do tratamento. Às vezes referido como efeito 
profilático ou protetor.
Pulicida: agente que mata membros da família Pulicidae, especificamente pulgas, usado para 
controle de pulgas.
Tatchell, RJ, 1974. O uso do teste de pacote para detecção de resistência a acaricidas em 
carrapatos africanos. In: Anais do 3º Congresso Internacional de Parasitologia, Volume 2, 
pp.
Vet, LEM, Van Lanteren, JCV, Heymans, M., Meelis, E., 1983. Um olfatômetro de fluxo de ar 
para medir respostas olfativas. Física. Entomol. 8, 97–106.
Schapiro, SJ, Everitt, JI, 2006. Preparação de animais para uso em laboratório: questões e 
desafios para o Comitê Institucional de Cuidado e Uso de Animais (IACUC). ILAR J. 47, 
370–375.
Ocultação ou mascaramento: um procedimento para reduzir possíveis vieses do estudo em 
que o pessoal designado é mantido desinformado (“cego” ou “mascarado”) sobre as 
atribuições de tratamento em um estudo.
Prullage, JB, Cawthrone, EG, Le Hir de Fallois, LP, Timmons, PR, 2011a.
Velocidade de morte (ação): o tempo após o tratamento terapêutico para um produto matar 
uma determinada porcentagem da população do parasita. É determinado pela taxa à qual 
o material activo cobre a superfície do corpo, pela taxa à qual o composto activo é 
absorvido pelo parasita, pelo modo de acção do tóxico e pela susceptibilidade do 
organismo alvo.
Wang, C., Mount, J., Butler, J., Gao, D., Jung, E., Blagburn, BL, Kaltenboeck, B., 2012. PCR 
em tempo real da hidroximetilbilano sintase de mamífero (HMBS) gene para análise de 
padrões de alimentação de pulgas (Ctenocephalides felis) em cães. Parasita. Vetores 5, 
1–8.
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
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ÿ Autor correspondente.
Gato
Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
Cachorro
Departamento de Medicina Diagnóstica/Patobiologia, Kansas State University, Manhattan, KS 66506, EUA
Reguladores de crescimento de insetos
Compostos sistêmicos: Compostos tópicos
a Zoetis Inc., (anteriormente Pfizer Animal Health), 333 Portage Road, Kalamazoo, MI 49007, EUA b 
Animal Health Alliance (Austrália) Ltd., Locked Bag 916, Canberra, ACT 2601, Austrália c ClinVet 
International (Pty) Ltd. , PO Box 11186, Universitas 9321, Bloemfontein, África do Sul d KLIFOVET AG, 
Geyerspergerstr. 27, D-80689 München, Alemanha e Elanco Animal 
Health, 2500 Innovation Way, Greenfield, IN 46140, EUA
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http://www.elsevier.com/locate/vetpar
http://www.sciencedirect.com/science/journal/03044017
dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.02.003
mailto:alan.marchiondo@zoetis.com
dx.doi.org/10.1016/j.vetpar.2013.02.003
O objetivo dos tratamentos individuais pode ser proporcionar alívio a 
curto prazo ou controle a longo prazo. Por exemplo, os ectoparasiticidas 
podem ser utilizados terapeuticamente para aliviar o desconforto e/ou 
interromper a perda de sangue, ou profilaticamente para prevenir ou 
reduzir picadas, evitando assim manifestações clínicas associadas e 
transmissão de patógenos. Alcançar
Pulgas e carrapatos são ectoparasitas hematófagos obrigatórios com 
histórias de vida complexas envolvendo estágios do ciclo de vida dentro 
e fora do hospedeiro. Dependendo das circunstâncias, as infestações 
podem resultar em perda de sangue, irritação, hipersensibilidade e 
transmissão de patógenos (vírus, bactérias ou parasitas).
O último ponto é de particular importância porque, com algumas exceções, 
como estudos in vitro de repelência de carrapatos, a avaliação do 
tratamento e controle de ectoparasitas não pode ser alcançada de forma 
realista sem o uso de animais hospedeiros.
As presentes diretrizes reúnem metodologias de diversas fontes com 
o objetivo de fornecer uma base para a racionalização, simplificação e 
harmonização de estudos necessários para a avaliação e licenciamento 
de ectoparasiticidas de pequenos animais em diferentes países. Estes 
métodos reflectem padrões e princípios comummente reconhecidos pela 
comunidade científica como apropriados e necessários para a recolha 
de dados científicos robustos para este fim. Espera-se que eles (1) 
sirvam como modelos para autoridades reguladoras responsáveis pelo 
desenvolvimento de requisitos significativos de registro de eficácia em 
seus países, (2) auxiliem os investigadores na preparação de planos 
básicos para uma definição eficaz da eficácia de um novo material 
investigacional, e ( 3) reduzir o número de animais de estudo utilizados 
em testes por razões de economia de custos e de bem-estar animal.
2. Visão geral
As definições destes termos são fornecidas no Glossário no final 
destas diretrizes revistas e uma discussão mais aprofundada destes 
termos e do seu significado na concepção de programas de controlo 
pode ser encontrada, por exemplo, em Marchiondo et al . (1990), 
Marchiondo (1993), Dryden e Rust (1994), Carlotti e Jacobs (2000), Rust 
(2005) e Halos et al. (2012).
As diretrizes de 2007 (Marchiondo et al., 2007) tiveram como objetivo 
abordar os fundamentos e metodologias mais atuais na avaliação da 
eficácia de parasiticidas contra pulgas e carrapatos, levando à adoção 
literal, em alguns casos, por muitas agências reguladoras em todo o 
mundo. Mas, com o passar do tempo, os avanços na química pulicida e 
acaricida tópica e sistêmica, o uso de combinações de ingredientes ativos 
para expandir as reivindicações e o progresso nas metodologias exigiram 
esta revisão. As principais revisões desta segunda edição incluem 
diretrizes sobre a avaliação de produtos sistêmicos contra pulgas e 
carrapatos, uma atualização da distribuição geográfica das espécies 
comuns de pulgas e carrapatos em cães e gatos, determinação da 
eficácia contra pulgas e carrapatos com base em dados geométricos 
versus aritméticos. meios no que diz respeito às agências reguladoras 
geográficas, modificação da categorização de carrapatos na avaliação 
da eficácia, diretrizes ampliadas sobre repelência e efeitos anti-
alimentação, orientações práticas aprimoradas para estudos de campo e 
considerações sobre as faixas de infestações por pulgas e carrapatos 
em estudos laboratoriais. Conforme enfatizado na diretriz original 
(Marchiondo et al., 2007), se em uma circunstância particular uma 
abordagem alternativa às listadas aqui for considerada mais adequada, 
um argumento fundamentado para seu emprego deve ser preparado e 
discutido com as autoridades reguladoras apropriadas antes início do 
programa de estudos.
anticoccidianos em galinhas e perus (Holdsworth et al., 2004) e 
ectoparasiticidas em ruminantes (Holdsworth et al., 2006a, 2006b, 2006c, 
2006d; Vercruysse et al., 2006).
As moléculas que exercem sua ação interferindo no desenvolvimento 
do ovo ou em outros estágios do ciclo de vida fora do hospedeiro são 
chamadas de reguladores de crescimento de insetos (IGRs) ou inibidores 
de desenvolvimento de insetos (IDIs). A eficácia de cada molécula é 
avaliada pelo seu efeito na eclodibilidade dos ovos e/ou na sobrevivência 
subsequente dos estágios do ciclo de vida fora do hospedeiro, e pela 
duração desses efeitos.
