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Produção in vitro de embriões PIVE Introdução objetivos: obtenção de embriões viáveis de fêmeas saudaveis de alto valor genético, ou que não são mais aptas a produzirem descendentes pelas tecnicas convencionais, femeas jovens ou no período pós parto. Viabiliza o emprego do sêmen sexado e utilização de touros diferentes para doadoras individuais Superovulação (SOV) mais utilizado FSH Coleta de gametas aspiração folicular: técnica de aspiração folicular orientada por USG (OPU) + usada cirurgica, slicing e punção folicular deixa a femea inviavel maturação oocitária in vitro (MIV) e capacitação espermatica maturação nuclear e citoplasmatica do oocito no meio de maturação - controle de CO2 e umidade = oócito maduro deve ter corpúsculo polar, zona pelúcida e espaço perivitelinico Capacitação espermatica com fert- TALP, motilidade progressiva e suporte do gameta masculino Fertilização in vitro (FIV) os sptzs vivos são adicionados nas gostas de fecundação contendo os oócitos ICSI - injeção intracitoplasmatica de espermatozoides / seleciona apenas um Sptz IMSI - SPTZ morfologicamente selecionados PICSI - DOADOR fisiologicamente selecionados Cultivo in vitro (CIV) dos prováveis embriôes meios Whitten, BMOC e fatores de crescimento - controle de temperatura, CO2 e umidade clivagens até virar blastocitos no 7º dia desenvolvimento embrinário inicial em laboratório - criopreservação, sexagem embrionária, inovulação Processos Técnicas para melhorar a habilidade de fertilização dos espermatozoides I. Dissecção parcial da zona pelúcida (PZD) oócito é desnudado com solução de hialuronidase e colocado em solução de sucrose para aumentar o espaço perivitelínico II. Inserção de espermatozóides no espaço perivitelínico (SUZI) envolve a injeção de um ou mais espermatozóides no espaço perivitelínico III. ICSI (Injeção Intracitoplasmática de Espermatozoides) O espermatozoide é injetado diretamente no citoplasma do óvulo