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APOSTILA DE FUNDAMENTOS DE LABORATÓRIO AUTORES: CLÁUDIA LOPES PENAFORTE DANIELLE NOGUEIRA DE ASSIS 2ª edição Belo Horizonte 2017 2 AULA 01 NORMAS DE SEGURANÇA EM LABORATÓRIOS OBJETIVOS: No final da aula o aluno deverá: � Conhecer as normas de segurança; � Conhecer os tipos de resíduos de saúde; � Conhecer alguns conceitos básicos em laboratórios; � Conhecer sobre as normas dos laboratórios em saúde; � Conhecer as principais simbologias de rotulagem. BIOSSEGURANÇA A Biossegurança é o conjunto de procedimentos, ações, técnicas, metodologias, equipamentos e dispositivos capazes de eliminar ou minimizar riscos inerentes às atividades de pesquisa, produção, ensino, desenvolvimento tecnológico e prestação de serviços, que podem comprometer a saúde do homem, dos animais, do meio ambiente ou a qualidade dos trabalhadores desenvolvidos (TEIXEIRA; VALLE, 1996). As medidas de biossegurança devem ser adotadas por laboratórios e associada a um plano de educação, com base nas normas nacionais e internacionais de transporte, conservação e manipulação de micro-organismos patogênicos, garantindo assim a segurança e integridade vital dos funcionários. 1. BOAS PRÁTICAS INDIVIDUAIS A norma ABNT (Associação Brasileira de Normas Técnicas) NBR 14785:2001 trata dos requisitos de segurança em laboratórios clínicos aplicáveis a todo o território nacional. Com base nessas normas, recomendação as seguintes precauções: • Proibir alimentos, bebidas e fumo na área técnica do laboratório; • Armazenar alimentos ou bebidas exclusivamente em áreas de alimentação; 3 • Não colocar na boca quaisquer materiais ou objetos empregados no ambiente de trabalho, tais como caneta, lápis, envelopes, etc. • Jamais pipetar com a boca; • Não fazer aplicação de cosméticos e maquiagens na área de coleta; • Prender, proteger os cabelos e barbas durante a jornada de trabalho; • Limpar e aparar as unhas e caso sejam utilizados esmaltes, preferir aqueles de cores claras; • Evitar o uso de correntes compridas no pescoço, brincos grandes ou braceletes soltos; • Lavar as mãos após o manuseio de qualquer material biológico. Os métodos de segurança que são utilizados durante a manipulação de materiais infecciosos dentro de laboratório, são descrito como “contenção”, tendo como objetivo principal a redução ou minimização de exposição a riscos dos profissionais que atuam no ambiente quanto aos que trabalham próximos seja na bancada ou com o que faz a limpeza do local. Para isso, torna-se necessária uma análise dos riscos e das atividades a serem desenvolvidas no espaço, isto é, os agentes químicos e biológicos a serem manipulados. Para tal são criados os mapas de riscos. O mapa de riscos é composto de círculos de variados tamanhos e cores diferentes que identificam os locais e os fatores de riscos associados a situações de risco em função da presença de agentes físicos, químicos, biológicos, ergonômicos e de acidentes. A seguir a Tabela 1 apresenta os tipos de riscos e a cor associada a cada um, respectivamente. 4 Tabela 1: Classificação dos principais riscos ocupacionais, de acordo com a sua natureza e a padronização das cores correspondentes Na caracterização dos riscos, ainda podem ser evidenciados a intensidade do grau de risco por meio da utilização de círculos com diferentes tamanhos, como pode ser observado na Figura 1. Figura1 – Círculos evidenciando a intensidade dos riscos. Fonte: http://www.biotecnologia.com.br/revista/bio36/lab_36.pdf 5 2. EQUIPAMENTOS DE PROTEÇÃO INDIVIDUAL (EPI) O Equipamento de Proteção Individual - EPI é todo dispositivo ou produto, de uso individual utilizado pelo trabalhador, destinado a proteção contra riscos capazes de ameaçar a sua segurança e a sua saúde. São exemplos de EPI: • UNIFORMES: obrigatoriamente protegido com avental de mangas longas, fechado na frente e longo (abaixo dos joelhos). Utilizar o uniforme recomendado pelo empregador, na área de coleta. Na ausência de um uniforme padrão, é recomendável utilizar um jaleco de tecido lavável ou descartável, longo e de mangas compridas, que alcance o nível do joelho, o qual deverá ser sempre retirado ao sair da área de coleta do laboratório, não sendo correto o seu uso nas áreas de alimentação; • SAPATOS: exclusivamente fechados. Não deve ser permitido o uso de sandálias dentro de área hospitalar e laboratorial. • ROUPAS PROTETORAS: avental exclusivamente de manga longo, permanentemente fechado. Deve ser usado no interior do laboratório, e deve permanecer no vestuário técnico, não devendo ser usado em áreas públicas como: bares, lanchonetes, banco, etc. • ÓCULOS: devem ser usados para todas as áreas nas atividades de risco, como manipulação de produtos biológicos potencialmente contaminados, produtos químicos, além daquelas que portam risco de radiação e/ ou iluminação (uso de óculos especiais em presença de lâmpada U.V.). Existem diversos modelos de óculos de proteção e cada qual se adapta às atividades desenvolvidas: óculos de proteção contra radiação ultravioleta; óculos de proteção contra gases e vapores; óculos de proteção contra produtos químicos. • MÁSCARAS: devem ser usadas sempre que manipuladas substâncias químicas como alto teor de evaporação (além de serem manipuladas em capelas de exaustão), e em áreas de alta contaminação com produtos biológicos. As máscaras podem e devem ser usadas também no sentido de não contaminarmos o ambiente 6 (isolamento reverso, centro cirúrgico, etc.). • LUVAS: obrigatórias na manipulação de qualquer material biológico, e com determinados produtos químicos. Devem ter formato anatômico, boa resistência e oferecer conforto e destreza ao usuário. A seguir estão alguns tipos de luvas e sua utilização: a) Luvas butílicas: Usadas no contato com cetonas e ésteres. b) Luvas de borracha natural (látex): Usadas para trabalhos gerais, manipulação de bases, alcoóis, soluções aquosas diluídas, aldeídos e cetonas. c) Luvas Kevlar® (marca registrada da DuPont): Fornecem proteção contra cortes, abrasão e calor. d) Luvas de Neoprene (borracha de policloropropeno): Excelentes para ácidos e álcalis. e) Luvas Nitrílicas: Resistentes a abrasão, perfuração e corte. f) Luvas de PVA (polivinilálcool): Resistentes a compostos orgânicos aromáticos, alifáticos, solventes clorados, ésteres e cetonas (exceto acetona). g) Luvas de PVC (cloreto de polivinila): Usadas no contato com bases e ácidos fortes, soluções aquosas, sais e alcoóis. Possui baixa resistência aos solventes. h) Luvas Spectra (fibra de vidro): Resistentes a abrasão e cortes. i) Luvas de vinil: Uma alternativa para os usuários alérgicos ao látex natural. j) Luvas Viton® (elastano fluorada - marca registrada da DuPont): Usadas no manuseio de aromáticos, solventes clorados, alifáticos e alcoóis. Não recomendadas para cetona, ésteres e aminas. Algumas informações adicionais: • Não se recomenda o uso dos equipamentos de proteção individual fora do perímetro onde seu uso está indicado; 7 • Recomenda-se sempre a utilização de luvas durante o ato da coleta. As trocas necessitam ser efetuadas quando houver qualquer situação de contaminação com material biológico; • Sempre que necessário, lavar as mãos, e em seguida, colocar luvas novas; • Não manusear objetos de uso comum (telefone, maçanetas, copos, xícaras, etc) enquanto estiver usando luvas; • Nunca descartar as luvas nas lixeiras de uso administrativo; • Utilizar máscaras quando o ato da coleta do material biológico sugerir risco de contaminação pela formação de gotículas ou aerossóis; • Utilizar sapatos totalmentefechado em toda a área do laboratório. 3. NÍVEIS DE BIOSSEGURANÇA (NB) Observando as diretrizes do Ministério da Saúde, foram determinados 4 níveis de biossegurança conforme os cuidados necessários para contenção do tipo de agente patológico: – NÍVEL DE BIOSSEGURANÇA 1 - NB-1: necessário ao trabalho com os agentes biológicos da Classe de Risco I; recomenda-se utilização de equipamentos de proteção adequados e observação das Boas Práticas de Laboratórios e Clínicas da Escola da Saúde da UnP. – NÍVEL DE BIOSSEGURANÇA 2 - NB-2: exigido para o desenvolvimento de trabalhos com agentes da Classe de Risco II; são aplicados a laboratórios clínicos e hospitalares de níveis primário de diagnósticos, onde, além da adoção das boas práticas, se faz necessária a contenção através de barreiras físicas primárias (EPIs e cabines de segurança biológica) e secundárias (projeção adequada do laboratório de acordo com a legislação vigente). – NÍVEL DE BIOSSEGURANÇA 3 - NB-3: destinado ao trabalho com microorganismos da Classe de Risco III e grandes volumes e altas concentrações de agentes da Classe de Risco II; são exigidas medidas de contenção física primária e secundária, devendo o laboratório ser projetado e construído de forma especial para contenção de agentes de alto risco; deve ser mantido sob controle rígido de vigilância, inspeção e manutenção, e o 8 corpo técnico deve receber treinamento específico sobre biossegurança e manipulação desses microorganismos. – NÍVEL DE BIOSSEGURANÇA 4 - NB-4: nível de segurança máxima para desenvolvimento de trabalhos com agentes da Classe de Risco IV; essas unidades devem ser projetadas em áreas isoladas e funcionalmente independentes de outras áreas; requer todas as exigências já citadas além de procedimentos de segurança especiais. 