Esses atributos contribuem com benefícios óbvios no tratamento da 
dermatite alérgica a pulgas e na prevenção da transmissão de patógenos 
transmitidos por carrapatos.
A atividade pulicida ou acaricida por si só não previne 
necessariamente picadas de pulgas ou fixação de carrapatos antes de 
sucumbirem ao efeito letal do material ativo. Alguns compostos, no 
entanto, têm efeitos repelentes e/ou anti-alimentares. Estes podem 
manifestar-se por pulgas ou carraças que evitam ou abandonam o seu 
hospedeiro, ou por não morderem, agarrarem ou alimentarem.
A pulga do gato, Ctenocephalides felis felis, é um problema quase 
onipresente em todo o mundo, tanto em gatos quanto em cães, enquanto 
C. canis está amplamente confinada aos cães e é mais restrita em sua 
distribuição (Tabela 1 ) . Gatos e cães podem ocasionalmente abrigar 
outras espécies de pulgas que normalmente parasitam outros hospedeiros, 
como coelhos, ouriços e aves. As pulgas dos gatos são
As substâncias ativas que matam as pulgas adultas são conhecidas 
como inseticidas, pulicidas ou adulticidas, enquanto as que matam os 
carrapatos são denominadas acaricidas. A atividade biológica de um 
pulicida ou acaricida não pode ser descrita completamente por um único 
valor de “eficácia”. Os critérios comumente usados para diferentes 
aspectos da atividade pulicida incluem: 'knockdown', 'eficácia imediata', 
'eficácia terapêutica' e 'velocidade de morte ou ação' para definir o efeito 
do tratamento contra infestações pré-existentes ou de desafio; «eficácia 
persistente a curto prazo (ou eficácia profilática)», que se refere ao 
período durante o qual o estabelecimentode novas infestações é evitado 
(normalmente até 4–6 semanas); e “eficácia persistente a longo prazo”, 
que geralmente é aplicada a dispositivos de liberação sustentada ou 
formulações sistêmicas que fornecem controle por períodos prolongados 
(tipicamente ÿ 3 meses).
Este último pode ser alcançado por meio de programas de tratamento 
que (1) impeçam que animais infestados de parasitas disseminem ovos 
no meio ambiente, (2) tornem os ovos produzidos inférteis ou (3) 
interfiram no desenvolvimento de estágios do ciclo de vida fora do 
hospedeiro, a transferência de quantidades biologicamente significativas 
de material activo do animal tratado para o seu ambiente imediato.
3. Pulgas e carrapatos em cães e gatos
Para atingir estes objectivos, os tratamentos em animais podem ser 
empregues para: (1) matar os parasitas que já se encontram no animal 
no momento do tratamento; (2) repelir novos artrópodes em busca de 
hospedeiros e/ou prevenir/reduzir picadas; (3) matar parasitas recém-
adquiridos pelo hospedeiro durante um período de tempo após o 
tratamento (atividade persistente (ou residual)); e (4) reduzir ou eliminar 
progressivamente os estágios do ciclo de vida fora do hospedeiro no ambiente.
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97 85
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O ciclo de vida se completa quando o adulto emerge
importância na África do Sul e I. holocyclus é restrita
(Dipetalonema), bem como muitos agentes microbianos (Bar-tonella, 
Rickettsia, Mycoplasma). Ovos postos na queda da pelagem
(larva, ninfa, adulto) faz uma única refeição de sangue prolongada
porque as toxinas injetadas com sua saliva induzem
pode, no entanto, ser parasitado naturalmente por A. americanum (larvas, 
ninfas e adultos), D. variabilis (ninfas
inseticidas e/ou acaricidas. Determinação do “mínimo
humano, as consequências incluem aborrecimento, urticária papular
(Walker et al., 2000; Estrada-Pena˜ et al., 2004). Rhipi-cephalus 
sanguineus coletado de gatos no Mediterrâneo
que podem ser infectados secundariamente. Várias espécies de carrapatos
outra importante espécie de carrapato que infesta cães e gatos em
cuja larva muda e permanece em seu primeiro hospedeiro. Algumas espécies,
Em estudos de laboratório, os cães são rotineiramente infestados com
(ninfas) nos EUA (Dryden e Payne, 2004). Para o Sul
4. Avaliação da eficácia contra pulgas e carrapatos
também pode ser conduzido usando técnicas in vitro. Métodos
partes da Europa podem na verdade ser R. turanicus. Rhipicéfalo
e a possibilidade de perigos de doenças zoonóticas, como infecção por 
tênia, febre da arranhadura do gato (causada por B. hensellae) ou
transmitir doenças microbianas e protozoárias graves de
e Ascher, 1999). Em contraste, infestações laboratoriais
alergia que podem causar, mas também transmitem a tênia
Os carrapatos geralmente têm requisitos ambientais específicos que 
limitam sua distribuição geográfica e local.
fixação do parasita e preparação mais meticulosa do hospedeiro
condições, especialmente canis, e é amplamente distribuído
e cai no chão para fazer a muda. Uma exceção é R. bursa
para o solo onde as larvas da pulga se desenvolvem e se transformam em pupas.
para a costa leste da Austrália. Rhipicephalus turanicus é
febre maculosa, tularemia, febre Q, piroplasmose, hepatozoonose e 
citauxzoonose. Alguns outros, como A.
paralisia.
e adultos), D. andersoni (ninfas) e I. scapularis
Técnicas in vitro são frequentemente utilizadas na descoberta
espécies de carrapatos “sensíveis” para uso em estudos de determinação de dose
África, H. elliptica e R. turanicus infestam gatos e
particularmente Amblyomma spp., produzem picadas profundas e dolorosas
espécies selecionadas de carrapatos, por exemplo R. sanguineus e D.
estão disponíveis para determinar valores de CL50 (Finney, 1971) por
o casulo e salta para um hospedeiro. Se isso acontecer
África do Sul e vários países do Sul da Europa
geralmente problemático devido à intensa irritação e animais e humanos, como doença de Lyme, Rickettsia
febre maculosa transmitida por pulgas (causada por R. felis).
sanguineus é o único carrapato que se adaptou bem ao interior
variabilis, sob condições controladas (Estrada-Pena
de gatos pode ser problemático. Uma taxa naturalmente mais baixa de
cães.
Dipylidium e o parasita filarial Acanthocheilonema
impacto (Tabela 2). Por exemplo, H. elliptica é de particular
em todo o mundo. Normalmente, cada estágio do ciclo de vida
americanum e D. variabilis na América do Norte e I. holo-cyclus na 
Austrália, são de considerável importância clínica
hábitos levam a uma grande variabilidade no estabelecimento. Gatos
4.1. Introdução
e fases pré-clínicas do desenvolvimento de potencial
–
África do Sul
–
Principais espécies de pulgas em cães e/ou gatos.
X
X
–
X
X
–
–
–
Ixodes hexágono
–
–
X
–
X
Amblioma oval
Japão
–
–
–
tabela 1
X
X
–
–
–
–
bursa de Rhipicephalus –
–
Haemaphysalis flava
X
–
X
Amblyomma aureolatum
–
–
X
cervo
–
X
X
Variável Dermacentor
–
–
X
–
–
Europa
Austrália
–
–
–
–
–
X
X
X
–
Ixodes ovatus
–
–
Amblyomma triguttatum
X
–
–
América do Sul
–
X
Espécies de pulgas
X
–
por Apanaskevich et al. (2007). Até recentemente, H. elliptica foi relatada na África do Sul como H. leachi. bWalker et al. (2000). c 
Estrada-Pena˜ et al. (2004).
