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Moara Lemos Moara.lemos@biof.ufrj.br Endocitose / exocitose. Tráfego intracelular de vesículas Endocitose É a internalização de compostos do meio extracelular através da formação de vesículas na membrana plasmática que não podem ser translocados por proteínas transportadoras Função: • Captação de nutrientes • Defesa contra vírus, bactérias e protozoários • Regulação de componentes da membrana plasmática em resposta às condições extracelulares Endocitose Pode ser classificada de acordo com o material e tamanho da vesícula formada • Fagocitose: internalização de grandes partículas e microrganismos para formar os fagossomos • Macropinocitose: internalização de grandes volumes de fluidos de receptores de membrana • Pinocitose: internalização de fluidos formando pequenas vesículas. Pode ser mediada por receptores Fagocitose • Tipo especial de endocitose • Ingestão de partículas grandes • Remoção de células mortas e patógenos • Internalização em fagossomos e digestão nos abundantes lisossomos • Realizada por fagócitos profissionais Fagocitose de Microrganismos Fagocitose Específica Ocorre a formação do complexo receptor-ligante Fagócitos profissionais reconhecem glicoconjugados presentes na membrana das bactérias Há projeção de pseudópodos Fagocitose do tipo zíper Fagocitose Específica É dependente de receptor na membrana da célula fagocítica Reconhecimento Indireto • Reconhecimento de anticorpos pelo contato prévio • Fagocitose de alta eficiência Reconhecimento Direto • Glicoconjugados de superfície do patógeno • Fosfatidilserina em eritrócitos Fagocitose • Há o recrutamento do citoesqueleto de actina Fagocitose Como os patógenos escapam da fagocitose? • Capping – concentração de ligantes em um região específica da membrana do patógeno • Shedding de membrana: liberação de pequena porção da membrana por brotamento contendo o complexo receptor-ligante Macropinocitose • Processo regulado que responde a estímulos específicos do ambiente • Captação de fluido extracelular • Processo ativado por sinalização celular • Formação de macropinossomos que aumentam a captação bruta de fluidos para a célula • Função de monitoramento do ambiente extracelular e reciclagem de receptores de superfície Macropinocitose e a Via para Degradação de Nutrientes Pinocitose Independente de receptor É a endocitose de fluido extracelular • Internalização de forma não seletiva e constante Cell drinking Endocitose Mediada por Receptor • Endocitose seletiva e de alta especificidade • Maior eficiência endocítica • Diferentes receptores participam deste tipo de endocitose como receptores de hormônios, lipoproteínas e colesterol Endocitose Mediada por Receptor As vesículas são revestidas com proteínas específicas no lado citoplasmático da membrana • Promovem a curvatura da membrana para acomodar os diferentes receptores Vesículas revestidas por CLATRINA Vesículas revestidas por CAVEOLINA Endocitose Dependente de Clatrina Endocitose – Dependente de Clatrina • A clatrina é composta por “Triskelions” Endocitose – Dependente de Clatrina Endocitose Dependente de Caveolina • Formam pequenas invaginações revestidas por caveolinas - 60 a 80 nm de diâmetro • Há participação da dinamina para a liberação da vesícula • Formação de caveossomo Endocitose Dependente de Caveolina • As principais proteínas estruturais das cavéolas são as caveolinas • Proteínas integrais de membrana Endocitose – Dependente de Caveolina Transcitose é um tipo de transporte vesicular • Mediada por receptor e as vesículas endocíticas são revestidas por caveolina • Não há perda do revestimento • Não há fusão com endossomos para o sistema de degradação celular Sistema de Endossomos – Endossomos Iniciais • Centro de triagem e distribuição da via endocítica • A maioria das vesículas endocíticas se funde com os endossomos iniciais da periferia celular • Morfologia heterogênea – projeções tubulares que emergem de um compartimento arredondado Sistema de Endossomos Endossomos de Reciclagem • Domínios especializados na membrana de endossomos • Retornam receptores e componentes da membrana • Rota curta • Rota longa Sistema de Endossomos Maturação dos Endossomos • Os endossomos iniciais amadurecem para endossomos tardios de forma progressiva • Perdem as projeções tubulares e migram para regiões perinucleares • Substituição dos marcadores de superfície • Progressiva acidificação do pH luminal Endocitose e o Sistema de Endossomos Fusão de Vesículas A fusão e entrega do conteúdo da vesícula no compartimento alvo é um processo complexo que envolve diferentes proteínas • A fusão de vesículas requer sua aproximação do compartimento alvo • A proteína de aprisionamento →Rab na superfície da vesícula • Atuação das SNARES que são compartimento-específicas Fusão de Vesículas Complexidade de uma Vesícula Endocítica Diferentes proteínas de superfície e suas funções Proteínas SNARE: fusão de vesículas ATPase: bombeando de H+ tipo V acidificação da vesícula com gasto energético Domínios de proteínas Rab: proteínas de endereçamento para fusão Exocitose É o processo de liberação de substâncias para o meio extracelular através da fusão de vesículas com a membrana plasmática • Importante para secreção de moléculas, comunicação intercelular e devolução de proteínas à membrana Ocorrem através de 2 vias 1. Via constitutiva 2. Via regulada Exocitose Via Constitutiva • Não seletiva Via Regulada • Dependente de sinal para estimular a secreção • Liberação em grandes quantidades de produto a ser secretado • Exemplos: liberação de neurotransmissores nos neurônios, células endócrinas e células secretoras Exocitose Secreção de vesículas sinápticas em neurônios Tráfego Intracelular de Vesículas • Formam 3 principais vias: Via endocítica, via de recuperação e via secretora • Vesículas de cada via são altamente seletivas separando suas cargas de forma específica • Revestidas por diferentes proteínas: Clatrina, COPI, COPII Tráfego Intracelular de Vesículas • Via endocítica • Internalização de nutrientes e de patógenos • Reciclagem • Vesículas revestidas por clatrina e caveolina Tráfego Intracelular de Vesículas • Via secretora • Integra o tráfego Anterógrado no fluxo de saída da célula • As vesículas que partem do Retículo em direção ao Golgi - revestidas por COPII Tráfego Intracelular de Vesículas • Via de recuperação • É integrada o tráfego Retrógrado • A COPI participa desta via revestindo vesículas no Golgi Por hoje é só!! Slide 1 Slide 2: Endocitose Slide 3: Endocitose Slide 4: Fagocitose Slide 5: Fagocitose de Microrganismos Slide 6: Fagocitose Específica Slide 7: Fagocitose Slide 8: Fagocitose Slide 9: Macropinocitose Slide 10: Macropinocitose e a Via para Degradação de Nutrientes Slide 11: Pinocitose Slide 12: Endocitose Slide 13: Endocitose Mediada por Receptor Slide 14: Endocitose Slide 15: Endocitose – Dependente de Clatrina Slide 16: Endocitose – Dependente de Clatrina Slide 17: Endocitose Slide 18: Endocitose Slide 19: Endocitose – Dependente de Caveolina Slide 20: Sistema de Endossomos – Endossomos Iniciais Slide 21: Sistema de Endossomos Slide 22: Sistema de Endossomos Slide 23: Endocitose e o Sistema de Endossomos Slide 24: Fusão de Vesículas Slide 25: Fusão de Vesículas Slide 26: Complexidade de uma Vesícula Endocítica Slide 27: Exocitose Slide 28: Exocitose Slide 29: Exocitose Slide 30: Tráfego Intracelular de Vesículas Slide 31: Tráfego Intracelular de Vesículas Slide 32: Tráfego Intracelular de Vesículas Slide 33: Tráfego Intracelular de Vesículas Slide 34