4. CLASSIFICAÇÃO DOS RESÍDUOS DE SAÚDE A RDC (Resolução da Diretoria Colegiada) ANVISA (Agências Nacional de vigilâncias Sanitária) n.306 de 7 de dezembro de 2004, no seu apêndice I, classifica os resíduos de saúde conforme segue: GRUPO A: resíduos com possível presença de agentes biológicos que, por suas características, podem apresentar risco de infecção; GRUPO B: resíduos contendo substâncias químicas que podem apresentar riscos à saúde pública ou ao meio ambiente, dependendo de suas características de inflamabilidade, corrosividade, reatividade e toxicidade; GRUPO C: qualquer material resultante de atividades humanas que apresentem radionuclídeos em quantidades superiores aso limites de isenção especificados nas normas do CNEM (Comissão Nacional de Energia Nuclear) e para os quais a realização é imprópria ou não prevista; GRUPO D: resíduos que não apresentem riscos biológico, químico ou radiológico à saúde ou ao meio ambiente, podendo ser equiparados aso resíduos domiciliares; GRUPO E: material perfuro cortantes, tais como: agulhas, escalpes, ampolas de vidro, lâminas de bisturi, lancetas, tubos capilares, lâminas e lamínulas de vidro, utensílios de vidro quebrados no laboratório( pipetas, tubos de coleta, tubos de ensaio). 9 NORMAS DE SEGURANÇA O manuseio de equipamentos e materiais em laboratórios sempre apresenta risco. A ocorrência de acidentes em laboratórios, infelizmente, não é rara. Com a finalidade de diminuir a frequencia e a gravidade desses eventos, torna-se imprescindível que durante os trabalhos se observe uma série de normas de segurança: 1. O laboratório é um local de trabalho sério. Execute as tarefas com atenção, método e calma. 2. Prepara-se antes da realização de cada aula, lendo os conceitos referentes ao assunto a ser abordado e a seguir leia o roteiro de prática. 3. Faça apenas o que se é indicado nos roteiros de práticas. Não faça misturas de reagentes por sua própria iniciativa. Consulte o professor sempre que tiver dúvidas quanto ao uso de algum reagente. 4. Use sempre um jaleco apropriado, calçados totalmente fechados e mantenha os cabelos sempre amarrados. 5. Não se deve comer ou beber em um laboratório, pois há o risco de ingestão de substâncias tóxicas. 6. Não se deve fumar em um laboratório, pois existe a possibilidade de provocar incêndio. 7. Não trabalhe com material imperfeito. 8. Se algum ácido ou qualquer outro produto químico for derramado, informe imediatamente ao professor. 9. Evite o contato de qualquer substância com a pele (evite passar os dedos na boca, nariz, olhos e ouvidos). Se alguma substância cair em sua pele, lavar imediatamente com água em abundância. Seja particularmente cuidadoso quando for manipular substâncias corrosivas como ácidos e bases concentradas. 10. Nunca tente sentir o sabor de algum produto químico ou solução. 10 11. Quando for testar um produto químico pelo odor (ex. amônia) não coloque seu rosto diretamente sobre o recipiente que o contém. Você deverá, com sua mão, deslocar um pouco do vapor que se desprende do recipiente em direção ao seu nariz. 12. Não deixe vidro quente em um local em que possam pegá-lo inadvertidamente. 13. Só deixe sobre a mesa o bico de gás aceso quando estiver sendo utilizado. 14. Tenha cuidado com os reagentes inflamáveis. Não os manipule na presença de fogo. 15. Ao término dos trabalhos onde haja aquecimento, feche com cuidado as torneiras de gás a fim de evitar escapamento. 16. Os tubos de ensaio contendo líquidos devem ser aquecidos pela parte do meio e não pelo fundo e utilize pinça de madeira para essa finalidade. Quando aquecer uma substância em um tubo de ensaio não volte a extremidade aberta do mesmo para si ou para qualquer pessoa próxima. 17. Não jogue nenhum material sólido dentro da pia ou nos ralos e sim nos cestos de lixo. 18. Todo o material líquido será descartado no refugo, nunca na pia. 19. O material biológico deverá ser descartado em frascos destinados para o mesmo. 20. O material perfuro-cortante e escarificantes como lâminas, lamínulas, vidrarias, seringas, bisturis, entre outros, devem ser descartados separadamente, no local de sua geração, imediatamente após o uso ou necessidade de descarte, em recipientes, rígidos, resistentes à punctura, ruptura e vazamento, com tampa, devidamente identificados. As agulhas descartáveis devem ser desprezadas juntamente com as seringas, quando descartáveis, sendo proibido reencapá-las ou proceder a sua retirada manualmente. 11 21. Leia com atenção o rótulo do frasco do reagente antes de usá-lo a fim de certificar-se que está utilizando o frasco correto. Segure o frasco pelo lado que contém o rótulo, evitando assim que o reagente escorra sobre ele. 22. Todos os experimentos que envolvem a liberação de gases ou vapores tóxicos devem ser realizados na capela química. 23. Sempre que for diluir um ácido concentrado, adicione-o lentamente e sob agitação, sobre a água e nunca faça o contrário. 24. Quando qualquer frasco de reagente for aberto, deve-se colocar sua tampa, sobre a mesa, virada para cima ou segurá-la entre os dedos a fim de se evitar contaminação. Após o uso, fechar novamente o frasco. 25. Uma porção de qualquer reagente retirada do frasco estoque, jamais poderá retornar ao mesmo. O aluno deverá aprender a estimar a quantidade que necessita, para evitar desperdícios. 26. No caso de reagentes sólidos, uma espátula deverá ser usada para retirar um reagente de um frasco e essa espátula não poderá ser utilizada para a manipulação de outro reagente, a não ser que a mesma seja devidamente lavada e seca. 27. No caso de reagentes líquidos, não introduzir pipetas, conta-gotas, etc nos frascos que o contém. Verter o reagente líquido para um recipiente para que possa ser pipetado. 28. Localize extintores de incêndio e familiarize-se com seu uso. 29. Certifique-se do bom funcionamento dos chuveiros e lava olhosde emergência. 30. Sempre que necessário, trabalhe com óculos de proteção. 31. Dedique especial atenção a qualquer operação que necessite de aquecimento prolongado ou desenvolva grande quantidade de energia. 12 32. Ao se retirar do laboratório, verifique se não há torneiras (água ou gás) abertas. Desligue todos os aparelhos, deixo o equipamento limpo e nos seus devidos lugares. 33. Lave sempre as mãos. CONCEITOS BÁSICOS � AEROSSÓIS: solução coloidal em forma de gotas que se dispersam no ar; � AMOSTRAS BIOLÓGICAS: são materiais de origem humana ou animal (ex.: excrementos, secreções, sangue e derivados, tecidos e líquidos orgânicos) com fins experimentais ou diagnósticos; � ANTI-SÉPTICO: agente químico ou físico utilizado para desinfecção de tecido vivo, capaz de destruir ou inibir o crescimento de microorganismos na área aplicada; � DESCONTAMINAÇÃO: destruição ou remoção (total ou parcial) de microorganismos dos artigos e superfícies; � DESINFECÇÃO: destruição ou inibição do crescimento de microorganismos patógenos não esporulados ou em estado vegetativo, de superfícies; � EPI: Equipamento de Proteção Individual: luvas, máscaras, jalecos, óculos de proteção, aventais, botas ou outro tipo calçado apropriados, tocas, etc.; � EPC: Equipamentos de Proteção Coletiva: extintores, sinalização adequada (mapas de risco), chuveiros e lava-olhos, chuveiros contra-incêndio, capelas, manta ou cobertor, vaso de areia, etc.; � ESTERILIZAÇÃO: processo de destruição de todos os microorganismos, incluindo os esporos; � LIMPEZA: processo de remoção de sujidade; � MATERIAL BIOLÓGICO: todo material que contenha informação genética e seja capaz de auto-reprodução ou de ser reproduzido em um sistema biológico. 13 Inclui os organismos cultiváveis e agentes (entre eles bactérias, fungos filamentosos, leveduras e protozoários); as células humanas, animais e vegetais, as partes replicáveis destes organismos e células (bibliotecas genômicas, plasmídeos, vírus e fragmentos de DNA clonado), príons e os organismos ainda não cultivados; � PATOGENICIDADE: capacidade de um agente biológico causar doença em um hospedeiro suscetível; � RESÍDUOS HOSPITALARES: restos de material biológico que deve ser descartado em recipientes e locais apropriados para receber o lixo hospitalar; � SANITIZAÇÃO: processo destinado à redução da maioria das bactérias patogênicas presentes; � SUBSTÂNCIAS INFECTANTES: são apresentações que contêm microrganismos viáveis (tais como bactérias, vírus, riquétsias, parasitas, fungos ou microrganismos recombinantes, híbrido ou mutante) sabidamente capazes de provocar doença ao homem ou animais. ROTULAGEM – SIMBOLOGIA É necessário observar bem os rótulos dos produtos e manuais de equipamentos contidos nos laboratórios, antes de manipulá-los. Nos rótulos das substâncias químicas constam especificações sobre a composição e os perigos que estas podem oferecer. Muitas vezes, essas informações se apresentam simbolizadas, seguindo um padrão pré-estabelecido. A seguir, apresentam-se a simbologia padrão constante nesses produtos, a que estão associados e algumas precauções que devem ser adotadas para utilização e armazenamento dos mesmos. 1. FACILMENTE INFLAMÁVEL (F) - Classificação: determinados peróxidos orgânicos; líquidos com pontos de inflamação inferior a 21ºC, substâncias sólidas que são fáceis de inflamar, de continuar queimando por si só; liberam substâncias facilmente inflamáveis por ação de umidade. - Precaução: evitar contato 14 com o ar, a formação de misturas inflamáveis gás-ar e manter afastadas de fontes de ignição. 