Rhipicephalus turanicusb, c
–
–
–
holociclo Ixodes
–
América do Sul
–
X
–
–
–
Ixodes escapulário
Ctenocephalides felis felis
–
X
Haemaphysalis ellipticaa
X
–
XX
–
X
–
As principais espécies de carrapatos ixodídeos que se alimentam de cães e gatos.
–
–
–
X
–
Ixodes ricinus
X
X
X
X
Dermacentor reticulatus
–
cervo
–
–
–
Japão
mesa 2
–
–
–
X
–
–
X
–
X
–
–
–
Rhipicephalus sanguineus
–
–
África do Sul
–
–
–
Amblyomma cajennense
X
–
X
Austrália
–
–
–
86
–
X
–
–
–
Ixodes, o pacificador
–
Ctenocephalides canis
–
–
Haemaphysalis longicornis
Amblyomma americano
–
Europa
–
–
Espécies de carrapatos
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–
–
–
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no espectro de atividade potencial inseticida/acaricida, em atividades 
sinérgicas (Prullage et al., 2011a), ou em
a mesma espécie de parasita. Estudos separados são, portanto,
4.2.1. Desenho de estudo controlado
tratamento químico (por exemplo, nitenpiram) antes do
estudos de campo são posteriormente necessários para confirmar a 
atividade contra infestações naturais sob uma ampla gama de
o composto experimental, e (4) a duração do
existem diretrizes firmes sobre o período de aclimatação, mas a 
flexibilidade e o julgamento profissional do
significa para a Agência Europeia de Medicamentos (EMA).
ser uma melhor estimativa da tendência central para comparação
até ou mais de 24 horas dependendo da formulação,
estudos depende das declarações exigidas no rótulo, da disponibilidade 
e acessibilidade de animais infestados e de aspectos de
(ambientais) e fatores (condições físicas de habitação,
estágios para uma faixa de concentrações do produto químico ativo embem como por outras considerações climáticas e geográficas.
para novas instalações, caso contrário um período mais curto pode ser 
apropriado), os animais são classificados de acordo com o número de
estar alinhado com os requisitos regulatórios regionais. Para
ou duração da eficácia de uma determinada investigação
como a população laboratorial específica utilizada, a condição fisiológica 
e a idade podem resultar em variações intraespecíficas
dosagem necessária para aplicação tópica ou sistêmica em um
Métodos estatísticos apropriados devem ser usados para
animais como coelhos e furões), mesmo que abriguem
tipo de estudo, a eficácia do material de teste é determinada pela 
comparação do número de parasitas em grupos de
infestação(ões) subsequente(s) (conforme detalhado nas Seções 4.2.2 e
1989). Tais estudos podem fornecer dados úteis, por exemplo,
de várias maneiras, por exemplo: oralmente, por injeção,
taxa de dose de uma formulação experimental e para confirmar seu perfil 
de eficácia imediato e persistente. Clínico
(2) o grau de controle, (3) a cobertura anatômica de
a concentrações menores nas regiões distais do corpo
reforçar a qualidade dos dados para estudos in vivo. Nenhum conjunto
e pulgas em cães e gatos com base nos cálculos feitos
exposição, por exemplo, de ciclo de vida apropriado de pulgas ou carrapatos
e criação de animais tratados; pela exposição à luz solar, chuva, natação, 
banho ou mesmo pH da água; como
e Drug Administration (FDA) em oposição à aritmética
da seguinte fórmula:
4.2. Estudos em animais
é eliminado preferencialmente penteando ou alternativamente
CE90 plasmática ou mais e a duração da concentração (área sob a 
curva) acima do limite
é distorcida, a média geométrica é geralmente considerada
projetos devem permitir um período de tempo, que pode ser
mas raramente dão mais do que uma indicação ampla do
O número e a natureza dos exames laboratoriais e clínicos
estudar. Aclimatação dos animais às condições
intervalos durante e após o tratamento para registrar reações adversas e 
efeitos colaterais clínicos. Contagens de parasitas a seguir
tem ação tópica ou sistêmica e pode ser administrado
Em relação aos próprios parasitas, vários fatores
pesquisa (Schapiro e Everitt, 2006). Após um período de aclimatação de 
pelo menos 7 dias (caso os animais sejam transferidos
ambas as médias geométricas e aritméticas devem ser registradas
uso real que os testes de laboratório nem sempre conseguem antecipar 
ou replicar adequadamente. Por exemplo, o grau
da alta concentração no local de aplicação
o estudo é importante para a otimização do bem-estar animal, bem como 
para minimizar a variação interanimal, assim
ferramenta para estimar a eficácia ectoparasiticida contra carrapatos
dará os mesmos resultados em cães e gatos (ou outros animais de estimação
avaliação da eficácia contra pulgas e carrapatos. Nisso
Drummond et al., 1973; Tatchell, 1974; Ferrugem e Reierson,
Agência de Proteção Ambiental (USA-EPA) e Centro de Medicina 
Veterinária (CVM) dos Estados Unidos Food
grupos. Em geral, a eficácia percentual é calculada
a suscetibilidade natural específica da população de parasitas utilizada, 
pela raça hospedeira, tipo de pelagem, comportamento
definir as potenciais eficácias curativas e persistentes.
alocados em grupos de estudo. A infestação pré-alocação
Estudos laboratoriais utilizando infestações animais induzidas 
experimentalmente ainda são necessários para estabelecer a melhor
as espécies de parasitas e os estágios do ciclo de vida que são controlados,
condições padronizadas em momentos específicos durante o
Se a distribuição do parasita contar dentro de cada grupo
perfis de resistência (expondo cepas definidas de pulgas ou carrapatos),
necessário para cada espécie hospedeira.
no caso de produtos não sistêmicos de aplicação tópica, estudar
controle concedido.
investigador, IACUC e patrocinador são necessários para determinar a 
duração e como os animais serão preparados para
condições. Existem muitas interações potenciais em
avaliações (EMEA/CVMP/005/00-Rev 2, 2011). Portanto
aplicado topicamente ou administrado por via oral, o tempo para atingir o
ou em meios líquidos ou sólidos, como sangue total ou papéis de filtro 
impregnados (Stone e Haydock, 1962; Anon, 1971;
Não se pode presumir que as formulações experimentais
Estudos controlados são defendidos para o laboratório
E = × 100 
o estudo começa. Os animais são observados em locais apropriados
Pulicidas, acaricidas, RCIs e IDIs podem exercer sua
animal.
avaliando a significância das diferenças observadas entre
para divulgação e distribuição do ingrediente ativo
a biologia do ectoparasita alvo. Quatro fatores determinam a força e a 
natureza da alegação do rótulo de eficácia: (1)
condições de habitação social, procedimentos dietéticos, experimentais 
e de manejo) que provavelmente experimentarão enquanto estiverem em
do que a média aritmética. Há, no entanto, uma visão alternativa de que 
a média aritmética é a única
ou como spot-ons, line-ons, sprays, xampus ou coleiras. Em
parasitas que se estabelecem em cada indivíduo após uma infestação 
pré-alocação (Seção 5.4), e são então aleatoriamente
por exemplo, um programa de desenvolvimento global exigirá estudos 
de eficácia determinados em médias geométricas para os EUA
produto pode ser influenciado pela pressão da infestação e
na suscetibilidade a inseticidas e acaricidas.
por Dobson et al. (2009) e aplicado ao estudo de carrapatos e pulgas
do animal hospedeiro. No caso de produtos sistêmicos,
e animais não tratados (controle negativo) sob cuidadosa
4.2.3) são usados para cálculos de eficácia.
