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Caruaru, 2013 Espectrofotometria ESPECTROSCOPIA NA LUZ VISÍVEL E ULTRAVIOLETA Método aplicado na determinação de compostos inorgânicos e orgânicos, como por exemplo: identificação/quantificação de fármacos; Método de análise baseado em medidas de absorção de radiação eletromagnética; Espectrofotometria Óptica Comprimento de onda corresponde a luz visível ou ultra-violeta: faixa entre aproximadamente 180 a 800 nm Lei de Lambert-Beer Através dessa lei, intensidades da radiação incidente e emergente podem ser relacionadas com as concentrações do material presente na solução. Efeitos de reflexão, refração e espalhamento não são considerados nessa lei. A radiação incidente deve ser monocromática I0 = intensidade da radiação incidente I = intensidade transmitida pela amostra l = comprimento I = I0 10-Ɛlc Lei de Lambert-Beer Transmitância: Na lei de Lambert-Beer T = I / I0 T = 10-Ɛlc Lei de Lambert-Beer Absorbância Na lei de Lambert-Beer A = - log10 T A = - log10 T = log10(1/T ) = log10(1/10-Ɛlc) Lei de Lambert-Beer Lei de Lambert-Beer É preciso determinar a quantidade de luz que a amostra irá absorver, sendo descrito pela Lei de Beer-Lambert que é a relação entre a intensidade da luz incidida na solução (I0) e a intensidade da luz saindo da solução (I). -log (I/Io) = A = cl A = absorbância = absorvidade molecular ou coeficiente de extinção c = concentração do material absorvedor l = espessura da amostra através da qual a luz passa Diagrama de um espectrofotômetro (a) lâmpada de deutério/tungstênio; (b) lente da fonte; (c) obturador; (d) amostra; (e) lente espectrográfica; (f) fenda; (g) rede de difração; (h) arranjo de detectores Fontes Luminosas Luz UV Lâmpada de gás hidrogênio Mercúrio Luz Visível Tungstênio Condições para uma fonte ser de boa qualidade para atuar nessa faixa: gerar radiação contínua; ter intensidade de potência radiante suficiente para permitir a sua detecção pelo sistema detector; ser estável. Além disso deve ter um tempo de vida longo e preço baixo. Fontes Luminosas Cubetas Espectrofotometria de Luz Visível Cubeta de Vidro ou Plástico Espectrofotometria de Luz Ultra- Violeta Cubeta de Quartzo Obrigado!!
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