2. EXTREMAMENTE INFLAMÁVEL (F +) - Classificação: líquidos com ponto de inflamabilidade inferior a 0ºC e o ponto máximo de ebulição 35ºC; gases, misturas de gases (que estão presentes em forma líquida) que com o ar e a pressão normal podem se inflamar facilmente. - Precauções: manter longe de chamas abertas e fontes de ignição. 3. TÓXICOS (T) - Classificação: inalação, ingestão ou absorção através da pele, provoca danos à saúde na maior parte das vezes, muito graves ou mesmo letais. - Precaução: evitar qualquer contato com o corpo humano e observar cuidados especiais com produtos cancerígenos, teratogênicos ou mutagênicos. 4. MUITO TÓXICO (T +) - Classificação: inalação, ingestão ou absorção através da pele, provoca danos à saúde na maior parte das vezes, muito graves ou mesmo letais. - Precaução: evitar qualquer contato com o corpo humano e observar cuidados especiais com produtos cancerígenos, teratogênicos ou mutagênicos. 5. CORROSIVO (C) - Classificação: por contato, estes produtos químicos destroem o tecido vivo, bem como vestuário. - Precaução: não inalar os vapores e evitar o contato com a pele, os olhos e vestuário. 6. OXIDANTE (O) - Classificação: substâncias comburentes podem inflamar substâncias combustíveis ou acelerar a propagação de incêndio. - Precaução: evitar qualquer contato com substâncias combustíveis. Perigo de incêndio. O incêndio pode ser favorecido dificultando a sua extinção. 7. NOCIVO (Xn) - Classificação: em casos de intoxicação aguda (oral, dérmica ou por inalação), pode causar danos irreversíveis à saúde. - Precaução: evitar qualquer contato com o corpo humano, e observar cuidados especiais com produtos cancerígenos, teratogênicos ou mutagênicos. 15 8. IRRITANTE (Xi) - Classificação: este símbolo indica substâncias que podem desenvolver uma ação irritante sobre a pele, os olhos e as vias respiratórias. - Precaução: não inalar os vapores e evitar o contato com a pele e os olhos. 9. EXPLOSIVO (E) - Classificação: indica substâncias que podem explodir sob determinadas condições. - Precaução: evitar atrito, choque, fricção, formação de faísca e ação do calor. De acordo com a legislação de Biossegurança, são também utilizados símbolos, tais como representados na figura 2, designados como pictogramas. Figura 2. Pictogramas utilizados de acordo com a legislação de biossegurança Fonte: goo.gl/EzpGWG O diagrama de Hommel, mundialmente conhecido pelo código NFPA 704, mas também conhecido como diamante do perigo ou diamante de risco. É uma simbologia empregada pela Associação Nacional para Proteção contra Incêndios (em inglês: National Fire Protection Association), dos Estados Unidos da América. Nela, são utilizados quadrados que expressam tipos de risco em graus que variam 16 de 0 a 4, cada qual especificado por uma cor (branco, azul, amarelo e vermelho), que representam, respectivamente, riscos específicos, risco à saúde, reatividade e inflamabilidade. Tabela 2- Diagrama de Hommel Quando utilizada na rotulagem de produtos, ela é de grande utilidade, pois permite num simples relance, que se tenha ideia sobre o risco representado pela substância ali contida ( figura 3 e 4). Figura 3- Classificação de riscos de produtos químicos Fonte: goo.gl/aoPPhWcontent_copy 17 Figura 4 – Pissetas mostrando a classificação de risco de acordo com o diagrama de Hommel Fonte: goo.gl/tUQF2Ocontent_copy 18 AULA 02 NOÇÕES BÁSICAS DE PRIMEIROS SOCORROS NO LABORATÓRIO QUÍMICO INTRODUÇÃO Um laboratório pode ser uma das áreas de trabalho mais perigosas, especialmente quando não é tratado com cautela. Entretanto, caso tais acidentes aconteçam, o primeiro procedimento a se fazer é por em prática medidas, adequadas, que possam minimizar as conseqüências para o acidentado ou vítima, o que pode determinar, até mesmo, sua sobrevida. Essas condutas são os primeiros socorros, que devem ser tomados com segurança e rapidez, imediatamente após a ocorrênciade um acidente, com finalidade de preservar a vida, minimizar os efeitos da lesão e promover a recuperação de uma pessoa que se acidentou (vítima). Porém, nem todas as pessoas são aptas a prestá-los, pois nas diversas situações em que eles se dão pode haver excessiva ansiedade, susto, mal estar entre outros nos socorristas (indivíduos que prestam os primeiros socorros), comprometendo assim o atendimento. Com isso, recomenda-se treinamento periódico e atualizado, principalmente aos que convivem frequentemente nos laboratórios, como um fator de garantia do sucesso de desse procedimento, que precisa ser aplicado em casos específicos. Ademais, é de suma importância que haja nos laboratórios: números e endereços de serviços de resgate e emergência – como o do corpo de bombeiros, pronto-socorro, polícia, hospitais, médicos, além dos serviços de gás, eletricidade e água – para que outras decisões e tratamentos possam ser buscados, observando- se que os primeiros socorros são serviços de caráter emergenciais. ACIDENTES NO LABORATÓRIO QUÍMICO Os acidentes mais comuns que podem ocorrer em um laboratório são vertigens, queimaduras, cortes, envenenamentos e substâncias químicas nos olhos. Alguns equipamentos devem estar facilmente acessíveis aos laboratórios como: extintor de incêndio; lava-olhos; chuveiros de emergência; caixa de primeiros socorros; lavatório para queimaduras de ácidos ou de álcalis. 19 Todos os acidentes de laboratório devem ser obrigatoriamente, comunicados aos responsáveis, quer tenham recebido tratamento especializado. Também é importante que a pessoa acidentada e remetida a tratamento especializado tenha um acompanhamento. Abaixo estão relacionados alguns lembretes importantes para auxiliar nos procedimentos de primeiros socorros: a) Evitar, sempre que possível tocar em ferimentos com as mãos e peças de roupas com resíduos corpóreos (sangue, vômito, entre outros); b) Em caso de desmaio, deitar o indivíduo de costas, com a cabeça mais baixa que o corpo, fazendo- o respirar amoníaco ou vinagre; c) Em caso de sinais de desmaio sentar o indivíduo e curvar sua cabeça entre as pernas, fazendo-o respirar profundamente; d) Em caso de hemorragias, fazer compressão do ferimento com gaze limpa e dependendo do local do ferimento, esta compressão poderá ser feita diretamente ou a certa distância do mesmo; e) Em caso de contato da pele com substâncias químicas promover uma lavagem abundante do local com água, caso o material seja com patível com a mesma; f) Em caso de queimaduras por contato ou respingos, providenciar a lavagem da área com água fria, por um período de pelo menos 15 minutos, encaminhando em seguida o acidentado ao socorro médico mais próximo. Abaixo estão dispostos alguns venenos usuais e os sinais ou sintomas induzidos por eles: • Ácidos e álcalis: queimam e corroem os tecidos em que entram em contato e, em casos extremos, podem fazer um orifício na parede estomacal. • Álcool: Atua como enérgico depressor do sistema nervoso central. • Cianeto: pode provocar o colapso da vítima. A morte é rápida em conseqüência da paralisia respiratória. Pode ser ingerido ou absorvido por um ferimento ou através da pele. É usado em certos formicidas. • Cianeto e monóxido de carbono: provoca a morte por asfixia em 20 virtude de combinação com o sistema carreador do oxigênio no sangue, o que impede a transferência do oxigênio para partes vitais do organismo humano. • Sulfeto de hidrogênio: gás inflamável e venenoso, com cheiro de “ovo estragado”; perceptível na diluição de 0,002 mg/l de ar. Muito perigoso por provocar o colapso, o coma e a morte em alguns segundos depois de apenas uma ou duas inspirações. É insidioso já que o olfato fica insensível ao seu cheiro depois de exposição prolongada. As concentrações mais baixas provocam irritação das mucosas, dor de cabeça, enjôo e fadiga. • Chumbo: o envenenamento agudo pelo chumbo pode provocar anorexia, vômitos, mal-estar, convulsões e injúria permanente no cérebro. Os casos crônicos evidenciam-se pela perda de peso, fraqueza e anemia. • Mercúrio: perigoso por ser razoavelmente volátil (pressão de vapor de 0,002 mmHg a 25ºC) e facilmente assimiláveis pelas vias respiratórias, pela pele e pelo tubo digestivo. O envenenamento agudo pelo metal, ou seus sais provoca ferimentos na pele e nas mucosas, náusea aguda, vômitos, dores abdominais, diarréia sanguinolentas, lesões nos rins e morte num lapso de dez dias. O envenenamento crônico provoca inflamação da mucosa bucal e das gengivas, salivação abundante, queda dos dentes, lesões nos rins tremores musculares, espasmos, depressão e brutas alterações de personalidade, irritabilidade e nervosismo. Antídoto: dimercaprol (BAL: Britsh anti-lewisite). • Álcool metílico: Tem um efeito especifico de degeneração do nervo óptico que pode provocar lesão permanente e cegueira, mesmo quando a quantidade assimilada tiver sido pequena. • Fenilhidrazina: Provoca a hemólise dos eritrócitos. • Piretrina: Encontrado em certos inseticidas. Provoca hiperexcitabilidade, descoordenação e paralisia dos músculos e das ações respiratórias. • Nitrato de prata: O contato com a pele ou com as mucosas pode ser cáustico e irritante. A ingestão pode causar severa gastroenterite e até a morte. 