Estudo dirigido - Microbiologia Oral (Bactérias anaeróbias, Relação parasito-hospedeiro, Meios de cultivo, Técnicas de semeio, Identificação de Gram positivas e negativas e Antibiograma)

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Estudo REVISÃO 3ª avaliação teórica- MICROBIOLOGIA ORAL, Bactérias anaeróbias, Relação parasito-hospedeiro, Meios de cultivo, Técnicas de semeio, Identificação de Gram positivas e negativas e Antibiograma
RELAÇÃO PARASITO-HOSPEDEIRO
O que é patogenicidade e virulência?
A patogenicidade consiste na capacidade do agente invasor em causar doença com suas manifestações clínicas entre os hospedeiros suscetíveis. Já a virulência é a capacidade patogênica de um microrganismo, medida pela mortalidade que ele produz e/ou por seu poder de invadir tecidos do hospedeiro, é a quantificação da patogenicidade.  
Defina biofilme e quorum sensing.
O biofilme é uma comunidade bacteriana complexa. Consiste na deposição de microorganismos heterogênicos envoltos por uma matriz polissacarídica sobre uma superfície inerte ou tecido. Já o quórum sensing é o termo usado para designar um mecanismo de comunicação entre os microorganismos presentes no biofilme, que promove a ativação ou repressão de um gene, podendo acarretar em variações fenotípicas. 
Quais as principais diferenças entre Exotoxinas e Endotoxinas?
Exotoxinas são proteínas que podem ser produzidos por bactérias gram positivas ou gram negativas, geralmente apresentam 2 componentes polipeptídicos: um de ligação da proteína à célula do hospedeiro e outro de efeito tóxico; já as endotoxinas são produzidas só por bactérias gram negativas e são lipopolissacarídeos.
MICROBIOLOGIA ORAL: ecologia bucal, carie, doenças periodontais e periapicais
O que são comunidade pioneira e comunidade clímax? Quais os microrganismos que predominam em cada comunidade pioneira?
Comunidade pioneira é a primeira comunidade de organismos presentes na ausência de dentes, tendo como principal representante o Streptococus salivaris. A comunidade clímax vai se fazer presente já com o surgimento dos dentes (erupção dentária), tendo como principal microrganismo o Streptococcus mutans e Streptococcus sanguis. 
Definir sucessão alogênica e sucessão autogênica.
A sucessão alogênica consiste no desenvolvimento da comunidade de microrganismos baseado nas características não microbianas (fatores não microbianos). A sucessão autogênica, por sua vez, consiste no desenvolvimento da comunidade influenciado por fatores microbianos, devido a características intrínsecas do microrganismo.
Defina carie dentária e cite 4 características gerais da carie.
Doença endógena, multifatorial, de natureza infecto-contagiosa, acidogênica e acidúrica decorrente da deposição de microrganismos, que vão produzir ácidos orgânicos pela degradação dos carboidratos da dieta e vão provocar a diminuição do pH, ocasionando a perda de estruturas mineralizadas do dente. Pode levar a doença progressiva crônica. 
Defina como os seguintes pesquisadores contribuíram para a cariologia: Miller, Clark, Black e Loesche.
Miller descobriu a teoria quimio-parasitária, que diz que os microrganismos presentes no biofilme degradam carboidratos da dieta levando à produção de ácidos que provocavam a perda de minerais do dente. 
Já Clark descreveu os Streptococus mutans, ao examinar tecido cariado proveniente de cavidades. Quando encontrou espécies de estreptococos com habilidade para fermentar carboidratos e criar um baixo pH, concluiu que esta bactéria era uma possível candidata a ser um organismo cariogênico.
Black descreveu a placa bacteriana propriamente dita, quando visualizou substância gelatinosa que ficava grudada no dente e era produzida na presença de carboidratos, sobretudo sacarose. 
Loesche descreveu a placa bacteriana específica, cariogênica e periodontogênica.
Cite os requisitos bacterianos de cariogenicidade.
Capacidade de produzir ácido, sobreviver em pH ácido, produzir polissacarídeos extra e intracelulares e capacidade de se aderir ao dente.
O que são PEC e PIC e qual a função deles? Descreva o metabolismo da sacarose pelo S. mutans.
PEC são polissacarídeos extracelulares de aderência e os PIC são polissacarídeos intracelulares de reserva. A sacarose vai ser quebrada em glicose e frutose, que vão produzir os PECs e PICs, respectivamente. Os PECs, produzidos pela glicose, vão ser as dextranas (solúvel) e mutanas (insolúvel), ambos vão resultar na produção de ácidos. Os PICs vão ser as amilopectinas.
Quais as principais bactérias presentes na carie superficial, com cavidade/dentina e de raiz?
