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UNIVERSIDADE FEDERAL DO PIAUÍ CAMPUS SENADOR HELVÍDIO NUNES DE BARROS DOCENTE: Dr. LUÍS EVÊNCIO LUZ DISCIPLINA: MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA Genética Microbiana EQUIPE 2 Amanda Martins Ana Paula Wenzel Andreia Pacheco Anna Clélia Resende Gabriela Valente Gabrielle Almeida CONCEITOS GERAIS 3 O QUE É GENÉTICA? GENOMA informação genética CROMOSSOMOS estrutura contendo DNA e proteínas GENES segmentos de DNA que contém a sequencia de nucleotídeos para a produção de uma determinada proteína CÓDIGO GENÉTICO relação entre cada códon e o aminoácido específico ORGANIZAÇÃO DO MATERIAL GENÉTICO 4 O material genético não está contido dentro de um núcleo, ou seja, seu genoma está “solto” no citoplasma e encontra-se condensado em uma estrutura chamada nucleoide. O nucleoide ou cromossomo bacteriano é constituído por: ~ 1 molécula de DNA de fita dupla, circular ~ não é delimitado por membrana nuclear ~ é capaz de auto replicação ~ seus genes contém todas as informações necessárias para a sobrevivência da célula Estrutura e Função do Material Genético 5 Estrutura nucleotídeos dupla hélice pares de bases Função passar o material genético para os descendentes, além de conter genes fundamentais para a produção de proteínas fundamentais à vida. DO QUE É FEITO O DNA 6 Dupla cadeia de nucleotídeos arranjados em hélices com pares de bases ligados por pontes de hidrogênio 7 8 O DNA bacteriano divide-se em: Cromossomial Extra-cromossomial ORGANIZAÇÃO DO MATERIAL GENÉTICO Fita dupla circular que contém as informações necessárias. São os plasmídios, transposons e integrons. 9 Plasmídios Tranposons Integrons Segmentos do DNA que carregam informação genética e se auto duplicam independentemente do cromossomo. São muito comuns em bactérias. Não são essenciais às células, porém podem capacitar suas bactérias a matar outras bactérias ou resistir à ação de antibióticos. São elementos genéticos móveis que podem transferir DNA dentro de uma célula, de uma posição para outra no genoma ou entre diferentes moléculas de DNA (plasmídio-plasmídio ou plasmídio-cromossomo). Não se auto duplicam. Segmentos de DNA menores que os transposons que também não se auto duplicam e também são elementos genéticos móveis. Estão relacionados à captura de genes de resistência. PLASMÍDIOS 10 Plasmídios conjugativos Plasmídios bacteriocinogênicos Plasmídios R Plasmídios de degradação PROCARIONTES X EUCARIONTES 11 Não possui membrana nuclear O cromossomo é enrolado, espiralado e altamente compacto Pode conter plasmídios Apenas uma cópia do seu cromossomo por célula (haploide) Possui membrana nuclear O cromossomo é linear É pelo menos 10x mais longo que o procarionte Raramente contém plasmídios Há normalmente mais de uma cópia de seu cromossomo por célula (diploide) PERGUNTAS 12 Do que é feito o DNA? O que é um plasmídio? O DNA é composto de nucleotídeos. Segmentos do DNA que carregam informação genética e se auto duplicam. Não são essenciais às células, porém podem oferecer uma vantagem à bactéria. REPLICAÇÃO DO DNA 13 É o processo que copia as sequências de nucleotídeos de uma molécula de DNA parental de fita dupla em duas moléculas de DNA filhas de fita dupla. Esse processo é denominado replicação semiconservativa porque cada molécula-filha contém uma fita da molécula parental, ou seja, uma fita velha conservada e uma nova sintetizada. Célula Parental Célula filha Célula filha ETAPAS DA REPLICAÇÃO 14 Iniciação Ampliação ou alongamento Término A enzima DNA girase desenrola as duas fitas parentais em um local específico da molécula de DNA, formando duas forquilhas de replicação. As forquilhas movem-se em direções opostas em torno da molécula de DNA. Como as fitas parentais estão separadas, cada uma serve como modelo para a síntese de uma nova fita, que é complementar à fita parental. A enzima DNA ligase junta os segmentos de DNA. REPLICAÇÃO DO DNA 15 A enzima DNA polimerase assegura a complementaridade pela adição de nucleotídeos para a fita nova de tal forma que cada novo nucleotídeo é complementar à base correspondente da fita parental. 