21 PROCEDIMENTOS ESPECÍFICOS DE PRIMEIROS SOCORROS VERTIGENS No estado de inconsciência, devem-se evitar aglomerações em torno do paciente, levá-lo para um lugar mais arejado e afrouxar sua roupa ao redor do pescoço. Deve-se deixá-lo sentado com a cabeça entre as pernas ou deitá-lo de costas com a cabeça mais baixa que o corpo. Não se deve administrar nada por via oral, sendo recomendável induzir uma inalação de amoníaco ou vinagre. Quando o paciente voltar a si, oferecer um estimulante, como café ou chá, por exemplo. QUEIMADURAS As queimaduras podem ser provocadas por fontes produtoras de calor ou frio, substâncias químicas ácidas ou básicas e até mesmo por choques elétricos. A mais comum delas é queimadura pelo calor seco (fogo). São classificadas de acordo com a extensão e a profundidade em que acometem os tecidos do corpo. As queimaduras de primeiro grau geralmente são causadas por exposição ao sol e deixam a pele avermelhada. Esse tipo de queimadura atinge as camadas superficiais da pele, sendo geralmente seca ou com pequenas bolhas, com inchaço e dor. As queimaduras de segundo grau são causadas por exposição limitada a líquidos, fogo ou agentes químicos e deixam a pele rosada. Esse tipo de queimadura atinge camadas mais profundas, sendo caracterizadas pela presença de inúmeras bolhas com descamação e dor mais intensa. As queimaduras de terceiro grau são ocasionadas por exposição prolongada ao fogo, objetos quentes, agentes químicos ou por choque elétrico. São brancas e translúcidas. Esse tipo de queimadura atinge todas as camadas da pele, e ainda podem atingir tecidos adjacentes e nervos, sendo caracterizadas pela ausência de bolhas, trombose dos vasos superficiais e insensibilidade. Existem alguns procedimentos a serem adotados para cada tipo de queimadura no 22 laboratório de química: a)- Queimaduras causadas por calor seco (chama e objetos aquecidos): No caso de queimaduras leves, aplicar pomada. No caso de queimaduras graves, elas devem ser cobertas com gaze esterilizada umedecida com solução aquosa de bicarbonato de sódio à 5% ou vaselina estéril. Se a queimadura for de pouca extensão, resfriar o local com água fria imediatamente, antes de aplicar a pomada ou a gaze. Se a queimadura for extensa ou de 3º grau, procurar um médico imediatamente. b)- Queimaduras por ácidos: Lavar imediatamente o local com água em abundância, durante cerca de cinco minutos.Em seguida, lavar com solução saturada de bicarbonato de sódio e novamente com água e secar a pele. Se os olhos forem atingidos, lavar com bicarbonato de sódio a 1%, se o ácido for diluído; se for concentrado, lavar primeiro com água por 15 minutos, depois com a solução de bicarbonato de sódio.Procurar o médico imediatamente. c)- Queimaduras por álcalis: Lavar a região atingida imediatamente com bastante água durante cinco minutos. Tratar com solução de ácido acético 1% e novamente lavar com água e secar a pele. Se os olhos forem atingidos, lavar com ácido bórico a 1%, para álcalis diluídos e água seguida de solução de ácido bórico a 1%para álcalis concentrados. Procurar o médico imediatamente. CONTATO COM REAGENTES a) Contato de reagentes com olhos: No caso de contato de um produto químico com os olhos, boca ou pele, lavar 23 abundantemente com água. A seguir, procurar o tratamento específico para cada caso. b) Contato de reagentes com a pele: Se algum ácido ou produto químico for derramado, lavar olocal imediatamente. c) Corpos estranhos nos olhos: Com muito cuidado lavar os olhos abundantemente com água limpa e após manter a pálpebra fechada. CORTES E FERIMENTOS a)- Cortes Pequenos: Deixar sangrar por alguns segundos, verificar se há ainda fragmentos de vidro, desinfetar o local e colocar atadura. b)- Cortes Maiores: Desinfetar e procurar estancar o sangue, fazendo pressão logo acima do corte, no máximo cinco minutos, se necessário,procurar um médico. c)-Fragmentos de vidro nos olhos: Remover os pedaços maiores com todo o cuidado possível, usando pinça ou lavando o olho com água. Chamar imediatamente um médico. INTOXICAÇÃO POR GASES A inalação de gases asfixiantes químicos impede a obtenção de oxigênio do ar atmosférico, ou ainda, a utilização do O2 pelos tecidos. Os mais conhecidos são o monóxido de carbono (CO) e o cianeto (CN). O CO é um gás inodoro, incolor, insípido, mais leve que o ar e produzido pela combustão incompleta de material orgânico (petróleo, gás natural, explosivos, madeira e carvão). Ele promove a asfixia por reduzir a capacidade da hemoglobina de transportar o O2 através da formação da carboxihemoglobina. Os sintomas dessa intoxicação são cefaléia, tontura, confusão mental, náuseas, vômitos, choque, coma e morte, de acordo com a quantidade de CO inalado. O CN tem a propriedade tóxica de inibir as enzimas da cadeia respiratória, o que 24 impede a utilização do oxigênio pelas células, com consequente asfixia Quando ocorrer a inalação de gases tóxicos no laboratório, deve-se remover a vítima para um ambiente arejado, deixando-a descansar e afrouxar as roupas que cobre a região do pescoço e do tórax. INGESTÃO DE SUBSTÂNCIAS TÓXICAS. Se houver ingestão de substâncias tóxicas no laboratório em quantidade pouco significante ou de uma substância de baixa toxicidade, a conduta indicada é de não se tentar a retirada da mesma. Estudos controlados têm demonstrado que na grande maioria das situações, a tentativa de se retirar o tóxico pode ser prejudicial ao paciente. Administrar uma colher de sopa de antídoto universal, que é constituído de: duas partes de carvão ativado, uma de dióxido de magnésio e uma de ácido tânico. INCÊNDIOS Além de materiais usualmente inflamáveis (madeira, cortiça, gás, o próprio vestuário, cabelos) todo laboratório contém solventes altamente inflamáveis (éter, acetona, álcool, benzeno e outros). Em caso de incêndio: a) Se for um acidente de pequenas proporções, abafar imediatamente com uma toalha; b) Fechar os bicos de gás e desligar aparelhos elétricos das proximidades; c) Apagar o fogo com extintor de incêndio; d) Colocar-se em segurança. 25 AULA 03 RECONHECIMENTO DE VIDRARIA E MATERIAL UTILIZADOS EM LABORATÓRIO OBJETIVOS: � Reconhecer a vidraria utilizada em laboratórios; � Reconhecer alguns equipamentos utilizados em laboratórios. � • VIDRARIAS, INSTRUMENTOS E ACESSÓRIOS UTILIZADOS EM LABORATÓRIO Tubo de ensaio: utilizado principalmente para efetuar reações químicas em pequena escala. Pode ser aquecido, com cuidado, diretamente sobre a chama do bico de Bunsen, sempre sob agitação. Estante para tubos de ensaio: confeccionado em madeira ou metal (aço inox, alumínio, etc.), usado como suporte para tubos de ensaio. Possui diferentes diâmetros e alturas para diferentes espessuras e comprimento de tubos. Pode ser levada à estufa e, em alguns casos à Câmara fria. Béquer: recipiente com ou sem graduação, utilizado para dissolver substâncias, efetuar reações, aquecer líquidos, efetuar pesagens, deixar substâncias em repouso, etc. Pode ser aquecido sobre tripé e tela de amianto. Erlenmeyer: utilizado para dissolver substâncias, fazer titulações, aquecer líquidos. Pode ser aquecido sobre tripé e tela de amianto. Proveta ou cilindro graduado: usado pra medidas aproximadas de volumes de líquidos. Não pode ser aquecido. 26 Pipetas manuais: recipientes calibrados utilizados para medida precisa de volumes de líquidos. Existem dois tipos: a) graduadas – escoa volumes variados de líquidos; b) volumétrica – escoa volumes fixos de líquidos. Não podem ser aquecidas. Pipetas de Pasteur: recipiente utilizado para efetuar a transferência de pequenas quantidades de líquidos. Possui apenas abertura inferior e conta com um balão que expulsa o ar quando pressionado. Pipetas automáticas ou eletrônicas: recipiente que possibilita uma medição de líquidos de forma muito precisa. As pontas das pipetas eletrônicas são descartáveis, o que evita a contaminação. Podem ser do tipo monocanal (apenas uma ponteira) ou multicanal (com diversas ponteiras) Bureta: equipamento calibrado para medida precisa de volume de líquidos. Permite o escoamento do líquido e é muito utilizada em titulações. Trata-se de um tubo cilíndrico e graduado que possui uma torneira em uma extremidade. Tal torneira permite controlar a vazão de saída com absoluto rigor e precisão. Balão volumétrico: recipiente de fundo chato, calibrado, de precisão, destinado a conter um determinado volume de liquido, a uma dada temperatura (20°C), podendo ser utilizado sem erro aplicável a temperaturas mais ou menos 8°C acima ou abaixo da indicada. É utilizado no preparo de soluções de concentrações definidas. Possui o traço de aferição situado no gargalo do balão. Balão de fundo chato e de fundo redondo: utilizados para aquecer líquidos e fazer reações com desprendimentos gasosos. Podem ser 27 aquecidos sobre o tripé e tela de amianto. Kitassato: recipiente que apresenta uma saída lateral; é usado em filtração à vácuo. Funil de separação ou de decantação: utilizados para separação de líquidos imiscíveis. Funil de vidro: utilizado para transferência de líquidos ou filtrações simples. Funil de Büchner: funil de porcelana, utilizado em filtração em vácuo, devendo ser acoplado a um Kitassato. Sobre a placa perfurada deve ser colocado um papel de filtro de diâmetro menor que o da placa. Dessecador: utilizado para o armazenamento e resfriamento de sustâncias quando se necessita de uma atmosfera com baixo índice de umidade. Também pode ser utilizado para manter substâncias sob pressão reduzida. Condensadores: usados para condensar os vapores das destilações e nos aquecimentos sob refluxo. Vidro de relógio: utilizado para cobrir béqueres, pesar sólidos e evaporar líquidos. 