Na cárie superficial a principal bactéria presente é a S. mutans. No caso da dentina/cavidade a cárie é provocada por Lactobacillus, já na raiz é provocada por Actinomyces.
Como ocorre o processo de desmineralização e remineralização do esmalte dentário?
Com o pH abaixo de 5,5 há a saída de cálcio e fosfato do dente, que se dispersam na saliva, e desse modo ocorre a desmineralização do esmalte dentário.  Os ácidos que se difundiram no sentido da saliva determinam, também, uma queda no pH desta.  Com esses íons saturados na saliva, há o retorno para o dente, ocorrendo a remineralização. 
Qual a importância da curva de Stephan/desafio cariogênico?
A curva de Stephan é importante pois é ela que fornece um meio de medir o potencial cariogênico do alimento. Quanto maior o tempo que o paciente ficar abaixo do pH crítico, maior o risco de desenvolver cárie. 
Quais as funções do flúor no controle de carie?
O flúor tem ação antimicrobiana, que vai combater as bactérias causadoras da cárie. Além disso, favorece a formação de fluorhidroxapatita, que vai dar resistência ao ataque de ácidos e elevar o pH crítico de 5,5 para 5.
Qual bactéria cariogênica tem maior relação com casos clínicos de endocardite bacteriana?
Streptococus sanguis.
Cite 3 característica da placa especifica cariogênica e da placa especifica periodontogênica.
Cariogênica: causada por bactérias gram positivas, anaeróbias facultativas e são sacarolíticas. 
Periodontogênicas: causada por gram negativas, anaeróbias e são proteolíticas.
Cite como ocorre o processo de patogenicidade das doenças periodontais. Pode ser por esquema.
Aumento da população patogênica, que vai provocar o aumento da liberação dos produtos tóxicos das bactérias, aumento da resposta imunológica e destruição progressiva das estruturas do dente e do periodonto de sustentação e proteção.
Na Gengivite Ulcerativa Necrosante Aguda (GUNA) qual o microrganismo encontrado em maior numero? E nos casos de lesões purulentas graves?
Na GUNA é o Treponema e o Fuso bacteruim nas lesões purulentas graves.
Cite os principais fatores microbianos de agressão ao periodonto e a polpa.
Enzimas, toxinas, produtos quimiotóxicos e produtos metabólicos.
Quais os efeitos da endotoxina-LPS das bactérias periodontais?
Vai provocar o aumento dos osteoclastos e induzir a reabsorção óssea.
Quais os mecanismos de defesa da polpa?
Células fagocitárias e anticorpos.
BACTERIAS ANAEROBIAS
Quais os produtos tóxicos gerados pelo oxigênio? Como os mesmos podem ser “inativados”/degradados?
Radical superóxido, radical hidroxila e peróxido de hidrogênio. Podem ser degradados por enzimas catalase, peroxidase e superóxido desmutase.
Por que as bactérias aeróbias não morrem na presença do oxigênio?
Por que produzem enzimas degradativas dos compostos tóxicos, como catalase, peroxidase e superóxido desmutase.
Quais os principais fatores predisponentes para infecção por anaeróbios?
Corpos estranhos, traumas, tumores, mordidas.
Quais as principais características clinicas sugestivas para infecção por anaeróbios?
Secreção fétida, necrose desproporcional a lesão em si, produção de gases, pigmentação enegrecida, resistência a aminoglicosídeos. 
IDENTIFICAÇÃO DE GRAM POSITIVAS E NEGATIVAS
Como o gênero Streptococcus se classificam quanto a hemólise? Descreva o aspecto das colônias em meio agar sangue para cada tipo de hemólise.
Alfa hemolíticos, beta hemolíticos e gama hemolíticos. Alfa hemólise se apresenta de forma esverdeada; já a beta forma um halo transparente, pois há degradação total das hemácias; e gamanão há alteração no meio, a colônia cresce em sangue integro.
Quais os principais testes que permitem a diferenciação entre as espécies de Staphylococcus , complete a tabela abaixo (positivo ou negativo) 
	Grupo Staphylococcus
	Catalase
	DNAse
	Novobiocina
	Coagulase
	S. aureus
	+
	+
	+ sensível/resistente
	+
	S. epidermidis
	+
	_
	+ sensível 
	_
	S. saprophyticcus
	+
	_
	+ resistente
	_
Na identificação de bactérias Gram negativas, para que se usa os meios: TSI, SIM (sulfeto-indol-motilidade) e agar MacConkey?
TSI: verificar a fermentação de açúcares e a produção de H2S.
SIM: motilidade e indolo, produção de H2s
Agar MacConkey: Fermentação de carboidratos.
Qual o principal teste bioquímico para diferenciar os 2 principais gêneros de bactérias classificadas como cocos Gram positivos?
Catalase. Streptococus = catalase negativo; Straphylococus = catalase positivo
ANTIBIOGRAMA
Com relação ao antibiograma assinale a alternativa correta (vale 1,0 ponto)
	
