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PROJETO DE TRABALHO FINAL DE GRADUAÇÃO
EXTRAÇÃO DE ÓLEOS ESSENCIAIS: 
COMPOSIÇÃO FENÓLICA, ATIVIDADE ANTIOXIDANTE
E ANTIMICROBIANA DO RESÍDUO AQUOSO DE Melaleuca 
alternifolia
Orientanda: Luana Lopes Dornelles
Orientadora: Silvana Michelin Bertagnolli
06.11.2017
APRESENTAÇÃO
❖ INTRODUÇÃO
❖ JUSTIFICATIVA
❖ OBJETIVOS
❖ REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
❖ METODOLOGIA
❖ CRONOGRAMA
❖ ORÇAMENTO
❖ REFERÊNCIAS 
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INTRODUÇÃO
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Óleos 
essenciais
Definição
Aplicações
Produção
Inconveniente 
da extração 
por arraste a 
vapor
Geração de 
resíduo sólido 
e líquido
(OLIVEIRA, 2015;) 
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INTRODUÇÃO
Espécie: Melaleuca 
alternifolia
Família Myrtaceae
Subfamília 
Leptospermoideae
Gênero nativo da 
Austrália e ilhas do 
Oceano índico
(VIEIRA et al., 2004;)
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INTRODUÇÃO
Melaleuca alternifolia
Produto principal: óleo 
essencial
Princípio ativo em 
dermocosméticos, 
antissépticos, produtos 
para a saúde
Propriedades
Analgésica, 
antifúngica
Antibacteriana, anti-
inflamatória
(WILLIANS et al., 1997).
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6 JUSTIFICATIVA
A extração de óleos essenciais usando a técnica de arraste a vapor gera resíduos constituídos por 2 frações:
uma aquosa e outra que contém a massa de plantas que foi submetida a esse processo. Atualmente, em uma
empresa localizada em Santa Maria, Rio Grande do Sul, que extrai e comercializa para todo o Brasil óleos essenciais
de diversas espécies de plantas, esse resíduo é descartado no solo ou utilizado para alimentação animal.
Existem inúmeros estudos sobre os óleos essenciais e os processos extrativos, mas ainda não há interesse nos
resíduos provenientes dessa extração, que podem conter substâncias bioativas levando em consideração sua origem
e com isso, podendo ser empregado em novos produtos, como saneantes, por exemplo.
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OBJETIVOS
Objetivo 
geral
Avaliar a presença de 
compostos bioativos no 
resíduo aquoso de 
Melaleuca, assim como 
possíveis atividades 
inibitórias de oxidação 
e desenvolvimento 
microbiológico.
Objetivos 
específicos
Polifenóis e 
flavonoides 
totais
Captura de 
radical ABTS e 
DPPH
Atividade 
inibitória frente 
microorganismos 
isolados ATCC
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
Óleos 
essenciais
Importância 
econômica
Aumento do 
uso: 
propriedades
Renascença: 
Paracelso “óleo 
essencial”.
Uso desde a 
Antiguidade
Metabolismo 
secundário das 
plantas
(FRANZ, 2010; SILVA, 1998; )
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
Propriedades 
farmacológicas
Antifúngica, 
antibacteriana, 
analgésica, anti-
inflamatória, entre 
outras
Vantagens frente 
aos 
medicamentos 
tradicionais
Volatilidade e 
baixo peso 
molecular
Rapidamente 
eliminados do 
organismo
Banhos de 
imersão, inalação 
e nebulizações
(CARMO et al., 2008; MENDES et al., 2010;)
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(SERAFINI et al., 2002;)
Extração 
de óleos 
essenciais
Folhas, 
flores, 
frutos, 
cascas
Incolores ou 
amarelados. 
Instáveis ao 
calor, a luz, 
metais e 
umidade
Fatores 
ambientais
[1% a 15%] 
de óleo 
essencial
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(VARGAS, 2006; LUCAS, 2011;)
Extração por arraste a 
vapor
Método simples e barato
Vapor à +- 100ºC que 
passa pela massa verde
Calor rompe as células 
odoríferas, com isso o óleo 
é arrastado pelo vapor até 
o condensador e logo, 
para o funil de separação
Destilação
Desvantagens: o vapor 
pode causar hidrólise ou 
degradação térmica, 
alterando as 
características do óleo.
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(OLIVEIRA, 2015; )
Novo papel: 
subprodutos que 
podem ser utilizados 
em novos processos 
como matéria prima 
sem causar maiores 
impactos ao meio 
ambiente
Geradores 
de 
problemas, 
matéria sem 
valor
Reutilização 
de resíduos
Um resíduo sólido que é a 
massa de plantas e o 
resíduo aquoso.