28 Bastão de vidro ou baqueta: cilindro maciço de vidro, usado para agitar e facilitar as dissoluções, na transferência de líquido, auxilia nas filtrações, etc. Almofariz (gral) e pistilo: utilizados na pulverizaçãoe trituração de sólidos. Suporte Universal: serve para a montagem e sustentação de aparelhos de laboratório. Anel ou argola: serve para a montagem e sustentação de aparelhos de laboratório. Garras: são usadas na sustentação de várias peças, tais como funil, bureta, etc. Tripé: usado para sustentar a tela de amianto. Tela de amianto: tela metálica, contendo amianto, utilizada para distribuir uniformemente o calor durante o aquecimento de recipientes de vidro à chama do bico de gás. Espátulas e colheres: usadas para transferir substâncias sólidas. Podem ser de porcelana, aço inoxidável e níquel. 29 Pinça metálica: usada para segurar objetos aquecidos. Pinça de madeira: usada para segurar tubos de ensaio durante o aquecimento no bico de gás. Bico de gás (Bunsen): fonte de calor destinado ao aquecimento de materiais não inflamáveis. No caso de materiais inflamáveis utiliza-se a manta elétrica. Pisseta ou garrafa lavadoura: recipiente que contém geralmente água destilada. Termômetro: utilizado para medida de temperaturas em sistemas reacionais. Cápsula de porcelana: usada para a concentração e secagem de soluções; serve para efetuar evaporação de líquidos, dissolução à quente, calcinação, secagem e aquecimento. Cadinho: Usado para a calcinação de substâncias (aquecimento a altas temperaturas). • EQUIPAMENTOS UTILIZADOS EM LABORATÓRIO Autoclave: utilizado para esterilizar objetos através de calor úmido (vapor) combinado com pressão Balança: Instrumento para determinação de massa (pesagem). 30 Banho-maria: usado para banho de aquecimento. Geralmente é equipado com um termostato. Bomba de vácuo: utilizada para acelerar as filtrações realizadas sobre vácuo. Capela de Fluxo laminar: equipamento projetado para criar áreas de trabalho estéreis para a manipulação de materiais biológicos ou estéreis que não possam sofrer contaminação do meio ambiente, garantido a segurança da manipulação e do operador. Capela química ou de exaustão: É um equipamento utilizado para realizar trabalhos em materiais no qual produzem vapores tóxicos e nocivos a saúde. Centrífuga: usadas para acelerar a sedimentação. Espectrofotômetro: instrumento de análise capaz de medir e comparar a quantidade de luz (radiação eletromagnética) absorvida, transmitida ou refletida por uma determinada amostra. Estufas: aparelhos elétricos, controlados por termostatos, que permitem temperatura de 40 a 300°C. São empregadas também na secagemde material. Manta de aquecimento: é utilizada para aquecimento controlado. Microscópio óptico: equipamento utilizado para ampliar uma imagem que não pode ser vista a olho nu. Mufla ou forno: produz altas temperaturas. Alcança até 1.500 °C. Placa de aquecimento: fonte de aquecimento para sistemas reacionais diversos, geralmente vem com sistema de agitação magnética. Potenciômetro ou pHmetro: é um aparelho usado para medição de pH. OBS: LIMPEZA � É importante que o usuário do laboratório habitue-se a limpar o material de vidro logo após o término do experimento, enquanto a natureza do resíduo é conhecida. O material de vidro após o uso deve ser lavado com água e 31 detergente com o auxílio de uma escova. Depois de bem enxaguado com água da torneira, enxaguar três vezes com água destilada ou deionizada. Depois de lavado, o vidro deve permitir o escoamento de água sobre sua superfície, sem formar gotas, que indicam a presença de matéria gordurosa. � Antes de ligar um equipamento a uma fonte de energia, observar a voltagem do mesmo. 32 AULA 04 MANUSEIO DE RECIPIENTES VOLUMÉTRICOS Objetivos: � Reconhecer a importância das medidas em química. � Usar corretamente provetas, buretas, balão volumétrico. � Listar cuidados com os diversos tipos de recipientes volumétricos. A medida correta de volume é fundamental para o sucesso do trabalho no laboratório. Para a medida de volumes, a dois tipos de instrumentos graduados e aferidos. Os aferidos medem um único volume e são em geral mais precisos. Os graduados, porém, permitem medir vários volumes, e um deles, a bureta é de alta precisão. De um modo geral, para medidas aproximadas de volumes de líquidos, usam-se provetas, enquanto, para medidas precisas, usam-se pipetas, buretas e balões volumétricos, que constituem o chamado material volumétrico. Os aparelhos volumétricos são calibrados pelo fabricante e a temperatura de calibração é 20°C. O volume é a medida da capacidade de um recipiente em conter um determinado líquido. A sua unidade padrão de medida é o litro. O litro é uma unidade de medida de volume que está veiculada diretamente ao sistema métrico decimal e, por tanto, obedecendo aos seus padrões. É simbolizado pela letra L. Cada Litro corresponde a 1 decímetro cúbico (1 dm3). Em referência ao litro de água, corresponde a aproximadamente 01 quilograma da substância medida. Pode-se observar que cada unidade de volume é dez vezes maior que a unidade imediatamente inferior. Assim podem-se transformar as unidades multiplicando ou dividindo por 10. Nas técnicas laboratoriais, os menores 33 volumes são os mais utilizados e estão na ordem de mililitros (mL) e microlitros (µL). 1 mL = 1000 µL A medida de volume do líquido é feita, comparando o nível do mesmo, com os traços marcados na parede do recipiente. A leitura do nível para líquidos transparentes deve ser feita na parte inferior do menisco, estando a linha de visão do operador, perpendicular à escala graduada (figura 5), para evitar erro de paralaxe (erro que ocorre pela observação errada na escala de graduação causada por um desvio óptico causado pelo ângulo de visão do observador). Figura 5. Realização da leitura em aparelhos volumétricos Fonte: COMPRI-NARDY et al., 2009. As medidas de volumes de líquidos com qualquer dos referidos aparelhos estão sujeita a uma série de erros. Os erros mais comuns são: � Medir volumes de soluções quentes; � Uso de material inadequado para medir volumes; � Uso de material molhado ou sujo; � Formação de bolhas nos recipientes; � Controle indevido na velocidade de escoamento. � Ao final de cada aula, as vidrarias utilizadas durante o trabalho de laboratório devem ser esvaziadas e enxaguadas antes de serem enviadas para limpeza. 34 � Entregar ao técnico ou responsável as vidrarias trincadas, lascadas ou quebradas MANIPULAÇÃO DA PROVETA a) Para realizar a medida nesse aparelho, deve-se utilizar a proveta com a capacidade total mais próxima do volume a ser medido. b) Utilizar na forma vertical e para aferição elevar o menisco até a altura dos olhos; b) Para esvaziar o líquido, vertê-lo, vagarosamente (pode-se usar um bastão de vidro para o bom escoamento, evitando-se que haja o completo escoamento. c) Medir 23 ml de água destilada em uma proveta de 50ml. MANIPULAÇÃO DO BALÃO VOLUMÉTRICO a) Trabalhar com o mesmo na posição vertical; b) Fazer uso de um funil ou um bastão de vidro, para colocar o líquido no balão, o que será feito em etapas, sendo que a cada uma deve-se agitar (homogeneizar) a solução. Isto se consegue através de movimentos circulares lentos com o balão; uma das mãos deverá segurar o gargalo e a outra, a parte inferior do mesmo; c) Colocar o balão sobre a bancada e acertar o menisco com o traço de aferição. Após isto, colocar a tampa e fazer total homogeneização com movimentos lentos, no sentido de rotação. d) Medir 100 ml em um balão volumétrico. MANIPULAÇÃO DA BURETA a) Fixar a bureta, limpa e vazia, num suporte na posiçãovertical; b) Agitar o recipiente que contém o reagente antes de usá-lo, pois não é raro haver, na parte superior do mesmo, gotas de água condensada; c) Colocar um becker ou um erlenmeyer sob a torneira; d) Lavar a bureta duas vezes com porções de cinco ml do reagente em questão, que são adicionadas por meio de um funil; cada porção é deixada escoar completamente antes da adição da seguinte; 35 e) Fechar a torneira e encher a bureta até um pouco acima do zero da escala e remover o funil; f) Segurar a torneira com a mão esquerda e com o auxílio dos dedos polegar, médio e indicador abrir a torneira para retirar todo o ar contido entre a mesma e a extremidade inferior da bureta e encher esta região. Encher a bureta novamente, se necessário, e acertar o menisco com o traço de aferição que fica na parte superior da mesma. Observação: a torneira de uma bureta deve ser levemente lubrificada para que possa ser manipulada com mais facilidade. Serve para este fim uma mistura de partes iguais de vaselina e cera de abelhas; misturas especiais são encontradas no comércio. g) Transferir sucessivamente alíquotas de 1,00 – 2,50 – 5,6 – 10,38 ml para tubos de ensaio. Fazer as leituras à altura dos olhos. h) Encher a bureta novamente e acertar o menisco com o traço de aferição que fica na parte superior da mesma. i) Transferir 20 mL de água da bureta, diretamente para uma proveta de 50 ml. j) Confrontar o volume transferido da bureta (20,00 mL) com o marcado na proveta. Registrar. Exercícios: 1- O que significa a inscrição 20oC presente em vidrarias para medidas de volume? 2- Qual o material mais indicado para: a- Preparar soluções: b- Medir 20 ml de solução ácida: 3- O que significa a inscrição +- 5% presente em algumas vidrarias? 