Lista de exercícios cromatografia pronta

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Lista de exercícios – cromatografia líquida de alta eficiência
1) Defina: 
a) Cromatografia de partição: 
Liquido-liquido e fase liquida. A diferença elas consiste em como a fase estacionaria é mantida nas partículas do suporte de empacotamento (adsorção e ligação química). A fase estacionaria é um segundo liquido que é imiscível com do liquido da fase móvel.
 b) Cromatografia de troca iônica:
A fase estacionaria é uma resina trocadoras de íons, e o analito de carga oposta interagem seletivamente com a coluna, e a detecção geralmente é realizada por um detector de condutibilidade. 
c) Cromatografia de adsorção: 
Os analitos interagem (adsorvem) com superfície polar da Fase estacionaria (solida), de acordo com a polaridade da fase móvel. 
d) Cromatografia de permeação em gel:
É utilizada na separação de espécies não polares, um tipo de cromatografia por exclusão molecular com porosidade de tamanho controlado. Moléculas maiores que o diâmetro dos poros da Fase estacionaria, não entram neles e saem rápido da coluna, as menores entram e demoram para serem eluídas. 
e) Eluição isocrática:
É a composição da Fase móvel que permanece constante durante a corrida cromatográfica.
 f) Eluição por gradiente:
A composição da Fase móvel é alterada continuamente durante a corrida cromatográfica ou uma serie de etapas.
 g) Recheio de fase reversa:
O recheio é apolar. 
h) Recheio de fase normal:
O recheio é polar. 
2) O que é um cromatograma? 
Cromatograma é o registro da analise cromatográfica onde o eixo Y significa a resposta analitcas e o eixo X o tempo de corrida (normalmente em minutos). O s composto são eluídos na forma de picos ou bandas cromatográficas e cada pico possui uma forma que se assemelha a uma curva gaussiana. O tempo de retenção está relacionado com a identidade dos analitos e as áreas sob as curvas de cada banda cromatográfica estão relacionadas com as concentrações do analito.
3) Quais os principais cuidados devem ser tomados em relação à fase móvel em cromatografia líquida de alta eficiência?
Deve ser pura, livre de partículas e gases, solubilizar a amostra; não degradar e nem dissolver a fase estacionaria; possuir baixa viscosidade, toxicidade e volatilidade; possuir compatibilidade com o detector, ser de baixo custo e apresentar disponibilidade no mercado.
 4) Qual é o material de suporte empregado no recheio da maioria das colunas para cromatografia líquida? 
Partículas de sílica ( SiO2).
5) Indique a ordem pela qual os seguintes compostos deverão ser eluídos de uma coluna de CLAE contendo um recheio de fase reversa 
(a) benzeno, éter dietílico, n-hexano
Mais polares eluem primeiro: éter etílico, benzeno, n-hexano.
 (b) acetona, dicloroetano, acetamida.
Mais polares eluem primeiro: acetamida, acetona,dicloroetano.
 6) Indique a ordem de eluição para os seguintes compostos e uma coluna de fase normal de CLAE: 
(a) acetato de etila, ácido acético, dimetilamina. 
Mais polares eluem por último: acetato de etila, dimetilamina, ácido acético.
(b) propileno, hexano, benzeno, diclorobenzeno.
Mais polares eluem por último: hexano, propileno, benzeno, diclorobenzeno.
 7) Quais espécies podem ser separadas por CLAE, mas não podem ser separadas por CG? 
Podem ser aplicadas a espécies que não são voláteis termicamente instáveis, enquanto em cromatografia gás-liquido não podem.
8) Quais as vantagens e desvantagens da cromatografia líquida de alta eficiência em relação à cromatografia gasosa? 
Vantagens CLAE: pode analisar amostras que não são voláteis e amostras termicamente instáveis, pode analisar substancias com massa molecular de 32 até 4x 106, pode analisar amostra com até 50 componentes, pode ser aplicada de forma geral a íons inorgânicos. Desvantagens: menor eficiência e necessidade de maior treinamento do analista. Detecção de até 10-9g.
Vantagens CG: Amostra ou derivado volátil e termicamente estável, gases, líquidos e sólidos com massa molecular de 2 até 1200, excelente, com separação de amostras com cerca de 200 componentes. Detecção até de 10-12g.
9) Um método de CLAE foi desenvolvido para a separação e determinação de ibuprofen em amostras de plasma de rato como parte de um estudo do tempo de permanência da droga em animais de laboratório. Vários padrões foram cromatografados e os seguintes resultados obtidos:
Concentração de ibuprofen µm/ml área relativa de pico
0,5 5,0
1,0 10,1
2,0 17,2
3,0 19,8
6,0 39,7
8,0 57,3
10 66,9
15 95,3
	Tempo (hora)
	Concentração de ibuprofen (µm/ml)
	0
	0,00
	0,5
	14,05
	1
	12,28
	1,5
	7,79
	2
	5,62
	3
	3,34
	4
	2,68
	6
	2,43
	8
	1,90
Depois, uma amostra de 10 mg/kg de ibuprofen foi administrada por via oral a um rato de laboratório. As amostras de sangue foram retiradas a vários intervalos de tempo após a administração da droga e analisadas por CLAE. Os seguintes resultados foram obtidos:
Tempo,h Área do pico
0 0
0,5 91,3
1,0 80,2
1,5 52,1 
2,0 38,5 
3,0 24,2
4,0 21,2
6,0 18,5
8,0 15,2 
Encontre a concentração de ibuprofen no plasma sanguíneo para cada intervalo de tempo e faça um gráfico da concentração versus tempo. 
y = 6,2669x + 3,2695 24,2=6,2669x + 3,2695
91,3=6,2669x + 3,2695 X=3,34 µg/mL
x=14,05 µg/mL
80,2=6,2669x + 3,2695 21,2=6,2669x + 3,2695 
X=12,28 µg/mL x=2,86 µg/mL 
52,1=6,2669x + 3,2695 18,5=6,2669x + 3,2695 
X=7,79 µg/mL x=2,43 µg/mL
 
38,5=6,2669x + 3,2695 15,2=6,2669x + 3,2695 
X=5,62 µg/mL x=1,90 µg/mL