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1 Disciplina: Práticas em Laboratório Clínico Professora: Amélia Lizziane Leite Duarte – Semestre 2025.1 ROTEIRO DE AULA PRÁTICA ► TÉCNICAS HEMATOLÓGICAS ● Requisitos que devem ser adotados: # Anticoagulante ♦ EDTA = ácido etilenodiaminotetraacético - Homogeneizar; - 1 gota da solução / 3 ml de sangue - Coletar e processar o hemograma. # Obtenção do soro ♦ Técnicas convencionais: - tubo sem coagulante; - centrifugar / separar o soro # Preparo do esfregaço - homogeneizar amostra sanguínea; - transferir uma gotícula de sangue para lâmina com auxilio do mirocapilar; - colocar a outra lâmina à frente da gotícula à frente da gotícula (ângulo 45º); - deslizar para frente à lâmina sobre a outra; - secar o esfregaço; - identificar a lâmina. ● Determinação do Volume Globular (VG) = Hematócrito ♦ Técnica do Microhematócrito: - encher 2/3 do micro tubo por capilaridade; - fechar a extremidade com massa de modelar; - microcentrifugação a 10000 rpm; - 15´ amostras de caprinos; - 5´ amostras de demais espécies; 2 - leitura em escala específica. - resultado expresso em %. ● Contagem Global de Hemáceas ♦ Método da diluição - pipetar 4 ml da solução de Gower (ou soro fisiológico); - misturar 20 μl da amostra de sangue / homogeneizar; - encher a câmara de Newbauer; - deixar em repouso por 3 minutos. # Contagem microscópica com objetiva 40: - hemáceas dos cinco quadrados médios; - somar / multiplicar por 10.000; - resultado expresso por mm³ de sangue. ● Contagem Global dos Leucócitos ♦ Método da diluição - pipetar 380 l da solução de Thoma (ou Turk); - misturar 20 l da amostra de sangue / homogeneizar; - encher a câmara de Newbauer ; - deixar em repouso por 3 minutos. # Contagem microscópica óptica na objetiva de 10: - leucócitos dos quatro quadrados extremos; - somar / multiplicar por 50; - resultado expresso por mm³ de sangue. VCM (fl.) = VG (%) x 10 ; CHCM (%) = Hb (g/dL) x 100 He VG (%)