4- Esquematize em desenho e conceitue: a- Menisco superior: b- Menisco inferior: 36 AULA 05 RECONHECIMENTO DE PIPETAS E TÉCNICAS DE PIPETAGEM As pipetas são instrumentos de medição e transferência rigorosa de volumes líquidos. Apresentam boa precisao em relação os demais instrumentos utilizados no laboratório para medir volumes. Há três tipos principais pipetas: PIPETAS GRADUADAS: possuem uma escala para medir volumes variáveis. Corresponde a um tubo graduado uniformemente em seu comprimento. Sua capacidade total é fracionada e dividida em décimos, centésimos ou milésimos. Sua capacidade total e o tipo de fracionamento estão informados na pipeta. Por exemplo, uma pipeta de 2ml fracionada em décimos é descrita como uma pipeta de 2ml 1/10. Significa que a maior medida efetuada por esta pipeta é de 2ml e a menor de 0,1 ml (1/10). Já a pipeta de 2ml fracionada em centésimos é descrita como pipeta de 2ml 1/100. Significa que a maior media efetuada por esta pipeta é de 2ml e a menor de 0,01ml (1/100). A tabela abaixo mostra as principais pipetas graduadas de acordo com sua capacidade total e o tipo de graduação (fracionamento) de cada uma delas: Tabela 3 – Capacidade e tipo de graduação de pipetas graduadas utilizadas em laboratórios. PIPETAS GRADUADAS FREQUENTEMENTE UTILIZADAS NO LABORATÓRIO Capacidade Total Tipo de Graduação 10ml 1/10 5ml 1/10 2ml 1/10 e 1/100 1ml 1/10 e 1/100 Assim como na proveta, deve-se utilizar pipetas graduadas com a capacidade total mais próxima do volume a ser medido. Durante a pipetagem, forma-se um menisco na parte superior da pipeta, onde termina o líquido contido na mesma. A observação do menisco é 37 fundamental para uma pipetagem bem feita. Assim, para líquidos incolores ou corados com transparência, lê-se o nível do líquido na superfície curva que denominamos menisco inferior. Para líquidos coloridos sem transparência lê- se o nível do líquido na superfície plana que denominamos menisco superior. PIPETAS VOLUMÉTRICAS: possuem apenas um traço final, para indicar o volume fixo e final indicado por ela, sendo estas mais rigorosas que as graduadas. É constituída por um tubo de vidro com um bulbo na parte central. O traço de referência é gravado na parte do tubo acima do bulbo. É usada para medir volumes de líquidos com elevada precisão. Não deve ser aquecida. • MANIPULAÇÃO DA PIPETA GRADUADA OU VOLUMÉTRICA: A pipetagem de um líquido (ou de uma solução) deverá ser metódica e cuidadosa. a) Conectar a pipeta uma pera de pipetagem ou um pipetador. b) Colocar uma porção do líquido a ser pipetado em um recipiente (ex. béquer). c) Levar a pipeta até próximo do fundo do recipiente que contém o líquido (ou a solução), tomando o cuidado de não bater a parte inferior da pipeta no fundo do mesmo; d) Fazer a sucção na parte superior da pipeta até notar que o líquido subiu um pouco acima do traço de aferição (fazer este passo devagar para não ir líquido à pera ou ao pipetador); e) Segurar o recipiente que contém o líquido (ou a solução) com a outra mão, de modo que a parte inferior da pipeta toque a sua parede lateral e elevar a pipeta até que o traço de aferição coincida com a altura dos olhos; (deixe escoar o líquido do interior da mesma até se conseguir aferição). f) Levar a pipeta até o recipiente de destino e deixar escoar através da parede lateral do mesmo, até a medida desejada. Cuidado, pois se esse recipiente já contém outro líquido não deixe que a pipeta encoste-se ao líquido já existente. g) Caso reste algum líquido dentro da pipeta, retorne esse líquido ao recipiente anterior. 38 PIPETAS AUTOMÁTICAS OU MICROPIPETAS: A pipeta automática é um aparato composto de uma parte fixa, contendo todos os dispositivos para seu funcionamento, à qual se adapta uma ponteira removível (tip), normalmente de plástico. A parte fixa apresenta um pistão de aço inoxidável capaz de mover-se dentro de um cilindro. O movimento apropriado cria vácuo, fazendo com que o líquido em contato com a ponteira seja aspirado para dentro do cilindro, ocupando o volume antes ocupado pelo ar. A alta exatidão indica que as pipetas automáticas dispensam volumes bastante aproximados do volume indicado no equipamento. A precisão está relacionada à reprodutibilidade de mensurações individuais de um mesmo volume, e também pode ser expressa como um desvio padrão. Quadro 1- Lista de pipetas e volume medido pelas diferentes pipetas fonte: http://labiq.iq.usp.br/ Para utilizar estas pipetas é necessário uma ponteira, de maneira que o líquido aspirado por elas não entra ou não deve entrar no corpo principal da micropipeta, sob risco de adulterá-la e descalibrá-la. • MANIPULAÇÃO DE PIPETAS AUTOMÁTICAS: Para a obtenção de resultados corretos é necessário selecionar a pipeta certa. O volume a ser transferido deve estar dentro da faixa de volume recomendada para a pipeta. Selecionada a pipeta adequada, é necessário ajustar o volume de interesse. Para isso, pegue a pipeta com uma das mãos e gire o botão de ajuste com a outra mão até chegar ao volume desejado. Existe um anel no meio do botão que bloqueia o volume (figura 6). Para o ajuste fino do volume é necessário girar o botão 1/3 acima do volume desejado e voltar lentamente para a configuração exata. Isso aumenta a 39 precisão da medida. Faça isso com todas as pipetas disponibilizadas na bancada do laboratório. Preste atenção ao volume medido em cada pipetagem. Figura 6- Partes da pipeta automáticas O visor indicador de volume geralmente tem três dígitos e é lido na direção do botão de pipetagem para a base (onde se encaixa a ponteira; figura 7). Os três dígitos indicam o volume em microlitros e podem ser coloridos em preto ou vermelho. Se houver esta distinção de cores, os dígitos pretos indicam volumes inteiros e os vermelhos, indicam frações. Os algarismos significativos variam de pipeta para pipeta e são, via de regra, 0,05%do volume máximo da pipeta. Por exemplo, a P-20 chega a 0,01µL e a P-200 a 0,1 µL. 40 Figura 7 - Alinhamento correto do visor da pipeta automática fonte: http://www.ufscar.br/ Depois de ajustado o volume, coloque a ponteira na pipeta de forma que fique bem presa (figura 8). Figura 8 – Forma de encaixe correto da ponteira na pipeta automática fonte: http://www.ufscar.br/ Para pipetar, aperte o botão de pipetagem até sentir o primeiro ponto de resistência. Leve a pipeta com o botão apertado até o recipiente contendo o líquido a ser transferido. Com a pipeta na posição vertical, faça a ponteira imergir de 1 a 6 mm abaixo da superfície do líquido. Para fazer o líquido subir 41 na ponteira, volte lentamente o botão para a posição inicial. Espere alguns segundo até que o líquido ocupe todo o volume. Retire a ponteira do líquido. Se ficarem algumas gotas do lado de fora da ponteira, passe cuidadosamente a ponteira no tubo de onde retirou o líquido para que o mesmo fique no local de origem ou passe um papel no entorno sem encostar-se à abertura da ponteira (figura 9). Figura 9 – Procedimento de pipetagem fonte: http://www.ufscar.br/ Logo após o uso, as ponteiras são descartadas em recipiente apropriado. Para uma pipetagem correta, deve-se observar: • Trocar a ponteira antes de aspirar líquido, amostra ou reagente diferente; • Pressione e solte o botão de modo lento e constante; • NUNCA pipete líquidos onde T > 70°C ou T < 4 °C; • NUNCA vire a pipeta de cabeça para baixo ; • NUNCA deite a pipeta enquanto houver líquido na ponteira; • NUNCA utilize graxa ou silicone no pistão ou selos; 42 • NUNCA tente ajustar o volume acima da especificação. 2 Objetivos: - Reconhecer e diferenciar as pipetas graduadas, volumétricas e automáticas; - Manusear corretamente pipetas graduadas, volumétricas e automáticas; - Responder às questões propostas para a avaliação da aula prática. 3 .Material: - Pipetas graduadas de 10mL, 5mL, 2mL in 1/10, 2mL in 1/100, 1mL in 1/100; pipetadores azuis e verdes, pipetas automáticas de voumes variáveis : 10µL, 20µL, 50µL, 100µL e 500µL,1000µL ponteiras, tubos de ensaio, descarte; - Líquidos corados. 4. Procedimento: 1a. Parte: 1- Observe atentamente todas as pipetas dispostas sobre a mesa. Observe as inscrições existentes. 2- Coloque as pipetas graduadas em ordem crescente de capacidade total, anote esta ordem. 3- Separe as pipetas graduadas de acordo com a divisão da escala. Quais são divididas em: • Décimos: • Centésimos: 4- Compare as escalas de uma pipeta de 2ml in 1/10 e uma de 2ml in 1/100. Quais as observações que podem ser feitas? 43 5- Quantas unidades de graduação encontraram nas pipetas de: a)- 10ml in 1/10 d)- 5ml in 1/10 b)- 2ml in 1/10 e)- 2ml in 1/100 c)- 1ml in 1/10 f)- 1ml in 1/100 6- Qual a pipeta graduada deverá ser usada para medir os seguintes volumes: 0,05ml; 0,20ml; 0,65ml; 0,7ml; 1,50ml e 1,75ml. 7- Observe as pipetas automáticas dispostas sobre a mesa e indique a capacidade de cada uma. 8- Aperte uma pipeta automática e observe os dois estágios que ela apresenta. Para que serve o primeiro estágio? E o segundo estágio? 9- Qual o material mais indicado para: a-Transferir 2,5 ml de um reagente para um tubo de ensaio: b-Medir 20 µl de sangue: 2a. Parte: Efetuar as seguintes pipetagens: 1- Numere dois tubos de ensaio: 01 e 02. 2- Observe a escala da pipeta de 2ml in 1/100. Aspire a solução corada até a indicação de 0,65 da escala graduada e despreze o líquido em um tubo de ensaio número 01. Quantos ml de solução foram na verdade desprezados no tubo de ensaio? 