Mc ÿ Mt
Mc
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97 87
Machine Translated by Google
A infestação inicial por pulgas (ÿ100 pulgas em cães e ÿ50–100 
pulgas em gatos) é geralmente aplicada ÿ24–72 horas antes do 
tratamento para avaliar a eficácia curativa imediata. A taxa de retenção 
adequada de pulgas para inclusão de animais no estudo deve ser 
definida no protocolo, mas geralmente, animais pré-tratados e não 
tratados devem reter pelo menos 25% da infestação de pulgas aplicada. 
A porcentagem de pulgas que permanecem em um hospedeiro após 
cada infestação experimental pode ser altamente variável e 
normalmente pode ser maior em cães do que em gatos devido à higiene 
mais intensa nos gatos.
4.2.2. Eficácia contra pulgas
Modelos confiáveis foram desenvolvidos (McCall et al., 2011; Jongejan 
et al., 2011) para avaliar a eficácia dos compostos na prevenção da 
transmissão de patógenos transmitidos por carrapatos.
onde E é a porcentagem de eficácia, Mc e Mt referem-se ao número de 
parasitas vivos nos animais controle e tratados, respectivamente. Para 
carrapatos, a fórmula é aplicável para acaricidas de contato aplicados 
topicamente, mas para acaricidas administrados sistemicamente, o uso 
de carrapatos vivos pode ser mais apropriado para avaliar a eficácia. 
A eficácia só ocorrerá se o carrapato se fixar eingerir uma dose tóxica 
do medicamento, portanto, contar apenas o número de carrapatos vivos 
fixados fornece o melhor método para avaliar a atividade de um acaricida 
sistêmico. Se os carrapatos estiverem vivos e livres 48 horas após a 
infestação, eles provavelmente não se fixaram (o que é raro após esse 
período) e, portanto, essas contagens de carrapatos vivos livres não 
devem ser usadas no cálculo de eficácia. Isto é ainda mais relevante 
para espécies machos de Ixodes que não se fixam facilmente. O modo 
de ação e a biologia do carrapato também devem ser considerados, 
especialmente com novos compostos e combinações, e a justificativa 
para a seleção da categoria do carrapato deve ser justificada. Um 
grande número de carrapatos vivos livres em animais tratados pode 
ser devido a um efeito anti-alimentação/desprendimento que interfere 
na eficácia acaricida.
A avaliação dos carrapatos como vivos pela confirmação do movimento 
deve ser realizada de forma semelhante à dos acaricidas aplicados 
topicamente. A metodologia utilizada para avaliação da eficácia deverá 
ser definida e justificada no protocolo do estudo. Para alegações 
específicas no rótulo, como “ajuda” ou “previne a transmissão de 
patógenos transmitidos por carrapatos”, devem ser realizados estudos 
especificamente elaborados para demonstrar tal afirmação.
Carrapatos colocados em um animal previamente tratado com um 
composto eficaz geralmente se desprendem e depois podem morrer no 
hospedeiro dentro de 24 a 48 horas sem ter feito uma refeição de 
sangue completa, mas alguns podem permanecer presos. Assim, os 
carrapatos no animal podem estar vivos (recomendamos a avaliação 
dos carrapatos como vivos pela confirmação do movimento após toque 
suave com uma sonda, exposição ao CO2 e/ou aquecimento) ou 
mortos, aderidos ou não aderidos (Tabela 3) . Os números médios de 
carraças vivas livres e aderidas de animais tratados topicamente e de 
controlo devem ser utilizados para calcular os valores de eficácia 
utilizando a fórmula apresentada na secção 4.2.1. Para animais 
tratados com acaricidas de ação sistêmica, o uso apenas da contagem 
de carrapatos vivos pode ser a medida de eficácia mais apropriada para 
algumas espécies. Isto deve ser apoiado por dados farmacocinéticos/
farmacodinâmicos e/ou pela avaliação dos números relativos de 
carrapatos livres vivos em animais não tratados e tratados (estes devem 
ser equivalentes; um número maior de carrapatos livres em animais 
tratados poderia indicar que o tratamento pode ter um efeito expelente).
Espécies de pulgas. A pulga do gato, C. felis felis, é cosmopolita e 
a espécie predominante em cães e gatos na maioria dos países 
(DrydenandRust, 1994) e pode, portanto, ser a única espécie necessária 
para ser testada. Não se pode presumir, contudo, que outras espécies, 
como C. canis, sejam igualmente susceptíveis e, consequentemente, 
podem ser necessários dados de apoio para uma alegação no rótulo. 
Populações mistas de pulgas podem ser utilizadas para testes, desde 
que seja estabelecida uma infestação adequada por pulgas no animal 
testado e que as pulgas de diferentes espécies sejam identificadas, 
contadas e registadas.
Para alegações específicas no rótulo, como ajuda ou previne a 
transmissão de patógenos transmitidos por pulgas, devem ser realizados 
estudos elaborados especificamente para determinar tal alegação.
No entanto, taxas de retenção mais baixas podem ser utilizadas 
conforme justificado no protocolo e com a concordância regulamentar regional.
Uma taxa de retenção de carrapatos de pelo menos 20% em animais 
não tratados é geralmente aceitável para inclusão de animais num estudo.
Reinfestações semelhantes em intervalos de quatro semanas, reduzidas 
para duas semanas durante o último mês de proteção esperada, são 
usadas para monitorar a eficácia persistente a longo prazo.
O desenho de estudos controlados para medir a eficácia acaricida 
contra carrapatos é semelhante ao descrito para pulgas (Seção 4.2.2) , 
exceto que o número de carrapatos não alimentados usados para 
infestação (~50) é geralmente menor para cães ou gatos devido ao bem-
estar animal. problemas definidos pela irritação da pele e danos 
causados por infestações repetidas por uma espécie específica de 
carrapato, por exemplo, A. americanum, e que o número de parasitas 
seja avaliado por palpação, penteação e inspeção visual (Apêndice 
A.3). Populações (espécies) mistas de carrapatos podem ser usadas 
para testes, especialmente ao tentar determinar as espécies de 
carrapatos menos suscetíveis, desde que uma infestação adequada de 
carrapatos de cada espécie seja estabelecida nos animais de teste e 
que os carrapatos de diferentes espécies sejam identificados. , contado 
e registrado. A taxa de retenção de infestações experimentais por 
carrapatos no animal é geralmente de 20 a 50% do número de 
infestações, mas podem ocorrer variações interespecíficas.
A eficácia terapêutica imediata do material investigacional é 
avaliada em um tempo pré-determinado pós-tratamento (normalmente 
entre 24 e 72 horas) penteando e contando as pulgas sobreviventes 
(Apêndice A.2). Grupos de animais, cada um com seu grupo de controle 
negativo apropriado, podem ser contados como pulgas, por exemplo, 
aproximadamente 4, 8, 12 e 24 horas após o tratamento para fornecer 
dados adicionais sobre a velocidade de morte (Apêndice A.2) . A 
eficácia persistente a curto prazo é medida reinfestando os animais 
em cada grupo de estudo em intervalos de 7 dias e contando as pulgas 
24-72 horas depois.
Assim, as infestações de gatos podem exigir um maior número de 
pulgas ou restrição de higiene.