16 Replicação do DNA 17 DNA PERGUNTAS 18 O que é uma replicação semiconservativa? Qual a função da DNA ligase na replicação do DNA? É a replicação do DNA na qual cada uma das células filhas recém formadas conserva uma das fitas de DNA parental da célula que a originou e, a partir da fita parental, forma uma cadeia nova, complementar ao seu molde. Ligar os filamentos de DNA recém sintetizados. TIPOS DE RNA 19 TRANSCRIÇÃO DA INFORMAÇÃO GENÉTICA 20 As mensagens genéticas orientam a produção de RNA e proteínas. Transcrição do DNA em RNA Processo pelo qual o DNA produz RNA. Envolve somente uma das fitas do DNA. A enzima RNA polimerase DNA dependente é quem transcreve o gene para o RNAm. As duas fitas de DNA são separadas e uma fita de RNAm é sintetizada. A transcrição acaba quando a enzima alcança a sequencia terminadora do gene. DNA RNA SÍNTESE DE RNA - TRANSCRIÇÃO 21 RNA polimerase DNA dependente liga-se ao DNA; Montagem dos nucleotídeos; Crescimento do RNA; RNA polimerase atinge o “terminador”; RNA polimerase e RNA mensageiro são liberados. 22 Tradução do RNA em proteína TRADUÇÃO DA INFORMAÇÃO GENÉTICA É o processo pelo qual o RNA produz proteína. A informação do RNAm é traduzida em RNAt. Cada molécula de RNAt possui uma trinca de 3 bases, o anticódon, que é complementar ao códon do RNAm. Cada trinca de RNAt transporta um aminoácido específico para o RNAm no ribossomo, onde os aminoácidos são ligados formando uma cadeia polipeptídica. A síntese de cadeia acaba quando um códon sem sentido (nonsense) é encontrado pelo ribossomo. 23 PERGUNTAS 24 O que é transcrição genética? O que é tradução genética? Processo pelo qual o DNA produz RNA envolvendo somente uma das fitas de DNA. Processo pelo qual o RNA transcrito pelo DNA produz proteína nos ribossomos. GENES E EVOLUÇÃO 25 A atividade dos genes podem ser controlados pelos mecanismos reguladores internos da célula e em si podem ser alterados ou redistribuídos pela mutação, transposição e recombinação. Todos esses processos fornecem diversidade aos descendentes das células. VARIABILIDADE GENÉTICA NOS MICRORGANISMOS 26 A variabilidade está associada com duas propriedades fundamentais de um organismo: Genótipo composição genética = coleção de genes Fenótipo genótipo + influência do meio ambiente 27 Alterações fenotípicas Acontece sempre que a presença ou a ausência de algum fator no ambiente determina a expressão ou não de uma característica genética. Ou seja: são resultado das condições ambientais. Não ocorre alteração no DNA, apenas da expressão genética. VARIABILIDADE GENÉTICA NOS MICRORGANISMOS 28 Alterações genotípicas Ocorrem como resultado de alterações do DNA. Essas alterações do DNA podem ocorrer de duas formas: pela mutação ou pela recombinação. VARIABILIDADE GENÉTICA NOS MICRORGANISMOS MUTAÇÃO 29 Mutação é uma alteração na sequencia de nucleotídeos do DNA e ocorre durante a replicação do cromossomo bacteriano. Qualquer gene pode sofrer mutação. Se um gene tem sua sequencia de nucleotídeos alterada, a proteína que ele codifica pode ter uma alteração na sequencia dos aminoácidos. Uma célula que possui um gene alterado é chamado de mutante e a célula parental com o gene normal é chamado de tipo selvagem. 