3- Utilizando uma pipeta de 1ml in 1/100, meça um volume de 0,75ml e despreze no tubo de ensaio número 02. Em que parte da escala 44 graduada a solução deverá chegar para que a pipeta contenha então os 0,75ml? 4- Utilizando uma pipeta automática pipete os seguintes volumes: 5µl; 13,5µl; 35µl; 98,3µl; 602µl;1000µl; Avaliação Final da Aula Prática 1- Que diferenças existem entre as pipetas graduadas, volumétricas e automáticas? 2- Quais foram as principais dificuldades encontradas nas técnicas de pipetagem apresentadas? 3- Quais os principais cuidados a serem observados durante a utilização de pipetas graduadas? 4- Quais os principais cuidados a serem observados durante a utilização de pipetas automáticas? 5- Identifique as pipetas correspondentes: a- Mede pequenos volumes fixos da ordem de microlitros: b- Mede volumes fracionados; c- Mede apenas aquele volume que corresponde à capacidade máxima da pipeta: d- Não é medida em volume, mas em milímetros: e- Podem ser lavadas com água: f- Nunca deve ser lavada: g- Usada para medir 5 ml exatos: h- Medir 50 µl: EXERCÍCIOS 1- Faça as conversões abaixo: a- 0,325 l = ................ ml g- 0,5 ml = ................ dl b- 12,37 dl = ................. ml h- 100 µl = ............... ml c- 500 µl = .................. ml i- 50 µl = .................dl d- 713,5 l = .................. dl j- 0,015 ml = ................... µl e- 13000 cl = ................ l k- 0,2 ml = .................. µl 45 f- 250µl = ............... ml l- 250 µl = ................ l 2- Um recipiente contém 400 litros de uma solução. Esta solução deverá ser colocada em frascos de 100 ml cada um. Quantos frascos serão necessários? 3- Indique a pipeta graduada que deverá ser utilizada para medir: 0,02 ml = 1,8 ml = 0,18 ml = 6,5 ml = 0,75 ml = 4,8 ml = 1,25 ml = 0,05 ml = 2,5 ml = 0,15 ml = 0,6 ml = 0,27 ml = 4- Indique a pipeta graduada que deverá ser utilizada para fazer os seguintes esquemas de medidas: a- 1 ml de solução para cada um de uma série de 5 tubos: b- 0,2 ml de uma solução para cada um de uma série de 5 tubos: c- 0,25 ml de uma solução para cada um de uma série de 8 tubos: 5- Complete: a- Uma escala de 1ml divididos em décimos (1/10) significa que a menor medida é ................. ml. b- Uma escala de 1 ml divididos em centésimos (1/100) significa que a menor medida é ............. ml. 6- Utilizando uma pipeta de 2 ml 1/100 aspirei a solução até a indicação 0,55 ml. Quantos ml estão contidos na pipeta? 7- Descreva a técnica e os cuidados necessários para a utilização das pipetas graduadas e automáticas: 46 AULA 06 AQUECIMENTO EM LABORATÓRIO O aquecimento é um procedimento muito utilizado no laboratório de química. Entretanto, antes de ser executado, é necessário que se conheça a natureza da substância a ser aquecida para que não ocorra acidentes. No laboratório de química, o aquecimento pode ser feito através de aquecedores elétricos (chapas, fornos, mantas elétricas, etc), bico de gás, vapor d’água ou banho-maria. AQUECIMENTO EM BICO DE GÁS O bico de gás, também chamado de bico de Bunsen (Figura 10), é um dos instrumentos mais utilizados em laboratórios para fins de aquecimento. Com ele, podem-se alcançar temperaturas da ordem de 1500ºC. Seu uso, porém, restringe-se apenas ao aquecimento de sólidos e líquidos não inflamáveis. Possui como combustível normalmente o G.L.P, uma mistura do gás butano (C4H10) e do gás propano (C3H8) e como comburente o oxigênio do ar atmosférico que em proporção otimizada, permite obter uma chama de alto poder energético. As partes que constituem o bico de Bunsen são: • Zona externa: quase invisível, onde os gases expostos ao ar sofrem combustão completa, resultando em CO2 e H2O. Esta zona é chamada de zona oxidante, alcançando temperaturas entre 1540ºC e 1560ºC.• Zona intermediária: luminosa, caracterizada pela combustão incompleta, por deficiência de suprimento de O2, formando CO2 e fuligem (C). Esta zona é chamada de zona redutora, com temperaturas abaixo de 1540ºC. • Zona interna: limitada por uma casca azulada, contendo os gases que ainda não sofreram combustão, com temperaturas em torno de 300ºC. 47 Figura 10: Desenho esquemático do Bico de Bunsen fonte: https://goo.gl/udpTZZ Abrindo-se o regulador ou registro de ar, dá-se entrada de suficiente quantidade de O2, dando-se na região intermediária combustão mais acentuada dos gases, formando, além do CO, uma quantidade maior de CO2 e H2O. Para se aquecerem béquer, erlenmeyer, balões, etc., não se deve usar diretamente o bico de Bunsen. Estes aquecimentos são feitos através da tela de amianto, cuja função é deixar passar o calor uniformemente e não permitir que passe a chama. Procedimento correto para acender o bico de Bunsen: • Fechar as válvulas de saída de gás (bancada), do bico de gás e de entrada de ar; • Abrir a válvula de saída de gás central; • Abrir a válvula da bancada; 48 • Acender o fósforo o aproximá-lo do queimador. Abrir, devagar e com muito cuidado, a saída de gás do bico de gás. • Regular a entrada de ar no bico de gás; Procedimento correto para desligar o Bico de Bunsen: • Desligara a válvula de gás da bancada; • Deixar todo o gás restante na mangueira entrar em combustão; • Fechar a válvula de gás do bico de gás; • Fechar a entrada de ar do bico de gás. • Desligar a válvula de gás central. OBJETIVOS • Aprender a utilizar o bico de Bunsen; • Aprender técnicas de aquecimento em laboratório; • Utilizar termômetro. MATERIAL Bico de Bunsen, fósforo, água destilada, tudo de ensaio, pinça de madeira, béquer de 250 mL, pérolas de vidro, termômetro, suporte universal, tela de amianto, tripé, garras para termômetro PROCEDIMENTO 1. Manuseio de bico de Bunsen a) Localize as válvulas de saída de gás (central, bancada e ado abico de gás) e de ar; b) Acenda o bico de gás; c) Descreva como proceder para acender o bico de Bunsen: d) Note que a chama forma um cone bem definido e faça um esquema da chama indicando as 3 regiões. Identifique estas regiões. e) Descreva os procedimentos para desligar o bico de gás. 2. Aquecimento de líquidos em tubo de ensaio a) Pipete 2 mL de água destilada em um tubo de ensaio; 49 b) Segure o tubo próximo à boca com uma pinça de madeira (cuidado, pois a boca do tubo de ensaio deve ser posicionada para um local seguro); c) Aqueça a água com uma inclinação de 45ºC e com pequena agitação, até a ebulição da água; d) Desligue o gás. 3 Aquecimento de líquidos no béquer a) Faça a montagem necessária para aquecimento de líquidos em béquer como no esquema abaixo; b) Coloque 100mL de água em um béquer de 250 mL; c) Acrescente à água algumas pérolas de ebulição ( pérolas de vidro); d) Faça a leitura da temperatura da água: ______ ºC; e) Acenda o bico de Bunsen e observe o movimento das pérolas de vidro e a formação de bolhas de ar; f) Meça a temperatura quando esta estabilizar: _______ºC; g) Desligue o gás da forma correta; Revisão da aula prática: 1. Como a tela de amianto e as pérolas de vidro evitam o superaquecimento? 2. Por que se usa a pinça de madeira e não a metálica para segurar o tubo de ensaio? 3. Discuta a temperatura de fervura da água. 50 AULA 07 MANIPULAÇÃO DA BALANÇA - CUIDADOS E TÉCNICAS DE PESAGEM A balança é um dos instrumentos mais importantes do laboratório. É um instrumento delicado, em sua maior parte importado e, por isso, de preço bastante elevado. Alguns tipos de balanças geram resultados muito precisos, como as balanças analíticas. As balanças analíticas geralmente pesam até décimo de milésimo, ou seja, até a quarta casa decimal. Como inteiro é o grama, elas pesam até decimiligrama. Ao utilizar uma balança deve-se, antes de tudo, verificar qual a capacidade máxima da mesma. A balança, sendo um aparelho de precisão delicado, não pode suportar cargas excessivas, o que acarretaria estragos na mesma. A carga máxima da balança vem impressa na própria balança. Normalmente, a capacidade máxima das balanças analíticas está em torno de 100 a 200g. Na realidade, trabalha-se com massas, e não com pesos. O peso de um objeto é a força exercida sobre ele pela atração gravitacional da Terra. Esta força difere em distintos locais da Terra. A massa, por outro lado, é a quantidade de matéria da qual o objeto é composto, e não varia. O processo de pesagem varia de acordo com o tipo de balança empregada, mas cuidados gerais na técnica de determinação de massa são sempre os mesmos: 1. Conhecer previamente o modo de funcionamento do aparelho. Em caso de dúvida, consultar o catálogo. 2. Verificar se a balança está nivelada observando através de um nível em forma de bolha. Para nivelar a balança gira-se os pés localizados na parte frontal da mesma (depende da balança). 3. Retirar poeiras ou detritos do(s) prato(s) com pincel apropriado. 4. Verificar se as escalas da balança estão ajustadas, isto é, se as mesmas estão indicando zero grama. Esta operação comumente é chamada zerar a balança (existe dispositivo para se acertar o zero). 5. Nunca pesar substâncias corrosivas, voláteis ou higroscópicas em frascos abertos. 51 6. Nunca colocar material diretamente no prato. Devam ser utilizados recipientes adequados (cadinho, pesa-filtro, Becker, papel manteiga ou papel alumínio etc.) que devem estar limpos e secos. 7. O material a ser pesado deve estar à temperatura ambiente O material quente cria em redor de si uma corrente ascendente de ar que o torna mais leve. 8. Pesar os objetos com as janelas laterais fechadas. 