4.2.3. Eficácia contra carrapatos
88
Status do anexo
Efeito acaricida 
demonstrado
Tabela 3 
Categorização dos carrapatos para contagem do polegar ou do pente.
Morto
Gratuito ou anexado
para acaricidas de ação sistêmica.
Gratuito ou anexado
InterpretaçãoStatus de sobrevivência
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97
Efeito acaricida NÃO 
demonstrado
Ao vivo
a Se justificado, apenas a contagem de carrapatos vivos pode ser usada para avaliar a eficácia
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Com referência específica ao efeito anti-alimentação de um 
composto, 97% das pulgas de gato normalmente terão se alimentado 
dentro de 1 hora após chegarem ao hospedeiro (Cadiergues et al., 2000).
Espécies de carrapatos. Espécies de carrapatos comuns a cães e 
gatos em regiões geográficas (Tabela 2) devem ser testadas para 
demonstrar atividade de controle biológico suficiente para apoiar as 
alegações do rótulo. Para uma alegação restrita (espécie única), os 
dados que apoiam uma única espécie de carrapato são adequados nos 
EUA e em certas regiões geográficas. Geralmente, as espécies de 
carrapatos controladas devem ser determinadas pelos dados laboratoriais 
e especificadas nas reivindicações; no entanto, algumas autoridades, 
como a USA-EPA, podem permitiruma alegação geral de “controle de 
carrapatos”. Neste caso, devem ser fornecidos dados laboratoriais 
utilizando animais para o carrapato Brown Dog (R. sanguineus) e pelo 
menos uma outra espécie de carrapato comum naquele hospedeiro, 
por exemplo, o carrapato American Dog (D. variabilis) nos EUA. , o 
carrapato europeu (D. reticulatus) na Europa, o carrapato asiático 
(Haema-physalis longicornis) na Ásia e no Japão, ou o carrapato amarelo 
(H. elliptica) na África Austral.
Em estudos de avaliação a longo prazo, o intervalo entre cada 
reinfestação não deve ser inferior a 4 semanas, uma vez que a aplicação 
mais frequente de carraças pode induzir uma resposta imunitária 
suficientemente forte para reduzir o estabelecimento de parasitas e 
provocar reações cutâneas. Para maior precisão, uma infestação final 
após aproximadamente 2 semanas pode ser indicada.
Recentemente, a terminologia de controle de carrapatos em relação à 
repelência foi proposta (Halos et al., 2012), juntamente com um desenho 
de estudo in vivo para medir os efeitos (expulsibilidade precoce e 
repelência sensu stricto, interrupção do apego e efeito de 'mata' 
acarídico) com base sobre o status do carrapato ao longo de 48 horas 
após o tratamento em cães. Com referência ao efeito/eficácia de um 
acaricida em infestações pré-existentes por carrapatos, ele pode causar 
desprendimento, expulsão que resulta em desprendimento e 
desengajamento (deixando o hospedeiro) e, por último, matar, caso em 
que os carrapatos aderidos podem morrer in situ. Será necessária uma 
abordagem muito específica para determinar a repelência sensu stricto. 
Um método proposto seria colocar cães sedados, tratados e de controle 
em jaulas de infestação e liberar carrapatos nas jaulas (não nos cães) 
e realizar avaliações aproximadamente 30 minutos a 1 hora depois 
(apenas contagens de carrapatos restantes nas jaulas) (Fourie, 
comunicação pessoal). Uma modificação desta metodologia foi usada 
para avaliar a prevenção da fixação de carrapatos de uma combinação 
tópica de fipronil, amitraz e (S)-metopreno, colocando os carrapatos no 
fundo de uma caixa, colocando o cão tratado na caixa por 2 horas, 
removendo o cão para uma segunda caixa por 2 horas e, em seguida, 
contando com o polegar os carrapatos aderidos ao cão (Prullage et al., 
2011b). Os carrapatos se moverão em direção a um hospedeiro 
potencial por curtas distâncias atraídos pelos odores do hospedeiro, 
calor radiante e outros estímulos (Ixodes, Dermacen-tor e Amblyomma 
spp.), mas esta abordagem pode diferir do encontro natural onde em 
algumas espécies de carrapatos a apetência assume a forma de 
preparar uma emboscada. Para determinar a repelência/expelência 
stricto lato, os carrapatos podem ser colocados diretamente nos animais 
sedados nas caixas de infestação e as avaliações podem ser feitas por 
períodos de até 24 horas.
Várias abordagens foram empregadas no passado para obter uma 
estimativa de repelência in vivo (Endris et al., 2002).
Outros métodos quantitativos incluem o reagente de Drabkin e os 
radionuclídeos (51Cr-etirócito e 125I-albumina) que têm sido usados 
para medir o consumo de sangue (Dryden e Gaafar, 1991). Tiras 
simples de teste de hemoglobina ou a visualização de pulgas esmagadas 
ao microscópio podem fornecer informações qualitativas sobre a 
alimentação sanguínea das pulgas.
2008: Dautel e Cranna, 2006). Outras diretrizes de testes regulatórios 
para a avaliação da repelência contra pulgas e carrapatos podem ser 
encontradas em USA-EPA OPPTS810.3700 Insect Repellents for 
Human Skin and Outdoor Premises, 712-C-99-369, dezembro de 1999, 
e EMEA/CVMP/005 /00-Rev 2.
O efeito anti-alimentação de um produto experimental pode ser avaliado 
a partir de aproximadamente 15 minutos após a infestação para produtos 
de contato tópico, coletando todas as pulgas vivas/moribundas/mortas 
no hospedeiro de animais tratados e não tratados. Para compostos 
sistemicamente ativos que exigem que a pulga ingira o composto, pode-
se avaliar cerca de 15 minutos após o tratamento ou pós-infestação, 
mas os efeitos na alimentação no caso do nitenpiram não foram 
observados até 1 hora após a dosagem ( McCoy e outros, 2008). Para 
quantificar a alimentação das pulgas, um ensaio de PCR em tempo real 
pode ser usado para determinar a quantidade de DNA hospedeiro nas 
pulgas coletadas de animais tratados e não tratados, permitindo a 
análise estatística comparativa apropriada (Wang et al., 2012) .
Quanto às pulgas, a eficácia persistente a curto prazo é medida 
reinfestando os animais em cada grupo de estudo em intervalos de 7 
dias e contando os carrapatos 48 horas depois. Se um período mais 
longo de fixação puder ser justificado, por exemplo, um modo de ação 
sistêmico e/ou levando em consideração a transmissão potencial de 
patógenos, a contagem de carrapatos ÿ72 horas ou mais após a 
infestação pode ser aceitável. Contudo, o período de fixação e os efeitos 
fisiológicos sobre os carrapatos durante este período também devem 
ser considerados e descritos.
4.2.4. Efeitos de repelência e anti-alimentação 
São definidos dois tipos de repelência: “sensu stricto” para repelência 
caracterizada por um efeito irritante, fazendo com que o carrapato se 
afaste do animal tratado ou levando-o a cair logo após o contato com a 
pelagem tratada dentro de ÿ 6–8 horas e “sensu lato” para todas as 
outras repelências (ou expelências) de carrapatos até aproximadamente 
24 horas. A primeira, repelência sensu stricto, pode ser atribuída à fase 
de vapor de um composto ou efeito irritante por contato direto (por 
exemplo, óleo de citronela, mas também alguns piretróides sintéticos), 
enquanto a segunda repelência (ou expelência) causa inibição de 
fixação ou desprendimento de carrapatos já aderidos (por exemplo, 
alguns piretróides sintéticos ou amitraz). Alguns inseticidas/acaricidas 
podem agir nos dois sentidos. Esta distinção deve ser refletida no 
projeto de técnicas in vitro para testar se pulgas ou carrapatos adultos 
não alimentados recém-emergidos se espalham aleatoriamente dentro 
de um aparato experimental, ou se sua distribuição espacial pode ser 
significativamente influenciada pela presença do composto experimental. 