A extração de óleos 
essenciais por arraste a 
vapor gera dois resíduos.
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(SANTOS; LEITE, 2006;)
Plantas cujos princípios 
ativos são constituídos 
majoritariamente por 
óleo essencial.
Plantas que tem odor.
Uma das plantas 
aromáticas: Melaleuca 
alternifolia
Uso de produtos naturais 
em diferentes áreas: 
biologicamente ativos
Plantas 
aromáticas
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(SIMÕES et al., 2002;)
Melaleuca 
alternifolia
Antiguidade: folhas 
maceradas em água 
por dias. Mistura usada 
para resfriado, feridas, 
infecções fúngicas, dor 
de garganta.
1925: Arthur Penfold
descobriu o óleo 
essencial da M. 
alternifolia, na 
Austrália.
Segunda Guerra 
Mundial: usada em 
grandes 
quantidades como 
antisséptico.
Logo perdeu a 
importância devido a 
descoberta da Penicilina, 
mas na década de 70 foi 
redescoberta em função 
do início do aparecimento 
de bactérias resistentes.
Casca fina, folhas 
longas e 
pontiagudas
Árvore do chá, Tea 
tree
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(SOARES et al., 2008;)
Compostos 
fenólicos
Amplamente distribuídos na 
natureza.
Pigmentos ou produtos do 
metabolismo secundário.
São antioxidantes: doam H+ ou elétrons, radicais intermediários 
estáveis que evitam oxidação principalmente de lipídios.
Flavonoides (polifenóis) e 
não flavonoides (fenóis 
simples ou ácidos).
Por serem ácidos são oxidados 
antes que outras moléculas.
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(DIAZ, 1997; )
Atividade
antioxidante
Antioxidantes 
retardam ou impedem 
a ação dos radicais 
livres.
A procura dos que tem 
origem natural tem 
aumentado 
significativamente.
Oxidação: processo 
metabólico natural 
para produção de 
energia.
Ao mesmo tempo 
produz radicais livres, 
se não forem 
controlados causam 
danos.
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REVISÃO BIBLIOGRÁFICA
(VOLPATO, 2005;) 
Atividade 
antimicrobiana
Bactericidas ou 
bacteriostáticos.
O óleo essencial da M. 
alternifolia causa lise e 
perda da integridade 
da membrana.
Essa propriedade é de muito 
interesse para diferentes 
indústrias, desde que o uso 
de aditivos naturais ganhou 
importância como tendência 
na substituição de 
conservantes sintéticos 
artificiais .
Reduzem ou inibem o 
desenvolvimento de 
micro-organismos.
METODOLOGIA
 A pesquisa será de caráter experimental quantitativo, as análises serão
realizadas nos laboratórios de Bromatologia e Microbiologia do Centro
Universitário Franciscano.
 As amostras de resíduo aquoso de Melaleuca serão doadas por uma
empresa que extrai óleos essenciais em Santa Maria.
 Elas serão acondicionadas em frascos de vidro âmbar logo após a extração,
refrigeradas e acomodadas em caixas térmicas de isopor até serem trazidas
para o laboratório.
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METODOLOGIA
 Tratamento da amostra
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Repouso até atingir temperatura ambiente
Filtração simples
5
 f
ra
sc
o
s
Amostra 
concentrada
1:1
1:5
1:10
1:20
METODOLOGIA
Determinação espectrofotométrica dos polifenóis totais 
 Folin-Ciocalteau, segundo Roesler e colaboradores (2007);
 Fundamento: redução do reagente pelos compostos fenólicos das amostras
com formação de complexo azul, cuja intensidade aumenta linearmente a
760 nm;
 Curva padrão de ácido gálico.
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Determinação espectrofotométrica dos flavonoides totais
 Método descrito por Zhishen e colaboradores (1999);
 Curva padrão de catequina.
METODOLOGIA
Determinação da capacidade de sequestrar radicais livres DPPH
 O radical estável 2,2-difenil-1-picrilhidrazil (DPPH’) tem sido amplamente
utilizado para avaliar a capacidade de antioxidantes naturais em sequestrar
radicais livres;
 Curva padrão Trolox, seguindo a metodologia de Roesler e colaboradores
(2007);
 Resultados: EC50 em ug/mL.
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EC50 é a concentração efetiva
50%, expressa a concentração
mínima de antioxidante
necessária para reduzir em 50%
a concentração inicial de DPPH.
METODOLOGIA
Determinação da capacidade de sequestrar radicais livres ABTS
 Além do método DPPH, a determinação da atividade antioxidante pelo
método ABTS (2,2- azino – bis – 3- etil – benzotiazolina – 6- ácido sulfônico) é
bastante utilizado;
 O método, segundo RE e colaboradores (1999): geração do radical ABTS.+, de
cor azul esverdeado, por meio da reação do ABTS com perssulfato de potássio.