9. Não se deve pesar material cujo peso seja mais ou menos próximo da capacidade da balança. 10. Conserve a balança limpa. Se durante a operação partículas cair no prato, retirá-las imediatamente. 11. A balança quando não está em uso deverá estar travada e fechada (depende do tipo de balança).Uma balança elétrica deverá ser desligada. 12. O(s) prato(s) deve(m) estar travados quando se coloca ou retira pesos ou objetos a pesar (depende do tipo de balança). 13. Travar e destravar a balança levemente. Medidas de massa: Instruções para uso: - Nivelar a balança através da bolha de nível. A balança deve estar desligada para o nivelamento; - Ligar a balança e observar se ela está zerada; - Calibrar a balança de acordo com o roteiro do manual, mas geralmente seleciona-se a tecla “CAL” e segue-se as instruções que irão aparecer no visor. - Pesar um béquer pequeno (50 ml). - Tarar a balança com béquer em seu interior; - Adicione então 50 gotas de água destilada com um conta-gotas e pese o conjunto. Anotar o valor; - Tare a balança e repita essa operação mais 2 vezes. Anote os valores e depois compare os valores pesados. Medidas de volume: 1) Pese um béquer seco de 100 mL. 52 2) Tarar a balança; 3) Meça 10 mL de água destilada com uma proveta, coloque-a no béquer de 100 mL e pese-o novamente. 4) Repita este procedimento mais duas vezes e anote os pesos obtidos na tabela abaixo. 5) Jogue fora a água destilada da primeira pesagem e tare a balança com um béquer de 100 mL vazio. Repita o procedimento anterior, utilizando agora uma pipeta volumétrica de 10 mL. Anote os pesos na tabela abaixo. 6) Compare a média dos valores obtidos com a medida na proveta com a pipeta volumétrica. Proveta graduada Pipeta volumétrica Massa após a 1a adição de 10 mL/proveta --- Massa após a 2a adição de 10 mL/proveta ----- Massa após a3a adição de 10 ml/proveta -------- Massa após a 1a adição de 10 mL/pipeta volumetrica ------ Massa após a 2a adição de 10 mL/pipeta volumetrica -------- Massa após a 3a adição de 10 mL/pipeta volumetica --------- Media das três medidas 53 AULA 08 PREPARO DE SOLUÇÕES PROPRIEDADES DAS SOLUÇÕES As substâncias químicas presentes na natureza e utilizadas em nosso cotidiano encontram-se, geralmente, em forma de soluções. As soluções podem ser líquidas, sólidas ou gasosas. As soluções são misturas homogêneas de duas ou mais substâncias caracterizadas como misturas monofásicas, ou seja, misturas que apresentam uma única fase. A maioria dos procedimentos executados em laboratório envolve o uso de soluções. Por isso, a preparação de soluções faz parte de uma rotina e o conhecimento sobre a técnica empregada no preparo é fundamental. As soluções são classificadas quanto ao seu estado físico como sólidas, líquidas e gasosas. Nos laboratórios, são utilizadas quase que exclusivamente as soluções líquidas. Aquelas que empregam água como solvente são chamadas soluções aquosas; já as que empregam álcool (etanol) como solvente são denominadas soluções alcoólicas. A Solubilidade: é a capacidade de uma substância (soluto) ser dissolvida por um determinado solvente, a uma dada temperatura. Como exemplos de soluções têm-se: ar atmosférico, soro fisiológico, aço. Como solvente têm-se: água, nitrogênio; como soluto tem-se: carbono, cloreto de sódio, oxigênio. Alguns fatores influenciam na solubilidade de alguns solutos, como temperatura, pressão e forças intermoleculares. As forças intermoleculares dependem das ligações químicas presentes: substâncias formadas por ligações covalentes podem ser POLARES ou APOLARES. A água, por ser uma substância polar, é um bom solvente para o álcool, que também é polar; 54 porém, a água é um solvente ruim para a gasolina, que é apolar, formando assim uma mistura heterogênea. As soluções líquidas mais preparadas nos laboratórios são aquelas obtidas pela dis- solução de solutos sólidos ou líquidos em um solvente líquido. Um dos primeiros passos para o preparo de soluções é fazer os cálculos referentes às quantidades necessárias dos reagentes (soluto e solvente) para o preparo. Para realizar os cálculos, primeiro precisamos selecionar os reagentes (soluto e solvente) envolvidos no preparo da solução. Os reagentes químicos utilizados no preparo de soluções são comercializados em diferentes graus de pureza. Existem várias classificações quanto à pureza dos reagentes, entretanto, uma das mais adotadas divide os compostos químicos na seguinte escala: � grau comercial, com 70 a 90% de pureza; � grau farmacêutico, a partir de 95% de pureza; � grau para análise (PA), que chega a 99,9% de pureza. Normalmente, consideramos o grau de pureza somente quando precisamos calcular as quantidades de reagentes necessários para o preparo de soluções do tipo padrão, pois o grau de exatidão nesse caso é mais rigoroso em função dos fins aos quais essas soluções se destinam. No preparo de soluções comuns, cujo grau de exatidão é me- nos necessário em virtude de sua utilização, normalmente não consideramos o grau de pureza do reagente, exceto se sua pureza for inferior ao grau comercial, como por exemplo, no preparo de soluções de ácido clorídrico (pureza de 37%) . CONCENTRAÇÃO EM QUANTIDADE DE MATÉRIA A quantidade de matéria é uma unidade fundamental do Sistema Internacional de Unidades (SI) que expressa a quantidade em mol de uma 55 substância. Concentração em quantidade de matéria é a quantidade em mol do soluto por litro de solução: Concentração em quantidade de matéria = mol do soluto/ L de solução = mol/L-1 Um exemplo da expressão da concentração em quantidade de matéria é a quantidade de sal, NaCl, na água do mar: cada 1 L contém 27 g de sal. É possível converter a massa de sal em quantidade de matéria: A massa molar do NaCl é a soma das massas do Na e do Cl: 23 + 35,5 = 58,5 g/mol. Então se 1 mol de NaCl pesa 58,5 g, quantos mol correspondem a 27 g? Basta fazer a seguinte regra de três: 58,5 g NaCl __________ 1 mol 27 g NaCl __________ x x = 0,46 mol Assim, a concentração em quantidade de matéria do sal NaCl na água do mar é 0,46 mol L-1. CONCENTRAÇÃO EM MASSA POR VOLUME C (m/v) CONCENTRAÇÃO COMUM Uma das expressões de concentração de soluções mais simples é a concentração comum. A partir dessa expressão, relacionamos a massa de soluto, expressa em gramas, com o volume de solução, expresso em litros. A concentração em massa por volume expressa a massa do soluto em gramas, por litro de solução. C(m/v) = massa de soluto (g)/ volume (L) = g L-1 A partir da utilização de subdivisões de massa e volume, obtemos outras unidades, como g/mL ou g/cm3, kg/L, mg/L e g/m3. 56 A solução fisiológica constitui-se de 9,0 gramas de cloreto de sódio, NaCl em um litro de água. A concentração desta solução é igual a 9,0 g L-1. Em geral, essa concentração é expressa nos rótulos em termos percentuais. Para isso, deve-se calcular a massa de NaCl contida em 100 ml de solução: 1 L = 1.000 mL 9,0 g NaCl _______1.000 mL de solução X _______100 mL de solução X = 0,9 g / 100 mL X = 0,9 % (m/v) CONCENTRAÇÃO EM MASSA POR MASSA C(m/m) E VOLUME POR VOLUME C(v/v) Esse tipo de concentração é comumente expresso em forma de composição percentual: Composição percentual (%): é a porcentagem em massa ou volume de um soluto por massa ou volume de solução. % (m/m) = massa de soluto (g) x 100/ massa de solução (g) % (v/v) = volume de soluto (L) x 100/ volume de solução (L) É possível observar essa expressão da concentração em rótulos de muitos produtos utilizados no cotidiano. O vinagre, por exemplo, é uma solução de ácido acético em água a 3,0 %. Isso significa que uma garrafa de 750 g de vinagre contém 22,5 g de ácido acético: Ácido acético no vinagre % (m/m) = 22,5 g x 100/750g = 3,0 % PREPARO DE SOLUÇÕES Preparar soluções é uma das tarefas principais dentro de um laboratório. Uma solução mal preparada ocasiona erros em formulações e análises. Para o preparo de uma solução, devem ser observados: 1) Qualidade da água 57 A maioria das soluções utilizadas em laboratório é líquida e têm a água como solvente. É importante que a água apresente um nível de qualidade satisfatório e atenda às especificações preconizadas pelas farmacopéias (códigos onde se estabelecem, dentre outras coisas, os requisitos mínimos de qualidade para fármacos, insumos, drogas vegetais, medicamentos e produtos na área da saúde). Para os laboratórios de análises clínicas, deve-se utilizar uma água de grau reagente (RDC 302/2005 - ANVISA), que deve passar por vários processos de purificação. 2) Qualidade dos reagentes Existem diferentes graus de pureza para um reagente químico, de acordo com o fim a que se destina. Quanto maior for o grau de pureza, maior será o custo do reagente. Grau de pureza (p): quociente entre a massa de substância pura e a massa total da amostra. Classificação dos reagentes de acordo com o grau de pureza: Grau de pureza Classificação do reagente Técnico ou comercial Destinados a fins industriais, não requerem grau de pureza elevado. Para análise (PA) Substâncias de grau de pureza analítico, destinadas a análises físico-químicas, com baixos teores de contaminantes. Substâncias Químicas de Referência (SQR) Materiais de referência certificados utilizados na avaliação da conformidade dos insumos farmacêuticos e dos medicamentos, como referência de
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