Os sistemas de teste in vitro repelentes de pulgas incluem olfatômetros 
de tubo Y ou T, bem como o olfatômetro de fluxo de ar de quatro 
braços (Vet et al., 1983). Revisões úteis sobre repelentes de carrapatos 
(Bissinger e Roe, 2010; Halos et al., 2012) e sistemas de teste in vitro 
para repelentes de carrapatos (Carroll et al., 2003; Dautel, 2004) devem 
ser consultadas para testar compostos e formulações para repelência 
de carrapatos . O bioensaio de objeto em movimento (Dautel et al., 
1999; Dautel, 2004) permite que os carrapatos exibam um comportamento 
de busca de hospedeiro mais intimamente relacionado à situação 
natural e tem sido usado com sucesso para avaliar produtos(Schwantes 
et al.,
AA Marchiondo et al. / Parasitologia Veterinária 194 (2013) 84–97 89
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Estudos de ovos de pulgas podem ser indicados, por exemplo, para 
demonstrar que os ovos produzidos por pulgas após exposição a um RCI ou 
IDI são inférteis, ou que um tratamento pulicida residual evita a produção de 
ovos de pulgas (ou seja, matando pulgas recém-adquiridas antes que 
comecem a botar ovos). Em ambos os casos, é provável que a actividade 
residual diminua com o tempo e, consequentemente, os dados devem 
incluir observações feitas no final do período de persistência reivindicado. 
Fatores estranhos podem influenciar a produção de ovos e a fertilidade e, 
portanto, comparações estatísticas devem ser feitas com controles não 
tratados.
Eficácia (%) = × 100
(C-T)
4.3.1. Ovos de pulgas – enumeração e efeitos ovicidas
As comparações dos números médios de ovos eclodidos, larvas, pupas 
ou pulgas adultas recém-emergidas em placas de controlo e tratamento 
replicadas podem ser feitas com a fórmula apresentada na secção 4.2.1 . 
Outra abordagem é calcular um valor de “eficácia” baseado nas proporções 
relativas de ovos que eventualmente dão origem a pulgas adultas através 
da aplicação da fórmula de Abbott (1925):
4.3. Testes in vitro de fase clínica
desde a pelagem do animal até as superfícies de contato (como a roupa de 
cama do animal). O projeto experimental básico descrito abaixo pode ser 
modificado para testar qualquer uma das circunstâncias acima e para estar 
de acordo com as práticas locais estabelecidas. As “eficácias” in vitro 
resultantes não fornecem necessariamente uma indicação quantitativa do 
desempenho no campo, uma vez que este pode ser afetado por fatores 
externos. Os restos da pelagem, por exemplo, podem estar espalhados por 
áreas variáveis, afetando a quantidade de material ativo que cai nos habitats 
das pulgas.
As pupas restantes são dissecadas e quaisquer adultos normalmente 
desenvolvidos são adicionados à contagem total de pulgas.
A atividade larvicida das pulgas pode resultar de (1) interferência no 
desenvolvimento dos ovos na pulga adulta, (2) ingestão pelas larvas do 
composto ativo aderido ou contido nos detritos que caem de um animal 
tratado (como escamas de pele ou fezes de pulgas), e (3) transferência 
direta de material ativo
O efeito anti-alimentação de um composto contra carraças pode ser 
determinado de forma semelhante, com excepção da confirmação 
microscópica, uma vez que as células sanguíneas ficam hemolisadas e 
difíceis de identificar.
São necessárias precauções rigorosas para evitar a transferência de material 
activo para pratos de controlo, superfícies de trabalho, instrumentos ou 
equipamentos, uma vez que vestígios podem muitas vezes ter efeitos 
mensuráveis no desenvolvimento larval. Os recipientes são incubados a 
ÿ21–29 ÿC e ÿ70–90% de umidade relativa. Após ÿ72 h, o número de larvas 
eclodidas é registrado e os pratos recolocados na incubadora. Após mais 9 
dias, o conteúdo de cada prato é vertido através de uma peneira de malha 
40 (425 m) para separar as pupas do meio de criação. Estas são contadas e 
colocadas em recipientes novos com tampas seladas para evitar a fuga de 
pulgas adultas emergentes. Aproximadamente 28 a 35 dias após a coleta 
dos ovos, os recipientes são retirados das incubadoras, agitados e as pulgas 
adultas imobilizadas com CO2, por congelamento ou despejadas em água 
quente, antes de serem contadas.
Um modelo de avaliação da eficácia de um RCI em uma combinação 
de adulticida mais RCI foi publicado (Franc et al., 2007) em que pulgas de 
reprodução ativa (50 por gato, proporção sexual de aproximadamente 50:50) 
de gatos não tratados são transferidas para gatos tratados. Os ovos 
produzidos permitem a determinação das atividades ovicida, larvicida e de 
prevenção de emergência de novas pulgas.
4.3.2. Efeitos larvicidas contra pulgas
Números iguais de ovos recém-coletados (geralmente entre 20 e 100, 
se disponíveis) são contados em réplicas de placas de Petri de vidro 
contendo meio de criação de larvas de pulgas (Moser et al., 1991; Richman 
et al., 1999). As placas de controlo e de teste terão quantidades pesadas de 
detritos de animais não tratados ou tratados, respectivamente, misturados 
no meio.
Os animais infestados são colocados em gaiolas individuais com piso de 
malha que permite que ovos e outros detritos passem e se acumulem em 
uma bandeja forrada de papel. São necessárias precauções para evitar que 
alimentos, água e urina sujem a bandeja. Ovos suficientes são coletados 
até aproximadamente 24 horas e contados sob ampliação usando uma 
agulha ou escova de pêlo de camelo de ponta fina para manipular os ovos. 
A eclodibilidade pode ser estimada colocando números conhecidos de ovos 
em meios de criação de larvas de pulgas em placas de Petri de vidro, 
incubando conforme descrito abaixo e contando o número de larvas 
resultantes. Se houver ovos suficientes, devem ser preparadas duas ou mais 
placas replicadas, uma vez que estes processos biológicos são muito 
sensíveis aos efeitos ambientais. Como as larvas de pulgas às vezes 
comem ovos não eclodidos, pode-se obter maior precisão colando os ovos 
na tampa da placa de Petri, de modo que fiquem fora do alcance das larvas 
eclodidas que caem no meio abaixo. Isto permite que os ovos eclodidos e 
não eclodidos sejam contados por observação direta (Rust et al., 2002).