30 As mutações podem ser de 4 tipos: Mutação neutra Mutação errônea Mutação sem sentido (nonsense) Mutação por deslocamento de quadro MUTAÇÃO MUTAÇÃO NEUTRA 31 Resulta de uma substituição de um nucleotídeo no qual o códon alterado continua a codificar o mesmo aminoácido, assim, a mesma proteína é sintetizada. Se o códon do RNAm é AAU e tornar-se AAC continuará a codificar o mesmo aminoácido e então não acarreta nenhum dano ou vantagem para a célula. MUTAÇÃO ERRÔNEA 32 Resulta de uma substituição de um nucleotídeo no qual, o códon alterado codifica um aminoácido diferente, assim, não poderá ser sintetizada a mesma proteína. Se o códon AAU tornar-se AAG, codificará um aminoácido diferente. Isso pode alterar as propriedades da proteína e até torná-la não funcional. MUTAÇÃO SEM SENTIDO (NONSENSE) 33 Resulta da uma substituição de um nucleotídeo no qual produz um códon de terminação de cadeia. Isto resulta em um término prematuro da proteína durante a tradução produzindo uma proteína incompleta que provavelmente não será funcional. O códon UAA é de terminação. Se houver alteração do códon UAU por UAA na tradução, como o UAA é de terminação, a proteína para de ser sintetizada e fica incompleta. MUTAÇÃO POR DESLOCAMENTO DO QUADRO DE LEITURA 34 Resulta da adição de um ou mais nucleotídeos no gene e é denominada mutação de inserção (se houver adição) ou mutação de deleção (se houver retirada de um nucleotídeo). Isso geralmente leva à formação de uma proteína não funcional. Por exemplo, se temos uma frase e adicionarmos uma letra aleatória depois do R, ficaremos com: TER UMA BOA MÃE _ _ _ _ _ _ _ _ _ TER DUM ABO AMÃ E_ _ _ _ _ _ _ _ Se você retirar uma letra o resultado também ficará sem sentido! RECOMBINAÇÃO 35 É o processo que produz um novo genótipo por meio da troca de material genético durante os processos de conjugação, transdução ou transformação. Mecanismos de recombinação: ~ Conjugação ~ Transdução ~ Transformação MECANISMOS DE RECOMBINAÇÃO 36 ~ Conjugação: mecanismo de transferência de informações genéticas. (Pili de conjugação) ~ Transdução: processo no qual o DNA bacteriano é transferido entre as células mediante um vírus. ~ Transformação: processo no qual o DNA livre no meio é tomado pela célula bacteriana, resultando em alterações genotípicas. CONJUGAÇÃO EM BACTÉRIAS 37 O material genético é transferido de uma bactéria para outro. A conjugação é mediada por um tipo de plasmídio, um fragmento circular de DNA que se replica independente do cromossomo da célula. Célula doadora Célula receptora Plasmídio conjugativo Pili TRANSDUÇÃO EM BACTÉRIAS 38 PERGUNTAS 39 Qual a diferença entre mutação e recombinação? Quais as diferenças entre mutações neutras, errôneas, sem sentido e por deslocamento do quadro de leitura? Mutação: alteração na sequencia de nucleotídeos do DNA e ocorre durante a replicação do cromossomo bacteriano. Recombinação: processo que produz um novo genótipo por meio da troca de material genético durante os processos de conjugação, transdução ou transformação. Mutações neutras: substituição de um nucleotídeo no qual o códon alterado continua a codificar o mesmo aminoácido. Mutações errôneas: substituição de um nucleotídeo no qual, o códon alterado codifica um aminoácido diferente. Mutações sem sentido: substituição de um nucleotídeo no qual produz um códon de terminação de cadeia. Mutações por deslocamento do quadro de leitura: adição de um ou mais nucleotídeos no gene. PERGUNTAS 40 Quais são e como ocorre os mecanismos de recombinação? Conjugação: mecanismo de transferência de informações genéticas. Transdução: processo no qual o DNA bacteriano é transferido entre as células mediante um vírus. Transformação: processo no qual o DNA livre no meio é tomado pela célula bacteriana, resultando em alterações genotípicas. OBRIGADA! 41
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