	**** A bactéria é resistente aos antibióticos 1 e 2
	
	A bactéria é sensível aos antibióticos 1 e 2
	
	A bactéria é resistente ao antibiótico 1 e sensível ao 2
	
	A bactéria é sensível ao antibiótico 1 e resistente ao 2 
	Antibiotico 1 (halo 12mm) 
	Resistente até 15 
	Sensível a partir de 19 
	Antibiótico 2 (halo 22mm)
	Resistente até 23 
	Sensível a partir de 25 
30. Nos seguintes resultados descritos após a leitura do antibiograma, cite qual técnica ou método foi realizado:
A) Leitura de halo de gentamicina 20mm: difusão de disco
B)Concentração inibitória mínima (CIM ou MIC) de gentamicina de 15µg/mL: microdiluição seriada
Qual a finalidade do teste de antibiograma? Qual a principal técnica qualitativa para antibiograma? 
Verificar a sensibilidade e resistência do microrganismo ao antibiótico. Difusão em disco.
Cite uma técnica quantitativa para antibiograma e o que ela permite definir?
e-teste ou microdiluição seriada, ambas vão definir a concentração inibitória mínima (ou mínima inibitória).
Qual a diferença entre os métodos de difusão e impregnação em discos?
Na difusão já vem o disco com a quantidade certa de antibiótico, já na impregnação é um disco virgem, sem nenhuma substância nele e adiciona-se 200 microlitros em cima do disco.
Quais as limitações da prova de Kirby-Bauer?
Não vai dar quantidades, pois será testado concentrações fixas do antibiótico. É um teste apenas qualitativo.
Cite os fatores que podem alterar a interpretação dos testes.
Quantidade de microrganismos, tipo do antibiótico, tempo na estufa, esterilização do material, execução da técnica.
Para que o método de impregnação do antimicrobiano em discos é mais utilizado? (CANCELADA)
Qual a importância da inoculação ser realizada de modo correto, permitindo crescimento confluente?
É importante que seja realizado da forma correta pois se houver muito microrganismos pode decrescer na presença do antibiótico com uma dose fixa, e se houver muito pouco, pode dar um halo falso. Ou seja, é necessário para dar confiabilidade ao teste. 
Podemos comparar os halos de inibição obtidos com antimicrobianos diferentes ou em diferentes concentrações?
Não. Há substâncias que se difundem melhor no meio e criam halos maiores e outros antimicrobianos que vão resultar em halos menores, por isso existe uma tabela para que se faça a correlação correta da eficácia de cada um. A presença do halo sugere a atividade antimicrobiana. A ausência do halo confirma resistência.
MEIOS DE CULTIVO
Como podem ser classificados os meios de cultivo?
Seletivo, diferencial, seletivo e diferencial, de manutenção, meios complexos.
Quanto as suas funções o que caracteriza um meio de cultivo complexo, de manutenção, seletivo, diferencial e seletivo e diferencial?
Complexo: meio no qual a maioria dos microrganismos crescem bem nele, tanto bactérias quanto fungos;
Manutenção: meio de cultivo específico para manter determinado microrganismo viável por mais tempo;
Seletivo: para selecionar de determinada amostra um microrganismo específico;
Diferencial: para diferenciar um grupo de microrganismo dentro de uma população;
Seletivo e diferencial: selecionar o grupo específico e diferenciar dentro desse grupo os microrganismos que cresceram; 
Com base na tabela assinale a resposta CORRETA. 
	 Bactérias
	 Meio de cultura 1
	 Meio de cultura 2
	Streptococcus mutans
	Ausência de crescimento
	Crescimento com colônias amarelas
	Staphylococcus aureus
	Crescimento
	Crescimento com colônias vermelhas
	Staphylococcus epidermidis
	Crescimento
	Crescimento com colônias vermelhas
	Streptococcus sanguis
	Ausência de crescimento
	Crescimento colônias amarelas
	
	O meio de cultura 1 é seletivo e o meio 2 seletivo e diferencial 
	
	*** O meio de cultura 1 é seletivo e o meio 2 diferencial 
	
	O meio de cultura 1 e 2 são seletivos e diferenciais
	
	O meio de cultura 1 é seletivo e diferencial e o meio 2 seletivo
TECNICAS DE SEMEIO
Qual a importância/finalidade de uma adequada técnica de semeadura de microrganismos? (CANCELADA)
Cite as 4 possíveis técnicas de semeadura de microrganismos em tubo de ensaio contendo meio solido.
Picada superficial e profunda, por estrias, reto.
Qual a finalidade/objetivo do semeio em meio solido por esgotamento?
Presença de colônias isoladas para a identificação de microrganismos. 
Para que se usa a alça de Drigalsky em semeadura em meio solido?
Para dar homogeneidade ao microrganismo para que se tenha a formação das colônias separadas. Espalhamento para o crescimento de colônias isoladas.