4.3.3. Testes in vitro de 
carrapatos Vários métodos descartáveis de pipeta, frasco ou placa de 
Petri podem ser usados para avaliar a susceptibilidade de carrapatos aos 
acaricidas e estabelecer valores de concentração letal ( Barnard et al., 1981; 
Prullage et al., 2011a, 2011c). A superfície interna dos recipientes é tratada 
com soluções acaricidas/acetona e seca ao ar por aproximadamente 24 
horas. Carrapatos maduros ou imaturos são colocados em pipetas tratadas 
e de controle e incubados em uma redoma de vidro por ÿ24 horas ou ÿ7 dias 
(atividade residual) a ÿ21 ÿC e ÿ90% de umidade relativa. A viabilidade dos 
carrapatos com base no movimento, postura normal e coordenação das 
pernas é avaliada após o período de incubação. Bioensaios de redução de 
eclosão de ovos podem ser realizados em carrapatos fêmeas abundantes 
para avaliar o efeito de acaricidas e RCIs (Donahue et al., 1997).
Os ovos coletados por até 24 a 96 horas após a infestação fornecem 
uma determinação das atividades ovicidas, larvicidas e de prevenção de 
novas atividades de emergência.
onde C e T são as porcentagens de emergência de adultos para as placas 
controle e tratadas, respectivamente.
Ovos de hospedeiros não tratados também podem ser coletados como fonte 
de material para a realização de estudos larvicidas (Seção 4.3.2). Caso 
sejam necessários ovos para este fim de animais tratados com insecticida, 
podem ser necessárias grandes infestações (~50-200 pulgas por animal,dependendo da sensibilidade das pulgas ao adulticida), para gerar números 
adequados. As pulgas dos controlos não tratados devem ser removidas o 
mais rapidamente possível por razões de bem-estar.
C
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Machine Translated by Google
Após um período de aclimatação e acúmulo de infestações por pulgas, 
as contagens de pulgas são realizadas para (1) verificar se as infestações 
atingiram níveis suficientes e (2) para fornecer dados usados para alocar 
animais/currais em grupos com base de cargas de pulgas pré-tratamento. 
Como a unidade experimental é o curral e o animal, esse projeto exige que 
os animais não sejam realocados de seus currais quando os procedimentos 
de alocação forem realizados.
para replicar dois cenários clínicos: (1) prevenção e (2) gestão de problemas 
existentes com pulgas. No primeiro caso, os animais do grupo tratado 
receberão o primeiro tratamento antes do início do ciclo de vida da pulga. 
No segundo caso, permite-se que a população de pulgas se estabeleça antes 
do primeiro tratamento ser administrado. Uma vez que este modelo avalia o 
sucesso de uma população de pulgas que pode completar o seu ciclo de 
vida, o método de avaliação da carga de pulgas deve ser concebido para ter 
o menor impacto sobre as pulgas. As opções incluem contagem de polegares 
(usando um método rigoroso e bem definido); ou contagem de pentes de 
pulgas para remover e substituir.
Isto acontece porque interromper a produção de ovos de pulgas ou inibir a 
fertilidade das pulgas acabará por levar a uma redução geral no número de 
pulgas que procuram hospedeiros no ambiente doméstico. Este efeito será 
acelerado se houver qualquer efeito letal adicional, direto ou indireto, nas 
fases do ciclo de vida fora do hospedeiro. Embora não seja um passo 
essencial na avaliação do produto, modelos laboratoriais foram desenvolvidos 
para demonstrar esse impacto acumulativo na população total de pulgas 
usando cães (Blagburn et al., 1995) ou gatos (Fisher et al., 1996; Jacobs et 
al., 1996; Jacobs et al., 1995). , 2001). Nestes estudos, o curral (e não o 
animal) é a unidade experimental, já que as contagens de pulgas dos animais 
são usadas como um indicador (imperfeito) da magnitude da população total 
de pulgas (ou seja, todas as vidas dentro e fora dos animais). etapas do 
ciclo). Os animais são divididos em grupos de controlo tratados e não 
tratados, conforme indicado na Secção 4.2.1, e colocados em baias 
parcialmente alcatifadas. Instalações construídas especificamente podem ser 
construídas para permitir o acesso do animal aos componentes internos e 
externos para simular ainda mais o ambiente doméstico. As pulgas são 
colocadas nos animais e o meio de criação de larvas de pulgas pode ser 
espalhado no tapete do animal de estimação. O ciclo de vida da pulga é 
assim estabelecido em cada curral.
No caso de animais de estimação que estão principalmente confinados 
nos arredores de casa, os benefícios clínicos a longo prazo de um tratamento 
pulicida, RCI ou IDI são, em grande medida, atribuíveis ao impacto desse 
tratamento na população de parasitas fora do hospedeiro ( 'controle ambiental 
em animais').
Quaisquer questões relativas aos procedimentos seleccionados deverão ter 
sido discutidas com os estatísticos e, se relevante, com a autoridade 
competente, nas fases iniciais do desenvolvimento do protocolo.
Métodos estatísticos apropriados devem ser usados para analisar os 
dados. Estes devem ser documentados no protocolo fornecendo detalhes de 
metodologia, referências e cálculos.
pulicida a ser usado quando o número de pulgas atinge um nível limite (alto) 
em animais individuais. O número de tratamentos de resgate necessários 
pode então ser usado como uma medida inversa do sucesso do controle de 
pulgas, além dos resultados da contagem de pulgas. As contagens de pulgas 
nestes estudos podem ser elevadas e é aceitável encerrar as contagens de 
pulgas no nível limite (atribuindo uma contagem de, por exemplo, “>200”), 
talvez em combinação com tratamento de resgate.
4.4. Estudos simulados de ambiente doméstico
O modelo de ambiente doméstico simulado pode ser usado
O objetivo deste tipo de estudo é determinar a dose pontual mínima eficaz 
a ser recomendada. Idealmente, deve ser utilizada a formulação final de 
ingredientes inertes (veículos, emulsificantes, etc.), com exceção das 
concentrações variáveis do ingrediente ativo. Em casos excepcionais, 
quando justificado, poderão ser aceites dados gerados com formulação 
equivalente. A eficácia do produto experimental deve ser avaliada por meio 
de estudos apropriados, como o teste controlado com as principais espécies 
de parasitas (Seções 4.2.1 a 4.2.3). Idealmente, quatro grupos, cada um 
constituído por um número suficiente de animais para permitir a análise 
estatística, podem ser administrados em 0, 0,5, 1 e 2 vezes a dose 
recomendada prevista. Cada grupo deve abrigar ou estar uniformemente 
infestado com números adequados de cada espécie de ectoparasita. Podem 
ser usadas infestações únicas ou mistas de carrapatos/pulgas. Os grupos 
devem ser realizados nas mesmas condições de estudo e as práticas de 
manejo devem ser descritas no protocolo. O percurso e
4.6. Análise estatística
As alegações no rótulo devem especificar o intervalo de tempo (min, 
horas, dias, semanas ou meses) durante o qual o grau de eficácia declarado 
é mantido.
5.1. Estudos de determinação de dose
5. Tipos de estudo
O nível aceitável de eficácia para uma afirmação no rótulo é um valor 
arbitrário que dependerá do uso pretendido do produto (ou seja, do objetivo 
de controle) e dos requisitos regulatórios locais. Geralmente, pode-se 
esperar que uma redução no número de pulgas ou carrapatos de 90% ou 
mais proporcione alívio imediato da irritação e perda de sangue, melhore os 
sinais clínicos em casos de hipersensibilidade e, em ambientes fechados, 
traga benefícios adicionais ao reduzindo o desafio futuro do parasita. 
Contudo, um nível mais elevado de controlo pode ser indicado em 
circunstâncias específicas, tais como o tratamento da dermatite alérgica a 
pulgas em indivíduos altamente sensíveis; para proteger contra carrapatos 
perigosos que induzem paralisia, como I. holocyclus; e reduzir a transmissão 
de organismos patogénicos.