 Absorção máxima em 734 nm.
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METODOLOGIA
Determinação da atividade antimicrobiana
 Concentração Inibitória Mínima (CIM): microdiluição em caldo, frente aos
micro-organismos padronizados disponíveis no laboratório de Microbiologia do
Centro Universitário Franciscano;
 Materiais: placas de 96 poços estéreis + 100 µL BHI (Brain Heart Infusion);
 Micro-organismos serão inseridos em solução salina estéril e ajustados na
escala 0,5 McFarland;
 Diluições sucessivas;
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CRONOGRAMA
As atividades previstas para o desenvolvimento do trabalho final de graduação são:
1- Revisão bibliográfica.
2- Análise de polifenóis e flavonoides totais.
3- Análise da atividade antioxidante por DPPH.
4- Análise da atividade antioxidante por ABTS.
5- Análise da atividade antimicrobiana.
6- Avaliação e interpretação dos dados obtidos.
7- Defesa do TFG II.
Tabela 1 - Cronograma das
atividades do projeto.
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ORÇAMENTO
Tabela 2 - Discriminação dos materiais necessário para a realização do
projeto.
Os custos referentes à execução do projeto são de responsabilidade
dos pesquisadores.
CARMO, E. S. et al. The potential of Origanum vulgare l. (lamiaceae) essential oil in inhibitingthe
growth of some food-related aspergillus species. Brazilian Journal of Microbiology, v. 39, n.2, p. 362-
367, Junho, 2008.
DIAZ, M. N. et al. Antioxidants and atherosclerotic heart disease. New Engl. J. Med, v. 337, n. 6, p.
408-416, 1997.
FRANZ, C. M. Essential oil research: past, present and future. Flavour Fragrance Journal, v. 25, p. 112-
113, 2010.
LUCAS, A. M. Estudo comparativos de extratos voláteis de eucalipto geneticamente modificados e
não geneticamente modificados. 2011. 76f. Dissertação (Mestrado em Engenharia e Tecnologia de
Materiais) – Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, Porto Alegre, 2011.
MENDES, S. S. et al. Evaluation of the analgesic and anti-inflammatory effects of the essential oil of
Lippia gracilis leaves. Journal of Ethnopharmacology, v. 129, n. 3, p. 391-397, 2010.
OLIVEIRA, F. C. M. Caracterização dos resíduos industriais gerados no processo de extração de
óleos essenciais por arraste a vapor. Dissertação para a obtenção do título de Mestre em
Engenharia e Tecnologia de Materiais. Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul. Porto
Alegre. 2015. 122p.
RE, R. et al. Antioxidant activity apllying na improved ABTS radical cationdecolorizantion assay. Free
radical biology medicinal, v. 26, n. 9, 1999.
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REFERÊNCIAS
ROESLER, R. et al. Atividade antioxidante de frutas do cerrado. Ciências Tecnológicas de
Alimentos, v. 27, n.1, p. 53-60, 2007.
SANTOS, A.; LEITE, I. Curso de Plantas Medicinais, Aromáticas e condimentares. Associação de
Agricultores do Concelho de Arouca. Portugal, 2006.
SERAFINI, L. A. (Org.). Extrações e aplicações de óleos essenciais de plantas aromáticas e
medicinais. Caxias do Sul: EDUCS, 2002.
SILVA, A. R. Tudo sobre aromaterapia. São Paulo: Roca, 1998. 624 p.
SIMÕES, R. P. et al. Efeito do óleo de Melaleuca alternifolia sobre a infecção estafilocócica.
Revista Lecta. Bragança Paulista, n. 2, v. 20, p. 143-152, jul./dez. 2002.
VOLPATO, Ana Marcia de Matos. Avaliação do potencial antibacteriano de Calendula officinalis
(Asteraceae) para seu emprego como fitoterápico. Curitiba: Universidade Federal do Paraná,
2005.
WATERHOUSE, A. L. Wine phenolics. Annals New York Academy of Sciences, New York, v. 957, p.
21-36, 2002.
ZHISHEN, J. et al. The determination of flavonoid contentes in mulberry and the scavenging effects
on superoxide radicals. Food Chemistry, v.64, p.555-559, 1999.
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REFERÊNCIAS
PROJETO DE TRABALHO FINAL DE GRADUAÇÃO
EXTRAÇÃO DE ÓLEOS ESSENCIAIS: 
COMPOSIÇÃO FENÓLICA, ATIVIDADE ANTIOXIDANTE
E ANTIMICROBIANA DO RESÍDUO AQUOSO DE Melaleuca 
alternifolia
Orientanda: Luana Lopes Dornelles
Orientadora: Silvana Michelin Bertagnolli
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