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PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO - POP Página 1 de 3 Data de Elaboração 16/MAR/2017 Data de Revisão Próxima Revisão MAR/2018 POP no 005 ASSUNTO: TÉCNICA DE SEMEADURA OBJETIVO Executar a semeadura em meio sólido e líquido, reconhecer qual método deve ser empregado a partir do que se necessita. MATERIAIS UTILIZADOS Ágar Mac Conkey. Agulha; Alça de Platina; Bico de Bunsen; Estufa; Fósforo; Meio de cultura semeado; Pera; Pipeta graduada; Placa de Petri; Solução Salina; Tubo de ensaio; PROCEDIMENTO MÉTODO COM TUBO INCLINADO POR ESTRIA SINUOSA EM MEIO SÓLIDO Lavar as mãos, colocar as luvas e higienizar a bancada. Ligar o Bico de Bunsen. Esterilizar a alça de platina e a parte superior do tubo de ensaio com o meio inclinado (antes e depois da prática). Coletar a amostra no meio de cultura e aplicar sobre o conteúdo do tubo de ensaio, em zigue zague, para uma intensa obtenção de massa de microrganismos. Fechar e levar à estufa durante algumas horas. MÉTODO COM TUBO INCLINADO POR ESTRIA RETA EM MEIO SÓLIDO Lavar as mãos, colocar as luvas e higienizar a bancada. Ligar o Bico de Bunsen. Esterilizar a alça de platina e a parte superior do tubo de ensaio com o meio inclinado (antes e depois da prática). Coletar a amostra no meio de cultura e aplicar sobre o conteúdo do tubo de ensaio, fazendo uma linha reta, para obtenção de uma pequena massa de microrganismos. Fechar e levar à estufa durante algumas horas. MÉTODO COM TUBO POR CAMADA ALTA ➜ PICADA EM PROFUNDIDADE Lavar as mãos, colocar as luvas e higienizar a bancada. Com a agulha, coletar uma pequena porção do meio de cultura semeado. PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO - POP Página 2 de 3 Data de Elaboração 16/MAR/2017 Data de Revisão Próxima Revisão MAR/2018 POP no 005 ASSUNTO: TÉCNICA DE SEMEADURA Fechar e levar à estufa durante algumas horas. Aplicar até aproximadamente 2/3 do volume do conteúdo do tubo, para verificar fermentação e motilidade em algumas técnicas. MÉTODO COM PLACA DE PETRI POUR PLATE Pipetar em torno de 1 ml da cultura de microorganismos na placa de Petri vazia. Sobrepor com o meio em torno de 2/3 do volume da placa, a fim de realizar a contagem bacteriana e análise de anaeróbicos. Fechar e levar à estufa durante algumas horas. Figura 01. Tubo reto e inclinado Figura 02. Esterilização da alça de Henle Figura 03. Estria sinuosa, estria reta e picada em profundidade. PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRÃO - POP Página 3 de 3 Data de Elaboração 16/MAR/2017 Data de Revisão Próxima Revisão MAR/2018 POP no 005 ASSUNTO: TÉCNICA DE SEMEADURA PRECAUÇÕES Abrir vidrarias próximo ao Bico de Bunsen; Esterilizar a alça antes da coleta; Prevenir a contaminação com microorganismos ambientais; Manusear corretamente os materiais. RESPONSÁVEIS ____________________ ____________________ _____________________ Jaqueline Bueno Jean Lima Luiz E. Tomal ____________________ Liriane Artner
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