4.5. Limites de eficácia contra espécies de pulgas e carrapatos
Os investigadores devem estar cientes de que a pressão de reinfestação 
nestes estudos pode tornar-se extremamente elevada e devem estar vigilantes 
para proteger o bem-estar dos controlos não tratados. Se necessário, o 
desafio parasitário pode ser reduzido reduzindo o tamanho do tapete e/ou 
removendo as pulgas adultas dos animais, ou aumentado, introduzindo pupas 
de pulgas ou reinfestando os animais. Quaisquer intervenções deste tipo 
devem ser documentadas, pois irão, naturalmente, influenciar a interpretaçãoestatística destes dados. Outra abordagem é permitir tratamentos de 
“salvamento” com um agente não residual de ação curta.
Os animais podem ser tratados e avaliados quanto à presença de pulgas em 
intervalos apropriados, de modo que possa ser feita uma comparação do 
aumento das populações de pulgas nos dois conjuntos de currais.
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que são aceitáveis no que diz respeito a critérios-chave, tais
nas residências. Os investigadores devem levar em conta o
com diferentes isolados de laboratório geneticamente enriquecidos com
e incluem uma variedade de raças mantidas em diferentes condições.
experiência sobre a eficácia e segurança da investigação
eficácia do produto na dose e formulação pretendidas, sua segurança no 
animal alvo foi
para demonstrar a eficácia de um produto experimental
incluindo o pico habitual da estação parasitária na região.
produtos para cães podem ser usados com segurança em gatos. Em estudos
ectoparasiticidas.
benefícios do tratamento estão associados à redução
outros locais infestados de pulgas), lavagem/hidrobanho, tosquia
história com relação aos fatores que afetam as populações de pulgas;
deve ser justificado, especialmente no que diz respeito à biologia
Os estágios do ciclo de vida fora do hospedeiro, tanto de pulgas quanto de carrapatos, são
necessário para cada estudo e o tamanho dos grupos deve ser justificado. 
Estudos devem ser conduzidos utilizando a formulação
Pela sua natureza, os estudos de campo envolvem um alto grau de
normalmente é realizado por pelo menos 1 mês, mas 2–3 meses
o número de animais do estudo foi adequado.
exemplo, o cachorro vive apenas fora e o gato vive apenas
para este propósito. Os animais recrutados devem ser tratados
do tratamento do estudo. Critérios de seleção bem considerados devem 
ser empregados para garantir a inscrição dos casos
deve ser aceitável como um dos estudos de confirmação de dose, desde 
que: a formulação utilizada seja equivalente a
Se os problemas de resistência forem generalizados numa espécie de 
ectoparasita para a qual se reivindica eficácia,
confirmação ou avaliações confirmatórias de eficácia e segurança em 
campo.
produto conforme empregado pelo usuário no campo, e para ganhar
produto foi usado em estudos de caneta confirmando a
e tratá-los com outro produto, desde que os cães e gatos não entrem em 
contato
as espécies-alvo de pulgas e carrapatos. Se os estudos permitirem, o acesso a
diferentes isolados do parasita alvo, são recomendados
a técnica de administração deverá ser a mesma proposta para a 
comercialização. Os intervalos de tempo para contagens de parasitas
agregados familiares que, tanto quanto possível, tenham uma situação consistente
Os estudos de campo envolvem animais de estimação de propriedade privada que vivem
regiões. Os estudos clínicos devem ser realizados em um momento
de animais a serem tratados. Estudos devem ser realizados
são frequentemente indicados. Os animais inscritos deverão ter infestação 
adquirida naturalmente confirmada (mínimo de 5 pulgas)
gatos e cães não vivem nos mesmos ambientes (por
servir como representante do agregado familiar como unidade estatística. 
Deve-se notar, no entanto, que nem todos
ação ou é um análogo químico próximo ao dos existentes
residência nas instalações (dependendo da reivindicação a ser investigada), 
probabilidade de exposição à carga de pulgas (por exemplo, visitar
foi estabelecida a infestação de espécies de ectoparasitas, e a
ser tratado com o mesmo produto desde o longo prazo
estudos neste ambiente.
dentro da caixa aquecida. Estudos de campo podem ser usados como dose
do isolado de pulga e carrapato deve ser bem documentado.
Um número adequado de animais tratados e de controle é
Dependendo da alegação alvo e do produto, os estudos devem
decidiu.
5.3. Campo de estudos
que não têm gatos; (2) seleção de domicílios com gatos
se houver, de lavar ou molhar os animais com xampu sobre a eficácia do 
produto sob investigação aplicado topicamente contra
Pelo menos dois estudos controlados, sempre que possível com
estudos cegos (mascarados) podem permitir que os dados sejam agrupados
afetando a população de pulgas, além da imposição
a dose recomendada no(s) estudo(s) de determinação de dose
5.3.1. Estudos de campo – pulgas
espécies, e realizado em diferentes regiões geográficas e climáticas
indicadas, regiões com diferentes práticas pecuárias, condições ambientais 
e perfil de resistência aos ectoparasitas,
qualidade dos dados, é importante recrutar animais e
do programa de desenvolvimento após a investigação
Estudos clínicos de campo são necessários principalmente para 
avaliação de acompanhamento do desempenho da investigação
usando as doses unitárias recomendadas para as faixas de peso
usando cepas resistentes definidas desse parasita, especialmente se o 
novo ingrediente ativo tiver um modo de ação semelhante
famílias, todos os cães e gatos devem, sempre que possível,
como carga de pulgas, histórico de tratamento contra pulgas, duração de
produto foi aplicado de acordo com a rotulagem, adequado
1 gato, se a população de análise estatística for diferente) pode
contra cada espécie de ectoparasita e estágio de desenvolvimento, 
conforme indicado na rotulagem do produto sob investigação.
produto quando aplicado em diversas condições clínicas.
confirmado, e o método de tratamento do rótulo foi
gatos e não tratá-los, desde que o
produto no animal a ser avaliado.
e que provavelmente permanecerão consistentes com fatores
do(s) ectoparasita(s). Dados obtidos para cada parasita em
Cuidadosamente gerenciado, multicêntrico, randomizado e
riscos e responsabilidades aumentados na condução de pesquisas
Alguns parasitas, como R. sanguineus e C. felis felis, no entanto, são 
afetados em menor grau, pois podem prosperar
parasitas de isolados de campo (ÿa cada 3 anos). A história
Estudos de campo devem ser realizados em fase final
dentro).
onde o produto de teste não pode ser usado em gatos, as opções 
justificáveis incluem: (1) selecionar apenas domicílios
5.2. Estudos de confirmação de dose
e preparação e assim por diante.
Também devem ser realizados estudos para avaliar o efeito,
pressão de infestação ambiental (Seção 4.4). No entanto, apenas um 
animal por espécie hospedeira (1 cão e/ou
afetado pelas flutuações climáticas. Estudos devem ser conduzidos com 
populações contemporâneas de pulgas ou carrapatos
e técnica de administração destinada ao marketing e
(~8–12 semanas) durante a “época das pulgas” em diversas regiões 
geográficas, que devem incluir, conforme cientificamente
variabilidade entre os casos e muitas vezes inconsistências na conformidade 
e gestão do estudo pelos proprietários. Para maximizar
ou compartilhar locais de descanso; ou (3) selecionar domicílios com
corridas abertas permitem a fotoestabilidade do investigacional
estudos controlados de confirmação de dose podem ser necessários
de acordo com as instruções