Transcrição e Tradução

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Anotações Lapidadas — Biologia Molecular
TRANSCRIÇÃO
• O DNA contém genes que podem ser transcritos em RNA.
• A expressão gênica é o que caracteriza funcionalmente uma célula.
• Em eucariotos, a transcrição ocorre no núcleo.
• O processo ocorre em três etapas: iniciação, alongamento e término.
Região promotora
• Região localizada antes do sítio +1 da transcrição.
• Atua como sinalização para recrutamento da maquinaria transcricional.
• Frequentemente apresenta regiões ricas em A e T, como a TATA box.
Fatores gerais de transcrição
• Reconhecem a região promotora.
• Auxiliam no recrutamento e posicionamento da RNA polimerase II.
• TFIIH apresenta atividade helicase, promovendo abertura local da dupla hélice, e atividade quinase, responsável
pela fosforilação da RNA polimerase II.
RNA polimerase II
• Lê a fita molde do DNA no sentido 3’→5’.
• Sintetiza o RNA no sentido 5’→3’.
• Forma ligações fosfodiéster entre os ribonucleotídeos.
Término
• Associado ao sinal de poliadenilação AAUAAA.
• Após clivagem do transcrito ocorre dissociação da RNA polimerase.
REGULAÇÃO GÊNICA
• Enhancers promovem aumento da expressão gênica.
• Silencers reduzem/inibem a expressão gênica.
• Fatores específicos podem ligar-se aos enhancers.
• O looping da cromatina aproxima enhancer e promotor, modulando a transcrição.
PÓS-TRANSCRICIONAL
• O pré-mRNA (transcrito primário) sofre processamento antes de originar o mRNA maduro.
1. CAP 5’
• Protege contra degradação por nucleases.
• Participa do reconhecimento do mRNA no início da tradução.
2. Cauda poli-A
• Adição de adeninas na extremidade 3’.
• Aumenta estabilidade e proteção contra degradação.
3. Splicing
• Remoção de íntrons e união de éxons.
• Realizado pelo spliceossomo composto por snRNPs.
Splicing alternativo
• Diferentes combinações de éxons geram diferentes proteínas a partir de um mesmo gene.
• Explica a alta diversidade proteica em eucariotos.
TRADUÇÃO
• Conversão da sequência de nucleotídeos do mRNA em sequência de aminoácidos.
• Segue as regras do código genético.
Código genético
• Organizado em códons (trincas de nucleotídeos).
• 64 códons totais.
• 61 codificam aminoácidos.
• 3 códons de parada: UAA, UAG e UGA.
• AUG atua como códon de início e codifica metionina.
Características do código genético
• Universal.
• Degenerado/redundante.
• Não ambíguo.
• Leitura contínua e não sobreposta.
• Leitura em trincas.
tRNA
• Possui anticódon complementar ao códon do mRNA.
• Atua como molécula adaptadora entre ácido nucleico e proteína.
• Fenômeno wobble permite certa flexibilidade no pareamento códon-anticódon.
Ribossomo
• Formado por proteínas e rRNA.
• Em eucariotos: subunidades 40S e 60S formando ribossomo 80S.
• Possui sítios A, P e E.
• Responsável pela formação das ligações peptídicas.
Iniciação da tradução
• O CAP 5’ é reconhecido por fatores de iniciação.
• EIF2 associado a GTP recruta o tRNA iniciador com metionina.
• O complexo realiza scanning até encontrar AUG.